全 文 ：北方园艺 2010(4):135 ～ 137 ·生物技术 ·
第一作者简介:李玲玲(1983-),女 ,在读硕士, 现从事百合种质资
源与遗传育种研究。 E-mail:LLL200023@163.com。
通讯作者:雷家军(1966-),男,教授,博士生导师 ,现从事观赏植物
遗传育种研究工作。 E-mail:jiajunlei@yahoo.com.cn。
基金项目:辽宁省教育厅基金资助项目(202053092)。
收稿日期:2009-10-20
有斑百合鳞片离体培养研究
李 玲玲 , 雷家军
(沈阳农业大学园艺学院,辽宁沈阳 11016)
　　摘　要:以有斑百合鳞片为外植体 ,研究不同激素配比对不定芽诱导 、增殖 、生根的影响及不
同基质对试管苗移栽成活的影响。结果表明:鳞片诱导不定芽的最佳培养基为 MS+BA 0.5
mg/ L+NAA 0.5 mg/L ,诱导率达 80.0%;最佳继代培养基为 MS+BA 1.0 mg/L +NAA 0.1
mg/ L ,增殖系数达2.83;最佳生根培养基为MS+IBA 0.5 mg/L ,生根率达 100.0%;试管苗最适
扦插基质为珍珠岩 ,扦插成活率达96.7%。
关键词:有斑百合;鳞片;离体培养
中图分类号:S 682.2　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2010)04-0135-03
　　有斑百合(Li lium concolor var.buschianum)为百合
科百合属多年生草本植物[ 1] ,其花色鲜艳 ,抗寒 、抗旱 、抗
病、抗盐碱能力均较强 ,具有较高的观赏 、药用及食用价
值 ,是百合新品种培育的重要亲本之一。有斑百合在野
生状态下繁殖系数较低 ,且由于人为原因 ,该种野生群
体的分布和数量都大大减少。目前还未见有关有斑百
合鳞片离体培养的报道。为了有效保存和利用这一野
生资源 ,现以有斑百合鳞片为外植体 ,研究不同激素配
比对不定芽诱导 、增殖 、生根的影响及不同基质对试管
苗扦插成活的影响 ,旨在建立有斑百合鳞片有效的离体
培养快繁体系 ,为种质资源保存及利用奠定基础。
1　材料与方法
1.1　试验材料
试材于 2008年 5月采自辽宁省抚顺市清原县南口
前镇 ,编号为 BH154 ,栽植保存于沈阳农业大学花卉试
验基地。试验于2008年8月～ 2009年 6月在沈阳农业
大学进行。
1.2　试验方法
1.2.1　初代培养　取有斑百合发育良好 、无病虫害的种
球 ,剥开鳞片 ,用自来水洗去表面泥土和污渍 ,再用洗衣
粉浸泡 15 min ,在自来水下流水冲洗 30 min ,然后在超
净工作台上用 70%酒精消毒 30 s ,再放入 0.1%的升汞
溶液浸泡 12 min ,无菌水冲洗4 ～ 6次后接种。以MS为
基本培养基配制不同激素组合的培养基 ,蔗糖浓度 3%,
琼脂 6 g/L ,pH 5.8 ,培养温度24℃,光照时间12 h/d ,光
照强度 1 500 ～ 2 000 lx 。鳞片接种在 5种不同的初代培
养基上:MS;MS +BA 0.5 mg/ L +NAA 0.5 mg/L;
MS+BA 0.5 mg/L+NAA 1 mg/ L;MS+BA 1 mg/ L+
NAA 0.5 g/L;MS+BA 1 mg/L+NAA 1 mg/L ,30 d后
调查诱导和生长情况。
1.2.2　继代培养　将初代诱导苗转接于6种继代培养
基中:MS+BA 0.1 mg/L +NAA 0.1 mg/L;MS+BA
0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L;MS+BA 1.0 mg/ L+NAA
0.1 mg/L;MS+BA 1.0 mg/ L+NAA 0.5 mg/L;MS+
BA 2.0 mg/ L+NAA 0.1 mg/L;MS+BA 2.0 mg/L+
NAA 0.5 mg/L ,30 d后调查增殖和生长情况。
1.2.3　生根培养　将未生根的试管苗转到 4种不同激
素配比的培养基上:MS+IBA 0.1 mg/L;MS+IBA 0.5
mg/L;MS+BA 0.1 mg/L +IBA 0.5 mg/ L;MS+BA
0.1 mg/L+IBA 1.0 mg/L ,30 d调查生根情况。
1.2.4　试管苗的移栽　选择苗高 3 ～ 5 cm的试管苗练
苗 4 ～ 5 d ,将其扦插于河沙 、珍珠岩 、草炭+蛭石(1∶1)
的 3种基质中 ,30 d后调查生根情况。
2　结果与分析
2.1　有斑百合鳞片不定芽的诱导
经过观察 ,有斑百合鳞片接种10 d后开始由白色转
为绿色或紫红色 ,15 d后鳞片表面产生白色或淡绿色突
起 ,且鳞片基部产生的突起最多 , 20 d后这些突起相继
长出带叶的不定芽(图 1 ,A)。
