全 文 ：第３７卷第１期
２ ０ １ ４年１月
河 北 农 业 大 学 学 报
ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ＯＦ ＨＥＢＥＩ
Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．１
Ｊａｎ．２ ０ １ ４
文章编号：１０００－１５７３（２０１４）０１－００５４－０５ ＤＯＩ：１０．１３３２０／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊａｕｈ．２０１４．００１１
有斑百合花粉低温贮藏研究
赵婵璞１， 张泉卫２， 史宝胜１， 刘冬云１
（１．河北农业大学 园林与旅游学院，河北 保定０７１０００；２．大连软件园安博开发有限公司，辽宁 大连１１６０００）
摘要：以有斑百合为试材，研究了不同贮藏温度、花粉含水量、冻存方式及解冻方式对有斑百合花粉萌发率的影
响。结果表明：低温冷冻保存是实现有斑百合花粉长期保存一个有效的途径，－８０℃贮藏可以使花粉保持２年
的生命力；有斑百合花粉在室温下干燥脱水处理８～１２ｈ，含水量最适宜范围为１８％～２２％，效果较好；采用液
氮预冻再投入中－８０℃保存，有效提高了超低温保存后有斑百合花粉的萌发率；采用３５℃温水快速化冻和０℃
化冻方式，均能保持较好的冷冻低温花粉保存效果。
关 键 词：有斑百合；花粉；萌发率；低温保存
中图分类号：Ｓ６８２．２ 文献标志码：Ａ
Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｖｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｌｉｕｍ ｃｏｎｃｏｌｏｒ ｖａｒ．ｐｕｌｃｈｅｌｌｕｍ
ＺＨＡＯ Ｃｈａｎ－ｐｕ１，ＺＨＡＮＧ Ｑｕａｎ－ｗｅｉ ２，ＳＨＩ Ｂａｏ－ｓｈｅｎｇ１，ＬＩＵ Ｄｏｎｇ－ｙｕｎ１
（１．Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｌａｎｄｓｃａｐｅ Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｔｏｕｒｉｓｍ，Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ，Ｂａｏｄｉｎｇ ０７１０００，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｐａｒｋ Ａｎｂｏ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｃｏ．Ｌｔｄ．，Ｄａｌｉａｎ １１６０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ Ｌｉｌｉｕｍ ｃｏｎｃｏｌｏｒ ｖａｒ．ｐｕｌｃｈｅｌｌｕｍａｓ ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｍａｔｅｒｉａｌ，ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔｏｒ－
ａｇｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐｏｌｅｎ，ｐｒｅ－ｆｒｅｅｚｉｎｇ ａｎｄ ｔｈａｗｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ ｏｆ ｐｏｌｅｎｓ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｉｓ ａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｗａｙ
