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虎眼万年青提取物降血糖作用的实验研究



全 文 :书第 31 卷 第 2 期
2015 年 4 月
哈 尔 滨 商 业 大 学 学 报(自然科学版)
Journal of Harbin University of Commerce (Natural Sciences Edition)
Vol. 31 No. 2
Apr. 2015
收稿日期:2014 - 10 - 31.
基金项目:黑龙江省教育厅科研项目(12531655)
作者简介:曹海玲(1986 -),硕士,研究方向:药物分析.
通讯作者:闫 静(1962 -),博士,教授,硕士生导师,研究方向:有机药物合成和药物质谱学.
虎眼万年青提取物降血糖作用的实验研究
曹海玲,徐 暘,闫 静
(黑龙江中医药大学 药学院,哈尔滨 150040)
摘 要:观察虎眼万年青提取物对糖尿病模型小鼠血糖质量浓度以及糖尿病相关特征的水平的影响.
采用四氧嘧啶腹腔注射法制造糖尿病小鼠模型,随机分为五组,醇提物高、中、低剂量组,二甲双胍阳
性药物组,模型小鼠溶剂对照组,正常小鼠空白对照组,观察各组小鼠血糖质量浓度以及其他相关指
标的变化水平.结果表明,模型各组的血糖质量浓度升高,经灌胃给以醇提物 14 d 后,血糖质量浓度
明显下降,其他糖尿病症状也相应减轻.而空白组小鼠血糖值无明显变化.可见虎眼万年青乙醇提取
物对于四氧嘧啶所致的糖尿病小鼠有治疗作用.
关键词:虎眼万年青乙醇提取物;糖尿病;血糖质量浓度
中图分类号:R285 文献标识码:A 文章编号:1672 - 0946(2015)02 - 0132 - 03
Study on hypoglycemic effect of Ornithogalum Caudatum Ait extracts
CAO Hai-ling,XU Yang,YAN Jing
(School of Pharmacy,Heilongjiang University of Chinese Medicine,Harbin 150040,China)
Abstract:To observe the influence of Ornithogalum Caudatum Ait extracts on the blood glu-
cose concentration of diabetic model mice and the level of diabetes relevant characteristics.
The diabetic mouse model was established by the method of alloxan intraperitoneal injec-
tions. Blood glucose concentration of the mice were randomly divided into five groups:the
groups of high,medium and low dose alcohol extracts,the group of metformin positive drug,
the comparison group in the model mice with solvent,the blank comparison group in the nor-
mal mice. Using this method,the varying level of blood glucose concentration in each group
mice and other related indicators were observed. The results indicated that blood glucose
concentration of each group in the model mice was increased. After lavaging with alcohol ex-
tracts for 14 d,blood glucose concentration was declined obviously,and other symptoms of
diabetes were also reduced relatively. However,the blood glucose concentration of mice in
the blank group was not varied obviously. The conclusion could be obtained that the Orni-
thogalum Caudatum Ait extracts have a therapeutic effect on the mice caused by alloxan.
Key words:Ornithogalum Caudatum Ait extracts;diabetes;blood glucose level
虎眼万年青(Ornithogalum caudatum Ait),又
名珍珠草、伯利恒之星,是虎眼万年青属单子叶植
物,原产于非洲南部,其花为头状花序,是很有名的
观赏植物,种植地广泛.成分研究表明,虎眼万年青
含有多糖、皂苷及生物碱等成分,可全草入药[1 - 2].
虎眼万年青多糖具有对机体的免疫增强作用和对
免疫应答的调节作用[3 - 4].虎眼万年青皂苷具有抗
肿瘤活性[5]和抗氧化作用[6]. 民间多有使用虎眼
万年青用于抗炎消毒,治疗肝病、肝癌、胆囊炎症
等.近年来有虎眼万年青抗炎活性的药理研究报
道[7].
