全 文 ：China Pharmacy 2015 Vol. 26 No. 3 中国药房 2015年第26卷第3期
南重楼Paris vietnamensis（Takht.）H.Li为百合科重楼属多
年生草本植物。我国共有约16种重楼属植物，其中，除北重楼
不作重楼药用外，其他种的根状茎在民间均作药用[1]。2010年
版《中国药典》（一部）收载重楼为百合科植物云南重楼 P.
polyphylla Smith var. yunnanensis（Franch）或七叶一枝花 P.
polyphylla Smith var. chinensis（Franch）Hara的干燥根茎[2]。《云
南天然药物图鉴》[3]、《云南植物志》[4]、《重楼属植物》[5]、《药用植
物辞典》[6]均收载了南重楼。其为云南习用药材，别称七枝莲、
独角莲[4]、七叶一枝花、重楼[7]等，性苦，微寒，有小毒，具有清热
解毒、消肿止痛、凉肝定惊的功效，可用于治疗疔疮痈肿、咽喉
肿痛、蛇虫咬伤、跌扑伤痛、惊风抽搐等症。
2010年版《中国药典》（一部）收载重楼的“含量测定”项采
用高效液相色谱（HPLC）法测定重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含
量。南重楼根状茎中含有多种甾体皂苷，包括重楼皂苷Ⅰ、
Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ及纤细薯蓣皂苷[8]。笔者前期的研究也表明，南重楼
根状茎中纤细薯蓣皂苷含量较高，重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量
较低。为此，本研究拟建立南重楼中纤细薯蓣皂苷的薄层色
谱（TLC）鉴别方法及含量测定方法，以期为南重楼药材的真伪
鉴别及质量控制提供参考依据。
1 材料
1.1 仪器
1100型HPLC仪，包括在线脱气、自动进样、光电二极管
阵列检测器、Chemistation色谱工作站（美国 Agilent公司）；
AG285型电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。
1.2 试剂
纤细薯蓣皂苷对照品由中国科学院昆明植物研究所制备
（批号：20100801，纯度：99.43％）；乙腈为色谱纯，水为超纯水，
其余试剂均为分析纯。
1.3 药材
南重楼药材样品均于2010年8月分别采自金平县余同厂
乡（批号：20101032、20101105，家种）、绿春县大兴镇（批号：
20100066、20100058、20100051，家种）、澜沧县竹塘乡（批号：
20100017、20100049，家种）、勐腊尚勇镇（批号：20100013、
20100078、20100088，家种），经中国科学院昆明植物研究所李
恒研究员鉴定均为百合科植物南重楼P. vietnamensis（Takht.）
H.Li。
2 方法与结果
2.1 TLC鉴别
取本品粉末0.5 g，加乙醇10 ml，水浴加热回流30 min，滤
过，取滤液作为供试品溶液。另取纤细薯蓣皂苷对照品适量，
加甲醇制成每 1 ml含 1 mg的溶液，作为对照品溶液。照TLC
Δ基金项目：云南省科技计划项目（No.2011CG012）
＊高级工程师，硕士。研究方向：天然药物研发。E-mail：peng-
lf428@126.com
# 通信作者：高级工程师，硕士。研究方向：天然药物研发。
E-mail：Ctao-10@163.com
南重楼中纤细薯蓣皂苷的鉴别及含量测定Δ
彭玲芳＊，张晓南，冯莉萍，崔 涛#（云南省药物研究所，昆明 650111）
中图分类号 R927.2 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2015）03-0384-03
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2015.03.30
摘 要 目的：建立南重楼药材中纤细薯蓣皂苷的定性鉴别及含量测定方法。方法：采用薄层色谱法定性鉴别南重楼药材中的纤
细薯蓣皂苷，并采用高效液相色谱法测定纤细薯蓣皂苷的含量。色谱柱为Waters XTerra RP18，流动相为乙腈-水（梯度洗脱），流速
为1.0 ml/min，检测波长为203 nm，柱温为30℃，进样量为10 μl。结果：纤细薯蓣皂苷的TLC斑点清晰、分离度好。纤细薯蓣皂苷
的进样量在0.22～11.10 μg范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系（r＝0.999 9）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜2％；平
均加样回收率为100.81％，RSD为1.83％（n＝3）。结论：本方法操作简便、结果准确、重复性好，可用于南重楼中纤细薯蓣皂苷的
定性鉴别及含量测定。
关键词 南重楼；纤细薯蓣皂苷；薄层色谱法；高效液相色谱法；鉴别；含量测定
Identification and Content Determination of Gracillin in Paris vietnamensis
PENG Ling-fang，ZHANG Xiao-nan，FENG Li-ping，CUI Tao（Yunnan Institute of Materia Medica，Kunming
