全 文 ：中国麻业科学 第 32卷
杀菌剂对剑麻茎腐病病原菌的室内毒力测定
郑金龙 1，高建明 1，张世清 1，陈河龙 1，刘巧莲 1，易克贤 1，2*
（1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所，农业部热带作物生物技术重点开放实验室，海南 海口 571101；
2.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，海南 儋州 571737）
摘 要：由黑曲霉引起的剑麻茎腐病是一种毁灭性病害，对我国的剑麻产业造成极大的威胁。
鉴于此，本研究在室内采用菌丝生长速率法测定了 14 种杀菌剂对黑曲霉病原菌的抑菌效果，同时
进行药剂成本分析，结果表明：50%咪鲜胺锰盐WP的 EC50最小，病原菌对它的敏感性最高，抑菌效
果最好；3%甲基多抗霉素WP和 40%五硝基多菌灵WP的 EC50较小，病菌对它们的敏感性也较高，
抑菌效果也较好；70%甲基托布津WP的 EC50最大，病菌对它们的敏感性最低，抑菌效果最差。通过
对药剂抑制效果和使用成本分析， 建议生产上可使用 50%咪鲜胺锰盐 WP、40%五硝基多菌灵 WP
和 3%甲基多抗霉素WP来防治剑麻茎腐病。
关键词：剑麻；茎腐病；黑曲霉；杀菌剂；毒力测定
中图分类号：S563.8 文献标志码：A
Indoor Toxicity Determination of Fungicides
on Sisal Stem Rot Pathogen
ZHENGJin- long1，GAOJian- ming1，ZHANGShi- qing1，CHENHe- long1，LIUQiao- lian1，YI Ke- xian1，2*
（1. Key Laboratory of Tropical Crop Biotechnology，Ministry of Agriculture，Institute of Tropical Bioscience
and Biotechnology，CATAS，Haikou，Hainan 571101；
2. Institute of Environment and Plant Protection，CATAS，Danzhou，Hainan 571737，China）
Abstract：The sisal stem rot caused by Aspergillus niger is a devastating disease which seriously
threats sisal production in China. Inhibition effect of 14 fungicides on Aspergillus niger was measured. The
results showed that the EC50 of 50% prochloraz manganese chloride complex WP was the smallest . The
sensitivity of pathogen to this fungicide was the highest，and its inhibitory effect was best. The EC50 of 3%
polyoxin WP and 40% five nitro badistan WP were smaller，the sensitivity of pathogen to themwas higher，
and their inhibitory effect was better. The EC50 of 70% topstn- methyl WP was the largest，the sensitivity of
pathogen to it was the lowest，and its inhibition effect was the worst，and the cost analysis of these
fungicides showed that prochloraz manganese chloride complex 50% WP，3% polyoxin WP and 40% five
nitro badistan WP could be applied in the control of the sisal stem rot.
