全 文 ：　[收稿日期] 2007-06-13
　[基金项目] 湖北省教育厅青年项目(Q200512005)
　[第一作者简介] 朱桂才(1970-),男 ,湖北仙桃市人 ,博士研究生 ,副教授 ,主要从事绿地生态学的研究.
　[通讯作者] 杨中艺 , E-mai l:ad syzy@mai l.syu s.edu.cn.
　　　李氏禾种子生活力的四唑法测定研究
　　朱桂才　(中山大学生命科学学院 , 广东 广州 51 0275;长江大学园艺园林学院 ,湖北 荆州 434025)
　　姚　振 ,罗春梅 ,周文林　(长江大学园艺园林学院 ,湖北 荆州 434025)
　　杨中艺　(中山大学生命科学学院 , 广东 广州 51 0275)
[ 摘要]比较了李氏禾(Leersia hexandra)种子在 25 ℃、30 ℃和 35 ℃ 3 种温度下分别用 0.5%和 1.0%的
TTC 溶液染色的效果 , 以探讨李氏禾种子生活力的四唑法测定条件。结果表明:在 35 ℃、0.5%的 TTC 浓
度下染色 30 h 可获得最佳染色效果 ,可作为李氏禾种子生活力测定的适宜条件。
[ 关键词] 李氏禾(Leersia hexandra);种子生活力;四唑
[ 中图分类号] Q945.3;Q949.71 +4.2 [ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1673-1409(2007)03-S040-02
四唑法测定技术于 1942年由德国学者莱康(Lakon)提出 ,以后逐渐为世界各国所采用。该方法可迅
速测定发芽缓慢或有休眠种子的生活力 ,具有快速 、经济 、准确和应用范围广泛等特点[ 1] 。李氏禾(Leer-
sia hexandra)为禾本科多年生湿生野草 ,具有很强的耐淹和耐干旱能力 ,水土保持性状优良 ,它对重金属
C r也有一定的耐性 ,是当前江河库区消涨带植被恢复的理想物种之一[ 2 ～ 4] 。虽然其结实率高 ,但是人工
播种萌发率极低 ,其原因的研究尚未见报道。因此 ,本研究拟通过适当的预处理 ,探讨四唑法测定其种子
生活力的最佳染色浓度和最佳染色时间 ,以科学评价其种子生活力 ,最终为全面研究李氏禾种子的萌发特
性提供依据。
1　材料与方法
1.1　材料
试验所用李氏禾种子于 2006年 9月采自长江大学园艺园林学院资源圃 ,风干后室温(21±5)℃储藏
于磨砂广口瓶备用 ,千粒重 0.255 7 g ,含水量 10.84 g/100 g 。
1.2　方法
试验设 2个 T TC溶液浓度水平(0.5%和 1.0%)和 3 个温度梯度(25 ℃、30 ℃和 35 ℃)。试验前先
将供试种子去稃后用自来水浸泡 24 h过夜 ,再从此样品中随机数取 2 400粒净种子分为 24等份 ,并将此
24份种子在上述 3种温度下分别用 0.5%和 1.0%的 T TC无色溶液浸染。共计 6个处理 , 4次重复 ,每处
理 100粒;另取 1 000粒种子在沸水中煮 10 min ,随机数取 600粒净种子分为 6等份作为对照(CK)。浸
染开始后 ,每隔 1 h观察并统计被染色种子数 。
所得数据采用 SPSS 12.0进行统计分析 ,种子生活力判断标准根据《1996国际种子检验规程》[ 5 , 6] 。
2　结果与分析
2.1　不同温度与 TTC浓度下李氏禾种子的染色情况
经 T TC无色溶液浸染并在放大镜下对剖面观察 ,发现经沸水煮过的李氏禾种子的活力完全丧失(表
·40· 长江大学学报(自科版)农学卷　2007年 9月 第 4卷第 3期Journal of Yangtze University(Nat Sci Edit)Agri Sci V　Sep.2007 , Vol.4 No.3
1),其他材料开始被染色的时间为浸染后 12 h ,且种子被染色的数量在 20 h后基本稳定 ,各表中数据均为
该时间统计。试验结果还表明 ,在 25 ～ 35℃温度范围内 ,四唑溶液浓度越高 ,所需染色反应时间越短 ,但
总体来讲较一般的物种种子开始着色的时间要晚(通常为 2 ～ 8 h[ 6])。因此选择合适的 TTC 溶液浓度来
测试李氏禾种子的生活力是必要的 。
表 1　不同温度与 TTC浓度下李氏禾种子的染色情况
Table 1　Dyeing effect of L .hexandra seeds under different temperatures and TTC concentrations
温度
/ ℃
被染色种子数
0.5% TTC
1 2 3 4 平均 CK
1.0% T TC
1 2 3 4 平均 CK
平均染色时间/ h
0.5% TTC 1.0%T TC
