全 文 ：收稿日期：2010-07-16
基金项目：乐山市科技重点研究计划（项目编号：09N2D034）
作者简介：刘芳（1978-），女，乐山师范学院化学与生命科学院讲师，硕士。
乐山师范学院学报
Journal of Leshan Teachers College
第 25卷 第 12期
2010年 12月
Vol．25,No．12
Dec．2010
红托竹荪母种培养基配方的筛选试验
刘 芳， 陈 娇， 吴三林， 李仲芳
（乐山师范学院 化学与生命科学学院，四川 乐山 614004）
摘 要：利用不同原料配制红托竹荪的培养基，并接种红托竹荪母种进行培养，通过对菌丝稠密及菌丝整齐度、菌丝萌
发所需时间、封面时间、菌丝平均满管时间、菌丝长势、菌丝生长速度以及红托竹荪可溶性糖和可溶性蛋白等指标的记录及
测定，来研究不同母种培养基配方对红托竹荪生长状况的影响，从而筛选出最适宜红托竹荪母种生长的培养基配方。试验
结果表明：以鲜松针为原料配制而成的培养基最适宜红托竹荪母种生长。
关键词：红托竹荪；培养基；鲜竹叶
中图分类号：S646.8 文献标识码：A 文章编号：1009-8666（2010）12-0021-03
红托竹荪是一种极其名贵的食用菌，其子实体
形态别具一格，风味独特，有“真菌之花，面纱女郎，
林中之王”的美称[1]。红托竹荪具有较高的食用和药
用价值，含有人体必需的多种氨基酸、维生素及各
种矿物质，对防治高血压、高胆固酵和减少皮下脂
肪的贮积有较好疗效，对食品防腐也有奇效，因而
其经济价值很高，受到人们的喜爱[2]。
我国是竹荪的主要人工栽培国，主要在福建、
云南、贵州及湖南的会同和绥宁等少数地方进行栽
培，多年来国际市场上供不应求。要想获得高产优
质的红托竹荪产品，除了选用优良菌种、采用科学
管理的方法之外，母种培养基的营养条件也直接关
系到竹荪生产的成败。目前人工培养红托竹荪的母
种培养基一般采用马铃薯、葡萄糖等作为原料，供
给分离纯化母种生长所需营养。但因原料相对简
单，不能充分供给母种生长所需的营养，使母种及
原种质量都受到相应影响，在扩大栽培后不能获得
高产优质的红托竹荪。因此，本试验选取 5种不同
的培养基配方进行试验，观察菌丝生长情况，同时
测定其可溶性糖和可溶性蛋白含量，通过对比筛选
出对红托竹荪生长比较理想的母种培养基配方，为
红托竹荪高产优质的栽培提供科学依据。
1 试验材料与方法
1.1 试验材料、试剂和仪器
1.1.1 材料：供试品种为红托竹荪（购买于四
川农科院）。
1.1.2 试剂：无水乙醇，蒽酮，标准牛血清蛋
白，考马斯亮蓝，磷酸，磷酸二氢钠，磷酸氢二钠。
1.1.3 仪器：723型分光光度计（上海科登精密
仪器有限公司），台式离心机（上海安亭科学仪器厂
制造），101-2电热鼓风干燥箱（江苏省东台县电器
厂），FA2004电子天平（上海上平仪器公司），超净
工作台（苏州净化设备有限公司），GXZ光照培养箱
（宁波市科技园新江南仪器有限公司），高压蒸汽灭
菌锅（上海三审医疗器械有限公司），接种器具消毒
器（上海稼丰园艺用品有限公司），HHS112恒温水
浴锅。
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1.2 试验方法
将红托竹荪母种接种于用不同原料配制而成
的培养基中，培养并观察。待菌丝开始生长时，每隔
一天观察记录菌丝封面时间、菌丝长度及长势等指
标。计算菌丝平均满管时间以及生长速度。此外，待
菌丝长势相对茂盛时，从每种培养基配方中称取定
量菌丝测定其可溶性总糖和蛋白含量。可溶性总糖
的含量用蒽酮比色法进行测定 [4]，可溶性蛋白的含
量用考马斯亮蓝比色法测定[5]。通过各指标比较，归
纳出最适宜红托竹荪母种生长的培养基配方。
1.2.1 配制培养基
1.2.2 分装试管
将上述配制的培养基分装于试管中，每支试管
中倒入的培养基量应不超过试管长度的 1/5。
1.2.3 培养基以及无菌操作台的灭菌
将配制好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅内灭
菌 30分钟。用 75％酒精擦拭无菌操作台、镊子、烧
杯、红托竹荪母种瓶、酒精灯等接种过程中所用器