目前,世界范围内,糖尿病的发病率快速上升,
已成为人类健康的重大威胁,糖尿病防治已成为医
学研究的热点.从天然药物尤其是植物中寻找降血
糖的有效成分是一条重要的途径. 多糖有免疫调
节、抗肿瘤、降血糖、抗氧化等作用.据 Frang[8 - 9]等
报道,已有近百种植物多糖被分离提取鉴定出来,
其来源广泛且没有细胞毒性,应用于生物体毒副作
用小.研究表明虎眼万年青有免疫调节、抗肿瘤、抗
氧化等作用,但其是否具有降血糖作用还尚未见文
献报道.本文对虎眼万年青多糖的降血糖作用进行
了研究,实验结果可为虎眼万年青药材的进一步开
发和应用提供依据.
1 实验材料
1. 1 试验动物
选用健康的昆明种小鼠 72 只(由青岛派特福
白鼠养殖专业合作社提供),雌雄各半,体重(25 ±
2)g清洁级,随机将雌雄小鼠各分为 6 组,每组 12
只.
1. 2 药材
虎眼万年青药材购于吉林长白研究所,经黑龙
江中医药大学李延冰教授鉴定.
1. 3 试剂
盐酸二甲双胍(哈尔滨同一堂药业有限公
司);四氧嘧啶(原装 Sigma). 甘油三酯试剂盒(长
春汇力生物技术有限公司);总胆固醇试剂盒(长
春汇力生物技术有限公司);注射用生理盐水(哈
尔滨三联药业有限公司) ;乙醇.
1. 4 实验仪器
旋转蒸发仪(上海申胜生物技术有限公司);
烘箱(DGX - 9143B - 1);电热套;圆底烧瓶;冷凝
管;离心机(北京医用离心机厂);721 型可见分光
光度计;水浴锅;三诺稳豪型血糖仪及配套试纸.
2 实验方法
2. 1 药物提取
取已粉碎的虎眼万年青全草 200 g 放入圆底
烧瓶,加配好的 70%乙醇 2 000 mL,浸泡 1 h,60 ℃
下加热回流提取 2 h.过滤.虎眼万年青残渣继续加
入 70%乙醇 1 600 mL,60 ℃下回流提取 2 次,每次
2 h.过滤,合并三次所得滤液.经旋转蒸发仪,温度
50 ℃,回收乙醇.回提后剩余液体约 800 mL,水浴
蒸发,并先后加入 2 次 100 mL双蒸水,使酒精充分
蒸发,得浸膏.再将浸膏放于 40 ℃烘箱中低温干燥
得粉末状虎眼万年青 70%乙醇提取物.
2. 2 糖尿病模型复制
小鼠常规适应性饲养 1 周,(正常进食、饮水,
特定时间内除外)称重,小鼠禁食(不禁水)约 12
h,腹腔注射新鲜配置的四氧嘧啶溶液 200 mg /kg.
72 h后再次禁食(不禁水)12 h 后,尾静脉取血,血
糖仪测空腹血糖值,大于 11. 1 mmol /L为糖尿病模
型小鼠.
2. 3 分组及给药
72 只昆明种小鼠,每组 12 只,雌雄各 6 只,共
分 6 组,即空白对照组,模型对照组,阳性药物组,
70%乙醇提取物高、中、低剂量组.按动物体表面积
比率换算等效剂量灌胃给药;每日 1 次,连续给药
2 周.空白对照组为健康小鼠按 0. 1 mL /g 给与生
理盐水灌胃;模型对照组为高血糖小鼠按 0. 1 mL /
g给与生理盐水灌胃;阳性药物组(盐酸二甲双
胍),阳性药物碾碎成粉末状溶于生理盐水中,制
成 12. 8 mg /mL 质量浓度的溶液,按 0. 1 mL /g 给
与灌胃;70%乙醇提取物干粉分别以 2、1、0. 5 g /kg
质量浓度制成生理盐水溶液,按 0. 1 mL /g 给与灌
胃.
2. 4 检测指标
2. 4. 1 血糖质量浓度
分别在灌胃给药第 7 天及第 14 天尾静脉取
血,用血糖试纸及血糖仪测定其血糖质量浓度的变
化.
2. 4. 2 总胆固醇质量浓度
于灌胃给药第 14 天眼球取血,严格按照试剂
盒操作说明测定血浆总胆固醇质量浓度.
2. 4. 3 甘油三酯质量浓度
于灌胃给药第 14 天眼球取血,严格按照试剂
盒操作说明测定血浆甘油三酯质量浓度.