Key words：sisal；sisal stem rot；Aspergillus niger；fungicides；toxicity determination
剑麻茎腐病是除剑麻斑马纹病外，对剑麻危害最大的真菌性病害。20世纪 50年代初，坦桑尼
亚[1，2]和肯尼亚[3]最早报道发生此病。我国于 1987年在广东省的一些国营农场发现此病，给当地剑麻生
文章编号：1673- 7636（2010）05- 0270- 05
收稿日期：2010- 07- 19
基金项目：国家科技支撑计划项目（No.2007BAD48B06）；中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助（ITBBZD0828）；
948 项目（2010- Z6）；海南省自然科学基金项目（80510）
作者简介：郑金龙（1982- ），男，硕士，主要从事剑麻分子病理研究。 电话：0898- 66987815， E- mail:zhengjinlong_36@163.com
通讯作者：易克贤（1964- ），男，博士生导师、研究员，主要从事热带作物抗病育种研究。
电话：0898- 66987815 ，E- mail:yikexian@21cn.com
2010年第 32卷第 5期 中国麻业科学 PLANT FIBER SCIENCES IN CHINA270
第 5期
产造成重大经济损失[4]。近年来，该病又相继在我国各剑麻主产区发生危害，并且有不断加重之势，特
别是对广西植麻区危害尤为严重。为了筛选出对剑麻茎腐病菌毒力大、抑菌效果好、成本低的杀菌剂
供生产上使用，本研究选用了 14种杀菌剂作为供试药剂，采用菌丝体生长速率法对剑麻茎腐病菌进
行室内毒力测定，以期筛选出对剑麻茎腐病菌毒力强的杀菌剂，为防治剑麻茎腐病提供参考。
1 试验材料
1.1 供试菌株
采自广西和广东的病样，通过科赫法则分离、纯化并鉴定病原菌，进行致病性测定后，选择致病
性强的三个菌株 CH0002、CH0003和 CH0027作为供试菌株保存备用。
1.2 供试杀菌剂
供试杀菌剂 14种：50%咪酰胺锰盐WP（德国拜耳作物科学公司），40％五硝基多菌灵WP（汤
普森生物科技），3％甲基多抗霉素WP（日本生化科研株式公社菌种生产），72％霜脲·锰锌WP（美
国杜邦公司），10％苯醚甲环唑WG（江苏丰登农药有限公司），70％甲基硫菌灵WP（美国默赛技术
公司制造），75％百菌清WP（苏州先正达作物保护有限公司），25％三唑酮WP（美国默赛技术公司
制造），70％甲基托布津WP（江苏龙灯化工有限公司），50％洽益发WP（江苏洽益农化有限公司台
资），真菌净ME（河北省徐水县农药厂），50％烯酰吗啉WP（青岛瀚生生物科技股份有限公司），
50%扑海因WP（德国拜耳作物科学公司），50%多菌灵WP（上海升联化工有限公司）。
1.3 供试培养基
PDA（马铃薯）培养基：马铃薯 200g，葡萄糖 15 g，琼脂 20 g，以去离子水定容至 1L，121℃灭菌
15min，用于黑曲霉菌的分离纯化培养、菌株保存及药剂筛选等。
1.4 主要仪器
SW- CJ- IFD单人单面洁净工作台；SHP- 450生化培养箱；灭菌锅。
2 试验方法
2.1 14种杀菌剂对剑麻茎腐病的毒力测定
采用生长速率法。先将不同杀菌剂制成含量分别为 0、0.1、1、100mg/L的 PDA培养基平板，然
后将培养 120h后的各菌株菌落边缘取单菌点移至含药平板上，置于（28±0.5）℃的恒温培养箱中
培养 120h后，观察供试菌株在各杀菌剂的不同浓度下的生长情况，用十字交叉法测量菌落直径，求
平均值，按以下公式计算抑菌率：
菌落生长抑制率（%）=（对照菌落直径 - 处理菌落直径）/对照菌落直径×100。
根据不同菌株在 0、0.1、1、100mg/L含药培养基上的生长情况和抑菌率大小，设置不同杀菌剂
的毒力测定浓度梯度，每种杀菌剂设 5～7个浓度梯度，每浓度 3皿，置于（28±0.5）℃的恒温培养
箱中培养 120h后，观察供试菌株在各杀菌剂的不同质量浓度下的生长情况，用十字交叉法测量菌
落直径，求平均值，计算抑菌率。试验重复 3次求平均抑菌率，并以浓度的对数值（x）和平均抑菌率
的机率值（y）求各种杀菌剂对参试菌株的毒力回归方程 Y = a + bX，并计算出抑制菌体生长的有效
中浓度 EC50以及 EC75和相关系数（r）值[5]。
2.2 药剂成本计算
配制 15 kg的药液按以下公式计算药剂的成本：药剂所需量 =盛水量（15kg）×1000/稀释倍
数；药剂成本 =药剂所需量（g）×单价（元 /g）。
3 结果与分析
3.1 供试药剂 EC50值比较分析
各药剂浓度对数与生长抑制率几率值之间表现为直线相关，各药剂的毒力回归方程与其 EC50
郑金龙等：杀菌剂对剑麻茎腐病病原菌的室内毒力测定 271
中国麻业科学 第 32卷
值见表 1。由表 1可知，同一种药剂对不同菌株的生长抑制率不同，不同药剂对相同菌株的生长抑
