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密叶朱蕉组培快繁技术研究



全 文 :热带棘业 以珍年 月 常 卷 草 期 缝
密叶朱蕉组培快繁技术研究
潘学峰 , 王毅 ,王安石
海南大学农学院 ,海南海口
海南文昌动植物检疫隔离农场有限公司 海南文昌
摘要 取密叶朱蕉健康无病的幼嫩茎段作为外植体进行组织培养 ,研究了无菌外植体的构建 ,芽增殖及生根
培养等几个关键步骤的配方。试验结果表明 一 ·一能够诱导茎段芽的萌发 一 ·
一十 · 一是诱导丛生芽增殖的较佳的激素配比 , 增殖倍数超过 倍 , 且所诱导出的丛芽健壮 在
一 · 一的培养基上试管苗均能生根 ,但是加入活性破后效果较好 ,生根效果较好的生根培养
塞是 吨 · 一 殆 · 一 在移栽阶段 ,选取椰糠 十河砂 表土 的基质中
作为移栽基质较为理想 ,移栽后成活率可达 以上 ,且植株健壮 。
关键词 密叶朱蕉 茎段 组织培养
中图分类号 文献标识码
密叶朱蕉 幼砚配朋 山 肠脚稗耽 俗称
太阳神 ,又称阿波罗千年木 、绿密叶龙血树 ,是百合
科龙血树属植物千年木的矮生品种 川 , 为竹蕉的一
个变种 ,原产我国与南亚热带地区。密叶朱蕉形态
特征为常绿小乔木 , 茎干笔直无分枝 , 叶片密集轮
生 ,重重叠叠 ,排列整齐 ,无叶柄 ,叶长椭圆披针形 ,
青翠油绿 ,从基部到茎顶均为厚质叶片紧密绕生 ,墨
绿色叶面具有多道平行叶脉 ,且叶尖略朝外翻 ,外观
看起来像一支鸡毛掸子 ,十分美观 ,被视为室内装
饰珍品 ,既可在室内花槽成列摆设 ,也可单独置放写
字间 、书房 ,给人以幽雅宁静之感 。龙血树属中有许
多植物不仅是优良的观叶植物 , 而且有的还是著
名的中药材 , 如具有止血 、活血和生肌功能的 “血
竭 ”,就是从海南龙血树 功心必 的茎 、枝受
伤后 ,分泌出的红棕色树脂中提取出来的 。目前国
内己就多种龙血树属植物进行了组织培养研究 , 例
如龙血树 、香龙血树 、金心巴西铁 、巴西铁 、海南龙血
树等 一川 , 但尚未查到有关密叶朱蕉组织培养方面
的报道 。密叶朱蕉常规繁殖多采用扦插法川 ,但繁殖
系数小 ,周期长 ,难以满足市场的需求 。因此 ,采用
组织培养手段快速繁殖密叶朱蕉很有必要 。
材料与方法
材料
接种材料
试验材料为健壮无病虫害的密叶朱蕉植株的幼
嫩茎段 。
, 外植体的构建
把取来的幼嫩茎段的顶端用流水冲洗 一
而 后放人 氏刀的烧杯中 , 用 , 洗衣粉溶液浸
洗两次后 ,再用流水冲洗 一 次 ,除去泡沫 ,然后置
于超净工作台对外植体进行表面消毒 。先用 酒
精灭菌 一浇 , 然后用 升汞溶液浸泡 一
而 , 接着用无菌水冲洗 一 次 , 最后将其剪成
长的茎段接种到初始培养基上培养 。接种前
最好要把超净工作台周围用 酒精喷洒消毒一
遍 ,以便接种时减少污染 。
试验方法
培养条件
培养室温度为 士 ℃, 以日光灯为光源 , 光
照强度 一 刃 ,光照 一 · 一 。
培养基制备方法
按组织培养常规方法进行配制 帅了,所有的培养
基均含有质量浓度 的卡拉胶 、 的蔗糖 ,
值调至 士 , 培养基装瓶后在 ℃、
高温高压下灭菌 ,冷却备用 。
初始培养基
本实验 采用 的初 始培 养基 为 一
· 一 ,待诱导新芽萌发后 ,转接至增殖培养基
进行增殖培养 。
继代培养基
为了选出较适宜密叶朱蕉组培苗诱导增殖
林业科技一 一 一︸一一一一 一好
T R O PI C A L F O R E S T R Y永一一一一理
的 一 的浓度 ,本实验以 为基本培养基 ,分别
先以 一 , , , , , 毗 · 一进行

