全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 12 期 2012 年 12 月

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HPLC 法测定不同产地重楼属植物中 7 种甾体皂苷成分
付绍智 1，李 楠 2, 3，刘 振 2，高文远 2, 3*，满淑丽 4
1. 重庆三峡医药高等专科学校，重庆 404120
2. 天津大学药物科学与技术学院，天津 300072
3. 天津中医药大学中药学院，天津 300193
4. 天津科技大学 工业发酵微生物教育部重点实验室，天津 300457
摘 要：目的 研究不同产地重楼属植物主要活性成分甾体皂苷量的差异性，为探讨品种及产地对重楼属植物活性成分的影
响提供参考依据。方法 采用 HPLC 法测定不同产地的重楼属 6 种药材中偏诺皂苷-3-O-α-L-Rha (1→2) [α-L-Rha
(1→4)]-β-D-Glc（PGRR），重楼皂苷 I、II、VI、VII、H 及纤细薯蓣皂苷的量。结果 不同重楼属植物中的皂苷种类及其量
存在较大差异，滇重楼、巴山重楼以及长药隔重楼的皂苷种类及其量较多；同一品种不同产地的重楼药材，其皂苷的种类及
其量亦不同，湖北恩施的金线重楼较重庆巫溪产的皂苷量高，贵州安顺的长药隔重楼皂苷量明显高于湖北来凤产。结论 重
楼属植物的品种及产地对其活性成分的量及类型有很大的影响。
关键词：重楼属；甾体皂苷；重楼皂苷；纤细薯蓣皂苷；HPLC
中图分类号：R286.022 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)12 - 2435 - 03
Determination of seven kinds of steroidal saponins in plants of Paris L.
from different habitats by HPLC
FU Shao-zhi1, LI Nan2, 3, LIU Zhen2, GAO Wen-yuan2, 3, MAN Shu-li4
1. Chongqing Three Gorges Medical College, Chongqing 404120, China
2. School of Pharmaceutical Science and Technology, Tianjin University, Tianjin 300072, China
3. School of Chinese Materia Medica, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China
4. Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China
Key words: Paris L.; steroidal saponins; polyphyllin; gracillin; HPLC

重楼属 Paris L. 为广义百合科植物，其根茎入
药，具有清热解毒、消肿止痛和凉肝定惊的功效，
主要用于抗肿瘤、止血、免疫调节、镇静镇痛等。
全世界有 24 种，中国有 19 种，主要分布于云南、四
川、广西等地，其中滇重楼 Paris polyphylla Smith var.
yunnanensis (Franch.) Hand.-Mazz. 和七叶一枝花 P.
polyphylla Smith var. chinensis (Franch.) Hara 这 2 个
变种被《中国药典》2010 年版收录[1-3]，但其他种
类的重楼属植物亦在民间通用。目前由于医药工业
生产对重楼需求量的不断增加，使得野生重楼越来
越少，资源日渐枯竭。因此，本研究以重楼的活性
成分甾体皂苷的量为指标，对不同产地、不同种的
重楼属植物进行定量分析，为评价产地及品种对重
楼药材的影响提供依据。
1 材料与仪器
1.1 材料
重楼属植物购于安国药材市场或直接从产地收
集，经天津大学高文远教授鉴定，详细信息见表 1。
表 1 样品信息
Table 1 Sample information
编号 种名 拉丁名 产地
1 滇重楼 P. polyphylla var. yunnanensis 云南丽江
2 金线重楼 重庆巫溪
3 金线重楼
P. delavayi var. delavayi
湖北恩施
4 球药隔重楼 P. fargesii var. fargesii 重庆奉节
5 巴山重楼 P. bashanensis 重庆城口
6 小重楼 P. polyphylla var. minora 重庆开县
7 长药隔重楼 湖北来凤
8 长药隔重楼
P. polyphylla var. pseudothibetica
贵州安顺

收稿日期：2012-02-17
基金项目：国家自然科学基金资助项目（30873378）
作者简介：付绍智（1965—），男，重庆云阳人，研究方向为中药资源与中药材规范种植。E-mail: fushaozhi@sina.com
*通讯作者 高文远 Tel: (022)87401895 E-mail: pharmgao@tju.edu.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 12 期 2012 年 12 月