具。再按 100mL/900mL=洁尔灭/蒸馏水配置洁尔灭
溶液，装于喷壶中对无菌操作室及光照培养箱进行
灭菌。将经高压蒸汽灭菌后的培养基置于超净工作
台内，打开超净工作台内的风扇及紫外灯进行灭
菌，同时也打开无菌操作室的紫外灯灭菌 30分钟。
1.2.4 接种及培养
在超净工作台下将红托竹荪母种接种于各种
配方的培养基中，整个操作过程要求尽量做到无菌
状态。接种完毕后，将试管置于光照培养箱中 25℃
下培养。
1.2.5 红托竹荪在不同母种培养基中菌丝生长情
况比较
1.2.5.1 菌丝污染情况：观察各管污染情况，计
算污染率（污染率=污染数目/接种总数）。
1.2.5.2 菌丝长势：观察菌丝稠密及菌丝整齐
度。
1.2.5.3 菌丝长速：记录菌丝萌发所需时间、封
面时间、每种配方菌丝平均满管时间、日均长势等。
待菌丝萌发后，每隔一天测一次菌丝长度，每种配
方测量竹荪母种菌丝生长速度（菌丝体生长速度=
养菌期间试管内菌丝体生长的高度/培养天数），然
后对菌丝体生长速度进行分析，根据结果分析得出
适宜红托竹荪母种菌丝体生长的最佳配方。
1.2.6 红托竹荪生理指标的测定方法
1.2.6.1 可溶性总糖的含量测定：参考张志良，
瞿伟菁主编的植物生理学实验指导[4]得出标准曲线
的直线方程：Y=0.014X（R2=0.9995）。
1.2.6.2 可溶性蛋白的含量测定：参考陈建勋，
王晓峰主编的植物生理学实验指导[5]得出标准曲线
的直线方程：Y=0.0054X（R2=0.9928）。
2 试验结果与分析
2.1 红托竹荪菌丝生长状况记录及分析
2.1.1 红托竹荪菌丝在不同配方母种培养基中的
生长情况
由表 2可以看出，红托竹荪母种在玉米培养基
和鲜松针培养基上生长较好，菌丝萌发时间较短，
菌丝密度高，菌丝特浓白，呈棉絮状，菌丝生长整
齐，玉米培养基上菌丝 7d即可封面，平均满管时间
仅需 12d，鲜松针培养基上仅 5d即可封面，平均满
管时间需 15d。土豆培养基一和黄豆芽浸汁培养基
上菌丝生长也普遍良好。土豆培养基二中菌丝生长
最差，菌丝萌发时间较长，菌丝密度低，生长不整
齐，菌丝封面时间需 9d，平均满管时间长达 20d。其
原因可能是玉米粉能够为竹荪的生长提供优良的
氮源，而鲜松针中的粗蛋白含量较高，而且具有抑
制细菌和放射菌等微生物生长的作用[6]，因而采用
这两种原料配制而成的培养基对红托竹荪的生长
较为有利；而土豆培养基二可能因为碳氮比的配置
不合适，对菌丝生长产生影响，致使其上的菌丝生
长情况相对较差。
表 1 培养基配方组成
培养基 配 方
土豆培养基一 马铃薯 250g，葡萄糖 25g，琼脂 20g
土豆培养基二
马铃薯 250g，葡萄糖 25g，琼脂 20g，蛋白胨
5g，硫酸镁 0.5g
玉米培养基 玉米粉 60g，蔗糖 10g，硫酸镁 0.5g
鲜松针培养基
鲜松针 36g，马铃薯 250g 琼脂 29g，葡萄糖
25g，蛋白胨 5g 磷酸二氢钾 3g
黄豆芽培养基
黄豆芽 250g，琼脂 18g，蔗糖 20g，硫酸镁
0.5g，VB1 100mg
表 2 红托竹荪在不同配方母种培养基中菌丝的生长情况
配方
萌发
时间（d）
封面
时间（d）
平均满管
时间（d）
菌丝
密度
菌丝长势
菌丝
整齐度
土豆培
养基一
2 7 14 高
特浓白，封口
早
整齐
鲜松针
培养基
2 5 15 高
特浓白，特粗
壮，封口早
整齐
黄豆芽
培养基
2 7 18 中
特浓白，特粗
壮
整齐
土豆培
养基二
3 9 20 低 特浓白 不整齐
玉米
培养基
2 7 12 高
特浓白，特粗
壮，封口早
整齐
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2.1.2 红托竹荪母种在不同配方培养基中菌丝的
生长速度
从表 3中可以看出，随着培养时间延长，红托
竹荪母种在不同培养基配方中表现出不同的菌丝
生长速度。培养 9d时，黄豆芽培养基中红托竹荪菌
丝最长，鲜松针培养基次之，而土豆培养基二中菌
丝最短。红托竹荪在玉米培养基中其菌丝刚开始的
增长幅度最大，为 4.03cm/d，但后期其增长幅度却
最低，为 0.27cm/d，因此其增长趋势表现为先上升
最快后上升最慢，反应出在该培养基上菌丝体容易
