全 文 ：2011 年 7 月 第 13 卷 第 7 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jul. 2011 Vol. 13 No. 7
［通讯作者］ * 吴立军，E-mail:wulijun_ 111@ hotmail. com
虎眼万年青多糖含量的研究
杨晓腾1，2，李井涛2，吴立军1*
(1. 沈阳药科大学，辽宁 沈阳 110016;
2. 吉林省食品药品检验所，吉林 长春 130033)
［摘要］ 目的:研究虎眼万年青多糖含量测定方法。方法:采用比色法，用紫外分光光度计测定虎眼万年青
多糖的含量。结果:虎眼万年青多糖的线性范围是 0. 408 3 ～ 0. 816 6 mg，重复性含量为 8. 5 %，RSD = 0. 7 %(n =
6) ;平均回收率为 97. 4 %，RSD = 1. 1 %(n = 6) ;精密度 RSD = 0. 1 %(n = 6) ;在 45 min 内样品吸光度较稳定，
在 24 h样品稳定。结论:通过对虎眼万年青多糖含量的研究，确定了虎眼万年青多糖含量的测定方法。
［关键词］ 虎眼万年青;多糖;紫外分光光度计
虎眼万年青 Ornithogalum caudatum Ait为多年生
草木植物，是吉林省道地药材。吉林省白山市的虎
眼万年青由朝鲜传入，当地老百姓习称珍珠草，民
间用其鲜汁液涂抹患处以治疗疗疮，内服可治疗无
名肿毒、肝炎、肝硬化、肝癌等［1-2］，未见历代本草
收载。本品全草入药，味甘、性微寒、归肝、脾经。
清热解毒、消坚散结。用于治疗痈疸、疔疮、瘰疬、
痄腮、无名肿毒、黄疸［1-2］。复方万年青胶囊中虎眼
万年青作为君药，列于处方中;而抗肿瘤药物虎眼
万年青注射液的开发项目也正在进行中。虎眼万年
青中多糖类化合物主要是依赖于对免疫功能具有较
强的调节作用，从而表现出一定的抗衰老、抗病毒
和抗肿瘤作用［3-4］。多糖作为虎眼万年青中功效成
分，对免疫功能有着较强的调节作用。因此，建立
有效方法对虎眼万年青中多糖的含量进行测定是必
要的。实验参考文献［5-8］采用比色法测定多糖。
1 仪器与试药
岛津 UV － 2550 紫外分光光度计。试剂均为分
析纯;D －无水葡萄糖对照品(中国药品生物制品检
定所，批号:110833 － 200503)。2，3，5 －二硝基
水杨酸试液(甲液:称取 6. 9 g 结晶酚于 15. 2 mL
10 %氢氧化钠的溶液中，用水稀释至 69 mL，并在
此溶液中加入 6. 9 g 亚硫酸氢钠。乙液:称取 255
g酒石酸钾钠加至 300 mL 氢氧化钠溶液中，再加
880 mL 1 % 3，5 － 二硝基水杨酸溶液，混匀，既
得。甲液与乙液混合，贮于棕色瓶中，7 d 后使
用)。虎眼万年青样品共 3 批，产地均为长白县，经
吉林省食品药品检验所孙玉滨主任药师鉴定。
2 方法
2. 1 对照品溶液的制备
精密称取于 105 ℃干燥至恒重的无水葡萄糖对
照品适量，加水制成 1 mg·mL －1的溶液，即得。
2. 2 标准曲线的制备
分别精密量取对照品溶液 0. 4，0. 5，0. 6，
0. 7，0. 8 mL置 25 mL量瓶中，加水稀释至 2. 0 mL，
分别精密加入 3，5 －二硝基水杨酸试液 1. 5 mL，混
匀，在沸水浴中加热 5 min，立即冷却至室温，加水
稀释至刻度，摇匀。另精密量取水 2. 0 mL置 25 mL
量瓶中，同法操作，作为对照品空白溶液。照紫外
－可见分光光度法，在 520 nm 波长处测定吸光度，
以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，
得回归方程 Y = 0. 914 0X × 0. 046 8，r = 0. 999 0，线
性范围为 0. 408 3 ～ 0. 816 6 mg。
2. 3 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约 3 g，精密称定，置
具塞锥形瓶中，精密加入水 50 mL，称定重量，浸
泡过夜，回流提取 3 h，放冷，再称定重量，用水补
足减失的重量，滤过，精密量取续滤液 2 mL 置
25 mL量瓶中，共取 2 份，1 份加 3 mol·L －1盐酸溶
液 10 mL，置沸水浴中加热 30 min，取出，冷却，
加酚酞指示液 1 滴，用饱和氢氧化钠溶液调至近红
色，再滴加氢氧化钠溶液(1→20)使呈红色，加水
稀释至 25 mL，摇匀。另 1 份不加 3 mol·L －1盐酸溶
液，同法操作，作为样品空白溶液［6］。
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DOI:10.13313/j.issn.1673-4890.2011.07.017
2011 年 7 月 第 13 卷 第 7 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jul. 2011 Vol. 13 No. 7