650111，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To set up the method for TLC identification and content determination of gracillin in Paris vietnamen-
sis. METHODS：The gracillin in P. vietnamensis was identified qualitatively by using TLC；HPLC method was adopted to deter-
mine the content of gracillin. The determination was performed on Waters XTerra RP18 column with mobile phase consisted of aceto-
nitrile-water（gradient elution）at the flow rate of 1.0 ml/min. The detection wavelength was set at 203 nm，and the column temper-
ature was 30 ℃，the sample size was 10 μl. RESULTS：TLC spots of gracillin were clear and well-separated. The linear range of
gracillin was 0.22-11.10 μg（r＝0.999 9）with an average recovery of 100.81％（RSD＝1.83％，n＝3）. RSDs of precision，stability
and reproducibility tests were lower than 2％. CONCLUSIONS：The method is simple，accurate and reproducible，and can be used
for the qualitative identification and content determination of P. vietnamensis.
KEYWORDS Paris vietnamensis；Gracillin；TLC；HPLC；Identification；Content determination
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中国药房 2015年第26卷第3期 China Pharmacy 2015 Vol. 26 No. 3
法[2010年版《中国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取上述两种
溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-
水（15 ∶ 5 ∶ 1，V/V/V）的下层溶液[9]为展开剂展开，取出，晾干，喷
以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰。结果，
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的
斑点。TLC图见图1。
2.2 含量测定
2.2.1 对照品溶液的制备 取纤细薯蓣皂苷对照品适量，精
密称定，加甲醇制成每 1 ml含 0.4 mg的溶液，作为对照品
溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 取样品粉末（过3号筛）约0.5 g，精
密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25 ml，称定质量，水浴
加热回流 30 min，放冷，再次精密称定，用乙醇补足减失的质
量，摇匀，经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2.2.3 色谱条件及系统适用性试验 色谱柱：Waters XTerra
RP18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-水（B），梯度洗
脱（0～30 min，35％→75％A）；流速：1.0 ml/min；检测波长：
203 nm；柱温：30℃；进样量：10 μl。在上述色谱条件下，纤细
薯蓣皂苷对照品的保留时间约为 16.7 min，分离度＞1.5；理论
板数按纤细薯蓣皂苷色谱峰计不低于5 000。色谱见图2。
2.2.4 线性关系考察 精密称取纤细薯蓣皂苷对照品适量，
按“2.2.1”项下方法制成质量浓度分别为 0.044、0.111、0.444、
1.110、1.554、2.220 mg/ml的系列对照品溶液。分别精密吸取
上述系列对照品溶液各 10 μl，按“2.2.3”项下色谱条件进样测
定，记录峰面积。以峰面积（y）为纵坐标、进样量（x，μg）为横坐
标，绘制标准曲线，得回归方程为 y＝369.49x－5.272 5（r＝
0.999 9）。结果表明，纤细薯蓣皂苷的进样量在0.44～22.20 μg
范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系。