老化；土豆培养基一上其菌丝刚开始增长幅度也较
大，为 3.90cm/d，随后的培养中其菌丝增长处于一
个平缓阶段，到后期其增长幅度也较低，为 0.29cm/
d，因此其增长趋势表现为先快后慢；鲜松针培养基
中其菌丝增长幅度为 3.53cm/d，到后期其增长幅度
为 0.48cm/d，增长趋势同样表现为先快后慢，但后
期的增长速度优于其它培养基的，表明该培养基在
后期的培养过程中也能为菌丝体的生长提供充分
的养分。
2.2 不同培养基配方红托竹荪可溶性糖和蛋白质
含量
红托竹荪在生长的过程中，对一些大分子的不
溶性多聚物如纤维素、淀粉和蛋白质等，在利用之
前要经过一个初步的消化过程。这个消化过程是红
托竹荪的细胞分泌胞外酶去水解这些大分子变为
小分子的过程。这些胞外酶大多为消化酶，且具有
一定的专一性[7]。因此，测定可溶性糖和可溶性蛋白
质的含量的高低，就可以进一步判断红托竹荪的胞
外酶对培养基的分解情况。
不同培养基配方的红托竹荪可溶性糖含量如
图 1所示，其菌丝可溶性糖含量因培养基配方的不
同而不同。玉米培养基和鲜松针培养基中的菌丝可
溶性糖含量相对较高，分别为 8.3mg/g和 8.1mg/g；
土豆培养基二为 6.3mg/g，黄豆芽培养基为 5.3mg/g，
土豆培养基一中的可溶性糖含量最低，为 2.9mg/g。
鲜松针培养基的可溶性蛋白含量为 1.9mg/g，其含
量相对最高，比含量最低的豆培养基一高出 1.2mg/
g。土豆培养基二和黄豆芽培养基菌丝体的可溶性
蛋白含量较为接近分别为 1.7mg/g和 1.6mg/g。从上
可知，鲜松针的培养基中的红托竹荪菌丝的可溶性
糖和可溶性蛋白含量最高，也就是红托竹荪的胞外
酶能够较好的分解鲜松针的培养基。
3 结论
红托竹荪母种在鲜松针培养基中菌丝萌发时
间短，密度高，菌丝特浓白且生长整齐，整个培养过
程中菌丝体增长速度较快，因此，鲜松针培养基能
充分提供菌丝体整个生长过程中所需营养，是最适
宜红托竹荪母种生长的培养基配方。黄豆芽培养基
中菌丝生长状况也较好，但其可溶性糖和蛋白含量
与鲜松针培养基相比略偏低。因此，总体来说，鲜松
针培养基对红托竹荪菌种的生长更有利。与之相
反，土豆培养基一仅由马铃薯、葡萄糖等组成而成，
缺少充分的氮源及矿质元素，所以其菌丝体增长速
度较慢，可溶性糖和蛋白的含量都较低，反应出其
菌丝体在整个生长过程中容易因养分不足而老化，
因此不适宜红托竹荪母种生长。
表 3 红托竹荪在不同培养基配方中菌丝长度比较
配方
菌丝长度(cm)
9d
8.37
7.75
8.67
8.72
8.84
7d
8.08
6.93
8.40
8.24
8.35
5d
6.64
5.81
6.58
6.76
6.53
3d
2.74
2.49
2.55
3.23
3.87
土豆培养基一
土豆培养基二
玉米培养基
鲜松针培养基
黄豆芽培养基
参考文献：
[1]刘明月,谭金莲,刘都才,等.竹荪菌种培养条件及品种亲缘关系
的研究[J]. 湖南农学院学报, 1992（18）:789-795.
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业科学, 1994(4):18-19.
[4]张志良, 瞿伟菁. 植物生理学实验指导[M]. 北京：高等教育出版
社, 2003:125-128.
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出版社, 2002:54-55.
[6]薛琏（王进）. 竹荪菌丝对不同基质适应性试验[J]. 食用菌：1995
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[7]刘振祥, 谭爱华, 杨辉德. 食用菌栽培学[M]. 武汉：华中师范大
学出版社, 2006：24-25.
图 1 不同培养基配方红托竹荪可溶性糖和蛋白质含量
可溶性糖
可溶性蛋白
可
溶
性
糖
、蛋
白
含
量
(m
g/
g)
土豆培养基一 土豆培养基二 玉米培养基 鲜松针培养基 黄豆芽培养基
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