由表 1可以看出 ,5种培养基上均可诱导有斑百合
鳞片产生不定芽 ,但不同激素组合对鳞片诱导不定芽有
较明显的影响 ,其中培养基 MS+BA 0.5 mg/ L+NAA
0.5 mg/L最适于有斑百合鳞片诱导不定芽 ,诱导率可
达 80.0%;其次是 MS+BA 0.5 mg/L+NAA 1 mg/L ,
诱导率也可达75.0%;不添加任何激素的 MS 培养基上
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的不定芽诱导率最低 ,且芽苗长势最弱。因此有斑百合
鳞片诱导最适培养基是 MS +BA 0.5 mg/L +NAA
0.5 mg/L。
　　表 1　不同激素组合对有斑百合鳞片诱导不定
芽的影响
激素浓度/ mg ·L-1
BA NAA
接种
鳞片数
诱导不定芽
鳞片数
诱导率
/ %
芽苗生长
状况
0.0 0.0 60 32 53.3 +
0.5 0.5 60 48 80.0 ++++
0.5 1.0 60 45 75.0 +++
1.0 0.5 60 38 63.3 +++
1.0 1.0 60 38 63.3 +++
　　注:“+”代表生长状况一般 ,“ ++”代表良好 ,“ +++”代表很好。下表同。
2.2　有斑百合鳞片诱导不定芽的增殖扩繁
试验观察到有斑百合鳞片诱导的不定芽在 6种培
养基上的增殖系数均在 2.00 以上 , 其中 MS +BA
1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L 上增殖系数最高 ,可达
2.83 ,且苗长势良好 、整齐(表 2;图 1B);MS +BA 0.5
mg/L+NAA 0.5 mg/L上增殖系数也较高 ,为 2.75。随
着 BA浓度的升高 ,增殖系数逐渐降低 ,说明高浓度 BA
对有斑百合不定芽增殖有一定抑制作用 ,BA浓度低于
0.5 mg/ L时其增殖系数也较低。因此有斑百合不定芽增
殖的最适培养基是MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/ L
或 MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/ L。
图1　有斑百合鳞片诱导不定芽(A)及不定芽增殖培养(B)
　　表 2　不同激素组合对有斑百合不定芽增殖的影响
激素浓度/ mg ·L-1
BA NAA
接种
苗数
增殖
苗数
增殖
系数
植株
生长状况
0.1 0.1 60 120 2.00 ++
0.5 0.5 60 165 2.75 +++
1.0 0.1 60 170 2.83 ++++
1.0 0.5 60 149 2.48 +++
2.0 0.1 60 130 2.17 ++
2.0 0.5 60 121 2.02 ++
2.3　有斑百合鳞片诱导试管苗的生根培养
有斑百合试管苗转接到生根培养基上 ,7 d后根原
基开始萌动 ,20 d后长出大量根。如表3所示 ,只加 IBA
的培养基上的生根率均较高 ,其中 MS+IBA 0.5 mg/ L
上生根率最高 ,可达 100.0%,且苗长势健壮。MS+IBA
0.1 mg/L生根率也可达93.3%,但苗长势细弱 ,而加入
少量 BA的培养基上生根率均较低 ,生根数量也较少 ,根
粗且短 ,有木质化现象。因此选用 MS+IBA 0.5 mg/ L
作为有斑百合的最适生根培养基。
　　表 3 不同生根培养基对有斑百合试管苗生根的影响
激素浓度/ mg·L-1
BA IBA
接种苗数 生根苗数 生根率/ %
平均根长
/cm
平均根粗
/ mm 植株生长状况
0 0.1 60 56 93.3 1.12 0.614 ++
0 0.5 60 60 100.0 1.28 0.663 +++
0.1 0.5 60 25 41.7 0.31 0.686 +++
0.1 1.0 60 33 55.0 0.70 0.752 +++
2.4　有斑百合鳞片诱导试管苗的移栽
从表 4可看出 ,3种基质上的有斑百合试管苗扦插
均能成活 ,但成活率不同。其中移栽至基质珍珠岩上的
试管苗扦插成活率最高 ,可达 96.7%,其苗长势健壮 ,根
系发达;草炭∶蛭石(1∶1)扦插成活率较低 ,为80.0%。
　　表 4　不同基质对有斑百合试管苗移栽成活的影响
移栽基质 移栽苗数 成活苗数 成活率/ % 植株生长状况
珍珠岩 60 58 96.7 ++++
河沙 60 51 85.0 ++
草炭∶蛭石(1∶1) 60 48 80.0 +++
3　结论与讨论
有斑百合鳞片进行离体培养可以在短期内获得大
量试管苗 ,能解决野生百合栽培中种源较少的问题。一
般认为 MS 培养基较适于百合离体培养 ,添加外源激素
以 BA和NAA配合为佳[ 2-3] 。培养基中外源激素种类、
配比对百合不定芽诱导和增殖影响较大 ,可以通过调整