2.2.5 精密度试验 精密吸取“2.2.1”项下对照品溶液 10 μl，
按“2.2.3”项下色谱条件连续进样 6次，记录峰面积。结果
RSD＝0.63％，表明仪器精密度良好。
2.2.6 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 10 μl，分别于
0、2、4、8、16、24 h时，按“2.2.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面
积。结果RSD＝1.30％，表明供试品溶液在24 h内基本稳定。
2.2.7 重复性试验 取同一批样品（批号：20100088）共 6份，
按“2.2.2”项下方法平行制备6份供试品溶液，再按“2.2.3”项下
色谱条件进样测定，记录峰面积，计算样品含量。结果，纤细薯
蓣皂苷的含量为1.16％，RSD＝1.10％，表明本法重复性良好。
2.2.8 加样回收率试验 取已知质量分数（1.16％）的同一批
样品（批号：20100088）约 0.25 g，按“2.2.2”项下方法制备供试
品溶液，再分别精密加入“2.2.1”项下对照品溶液（质量浓度为
1.11 mg/ml）1.7、3.5、5.0 ml，各3份，自然挥干甲醇后进样测定，
记录峰面积，并计算加样回收率，结果见表1。
表1 加样回收率试验结果（n＝3）
Tab 1 Results of recovery tests（n＝3）
称样量，mg
254.2
249.5
251.3
241.3
249.5
257.4
254.5
247.3
252.4
已知含量，mg
2.959
2.904
2.925
2.809
2.904
2.965
2.962
2.879
2.938
加入量，mg
1.887
1.887
1.887
3.885
3.885
3.885
5.550
5.550
5.550
测得量，mg
4.87
4.81
4.86
6.60
6.89
6.98
8.54
8.32
8.56
加样回收率，％
101.53
100.77
102.55
97.67
102.51
103.27
100.55
98.00
101.24
平均加样回收率，％
100.81
RSD，％
1.83
2.2.9 样品含量测定 取批号为20101032、20101105、20100066、
20100058、20100051、20100017、20100078、20100088、20100013、
20100049的样品各适量，分别按“2.2.2”项下方法制备供试品
溶液，按“2.2.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，计算样
品中纤细薯蓣皂苷的质量分数。结果，样品中纤细薯蓣皂苷的
质量分数分别为 1.609％、1.013％、2.045％、1.363％、1.528％、
1.544％、1.085％、1.169％、1.209％、0.836％。
3 讨论
按 2010年版《中国药典》（一部）中重楼的含量测定方法，
选用不同比例的乙腈-水流动相系统进行考察。结果表明，采
用上述流动相时纤细薯蓣皂苷不能达到有效的分离，因此笔
者对乙腈-水的流动相系统进行了优化，最终选择了本研究的
梯度洗脱条件，使纤细薯蓣皂苷达到了有效分离。
笔者还考察了不同的提取溶剂（稀乙醇、乙醇、甲醇或
50％甲醇）、提取方式（加热回流、超声）及提取时间（30、50
min）对样品溶出结果的影响。结果表明，提取溶剂为乙醇、提
取方式为水浴加热回流、提取时间为 30 min时可达到较好的
提取效果，且纤细薯蓣皂苷在第1次加热回流提取时就已基本
提取完全。
综上所述，本方法操作简单、结果准确、重复性好，可用于
南重楼中纤细薯蓣皂苷的定性鉴别及含量测定方法。
图1 薄层色谱图
1.纤细薯蓣皂苷；2～5.供试品（批号：20100088）
Fig 1 TLC chromatograms
1. gracillin；2-5. test samples（lot No. 20100088）
80
60
40
20
0
mA
U
0 5 10 15 20
t，min
A
1
80
60
40
20
0
mA
U
0 5 10 15 20
t，min
B
1
图2 高效液相色谱图
A.对照品；B.供试品；1.纤细薯蓣皂苷
Fig 2 HPLC chromatograms
A.substance control；B.test samples；1.gracillin
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China Pharmacy 2015 Vol. 26 No. 3 中国药房 2015年第26卷第3期
参考文献
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明：云南科技出版社，2007：298.
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北京：科学出版社，1997：654.
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质的分离与鉴定[J].药学学报，2006，41（4）：361.
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药房，2008，19（12）：924.