3 实验结果
虎眼万年青全草 70%乙醇提取物,不同剂量
对糖尿病昆明种小鼠血糖质量浓度、血浆总胆固醇
质量浓度以及血浆甘油三酯质量浓度的影响.见表
1.
·331·第 2 期 曹海玲,等:虎眼万年青提取物降血糖作用的实验研究
表 1 虎眼万年青全草提取物对糖尿病模型小鼠血糖值及其他指标的影响
组别 数量 体重
给药前
血糖
给药 7d
血糖
给药 14d
血糖
给药 14d
总胆固醇
给药 14d
甘油三酯
空白 12 24. 84 5. 60 5. 44 5. 56 5. 03 2. 41
模型 9 25. 17 16. 71 18. 61 19. 70 7. 80 4. 46
阳性 12 25. 24 15. 84 13. 23 10. 11 5. 22 3. 01
高剂量 12 25. 038 13. 60 11. 01 9. 12 5. 24 2. 86
中剂量 11 24. 58 15. 45 13. 42 11. 17 5. 38 3. 06
低剂量 10 25. 31 13. 63 12. 86 11. 23 6. 29 3. 87
对小鼠空腹血糖的影响:经口灌胃 14 d 后,虎
眼万年青 70%乙醇提取物高中剂量组与对照组相
比较有显著性差异(P < 0. 05),阳性药组与对照组
相比较有显著性差异(P < 0. 05),虎眼万年青 70%
乙醇提取物低剂量组与对照组相比较无显著性差
异(P > 0. 05).虎眼万年青 70%乙醇提取物高中剂
量组相比较无显著性差异(P > 0. 05),虎眼万年青
70%乙醇提取物高中剂量组与阳性药组相比较无
显著性差异(P > 0. 05).表明虎眼万年青 70%乙醇
提取物对四氧嘧啶诱导的高血糖昆明种小鼠有一
定的辅助降血糖作用且有剂量依赖性.
对小鼠总胆固醇、甘油三酯的影响:虎眼万年
青 70%乙醇提取物高中剂量组、阳性药物组与对
照组相比较无显著性差异(P > 0. 05),虎眼万年青
70%乙醇提取物低剂量组与对照组比较差异性不
大(0. 10 > P > 0. 05).表明虎眼万年青 70%乙醇提
取物对四氧嘧啶诱导的高血糖昆明种小鼠的胆固
醇、甘油三酯水平有一定的控制作用,且呈剂量依
赖性.
4 讨 论
随着社会的发展,生活水平的提高,心脑血管
病的发病率也呈逐年上升的趋势,且死亡率位于各
种疾病之首,所以研究开发治疗和预防心脑血管疾
病的保健品就显得非常重要[10];糖尿病是一种由
于遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、
自由基毒素、精神因素等各种致病因子作用于机体
导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋
白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征,
血糖一旦控制不好会引发多种并发症,导致肾、眼、
足等部位的衰竭病变,且无法治愈[11].很多种皂苷
类以及多糖类含量高的中草药或植物也相继被研
究发现具有治疗或辅助治疗糖尿病的功效.
本文对多糖及皂苷含量较高的虎眼万年青全
草进行分析研究,以期其对糖尿病有治疗或辅助的
治疗作用.目前制作糖尿病动物模型的方法主要有
三类[12],一类是自发性糖尿病动物模型;第二类是
转基因动物模型;因经费和试验条件等客观条件限
制,这两类均应用不广泛.第三类是通过手术、化学
药物损伤、病毒感染等方法造模. 目前常用化学药
物有 STZ、四氧嘧啶. 本实验以腹腔注射四氧嘧啶
方法造模.
对昆明种小鼠造模及给药治疗的实验结果表
明,中、高剂量的虎眼万年青全草 70%乙醇提取物
能够使糖尿病小鼠的血糖水平降低并趋于稳定,且
对糖尿病小鼠的三高症状有所缓解.而低剂量组与
糖尿病模型组相比较则无明显差异,可能剂量太低
效果不明显.此亦能说明虎眼万年青提取物对于糖
尿病的治疗作用存在剂量差异,为以后的深入研究
提供参考与佐证.
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·431· 哈 尔 滨 商 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 ) 第 31 卷