ｔｏ ａｃｈｉｅｖｅ ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｐｏｌｅｎｓ ｏｆ Ｌｉｌｉｕｍ ｃｏｎｃｏｌｏｒ ｖａｒ．ｐｕｌｃｈｅｌｌｕｍ，ｉｔ ｃａｎ
ｍａｋｅ ｔｈｅ ｖｉｔａｌｉｔｙ ｏｆ ｐｏｌｅｎｓ ｍａｉｎｔａｉｎ ｆｏｒ ２ｙｅａｒｓ ｕｎｄｅｒ－８０℃；ａ ｍｏｉｓｔｕｒｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ １８％－２２％
ｗａｓ ｓｕｉｔ ｆｏｒ ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｅｎｓ ｉｎ Ｌｉｌｉｕｍ ｃｏｎｃｏｌｏｒ ｖａｒ．ｐｕｌｃｈｅｌｌｕｍ，ａｎｄ ｉｔ ｗａｓ ｂｅｔｔｅｒ
ｔｈａｔ ｉｔ ｔｏｏｋ ８－１２ｈｔｏ ｄｒｙ ａｎｄ ｄｅｈｙｄｒａｔｅ ｂｙ ｔｈｅ ｄｒｙ ｄｉｓｈ ａｔ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ；ｉｔ ｃａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ
ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｆｔｅｒ ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｂｙ ｔｈｅ ｆｒｅｅｚｉｎｇ ｏｆ ｌｉｑｕｉｄ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｆｉｒｓｔｌｙ ａｎｄ
ｔｈｅｎ ｐｒｅｓｅｒｖｅｄ ｉｎ－８０℃；ａｎｄ ｉｔ ｃａｎ ｋｅｅｐ ａ ｂｅｔｔｅｒ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｂｙ ｔｈｅ ｗａｙ ｉｎ ３５℃ｗａｒｍ
ｒａｐｉｄ ｔｈａｗ ｏｒ ０℃ｔｈａｗ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｌｉｌｉｕｍ ｃｏｎｃｏｌｏｒ ｖａｒ．ｐｕｌｃｈｅｌｌｕｍ；ｐｏｌｅｎ；ｖｉａｂｉｌｉｔｙ；ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ
收稿日期：２０１３－０９－１８
基金项目：河北省教育厅项目：河北省野生耐阴性地被植物资源的收集筛选及应用研究（２０１０２５３）．
作者简介：赵婵璞（１９８８－），女，河北省赞皇县人，在读硕士生，研究方向：园林植物资源与应用．
通讯作者：刘冬云（１９７１－），女，河北省赞皇县人，硕士生导师，研究方向：主要从事百合遗传育种研究．
Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｏｎｇｙｕｎｌｉｕ＠ｈｅｂａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
第１期 赵婵璞等：有斑百合花粉低温贮藏研究 ５５
有斑百合（Ｌｉｌｉｕｍ ｃｏｎｃｏｌｏｒ ｖａｒ．ｐｕｌｃｈｅｌｌｕｍ）
为百合科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）百合属（Ｌｉｌｉｕｍ）渥丹（Ｌｉｌｉｕｍ
ｃｏｎｃｏｌｏｒ）的变种，花姿优美，花色橘红色，花瓣上有
褐色斑点，具有较高的观赏价值。其种质资源丰富，
广泛分布于朝鲜、俄罗斯以及中国大陆的内蒙古、吉
林、山东、山西、河北、辽宁、黑龙江等地。
百合抗逆性极强［２］，其种质资源保存及育种工
作的开展是百合研究的重要方面。自然条件下百合
