全 文 :河北林业科技第 3期 2013年 6月
收稿日期:2013-04-28
有斑百合的组织培养技术研究
黄智冬 1,刘冬云 2
(1.隆化县林业局,河北 隆县 068150;2.河北农业大学园林与旅游学院,河北 保定 071001)
摘要:以有斑百合鳞片为外植体,进行不定芽的诱导、分化、增殖、生根、快速繁殖技术研究。结果表明:有斑百合鳞
茎的最佳诱导培养基为 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L;最佳增殖培养基为 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L;最佳生根培
养基为 1/2MS+NAA0.3mg/L。
关键词:有斑百合;百合鳞片;组织培养
中图分类号:S682.265 文献标识码:A 文章编号:1002-3356(2013)03-0017-02
有斑百合(Lilium concolor var. buschianum
Baker)是渥丹的一个变种,为百合科百合属多年
生球根花卉,分布于辽宁、吉林、河北、山西、山东
等地,是很好的花坛、花境和切花材料,其鳞茎可
食用、药用。现以其鳞片为外植体,探讨不同激素
配比对其不定芽诱导、增殖、生根的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
以河北农业大学园林与旅游学院实验苗圃
的有斑百合鳞片为材料。
1.2 培养条件
以 MS培养基(根诱导培养基为 1/2MS)为基
本培养基,添加不同浓度组合的植物生长调节
剂,培养基中均加入 0.60%的琼脂、蔗糖 30.0g/L,
调节 pH为 5.6~5.8。培养温度为 20~25℃,光照强
度为 1000~1500Lx,光照 12h/d。
1.3 试验方法
1.3.1 外植体处理 将百合鳞茎从土中取出,选
取健壮鳞茎中部较充实的鳞片,用自来水和软毛
刷洗刷干净,4℃低温处理 24h,以降低鳞片带毒
率。在超净工作台上,先用 75%酒精浸泡 10s,再
放入 0.1%升汞溶液中浸泡 15min,无菌水冲洗 7~
8次。用消毒滤纸吸干表面水分,在无菌条件下将
鳞片切为 5mm×5mm的小块,放在灭过菌的培养
皿中备用。
1.3.2 初代培养 在超净台上取外植体小块分
别接种于下列诱导培养基中:①MS+6-BA2.0mg/L
+NAA0.1mg/L。②MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。
③ MS +6 -BA0.5mg/L +NAA0.1mg/L。④ MS +6 -
BA1.0mg/L。⑤MS+NAA0.1mg/L。⑥MS。
1.3.3 继代培养 将初代培养诱导出的小鳞茎
切成单株分别接种到下列增殖培养基上。①MS+
6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L。②MS+6-BA1.0mg/L
+NAA0.1mg/L。③MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。
观察记录再生不定芽的分化情况及在不同激素
组合条件下鳞茎的增殖情况,30d 后进行数据
统计。
1.3.4 生根培养 将继代培养基中长势较好的
鳞茎转入不同的生根培养基中进行生根培养。①
MS。②1/2MS+NAA0.3mg/L。③1/2MS+IBA0.3mg/L。
④1/2MS+IBA0.5mg/L。观察记录在不同培养基上
苗的生长及生根情况,20d后统计生根情况。
2 结果与分析
2.1 初代培养
由表 1知,外源激素 6-BA与 NAA配合使用
能较好地诱导鳞片分化不定芽,从分化率、增殖
系数及不定芽的长势可以看出,适合有斑百合鳞片
的分化培养基为:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,
增殖系数最大,为 1.74。
2.2 继代培养
由表 2知,在 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L
增殖培养基中培养时,增殖系数最大,为 2.79,小
苗长势最佳。同时,NAA浓度固定不变时,随 6-
BA浓度的降低,新增鳞茎有根系产生,也说明细
胞分裂素/生长素比值低时,有助于根系的产生。
2.3 生根培养
由表 3知,在激素组合为 1/2MS+NAA0.3mg/L
和 1/2MS+IBA0.3mg/L的培养基上培养时,生根
17- -
DOI:10.16449/j.cnki.issn1002-3356.2013.03.028
河北林业科技第 3期 2013年 6月
表 1 不同激素组合对有斑百合初代培养的影响
激素组合
MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L
MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L
MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L
MS+6-BA1.0mg/L
MS+NAA0.1mg/L
MS
接种数/个
83
85
78
74
60
51
分化数/个
13
14
23
11
6
7
分化率/%
16
17
30
15
10
14
不定芽数/个
6
16
40
17
0
10
增殖系数
0.46
1.14
1.74
1.55
0
1.43
平均球茎/cm
0.10
0.09
0.23
0.13
0
0.04
有无根系
有
无
有
无
有
无
率最高,均为 100%;在添加 NAA浓度为 0.3mg/L
的培养基中,小鳞茎的平均生根数为 8.0,而在添
加 IBA浓度为 0.3mg/L的培养基中,小鳞茎的平
均生根数为 5.5;当 IBA浓度达到 0.3mg/L时,随
着 IBA浓度的增加,有斑百合的生根率下降。通
过以上比较,可看出有斑百合最适宜的生根培养
基为 1/2MS+NAA0.3mg/L,生根率 100%,每个试
管苗平均根数达 8.0条,且根色洁白。
3 结论
不同浓度的外源激素 6-BA和 NAA的组合,
对有斑百合鳞片不定芽的诱导和生长影响十分
显著。适宜有斑百合鳞片不定芽诱导的最佳诱
导培养基为 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。当
6-BA浓度为 0.5mg/L时分化率最高,并且新球增
殖倍数最高,其分化率可达 30%,新球增殖倍数
高达 1.74。
有斑百合不定芽继代培养的最佳继代培养
基为 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,此培养基下
不定芽生长最快,鳞茎的增殖系数最大,为 2.79,
但球径较小。
有斑百合无菌芽的最佳生根培养基为 1/2MS+
NAA0.3mg/L,生根率可达 100%,根数较多,但平
均根径、根长较小。
参 考 文 献
[1]杨增海,王聚瀛.植物生长调节剂对百合组织培养繁殖
的效应[J].西北农业大学学报,1987,15(3):72-77.
[2]王康才.百合栽培新技术[M].北京:中国农业出版社,
1999.
[3]赵祥云,王树栋,陈新露,等.百合[M].北京:中国农业
出版社,1999.
[4]王家福,陈振光.百合快速繁殖条件的优化[J].福建农
业大学学报,1999,28(2):152-156.
[5]罗凤霞,徐桂华,金丽丽,等.新铁炮百合微繁的研究
[J].沈阳农业大学学报,2000,31(3):254-257.
表 2 不同激素组合对有斑百合鳞茎增殖的影响
激素组合
MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L
MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L
MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L
接种球数/个
27
49
43
新小球数/个
35
92
120
增殖系数
1.30
1.88
2.79
平均球径/cm
0.20
0.21
0.19
有无根系
无
有
有
苗长势
一般
较好
最好
表 3 不同激素组合对有斑百合生根培养的影响
激素组合
MS
1/2MS+NAA0.3mg/L
1/2MS+ IBA0.3mg/L
1/2MS+IBA0.5mg/L
接种苗数/株
15
15
15
15
生根苗数/株
14
15
15
14
生根率/%
93
100
100
93
平均根数/架
2.60
8.0
5.50
3.33
平均根长/cm
0.56
0.20
1.03
1.16
平均根径/cm
0.05
0.06
0.12
0.09
苗长势
根细,苗弱
根较粗,苗弱
根粗,苗壮
根粗,苗壮
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