制率也不相同。14种药剂可分为 5个类群，其中对病原菌抑制效果最好的是咪酰胺锰盐，其平均
EC50值为 0.1608μg/mL；其次是五硝基多菌灵和甲基多抗霉素，其平均 EC50值分别为 4.9392
μg/mL和 8.4160μg/mL；第三是霜脲锰锌、苯醚甲环唑和百菌清，其平均 EC50值在 21.5538～
79.4119μg/mL之间；第四是三唑酮、甲基硫菌灵、扑海因、多菌灵和烯酰码啉，其平均 EC50值在
110.4216～969.0672μg/mL之间；对病原菌抑制效果最差的是洽益发、真菌净和甲基托布津，其平
均 EC50值在 4624.9062～14114.5152μg/mL之间。
表 1 不同杀菌剂测试效果的回归方程、相关系数、EC50、平均 EC50和 EC75
Table.1 Toxicity test result of different fungicides
杀菌剂
Fungicides
咪酰胺锰盐
五硝基多菌灵
甲基多抗霉素
苯醚甲
环唑
霜脲锰
锌
百菌清
三唑酮
甲基硫
菌灵
扑海因
多菌灵
烯酰码
啉
洽益发
真菌净
甲基托
布津
菌株
strain
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
CH0002
CH0003
CH0027
毒力回归方程
Toxic linear
regressive
equation
y=2.4672x+6.9212
y=2.6866x+7.4150
y=1.9666x+6.4199
y=2.6276x+3.4958
y=2.1570x+3.4525
y=1.6898x+3.7019
y=1.5699x+3.6311
y=1.7235x+3.5814
y=1.5860x+3.3392
y=2.9548x+0.0253
y=2.0671x+2.8367
y=2.0991x+3.4850
y=2.0079x+2.0126
y=1.9818x+2.0345
y=2.5760x+1.1197
y=0.7204x+3.7228
y=0.4978x+3.9220
y=0.9532x+3.5581
y=0.6155x+3.5356
y=0.8075x+3.4945
y=1.2509x+3.4108
y=1.3549x+1.7270
y=1.4798x+1.5090
y=1.5269x+1.2543
y=0.5876x+3.3766
y=0.8279x+2.6481
y=0.9625x+2.5441
y=2.3664x- 1.8105
y=2.0258x- 1.1618
y=2.1308x- 1.2271
y=1.0318x+1.6372
y=1.7235x- 0.0941
y=1.3639x+1.8981
y=0.6704x+2.6548
y=0.6289x+2.6569
y=0.5686x+2.8774
y=0.3839x+3.3766
y=0.6355x+2.9999
y=0.3768x+3.5401
y=0.8532x+2.2879
y=0.8942x+1.8378
y=0.4703x+2.8494
相关系数
（r）
Relative
coefficient
0.9779**
0.9860**
0.9584*
0.9587*
0.9014*
0.9727**
0.9826**
0.9599**
0.9741**
0.9546*
0.9431*
0.9615**
0.9596**
0.8828*
0.9730**
0.8794*
0.8469*
0.8695*
0.9772**
0.9527*
0.9720**
0.9756**
0.9859**
0.9840**
0.9364*
0.9826**
0.9702**
0.9620**
0.9895**
0.9971**
0.9982**
0.9855**
0.9817**
0.9700**
0.9312*
0.9842**
0.9967**
0.9609**
0.9666**
0.9732**
0.9381*
0.9713**
EC50
μg/mL
0.1665
0.1262
0.1897
3.7364
5.2171
5.864
7.4467
6.6541
11.1471
48.2612
11.1311
5.2691
30.7484
31.3593
32.0869
59.2794
146.3957
32.5607
239.444
73.1807
18.64
260.4213
228.6139
283.8836
579.1136
693.1098
356.1102
755.0928
1100.683
836.4138
1816.179
902.9664
188.0559
3149.271
5317.55
5407.898
5407.898
1403.737
7489.783
1509.172
3438.312
37396.06
平均 EC50
μg/mL
0.1608