花粉生命力保持时间很短，很难满足育种上的需求，
为了延长花粉的生命力及克服杂交育种时间及空间
上的限制，有斑百合花粉的超低温保存研究具有重
要意义。目前，关于百合的研究有形态［３］、核型［４］、
抗性［５－６］、花粉保存等方面。花粉保存方面的研究表
明，干燥和低温有助于维持花粉生活力［７］，并且野生
百合花粉生活力高于栽培品种［８］。因此本试验主要
研究不同贮藏温度、花粉的含水量、冻存及化冻方式
对有斑百合花粉萌发的影响，以期服务于百合的杂
交育种工作。
１ 材料与方法
１．１ 材料
本试验以有斑百合（Ｌｉｌｉｕｍ ｃｏｎｃｏｌｏｒ ｖａｒ．ｐｕｌ－
ｃｈｅｌｌｕｍ）盛花期的新鲜花粉为材料，百合植株于
２００８年６月由辽宁省开原市靠山镇引种至河北农
业大学试验苗圃，本试验于２００９—２０１１年在河北农
业大学园林与旅游学院实验室进行。
１．２ 试验方法
１．２．１ 贮藏温度对花粉生活力的影响 采集当天
开放的新鲜花粉，将花粉干燥８ｈ后，用硫酸纸包裹
装于盛有１／４硅胶颗粒的冻干管中，分别放置在
０～４，－２０，－４０，－８０℃温度下保存。分别于０，
３０，６０，９０，１２０，１５０，１８０，２４０，３６０，４８０，６００，７２０ｄ
时测定花粉的萌发率。保存的花粉用３５℃水浴快
速化冻５～１０ｍｉｎ，然后对所有处理进行萌发培养
测定花粉生活力。
１．２．２ 花粉含水量对低温贮藏花粉生活力的影响
开花当天采集有斑百合新鲜花粉，在硫酸纸上摊
开，置于盛有硅胶颗粒的干燥器中分别干燥４，８，
１２，２４，４８ｈ后放于－８０℃保存，测定花粉含水量，
然后贮藏于－８０℃下，分别于２４０，３６０，４８０，６００和
７２０ｄ测定花粉的萌发率以及不同的干燥时间对花
粉萌发率的影响。
含水量采用烘干法［９］进行测定，将称量瓶在
１２０℃的烘箱中烘至恒重，用万分之一分析天平称
量为Ｗ１，然后加入花粉（０．１～０．２ｇ），称量为Ｗ２，
放入烘箱，１２０℃进行烘干（１０ｍｉｎ左右），将称量瓶
取出，用干燥皿冷却，称重并记下读数，反复称重，直
至恒重，称量为Ｗ３，计算花粉的含水量，试验设３次
重复，相对含水量取其平均值。
相对含水量（％）＝（Ｗ２－Ｗ３）／（Ｗ２－Ｗ１）×１００
１．２．３ 不同冻存方式对低温贮藏花粉生活力的影
响 将采集好的花粉分别经过不同的冻存处理方式
进行贮藏，之后每隔一定时间测定一次各组花粉的
萌发率及其萌发的状况。将经过８ｈ干燥的花粉放
入１．５ｍＬ的冻存管中，每个冻存管中装入的花粉
量以不超过冻存管容积的２／３为宜，将瓶盖拧紧，再
将装有花粉的冻存管进行以下几种方式冻存：
Ａ：直接放入温度为－８０℃的冰箱中贮藏；
Ｂ：分别经过０恒温（２４ｈ）、－２０℃恒温（２４ｈ）、
－４０℃恒温（２４ｈ）、－８０℃恒温（２４ｈ）变温预冻处
理，然后置于－８０℃冰箱中保存；
Ｃ：用液氮 （－１９６ ℃）处理之后迅速放入
－８０℃冰箱中保存。
在冷藏２４０，４８０，６００，７２０ｄ后，将冻存管从
－８０℃冰箱中取出，迅速放入３７℃温水浴中化冻
（５～１０ｍｉｎ），从冻存管中取出花粉，置于室温片刻
后再作相关的测定工作。
１．２．４ 不同解冻方式对的花粉萌发率的影响 粉
经－８０℃保存后，分别于０，２４０，４８０，６００和７２０ｄ
取出，采用以下４种方式进行化冻：
Ａ：室温解冻：将花粉从－８０℃冰箱中取出，将
花粉直接在室温下解冻３０ｍｉｎ后，再培养观察其花
萌发率。
Ｂ：水浴解冻：将花粉从－８０℃冰箱中取出，放
在指形管中，在温度为３５℃的水浴锅中水浴处理
１０ｍｉｎ，然后再培养，观察其萌发率。
Ｃ：温度过度解冻：分别在－８０℃恒温（２４ｈ）、
－４０℃恒温（２４ｈ）、－２０℃恒温（２４ｈ）、０℃恒温
（２４ｈ）做温度过渡解冻处理，然后再培养，观察其萌
发率。
