全 文 ：收稿日期:2001-10-10
作者简介:马纯艳(1960-), 女 ,辽宁沈阳人 , 沈阳师范大学副教授.
文章编号:1008-374X(2002)03-0219-03
有斑百合叶片的组织培养
马纯艳
(沈阳师范大学 化学与生命科学学院 ,辽宁 沈阳　110034)
摘　要:试验采用红色顶生花有斑百合为试材 , 取其叶片进行组织培养.在 MS+2.4-D 1.0 mg/ L
+6 BA 0.5 mg/ L+蔗糖 30 g+琼脂粉 7 g的培养基上进行培养 , 形成愈伤组织及鳞茎丛.
在 MS+2.4-D1.0 mg/ L+蔗糖 30 g+琼脂粉 7 g的培养基上进行培养 , 仅形成了愈伤组
织.在 MS+6BA 1.0 mg/ L+IAA 0.5 mg/ L+蔗糖 30 g+琼脂粉 7 g 上进行培养 , 不经过
愈伤组织 ,直接在外植体上形成了鳞茎丛 ,经过诱导生根 , 长成了幼苗 , 幼苗长至 5 cm 左
右 ,栽到蛭石与沙土的混合基质中培养进一步长成了植株.
关键词:有斑百合;愈伤组织;鳞茎丛;幼苗
中图分类号:O 943.1　　　　　文献标识码:A
百合的繁殖主要靠鳞茎 ,一年一次 ,时间长 、繁殖数量少.利用组织培养的方法对百合的叶进行培
养 ,可在这些外植体上形成小鳞茎 ,对其小鳞茎进行生根诱导 ,形成完整植株;百合的快速繁育具有重要
意义;百合属植物的组织培养已有报道 ,但是对于有斑百合 ,国内在这方面报道较少.本种百合据辽宁植
物志记载为(L .concolor var.),多年生草本植物 ,具鳞茎 ,叶披针形.花被片红色 ,上有斑点 ,花朵直立朝
上 ,花瓣展开 ,花梗挺直 ,花色艳丽.有斑百合可以用来观赏 ,用来布置花坛 ,还可以做切花.在国内市场 ,
人们对百合品种的需求也越来越多 ,具有较高的经济价值.在MS+6 BA 1.0 mg/L +IAA 0.5 mg/ L+蔗
糖 30 g+琼脂粉 7 g 培养基上进行培养的叶片 ,形成了鳞茎丛 ,且分化率达到 50%以上.
1　材料与方法
1.1　材料:有斑百合的茎段 、叶片
1.2　诱导培养基
(1)MS+2.4-D 1.0 mg/L
(2)MS+2.4-D 1.0 mg/L+6 BA 0.5 mg/L
(3)MS+6 BA 1.0/L+IAA 0.5mg/L
1.3　生根培养基
(4)1/2 MS+6 BA 0.5 mg/L +IAA 1.0 mg/ L+NAA 0.1 mg/ L
以上各培养基均加入蔗糖 30 g/L 、琼脂粉 7 g/L .
1.4　操作方法
取有斑百合植株的叶片 ,用清水冲洗干净 ,在纱布上沥干水分.放入 70%的酒精中漂洗 30 s左右 ,
再放入0.1%的升汞中 ,浸 3 ～ 5 min消毒;最后用无菌水清洗四遍.把消毒后的叶用无菌滤纸吸干水分 ,
把材料切成 1.0 cm 左右的小片 ,分别植入三种诱导培养基内 ,整个过程为无菌操作.接种后将培养瓶置
第 20 卷　第 3 期
　2002年 7 月
沈阳师范学院学报(自然科学版) Vol.20 , No.3
Jul.2002　
于培养架上 ,温度为 22 ～ 26℃,光照为 1 000 ～ 1 500 lx ,每天光照 10 h.
2　结果与讨论
2.1　结果
接种在培养基上的茎段 2周后 ,1 、2号培养基上的茎段有淡黄色愈伤组织出现 ,外观质地疏松 ,4周
后2号培养基内愈伤组织上形成鳞茎丛.1 号培养基内愈伤组织也增加了.接种在 3号培养基上的叶
片 ,在 1周左右有卷曲 ,4周左右有丛生鳞茎形成.1号只有愈伤组织形成与生长 ,而没有鳞茎发生(见表
1).