4.9392
8.416
21.5538
31.3982
79.4119
110.4216
257.6396
542.7779
897.3968
969.0672
4624.906
8605.085
14114.52
EC75
μg/mL
0.3124
0.225
0.4178
6.7478
10.7185
14.7013
20.0268
16.385
29.6788
81.6342
23.5962
11.0425
66.6417
68.6616
58.6365
511.905
3315.051
156.5468
2985.802
500.8301
64.5145
819.406
652.9913
785.0278
8140.545
4523.91
1787.984
1455.5678
2369.2857
1733.6893
8182.212
2223.445
587.2523
31939.33
62837.53
83037.8
966969.7
16167.94
461895.3
9317.343
19527.69
1016288
注：r值右上角标有“*”和“**”者，分别表示经 Fisher测验相关系数达到显著和极显著。
272
第 5期
3.2 成本分析比较
各药剂的使用成本见表 2。从表 2可见，配制 15kg药液，成本较低的是多菌灵、苯醚甲环唑和咪酰
胺锰盐，仅分别为 0.34、0.6和 0.75元；其次是五硝基多菌灵、甲基多抗霉素、三唑酮、烯酰码啉和甲基
托布津，成本价介于 1.00～1.50元之间；最后是霜脲锰锌、甲基硫菌灵、百菌清、扑海因、洽益发和真菌
净，成本价介于 1.50～4.00元之间，其中成本最高的是扑海因和洽益发，其成本均为 3.75元。
药剂名称 单价（元 /g或 ml） 稀释倍数 药剂成本（元）
咪酰胺锰盐 3.00/20 3000 0.75
五硝基多菌灵 5.00/100 700 1.07
甲基多抗霉素 7.00/100 1000 1.05
霜脲锰锌 10.00/100 500 3.00
苯醚甲环唑 10.00/50 5000 0.60
甲基硫菌灵 8.00/100 700 1.71
百菌清 10.00/100 450 3.33
三唑酮 6.00/50 1500 1.20
扑海因 10.00/40 1000 3.75
烯酰码啉 3.00/25 1600 1.13
洽益发 2.00/10 800 3.75
真菌净 3.00/20 750 3.00
甲基托布津 7.00/100 800 1.31
多菌灵 7.00/400 800 0.34
表 2 配制 15kg药液使用杀菌剂的成本核算
Table.2 Cost analysis of used fungicides
说明：“单价”以每袋（瓶）的价格计算，如 4.00/20表示每袋重量为 20g，价格为 4.00元。药剂成本为 0.2元 /g；稀
释倍数以药剂使用说明书上的最低倍数计。
4 讨论和建议
4.1 讨论
（1）供试的 14种药剂中，咪酰胺锰盐的抑菌效果最好，其 EC50值在 0.1262～0.1897μg/mL之
间；其次是五硝基多菌灵，其 EC50值在 3.7362～5.8540μg/mL之间；这两种药剂对三个菌株的 EC50
都比较小，但也存在差异，存在差异的主要原因是三个参试菌株之间的致病力不同所致；抑菌效果
最差的是甲基托布津，其 EC50值高达 37396.0607μg/mL；其中多菌灵的平均 EC50值为 897.3968
μg/mL，抑菌效果较差，这与国内学者黄标[6]、赵艳龙[7]等报道 25%多菌灵可湿性粉剂对剑麻茎腐病
具有较好的防治效果有差异，其原因可能是我国剑麻主产区长期使用多菌灵，使病原产生抗性所
致。
（2）毒力回归曲线的斜率与病原菌对杀菌剂的敏感性成正比，因此可以和 EC50值配合来比较
分析药剂的抑菌效果，杀菌剂的 EC50值越小，毒力回归曲线的斜率值越高，说明随着药剂浓度的增
加，对病原菌生长的抑制作用提高越快。综上所述，14种药剂的抑菌效果排序依次为：咪酰胺锰
盐＞五硝基多菌灵＞甲基多抗霉素＞霜脲锰锌＞苯醚甲环唑＞甲基硫菌灵＞三唑酮＞百菌清＞扑
海因＞多菌灵＞洽益发＞真菌净＞烯酰码啉＞甲基托布津。
4.2 建议
通过对 14种药剂抑菌效果的测定以及药剂成本核算，认为目前我国防治剑麻茎腐病的最佳药
剂为咪酰胺锰盐和五硝基多菌灵，用这两种药剂防治剑麻茎腐病在国内尚未见报道，若在大田实验
中得到验证，有望在我国剑麻主产区进行推广。
剑麻茎腐病发病迅速，传染性强，因此光靠药剂防治是不够的，应该贯彻“预防为主，综合防治”
的原则，应以提高抗病性为主，辅以避病措施、化学防治和其它农业措施等进行剑麻茎腐病的防治。
参考文献：
[1] Mand.M.Wallance，E.C.Diekmahns：Bole rot of sisal，The East African Agricultural Journal，18（1）1952：24- 29.