2. 4 测定方法
精密量取供试品溶液及样品空白溶液各 2 mL置
25 mL量瓶中，精密加入 3，5 －二硝基水杨酸试液
1. 5 mL，混匀，在沸水浴中加热 5 min，立即冷却至
室温，加水稀释至刻度，摇匀。以样品空白溶液作
为空白溶液，依法测定吸光度，从标准曲线上读出
供试品溶液中含葡萄糖的重量(mg) ，计算，既得。
2. 5 精密度试验
取样品 3. 000 2 g精密称定，依法测定，重复 6
次，计算 RSD = 0. 1 %，结果表明仪器精密度
较好。
2. 6 稳定性试验
2. 6. 1 比色后样品稳定性 取精密度项下比色后溶
液，分别在 0，15，30，45，60，75 min 测定 6 次，
结果表明比色后样品在 45 min吸光度较稳定。
2. 6. 2 样品稳定性 取精密度项下供试品溶液，分
别在 0，5，10，15，20，24 h 进行比色，测定 6
次，计算 RSD = 0. 1 %，结果表明样品在 24 h 内
稳定。
2. 7 重复性试验
取供试品 6 份，依法测定，计算平均含量为
8. 5 %，RSD =0. 7 %，结果表明重复性良好。
2. 8 加样回收率试验
取本品粉末(过三号筛)约 1. 5 g，精密称定，
置具塞锥形瓶中，精密加入水 50 mL，称定重量，
浸泡过夜，回流提取 3 h，放冷，再称定重量，用水
补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液 2 mL 置
25 mL量瓶中，共取 2 份，1 份加 3 mol·L －1盐酸溶
液 10 mL，加 D －无水葡萄糖 5 mg，精密称定，置
沸水浴中加热 30 min，取出，冷却，加酚酞指示
液 1 滴，用饱和氢氧化钠溶液调至近红色，再滴
加氢氧化钠溶液(1→20)使呈红色，加水稀释至
25 mL，摇匀。另 1份不加 3 mol·L －1盐酸溶液，不加
对照品，同法操作，作为样品空白溶液。结果见表1。
表 1 万年青多糖加样回收率试验
编号
取样量
/ g
样品中
含量 /mg
对照品加
入量 /mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
RSD
/%
1 1. 501 2 4. 78 5. 51 10. 05 95. 64 97. 4 1. 1
2 1. 504 8 4. 79 5. 21 9. 90 98. 08
3 1. 505 5 4. 79 5. 52 10. 16 97. 28
4 1. 507 9 4. 80 5. 94 10. 58 97. 31
5 1. 500 3 4. 77 5. 47 10. 09 97. 26
6 1. 511 2 4. 81 5. 11 9. 87 99. 02
2. 9 样品含量测定
依法测定 3 批样品，结果见表 2。
表 2 3 批虎眼万年青中多糖含量测定
样品 取样量 / g 多糖含量 /%
1 3. 004 8 8. 5
2 3. 014 1 8. 2
3 3. 007 9 7. 4
3 讨论
3. 1 取样量的考察
取本品粉末(过三号筛)1，3，5 g，依法测定，
结果表明取样量为 3 g 时，样品的测定值和校正值
与标准曲线匹配良好。
3. 2 提取条件的考察
取样品 5 份，取样量为 3 g，各加 50 mL 的水，
分别超声处理 1 h，浸泡过夜超声处理 1 h，浸泡过
夜回流 1 h，浸泡过夜回流 3 h，浸泡过夜回流 4 h，
依法测定。结果表明浸泡过夜是必要的，回流提取
要优于超声提取，回流最佳时间为 3 h。
多糖含量测定时发现，虎眼万年青含有大量的
单糖成分，采用实验方法能够有效地摆脱单糖的干
扰，对多糖的含量进行准确的测定。虎眼万年青作
为吉林省的道地药材，在近些年已经被越来越多的
人关注，合理有效地使用该药材，已经成为了重中
之重，为了更好地控制该药材的质量，需要收集更
多的样品，完成数据积累。
参考文献
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(收稿日期 2010-11-09)
(下转第 41 页)
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于正丁醇萃取法，且所得总皂苷颜色较浅，收率较
高。而且该法克服了传统工艺存在的有机溶剂消耗
多、萃取易乳化、糖和色素等杂质除不完全等缺点。
操作简单、安全、稳定，适合广泛应用推广。
本研究是在实验室研究规模下进行的，优选出
的最佳工艺必须进行放大试验，具体分析工艺条件
放大后如果某些条件不合适，必须进行适当调整，
以达到最佳分离纯化效果，保证工业生产时的产品
质量。
参考文献
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(收稿日期 2011-03-07)