Ｄ：０℃解冻：将花粉从－８０℃冰箱中取出，直
接放在０℃冰箱中解冻３０ｍｉｎ，然后再培养，观察
其萌发率。
１．３ 数据处理
数据处理采用ＥＸＣＥＬ２０１０和 ＤＰＳ７．０５数据
处理软件。
５６ 河 北 农 业 大 学 学 报 第３７卷
２ 结果与分析
２．１ 贮藏时间和温度对花粉萌发率的影响
花粉萌发受贮藏时间和贮藏温度的影响，如图
１所示。随着贮藏天数的延长，各贮藏温度下有斑
百合花粉萌发率均逐渐降低，贮藏６０ｄ后，仍然保
持较高的萌发率，平均为９３．２５。０～４℃低温下，贮
藏到９０ｄ时萌发率下降了１５．７９％；至贮藏１５０ｄ
时萌发率下降了７５．７９％，仅为２３．１２％；至贮藏
１８０ｄ时，花粉停止萌发。相对于０～４℃的低温贮
藏，－２０℃冷冻贮藏能够使花粉的生命力得到较长
时间的保存，－２０℃下有斑百合花粉的生命力下降
趋势较为缓慢，贮藏至１８０ｄ时，萌发率下降了
２３．９６％，为７２．２４％，贮藏至６００ｄ时花粉丧失发芽
率。与－２０℃贮藏相比较，－４０℃贮藏没有使有
斑百合花粉的生命力得到显著的延长，但在相同贮
藏时间内其花粉的萌发率较－２０℃下贮藏的萌发
率要高，－４０℃贮藏下有斑百合花粉的生命力在
１８０ｄ之前均表现出缓慢下降的趋势，之后下降较
快，至２４０，４８０ｄ时，有斑百合花粉萌发率分别比比
－２０℃高２１．９２％，１５３．３３％。－８０℃贮藏使花粉
的生命力得到更长时间的保存，至３６０ｄ时，花粉仍
保持较高的萌发率，在８５％以上；至４８０ｄ时，花粉
萌发 率 为 ７９．８６％，分 别 比 －４０，－２０ ℃ 高
１１０．５３％，４３３．３３％，仍可以用于授粉；至６００ｄ时，
萌发率为４４．５６％，仍然可以用于杂交育种；至
７２０ｄ时仍然保持２３．７７％的萌发率，可见－８０℃贮
藏能够很好的保持花粉的生活力，可用于有斑百合
花粉的贮藏。
图１ 不同温度下贮藏花粉的萌发率
Ｆｉｇ．１ Ｔｈｅ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｐｏｌｅｎ ｓｔｏｒａｇｅ
ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
２．２ 花粉含水量对低温贮藏花粉萌发率的影响
花粉含水量的大小对冷冻低温贮藏花粉的萌发
有重要影响，由表１可以看出，有斑百合新鲜花粉的
含水量在４５．６％左右，如果不加干燥处理直接冷冻
的花粉在第２４０天时已经仅有３０．４％的萌发率，在
冷冻第４８０天时则仅有极少量的萌发（２．３％），而进
行不同时间干燥处理后贮藏的花粉均比未进行干燥
处理的花粉萌发率高。其中，经过４ｈ干燥处理后，
花粉的含水量为３６．５％，在贮藏第６００天时仍有
１６．５％的花粉萌发率；经过８ｈ和１２ｈ干燥处理后
的花粉在贮藏至第７２０天时仍有一定的萌发率，分
别为２０．７％和１６．７％，其贮藏前对应的含水量分别
为２１．３％和１８．４％；而经过２４ｈ和４８ｈ干燥处理
后的花粉在贮藏至第６００天时也已经几乎丧失生活
力，其对应的含水量分别为１０．６％和５．３％。因此，
干燥８～１２ｈ，含水量在１８％～２２％能够长期保存
花粉的生活力。
表１ 花粉含水量对有斑百合贮藏花粉萌发率的影响
Ｔａｂｌｅ １ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｆｒｏｚｅｎ ｌｉｌｙ ｐｏｌｅｎ
含水量及贮藏后花粉萌发率／％
Ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ｓｔｏｒａｇｅ ｏｆ ｐｏｌｅｎ
ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ
花粉干燥时间／ｈ
Ｐｏｌｅｎ ｄｒｙｉｎｇ ｔｉｍｅ
０ ４ ８ １２ ２４ ４８