郑金龙等：杀菌剂对剑麻茎腐病病原菌的室内毒力测定 273
中国麻业科学 第 32卷
产量构成因素均不及对照。
6.4 S4（96- 1- 2）：由江西省麻类研究所提供，该品种年平均纤维产量为 2244.75kg/hm2，比对照减产
11.25%，居参试品种第五位；纤维支数 1760公支，排第六位，纤维强力为 36.54cN，居参试品种之
首；工艺成熟期 205天；产量构成因素中除了有效株数略高于对照外，其余均不及对照；抗倒伏性
好，其它抗逆性能中等。
6.5 S5（NC01）：由中国农业科学院麻类研究所提供，该品种中后期生长旺盛，整齐度好，茎杆粗壮
均匀，除了茎粗和皮厚稍不及对照外，其它产量构成因素均超过对照。年平均纤维产量为
2796.90kg/hm2，居参试品种第一位，比对照增产 10.42%；纤维支数年平均 2036公支比对照高出 184
公支；纤维强力为 35.53cN，居参试品种第二位；工艺成熟期 207天；所有抗逆性优于对照。
表 8 各参试品种抗逆性调查
Tab.8 The stress resistance of tested varieties
表 9 各参试品种的工艺成熟期（天）
Tab.9 The ripeness days of each tested variety
表 7 各参试品种纤维支数及强力结果
Tab.7 Fiber fineness and fiber strength of each tested variety
品种名称
S1 (CZ0601)
S2(华苎 4号)
S3(D- 801)
S4(96- 1- 2)
S5(NC01)
S6(圆叶青)
支 数(公支)
2298①
2078③
2284②
1760⑥
2036④
1852⑤
强力(cN)
33.90⑥
34.52④
33.95⑤
36.54①
35.53②
35.17③
品种代码
S1（CZ0601）
S2（华苎 4号）
S3(D- 801)
S4(96- 1- 2)
S5(NC01)
S6(圆叶青)
抗病性
花叶病 根腐线虫 炭疽病
发病率%
0
0
0
0
0
0
病指
0
0
0
0
0
0
发病率%
-
-
-
-
-
-
病指
-
-
-
-
-
发病率%
0
0
0
0
0
0
病指
0
0
0
0
0
0
抗
风
性
中
中
弱
强
中
强
抗
渍
性
中
中
中
中
中
中
抗
寒
性
较好
较好
较好
较好
较好
较好
缺蔸
蔸数
15
10
50
61
18
24
缺蔸率%
5.00
3.33
16.70
20.03
6.00
8.00
试点名称
南县(U2)
达州(U3)
宜春(U5)
咸宁(U6)
平 均
S1（Cz0601）
198
203
221
207
207
S2（华苎 4号）
207
200
220
221
212
S3（D- 801）
198
200
222
207
207
S4（96- 1- 2）
193
199
221
207
205
S5（NC01）
198
204
215
212
207
S6（圆叶青）
193
196
223
203
204
（上接第251页）
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