比较试验 , 田后观察结果 。
为了筛选出较适宜密叶朱蕉丛芽诱导和增
殖的激素配比 ,以 为基本培养基 , 以上一步选出
的最佳 一 的质量浓度 , 然后再分别添加
、 、 、 、 、 ,哩 · 一 个浓度
梯度进行比较实验 , 份后观察芽的增殖情况 。
壮苗培养基和生根培养基
壮苗培养基 鹏 · 一,上 。
生根培养基是为 ① · 一
② 鸭 · 一` ③鹏 队 吨 · 一 ④
吨 · 一 雌 · 一 。
试管苗的移裁
试管苗移栽时 ,先将培养瓶移出培养室 ,于室温
下放置 一 , 再将瓶盖去掉 , 在室温下继续炼苗
一 ,取出苗用流水洗净培养基 ,然后用 拟 倍液
的多菌灵浸泡 一 而 , 待自然凉干后再移栽于椰
糠 河砂 表土 的基质中 ,
后调查成活率 。
统计分析方法
对取得的部分试验数据采用 软件进行方
差分析 。
结果与分析
无菌芽的获得
密叶朱蕉的幼嫩茎段在 一 城 · 一,
培养基上进行培养 , 旧后开始萌发出白色小芽点
一 。 后生长好的外植体已萌发出 一 个新芽 ,
而差的仅萌出一个芽点。据我们观察发现 , 带有茎
尖的茎段容易出芽 , 这可能与顶端优势有关 。萌发
出新芽的即可转人增殖培养基进行增殖 。
继代增殖培养
一 对丛生芽增殖的影响
将在初始培养基中诱导出的新芽分别接种到以
为基本培养基附加不同 一 浓度的培养基中
进行增殖 , 份后观察芽的增殖情况 ,结果见表 。
表 不同 一 浓度对增殖率的影响
显著 ,不同大写字母为差异极显著 , 以下与此相同。
从表 可以看出 , 一 浓度在 一
· 一范围内 ,随着浓度的增大 ,芽的增殖倍数不
断提高 , 一 为 · 一时 , 增殖倍数为
一 为 · 一时 , 平均增殖倍数最
高 ,达到 倍 ,而且芽苗健壮 。但是 ,当 一 浓
度达到 · 一时 ,浓度越大 ,新增的芽数反而就
越少 ,增殖倍数与 一 浓度成反比 , 一 众
· 一时 ,平均增殖倍数为 · 一时 ,增
殖倍数降为
经对所得的数据用 软件进行方差分析 , 结
果表明 一 各浓度之间的差异都达到极显著水
平 。由此可见 一 为 · 一,时 ,较有利于
密叶朱蕉芽的增殖 。
不同激素配比片丛生芽增殖的影响
通过试验我们选出最佳的 一 浓度
· 一, 来跟 进行配比 ,共 个处理组合 ,详见表
表 不同激素配比对丛芽增殖率的影响
激素配比叱 ·一 平均增殖倍数 芽的生长状况
壮一工,健一日犯刃洲…,几且傀白`一从 十 一一