花粉含水量 ４５．６±３．２ ３６．５±２．８ ２１．３±１．３ １８．４±１．５ １０．６±０．７ ５．３±０．３
冷冻前萌发率 ９７．６±５．６ ９７．８±５．３ ９３．４±４．６ ９０．６±３．８ ８６．３±４．１ ７９．５±３．８
冷冻２４０ｄ后花粉萌发率 ３０．４±２．２ ８３．３±３．５ ８８．５±２．９ ７５．１±３．１ ７３．６±４．２ ５３．２±３．２
冷冻４８０ｄ后花粉萌发率 ２．３±０．６ ４４．５±２．５ ７８．３±４．３ ４２．５±３．６ ３６．４±２．６ ２２．７±１．８
冷冻６００ｄ后花粉萌发率 ０ １６．５±２．４ ４１．６±３．５ ４０．３±２．７ ４．３±０．２ ２．６±０．１
冷冻７２０ｄ后花粉萌发率 ０ ０ ２０．７±１．３ １６．７±０．８ ０ ０
２．３ 冻存方式对低温贮藏花粉萌发率的影响
低温贮藏花粉萌发率的大小受冻存方式的影
响，由表２可以看出，经过变温预冷冻（０～－２℃～
－４０℃恒温）的花粉在贮藏期间花粉的萌发率下降
第１期 赵婵璞等：有斑百合花粉低温贮藏研究 ５７
很快，到第６００天时仅有１．６％的花粉萌发率，而直
接冷冻和经过液氮处理后冷冻的花粉则在贮藏至第
６００天时，仍然有较高的萌发率，分别为４１．６％和
４８．３％。
表２ 冻存方式对有斑百合贮藏花粉生活力的影响
Ｔａｂｌｅ ２ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔｏｒａｇｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｌｉｌｙ ｐｏｌｅｎ
冻存方式
Ｆｒｅｅｚｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ
不同贮藏天数的花粉萌发率／％
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｌｉｌｙ ｐｏｌｅｎ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔｏｒａｇｅ ｔｉｍｅｓ
０ ２４０ ４８０ ６００ ７２０
直接冷冻 ９７．６±５．６ ８２．５±３．８ ５８．３±２．４ ４１．６±２．２ ２０．７±０．６
变温预冻 ９７．６±５．６ ５０．３±２．５ ３０．７±１．６ １．６±０．２ ０．３±０．１
液氮（－１９６℃）预冻 ９７．６±５．６ ９０．７±３．６ ８０．５±３．３ ４８．３±１．８ ２３．６±０．８
２．４ 不同化冻方式对的花粉萌发率的影响
不同的化冻方式对有斑百合花粉低温保存效果
的影响差异不大，从表３的试验结果可以看出，采用
３５℃温水水浴解冻、逐渐解冻和０℃解冻，花粉均
具有普遍较高的萌发率，至４８０ｄ时花粉的萌发率
在７８．２％～８５．３％之间，但在室温下（５月中旬，
２５～２８℃）自然解冻的花粉萌发率则较低，第４８０
天时为３２．４％，明显低于其他３种方法。可见，有
斑百合的解冻方式可以采用３５℃水浴解冻、逐渐解
冻和０℃解冻３种方法。
表３ 化冻方式对有斑百合贮藏花粉生活力的影响
Ｔａｂｌｅ ３ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｈａｗｉｎｇ ｗａｙｓ ｏｎ ｔｈｅ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｌｉｌｙ ｐｏｌｅｎ
解冻方式
Ｔｈａｗｉｎｇ
不同贮藏天数的花粉萌发率／％
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｌｉｌｙ ｐｏｌｅｎ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔｏｒａｇｅ ｔｉｍｅｓ