培养基中的外源激素 ,使百合鳞片不定芽诱导率和增殖
系数达到最高。在百合增殖培养中 ,一般使用细胞分裂
素浓度高于生长素浓度的配比 ,但过高浓度的细胞分裂
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素容易使芽的增殖能力降低 ,而且也使其遗传性难以稳
定。试验以 BA和 NAA不同浓度配比对有斑百合鳞片
进行不定芽诱导 ,发现 BA 浓度在 0.5 mg/L 左右时有
利于有斑百合不定芽的诱导。试验中选用的 4种生根
培养基 ,只加入 IBA的试管苗生根效果均良好 ,这与马
永红[ 4] 研究的野生山丹生根结果相同 ,而加入 BA的试
管苗生根效果较差 ,说明 BA对有斑百合试管苗生根有
一定抑制作用。试管苗移栽中发现珍珠岩最适合有斑
百合试管苗的扦插成活 ,这与袁芳亭[ 5] 研究麝香百合试
管苗扦插生根结果一致。这可能因为珍珠岩具有排水 、
透气等作用 ,有利于有斑百合试管苗的生根和成活。
参考文献
[ 1] 　中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第 14卷)[ M] .北
京:科学出版社, 1980:133.
[ 2] 　Panizza M , Sodi A M , Tognoni F.Effect of various factors on in vit ro
propagation of Lilium speciosum Thunb and Lilium longi f lorum Thunb[ J] .
Adv Hort Sci ,1990 ,4(2):103-106.
[ 3] 　孙君社,方晓华.植物激素对百合鳞片愈伤组织生长的影响[ J] .中
国农业大学学报, 2001, 6(2):58-61.
[ 4] 　马永红.野生山丹组培快繁的研究[ J] .园林科技, 2007(1):11-14.
[ 5] 　袁芳亭,陈龙清.麝香百合的叶片离体培养及植株再生[ J] .湖北农业
科学, 2001(3):50-51.
Study on Bulb Scale Culture in vitro of Liliumconcolor var.buschianum
LI Ling-ling , LEI Jia-jun
(College of Horticulture , Shenyang Ag ricultural University , Shenyang , Liaoning 110161)
Abstract:The bulb scales of Liliumconcolor var.buschianum were used as explants to study the effects of dif ferent hor-
mone combination on adventitious buds induction , proliferation and rooting.And the effect of different media on cutting
survival of tube plantlets was investigated.The results showed that the appropriate medium for the adventitious buds in-
duction was MS+BA 0.5 mg/ L+NAA 0.5 mg/ L with the induction rate of 80.0%.The suitable subculture medium
was MS+BA 1.0 mg/ L+NAA 0.1 mg/L with the multiplication coefficient of 2.83.The appropriate medium for roo-
ting w as MS+IBA 0.5 mg/L with the rooting rate of 100.0%.The proper medium for cut ting of tube plantlets was
perlite wi th the survival rate of 96.7%.An effective system of regeneration and multiplication of bulb scales of Lilium
concolor var.buschianum was established.
Keywords:Lilium concolor var.buschianum;bulb scale;culture in vit ro
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