（收稿日期：2013-12-27 修回日期：2014-03-06）
（编辑：孙 冰）
Δ基金项目：上海市中医药标准化研究项目（No. ZYSNXD-CC-
BZH）
＊研究员，硕士。研究方向：中药质量标准。电话：0512-
58451790。E-mail ：573960078@qq.com
郁李仁配方颗粒的质量标准研究Δ
晏小云＊（江阴天江药业有限公司，江苏江阴 214434）
中图分类号 R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2015）03-0386-03
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2015.03.31
摘 要 目的：建立郁李仁配方颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱（TLC）法对郁李仁配方颗粒中的苦杏仁苷进行定性分析，
采用高效液相色谱（HPLC）法测定制剂中苦杏仁苷的含量。色谱柱为GP-Phenyl，流动相为乙腈-水（10 ∶ 90，V/V），流速为 0.8 ml/
min，检测波长为210 nm，柱温为30℃，进样量为5 μl。结果：苦杏仁苷的TLC图斑点清晰、分离较好，阴性对照无干扰。苦杏仁苷
质量浓度在50.92～611.04 μg/ml范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系（r＝0.999 8）；精密度试验的RSD＜2％，稳定性、重复
性试验的RSD＜3％；平均加样回收率为101.07％，RSD为0.64％（n＝6）。结论：该方法操作简单、灵敏、专属性强、重复性好，可作
为郁李仁配方颗粒的质量控制方法。
关键词 郁李仁配方颗粒；薄层色谱法；高效液相色谱法；苦杏仁苷；质量标准
Quality Standard of Pruni Semen Formula Granules
YAN Xiao-yun（Jiangyin Tianjiang Pharmaceutical Co.，Ltd.，Jiangsu Jiangyin 214434，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the quality standard of Pruni Semen formula granules. METHODS：Pruni Semen formula
granules were identified by TLC. The content of amygdalin was determined by HPLC. The determination was performed on GP-Phe-
nyl column with mobile phase consisted of acetonitrile-water（10 ∶ 90，V/V）at the flow rate of 0.8 ml/min. The detection wavelength
was set at 210 nm，and column temperature was 30 ℃.The sample size was 5 μl. RESULTS：TLC spots of amygdalin were clear
and well-separated without interference from negative control. The linear range of amygdalin was 50.92-611.04 μg/ml（r＝0.999 8）
with an average recovery of 101.07％（RSD＝0.64％，n＝6）. RSD of precision test was lower than 2％，and RSDs of stability and
reproducibility tests were lower than 3％ . CONCLUSIONS：The method is simple，sensitive，specific and reproducible，and can
be used for the quality control for Semen pruni formula granules．
KEYWORDS Pruni Semen formula granules；TLC；HPLC；Amygdalin；Quality standard
􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙
郁李仁为蔷薇科植物欧李Prunus humilis Bge.、郁李P. ja-
ponica Thunb.或长柄扁桃P. pedunculata Maxim.的干燥成熟种
子，具有润燥滑肠、下气、利水之功效[1]。郁李仁中含有的苦杏
仁苷为其主要药效成分，是临床常用的祛疲止咳剂和辅助性
抗癌药物[2-4]。为有效控制郁李仁配方颗粒的质量，笔者参考
原国家食品药品监督管理局《中药配方颗粒管理暂行规定》的
相关要求，采用高效液相色谱（HPLC）法对郁李仁配方颗粒的
质量标准进行了研究。
1 材料
1.1 仪器
1260型HPLC仪（美国Agilent公司）；REPROSTAR 3型薄
层自动成像仪（瑞士CAMAG公司）；BS110S型万分之一天平
（德国赛多利斯公司）；十万分之一电子天平（瑞士梅特勒-托利
多公司）；KQ-250B型超声清洗器（昆山市超声仪器有限公
司）；硅胶G薄层板（20 cm×10 cm，青岛海洋化工厂）。
1.2 药品与试剂
郁李仁配方颗粒（江阴天江药业有限公司，批号：1210008、
1207085、1202037、1110100、1107095、1101086、1009031、
1003112、0907216）；苦杏仁苷对照品（中国食品药品检定研
究院，批号：1108020-201305，纯度＞98％）；其余试剂均为分
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