０ ２４０ ４８０ ６００ ７２０
直接室温解冻 ９７．６±５．６ ５２．６±２．７ ３２．４±２．２ １８．６±０．６ ０
３５℃水浴解冻１０ｍｉｎ ９７．６±５．６ ９１．５±５．１ ８１．６±３．０ ２５．３±１．２ ２０．７±１．１
逐渐解冻 ９７．６±５．６ ９２．４±４．３ ８５．３±３．２ ２９．７±１．６ ２０．３±０．８
０℃解冻３０ｍｉｎ ９７．６±５．６ ９０．３±３．５ ７８．２±２．８ ３０．６±２．１ ２２．３±１．３
３ 讨论与结论
研究表明，保存温度影响着花粉的寿命，低温能
够降低花粉的呼吸作用，从而延长花粉的生命
力［１０］。花粉细胞在低温状态下，细胞内的水分变成
固态，不能被利用，新陈代谢基本停止［１１］。耿兴敏
等［１２］研究表明，唐菖蒲花粉在－８０℃保存１年后，
仍具有２．３％的萌发率，还可以进行授粉应用。李
秉玲等［１３］研究表明，超低温保存可以使日本牡丹品
种花粉寿命至少延长至２年，经超低温保存２年，花
粉仍然具有较高的生命力。罗凤霞等［１４］研究表明，
贮藏温度对东方百合花粉萌发率影响很大，常温条
件最差，－１８℃冷藏条件比４℃更有能保持花粉生
命力。本试验中，随着温度的降低，有斑百合花粉生
命力下降趋势逐渐缓慢。０～４℃的低温贮藏使有
斑百合花粉的生命力延长至１８０ｄ；在－２０，－４０℃
冷冻贮藏使花粉的生命力得到更好的保存，直到
６００ｄ时花粉才丧失生命力，－８０℃贮藏使花粉能
保存２年。综上所述，有斑百合花粉在经过长达２
年的低温保存后，虽然花粉萌发率逐渐降低，但萌发
率能保持在一个较高的水平，因此，总体来说
－８０℃低温保存实现了有斑百合花粉的长期保存。
含水量的多少在花粉的低温贮藏过程中起着关
键因素。花粉低温冷冻过程中，含水量高的花粉的
细胞内会由于水分结冰而形成冰晶，使得花粉丧失
萌发率，导致低温贮藏期缩短，因此适宜的花粉含水
量是花粉贮藏的重要条件［１５］。赵兴华等［１６］研究了
６种百合花粉的贮藏研究，以低温干燥最能够保持
花粉活力。赵云等［１７］研究表明，诸葛菜花粉寿命较
短，未干燥的花粉不耐冰冻，干燥花粉在－２０℃保
存４０ｄ时，在液氮中生活力基本不变。本试验探讨
了有斑百合花粉含水量与低温贮藏的关系。有斑百
合花粉经过８ｈ和１２ｈ干燥处理后，贮藏至第７２０
天 时仍有一定的萌发率，分别为２０．７％和１６．７％，
５８ 河 北 农 业 大 学 学 报 第３７卷
其贮藏前对应的含水量分别为２１．３％和１８．４％，这
说明２０％左右的花粉含水量是有斑百合花粉贮藏
适宜的含水量，可以使花粉贮藏达到２年。
不同的冻存方式对花粉低温冷冻贮藏有一定的
影响，预冷冻处理对花粉贮藏的效果因植物种类的
不同而不同。预冷冻的目的是为了避免细胞内结冰
造成对细胞原生质的伤害。本研究中有斑百合的预
冷冻处理的效果并不理想，有斑百合花粉的超低温
保存无需进行预处理，花粉经过干燥处理后可以直
接进行超低温保存。
解冻方式对低温贮藏后花粉的萌发具有很大影
响［１８］。当环境条件恢复到正常时，花粉要达到保存
前的状态，内部环境也需要有一个恢复过程［１９］。花
粉经过超低温保存材料后，解冻时再次结冰的温度
范围为－１０～－５℃［２０］，合适的解冻方式能有效的
避免细胞内再次结冰，并且能够防止水的渗透冲击
对细胞膜系统的破坏［２１］。本试验中室温解冻效果
最差，逐渐解冻（－８０ ℃２４ｈ －４０ ℃２４ｈ—
－２０℃２４ｈ—０℃２４ｈ）方法较为繁琐，故建议采用
３５℃水浴解冻１０ｍｉｎ和０℃解冻３０ｍｉｎ ２种方
法。这与尚晓倩［２２］研究的芍药花粉超低温贮藏解
冻方式研究结果相似。
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（编辑：宗淑萍）