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对照品重楼皂苷 I、II、VI 和 VII 均购自中国药品生
物制品检定所，纤细薯蓣皂苷购自天津一方科技有
限公司。重楼皂苷H及偏诺皂苷-3-O-α-L-Rha (1→2)
[α-L-Rha (1→4)]-β-D-Glc（PGRR）由本实验室提取
分离得到，经液相分析，质量分数≥90%。
1.2 仪器
Agilent1100 液相色谱仪，G1311A 四元泵，
G1322A，G1314AVWD 检测器，HPRev.A.0501 化学
工作站；Sartorius BS210S 型电子天平，北京赛多利
斯仪器系统有限公司；Sartorius CP225D 型电子天
平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；乙腈（色谱
纯）、甲醇（色谱纯）购自天津康科德科技有限公司；
水为娃哈哈纯净水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Agilent1100 液相色谱仪，色谱柱为 HiQ-C18
柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-
水（B），梯度洗脱（0～10 min，20%～30% A；
10～20 min，30%～40% A；20～35 min，40%～
50% A；35～45 min，50%～60% A；45～55 min，
60%～80% A；55～60 min，80%～90% A；60～
70 min，90%～100% A）；柱温 30 ℃；体积流量
1.0 mL/min；检测波长 210 nm；进样量 20 μL。色
谱图见图 1。

1-重楼皂苷 VII 2-PGRR 3-重楼皂苷 H 4-重楼皂苷 VI 5-重
楼皂苷 II 6-纤细薯蓣皂苷 7-重楼皂苷 I
1-polyphyllin VII 2-polyphyllin II 3-polyphyllin H 4-polyphyllin VI
5-polyphyllin II 6-gracillin 7-polyphyllin I
图 1 对照品 (A) 和滇重楼药材 (B) HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of P. polyphylla var.
yunnanensis (A) and reference substances (B)
2.2 对照品溶液的制备
分别精密称取恒定质量的对照品适量，加甲醇
溶液分别制成一定质量浓度的对照品溶液，重楼皂
苷 VII、I、II、VI、H 质量浓度分别为 0.240、1.190、
0.300、0.730、0.650 mg/mL、PGRR 质量浓度为 0.640
mg/mL，纤细薯蓣皂苷质量浓度为 0.460 mg/mL。
另各取上述对照品溶液 1 mL配成混合对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
将重楼药材粉碎，过 40 目筛，精密称取 10 g，置
圆底烧瓶中，加入70%乙醇40 mL，水浴回流2 h，滤
过，取滤液，重复3 次。合并滤液，蒸去乙醇后干燥，
得粉末。将粉末溶于250 mL 甲醇，过微孔滤膜，即得。
2.4 线性关系考察
取混合对照品溶液 5、15、20、25 μL，另取稀
释 10 倍的混合对照品溶液 5、10 μL 按上述色谱条
件进样，以进样量为横坐标（X），峰面积为纵坐标
（Y），进行线性回归，重楼皂苷 VII，PGRR，重楼
皂苷 II、 H、VI、I 和纤细薯蓣皂苷的线性回归方
程分别为 Y＝89.524 X＋10.227，r＝0.999 2；Y＝
223.49 X＋42.463，r＝0.999 7；Y＝78.235 X＋
17.376，r＝0.999 1；Y＝77.001 X＋44.325，r＝0.999 1；
Y＝32.639 X＋14.728，r＝0.999 7；Y＝48.594 X＋
38.417，r＝0.999 5；Y＝207.42 X＋72.006，r＝0.999 1。
2.5 精密度试验
取滇重楼供试品溶液，连续进样 6 次，记录峰
面积，计算重楼皂苷 VII，PGRR，重楼皂苷 II、H、
I 和纤细薯蓣皂苷峰面积的 RSD 值分别为 1.37%、
1.17%、3.31%、1.25%、1.13%和 2.15%。
2.6 稳定性试验
取滇重楼供试品溶液，分别在 0、1、2、4、8、
12、24、36、48 h 进样测定，记录峰面积，计算重
楼皂苷 VII，PGRR，重楼皂苷 II、H、I 和纤细薯蓣
皂苷峰面积的 RSD 值分别为 1.21%、1.49%、2.71%、
1.05%、1.35%和 1.76%。结果表明其在 48 h 内稳定。
2.7 重复性试验
取滇重楼样品 6 份，制备供试品溶液，按照上述
色谱条件测定重楼皂苷VII，PGRR，重楼皂苷 II、H、
I 和纤细薯蓣皂苷的峰面积，计算其质量分数的 RSD
值分别为1.29%、1.33%、3.01%、1.15%、1.24%和1.95%。
2.8 样品测定
取各批次重楼属植物样品，按照“2.3”项下制备
供试品溶液，按照“2.1”项条件测定重楼皂苷VII、II、
H、VI、I，PGRR 和纤细薯蓣皂苷的量。结果见表 2。