重复
芽淡绿 、
芽淡绿 、
芽浓绿 、
芽浓绿 、
芽浓绿 、
从表 可以看出 , 当 一 ·
一队浓度
叮 一 平均增殖倍数 芽的生长状况

重复

芽较小而色淡
芽淡绿、健壮
芽浓绿、健壮
芽浓绿、健壮
芽浓绿、健壮
八,`勺
注 差异显著性如表中字母所示 , 相同小写字母为差异
不显著 , 不同小写字母为差异显著 相同大写字母为差异不
浓度在 一 · 一,范围内 , 随着浓度的
增大 , 增殖的倍数不断提高 , 当 浓度为
· 一`时 ,新增的芽数明显减少 ,增殖倍数有降低
的趋势 。可见过高浓度的 大于 · 一
会抑制密叶朱蕉丛芽的发生 。 从 为 · 一,
时平均增殖倍数最大 ,达到 倍 ,而且芽苗健壮 ,
其次是 · 一和 · 一 , 平均分别达到
倍和 倍 。
经对所得数据进行方差分析 , 结果表明 除了
一 与 一 组
合的差异不显著外 , 其它配比组合间的差异均达到
极显著水平 。实验表明 , 较适宜密叶朱蕉芽增殖的
激素配比是 一 · 一,十 恤 · 一, 。
生根培养基的筛选
当丛芽中的小芽长至高约 一 时 , 先
将其切成单株转接到壮苗培养基 , 待芽高至
吸 时转接到生根培养基中 。每个处理接种
株芽苗 ,尽量要求无根苗大小一致 , 后统计生
根率 ,并观察根的生长情况 。
畜︸一 一 一一 一 一︸一︸ ︸一︸尸林业科技
热带棘业 , 年月 , 卷 , 期
植株接人生根培养基 份 后开始长出根
点 ,再继续培养 一 便可长出完整的根系 ,从表
可以看出 ,各个浓度的 都能诱导生根 。在我们
所试的范围内 , 浓度越高 ,生根效果越好 ,生根
率随着 的浓度的不断增加而升高 。至于 的
质量浓度高于 · 一是否能更好促密叶朱蕉
试苗生根还有待研究。在 一本的基础
上 ,加人 · 一能提高生根率 。实验表明 ,较
适宜密叶朱蕉生根的培养基是 招 唱· 一
· 一诬。
表 不同 浓度对试管苗生根的影响
一一一一桑试管苗在所有的生根培养基上都能生根 ,在
生根培养基 接种数生根数生根率株 株 生根状况
扣刃泥 城 ·一
泥 皿 城 ·一


婚 叮 一 盯
肠伙 峪 一十们 『一
一般 条的不定根,较少侧根
一不定根条,侧根多,根微
绿 ,木质化
一不定根条、侧根多,根微
绿,木质化
根系很多,大小基本一致,根
微白色,柔嫩
试管苗的出瓶移栽
当试管苗长出 一 条主根时 ,即可出瓶移栽 。
为了使试管苗尽快适应自然条件 ,提高成活率 ,移栽
前应进行炼苗 。首先把试管苗从培养室移到明亮通
风的常温炼苗室中 , 起初以密封的状态炼苗 , 接
着打开瓶盖炼苗在散光条件下 一 , 然后从瓶中
取出试管苗 , 用清水把粘附在根系上的琼脂清洗干
净 , 以免琼脂发霉引起根部腐烂 , 接着用 《幻倍液
的多菌灵浸泡 一俪 , 清水洗净 , 待自然风干后 ,
再移栽到椰糠 河砂 表土
的基质中 , 浇足定根水 , 置于荫蔽度为 的荫
棚中 , 保持温度 一 ℃和空气湿度 一 ,
以促进小苗的成活 。 侧后即可成活 , 成活率较高 ,
可达 。
结论与讨论
在 十 一 · 一,培养基上 ,密叶
朱蕉的幼嫩茎段能萌发出新芽 。据我们观察发现 ,
带有茎尖的茎段容易出芽 , 茎的中下端较难诱导出
新芽 , 这可能与顶端优势有关 。其它研究者在对同
属的金边和金心香龙血树的组培快繁研究中也得出
类似的结果 , ,川 。
在芽的增殖培养阶段 ,我们发现了一个有趣
的现象 ,一般来说分裂素 生长素 有利于芽的增
殖 ,但我们的实验结果恰恰相反 ,最好的激素配比是
一 哪 · 一 从 · 一 ,分裂素 生长
素 。这可能跟物种的不同有关 ,具体原因有待于
进一步研究 。
我们所试的范围内 , 浓度越高 , 生根效果越好 ,
生根率随着 的浓度的不断增加而升高 。在卜
哪 · 一的基础上 , 加人 · 一能提高
生根率 。实验表明 ,较适宜密叶朱蕉生根的培养基是
孙 · 一` 飞 ·一, ,生根率可达 ,
而且根系均匀 ,根数多 ,植株长势好 ,根系较白 ,非常
有利后期炼苗移栽 。这跟活性碳的特性有很大关系 ,
活性碳不仅能吸咐根分泌的有害物质 , 而且能使培
养基变黑 ,模仿黑暗条件 ,有利于试管苗的生根 。
密叶朱蕉喜高温高湿与半阴环境 ,耐阴性强
且耐旱 ,忌阳光直射 ,生长适温为 ℃一 ℃,气温
低于 ℃时会受到 “冻害 ”,生长缓慢 对土壤要求不
严 ,但喜排水良好 ,富含腐殖质的砂壤土川。因此 ,我
们采用椰糠 河砂 表土
作为移栽基质 ,结果取得了良好的效果 ,试管苗移栽
成活率可达 。
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