表 1　三种培养基上外植体生长情况
培养基 外植体生长状况
形成的愈
组织的颜色
愈伤组
织的状态
愈伤组织的生长
及分化状况
1 号 外植体边缘的愈伤组织形成 黄白 致密 光滑 愈伤组织生长良好 , 无分化迹象 , 且诱导率为 100%。
2 号 外植体边缘有愈伤组织形成 黄色 质地疏松
生长近 4 周时 , 在愈伤组织上出现分
化 , 有幼小的鳞茎出现。 但诱导率较
低。(见表 2)。
3 号 外植体上无愈伤组织形成 , 一周左右外植体边缘卷曲形成幼小的鳞茎丛。
外植体上形成的鳞茎生长较好 , 外植
体的诱导率较高(见表 2)。
表 2　百合叶片外植体诱导率
培养基 接种总数(瓶)
污染
总数(瓶)
诱导出愈伤
组织的总数(瓶)
诱导率
(%)
诱导成鳞
茎的总数(瓶)
诱导率
(%)
1 30 4 26 100 0 0
2 30 6 24 100 8 30
3 30 4 0 0 15 58
　　将 2号 、3号培养基上诱导出的鳞茎移入(4)号生根培养基中 , 2周后 ,在鳞茎的下面生出不定根.当
不定根长到 2 cm以上 ,将幼苗取出 ,去掉培养基 ,练苗 2天 ,栽种于沙土与蛭石 1∶1混合成的基质内 ,每
一两天以清水喷浇 ,叶片由淡绿转为深绿色 ,并变厚 ,生长较好;将 1号培养基上形成的愈伤组织切成
1/3 ～ 1/4 cm 的小块 ,接种到 3号培养基上 ,20天后 ,愈伤组织增加 ,6周后 3号培养基内的愈伤组织外
表疏松 ,颗粒状 ,边缘出现淡绿色 ,再过两周 ,绿色处长出鳞茎丛 ,而 1号培养基的愈伤组织未见分化现
象出现.
将 2号培养基上形成的鳞茎接到 3号培养基中继代培养 ,2周后有不定根萌生 ,4 周后不定根长度
约 1/3 ～ 1/4 cm ,叶片 1 ～ 2片 ,长约 4 ～ 5 cm ,形成幼苗.
3　讨论
在对百合叶片组织培养中 ,外源激素的作用是非常明显的 ,外植体愈伤组织的形成及分化与外源激
·220· 沈阳师范学院学报(自然科学版) 2002 年
素的作用密不可分 ,其中尤以适当浓度配比的生长素和细胞分裂素的作用最为重要.
对比以上三种培养基上外植体的生长情况 ,2.4-D对外植体上愈伤组织的形成起重要作用 ,在 1 、
2号培养基上由于有 2.4-D的存在 ,所以在两种培养基上均形成了愈伤组织.尤其是 1号培养基内愈
伤组织生长旺盛 ,无分化现象发生.可见 2.4-D可抑制芽的分化.2号瓶内外植体的生长情况也证明了
这一点.2号培养基内除了 2.4-D 1.0 mg/L 以外 ,另外加入了 0.5mg/L 的 6 BA ,由于 6BA 的作用 ,部
分抵消了 2.4-D的抑制芽的作用 ,在培养基中诱导出鳞茎 ,但诱导率较低 ,而且诱导出的鳞茎生长较
弱 、较小.
3号培养基 MS+6BA 1.0/L+IAA 0.5 mg/L+蔗糖 30 g +琼脂粉 7 g 中 ,由于没有 2.4-D的存
在 ,而加入了适当配比的细胞分裂素与生长素 ,使得在外植体上直接诱导出幼小的鳞茎 ,诱导率较高.
综上所述 , MS+6 BA 1.0/1+IAA 0.5 mg/L+蔗糖 30 g+琼脂粉 7 g 这一培养基可使百合的叶片
细胞分化成鳞茎 ,诱导率较高;再经过诱导生根 ,形成幼苗.MS+6 BA 1.0/L +IAA 0.5 mg/L 这一培养
基的激素组合是诱导百合叶片生芽的较理想的培养基.这一结果对于利用百合工厂化育苗及快速繁殖
具有重要意义.本试验为百合科其它种及品种的组培研究积累了资料.而 2号培养基 ,在诱导过程中出
现了愈伤组织 ,虽然后来也在愈伤组织上形成了芽 ,但芽的分化率较低 ,所以这一培养基不适合用于有
斑百合的组培与快速繁殖.
参考文献:
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Tissues culture to the stem and leave of L .Concolor var.
MA Chun-yan
(College of Chemistr y and Li fe Science , Shenyang Norma l U niversity , Shenyang 110034 , Ch ina)
Abstract:With the stems and leaves of Lilium as material , this test induces recovery tissues and a patch of
bulb on the culture mediums of MS+2.4-D 1.0 mg/ L+6BA 0.5mg/L +sucrose 30 mg/L +a-
gar 7 g/L , induces recovery t issues only on the culture mediums of MS+2.4-D 1.0 mg/L +su-
crose 30mg/L +agar 7 g/L , and induces a patch of bulb on the culture mediums of MS+6 BA 1.0
mg/L +IAA 0.5 mg/L +sucrose 30 mg/L +agar7 g/L.Then the bulbs grow up to seedling s.
Move them to sandy soil when the seedling g row up to 5 cm , they grow up continuously.
Key words:Lilium Concolor var;recovery tissues;a patch of bulb;seedling
·221·第 3期 马纯艳:有斑百合叶片的组织培养