42 44 46 48 50 52 54
42 44 46 48 50 52 54
1
2
3
4
5
76
1 2
3
5
6
7
A
B
t / min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 12 期 2012 年 12 月

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表 2 不同产地不同品种重楼属植物中甾体皂苷的量
Table 2 Determination of steroidal saponins in plants of Paris L. from different habitats
质量分数 / (mg·g−1) 样品编号
重楼皂苷 VII PGRR 重楼皂苷 H 重楼皂苷 II 重楼皂苷 VI 重楼皂苷 I 纤细薯蓣皂苷
1 24.235 9.376 3.801 29.068 0.000 95.609 1.527
2 4.730 0.000 0.270 0.000 0.000 0.000 0.000
3 11.892 5.215 1.187 0.000 0.000 0.000 0.000
4 49.005 4.661 8.733 1.730 192.670 0.000 0.000
5 2.973 1.048 0.219 3.770 0.000 73.976 4.772
6 17.450 12.211 2.811 0.000 0.000 0.000 0.000
7 18.469 7.060 3.505 0.000 0.000 23.919 0.000
8 35.531 8.145 1.867 30.041 0.000 183.560 0.026

3 讨论
从表 2 可以看出，重楼属植物中重楼皂苷 VII
和重楼皂苷 H 在这 6 种植物中均含有，PGRR 除重
庆巫溪产地的金线重楼未检测到外，其他几种均含
有，而重楼皂苷 II 在金线重楼、小重楼及长药隔重
楼（湖北来凤）中未检测到，重楼皂苷 VI 仅在球
药隔重楼（奉节）中检测到，重楼皂苷 I 在金线重
楼、小重楼、球药隔重楼中未被检测到，纤细薯蓣
皂苷则只在滇重楼、巴山重楼及长药隔重楼（安顺）
中检测到。这说明不同种的重楼属植物在皂苷种类
上存在很大差别。
重楼属不同种植物的皂苷量上也存在很大的差
异。奉节产地的球药隔重楼中重楼皂苷 VII 的量最
高，其次为贵州安顺产的长药隔重楼，最低的为重
庆城口产的巴山重楼；重楼皂苷 H 分布和重楼皂苷
VII 类似，以奉节产地的球药隔重楼最高，城口的
巴山重楼的量最低。
不同产地的同种重楼属植物皂苷量及种类亦
不相同。重庆巫溪产地的金线重楼与湖北恩施产
地的金线重楼皂苷种类相同，皂苷种类较少，且
量均较低，但湖北恩施产地的重楼皂苷量高于重
庆巫溪的；湖北来凤及安顺的长药隔重楼在皂苷
种类及量上均存在很大差别，安顺产地的长药隔
重楼含有较高的重楼皂苷 II 及微量的纤细薯蓣皂
苷，并且其含有的重楼皂苷 I 及重楼皂苷 VII 明
显高于湖北来凤的长药隔重楼。
重楼皂苷作为重楼属植物的药效成分，其种类
及量不同活性亦不同[4-5]，以上结果表明不同种重楼
药材中皂苷量种类差异很大，但药效活性的差异性
需要进一步研究。从产地上来说，环境对其影响也
很大，如果扩大重楼资源对其进行栽培种植，需要
选择合适的地域。
参考文献
[1] 中国药典 [S]. 一部. 2010.
[2] 黄贤校, 高文远, 满淑丽, 等. 重楼属药用植物皂苷类
化学成分及其生源途径的研究进展 [J]. 中草药, 2009,
40(3): 483-489.
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[4] Man S L, Gao W Y, Zhang Y J, et al. Antitumor and anti-
metastatic activities of Rhizoma Paridis saponins [J].
Steroids, 2009, 74(13/14): 1051-1056.
[5] Man S L, Gao W Y, Zhang Y J, et al. Qualitative and
quantitative determination of major saponins in Paris and
Trillium by HPLC-ELSD and HPLC-MS/MS [J]. J
Chromatogr B, 2010, 878(29): 2943-2948.