Optimization of the Purification of Total Saponins from Dioscorea nipponica by Macroporous Resin
ZHANG Yuan-yuan1，LIU Rui1，REN Rui2，MO Chou1
(1. School of Chinese Materia Medica，Beiing University of Chinese Medicine，Beijing 100102，China;
2. Guangdong Institute for Drug Control，Guangzhou 510000，China)
［Abstract］ Objective:The optimal technical parameters for total saponins purification with macroporous resin
was studied. Methods:Orthogonal test was used to screen the optimal conditions in terms of extraction yield and purity
of saponins. Results:The optimal condition was as follows:the ratio of total saponins and macroporous resin was 1∶
2，the resin column diameter-height ratio was 1∶13 and the amount of desorption solvent was 8 BV. The extraction yield
of total saponins was 5. 79 % ～6. 27 % and the purity reached 55. 08 % ～57. 79 %. Conclusion:The technique was
simple，feasible and suitable for industry production.
［Key words］ Dioscorea nipponica;Total saponins;
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
Technique conditions
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Polysaccharide Assay Study of Ornithogalum caudatum Ait
YANG Xiao-teng1，2，LI Jing-tao2，WU Li-jun1
(1. Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，China;
2. Jilin Institute for Food ＆ Drug Control，Changchun 130033，China)
［Abstract］ Objective:Study the methods to determine the Polysaccharide assay of Ornithogalum caudatum
Ait. Methods:By colorimetry，using UV spectrophotometric to determine the polysaccharide assay of Ornithogalum
caudatum Ait. Results:Polysaccharide assay of Ornithogalum caudatum Ait linear range is 0. 408 3 ～ 0. 816 6 mg;
repeatability 8. 5 %，RSD was 0. 7 % (n = 6) ;recovery was 97. 4 %，RSD% was 1. 1 % (n = 6) ;precision RSD%
was 0. 1% (n = 6) ;in 45 minutes， the sample absorbance was stable， in 24 hours， the sample was
stable. Conclusion:Through the study of polysaccharide assay of Ornithogalum caudatum Ait，we established the
method for determination of polysaccharide assay of Ornithogalum caudatum Ait.
［Key words］ Ornithogalum caudatum Ait;Polysaccharide;UV spectrophotometric
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