25 46 34 50 28 39.5aA 0 6 0 0 0 1.5aA 0 8.0 7.5
30 34 30 44 38 36.5aA 0 46 46 50 58 50.0bB 0 6.5 5.0
35 64 72 74 68 69.5bB 0 52 56 48 62 54.5cB 0 5.5 5.0
　　　　注:(1)1～ 4代表 4次重复;(2)表中同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异显著(P<0.01)。
2.2　不同温度对李氏禾种子 TTC染色的影响
四唑染色是生物体内的酶促反应 ,需要在一个最适温度条件下进行 ,而酶的最适温度是一个有条件的
常数 。从表 1可知 , 2种浓度的 T TC溶液对李氏禾种子进行染色 ,25 ℃、30 ℃和 35 ℃3种温度之间存在
显著差异 。从显著程度来看 , TTC 溶液浓度相对较低时 ,较高温度对李氏禾种子染色的影响大;而当
T TC溶液浓度相对较高时 , 2个较高温度处理之间的差异趋于减小。
2.3　不同温度及 TTC浓度对李氏禾种子染色的影响
表 2　李氏禾种子染色处理间多重比较
Table 2　Mul ticomparison of seed viabil ity
of L .hexandra under six treatments
处　　理 被染色种子平均数
差异显著性
0.05 0.01
25 ℃+1.0%TTC 1.5±2.60 a A
30 ℃+0.5%TTC 36.5±5.17 b B
25 ℃+0.5%TTC 39.5±8.87 b B
30 ℃+1.0%TTC 50.0±4.90 c B
35 ℃+1.0%TTC 54.5±5.17 d B
35 ℃+0.5%TTC 69.5±3.84 e C
　　影响四唑染色的因素不仅包括四唑溶液的浓度 ,
而且还包括染色反应温度等。多重分析结果表明 , 25
℃+1.0%TTC 、35 ℃+0.5%T TC 与 30 ℃+0.5%
T TC组合之间的染色的效果存在极显著差异 ,而 30
℃+0.5%T TC 与25 ℃+0.5%TTC 组合之间 、30 ℃
+1.0%T TC 与 35 ℃+1.0%T TC 组合之间染色的
效果无显著差异(表 2)。这说明 ,温度虽能影响李氏
禾种子体内的酶促反应 ,但是不同 T TC 浓度下产生
影响的温度是不同的。由表 2 可知 , 0.5%T TC 和 35
℃条件下 ,被染色种子平均数相对较高 ,因此可以作为
该种子适宜的染色条件。
3　结论与讨论
(1)本试验结果说明 ,在同一 TTC溶液浓度下 ,染色温度越高 ,染色反应的速度越快 ,被染色种子平
均数相对较高。其原因是多方面的 ,种子活力是一个由多基因控制的数量性状 ,近年来 ,国内外有关种子
活力的生理机理研究表明 ,在种子发育后期 , LEA 蛋白 、寡聚糖和 ABA 等抗逆物质与种子活力的形成有
关 ,而膜脂过氧化作用 、染色体及基因的畸变和胚蛋白的降解等则被认为是引起或加剧种子活力衰退即种
子老化劣变的重要原因[ 7] 。本试验结果在一定程度上支持了上述理论 。
(2)种子活力主要决定于遗传性以及种子发育成熟程度与贮藏期间的环境因子 。遗传性决定种子活
力强度的可能性 ,发育程度决定活力程度表现的现实性 ,贮藏条件则决定种子活力下降的速度[ 8 , 9] 。李氏
禾为热带起源的草种 ,其种子即使在脱水状态下也可能对低温敏感。总体来讲 ,本试验中李氏禾种子生活
力不高 ,是否与种子采收的时期及储藏时水分的控制有关尚值得进一步研究。因此 ,在种子生物学的研究
中种子顽拗性类型的区分是制定种子研究和储藏策略的关键 ,而种子的发育特性又是种子脱水行为和储
藏行为的基础。
(下转第 50 页)
·41·第 4 卷 第 3 期 朱桂才等:李氏禾种子生活力的四唑法测定研究 　
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(上接第 41 页)
　　(3)不同品种的种子对预处理的效果存在不同 ,应在实践中采用不同的预处理[ 10] 。本试验中去稃后
用自来水浸泡种子的预处理是有效的。另外 ,新收获的李氏禾种子直接发芽试验中发芽率较低 ,可能与其
存在一定程度的生理休眠有关 ,而直接用生活力四唑测定法则可以快速准确地了解到其潜在的发芽能力 。
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·50· 　 长江大学学报(自科版)农学卷 2007年 9 月
Abstract:Different media were used to asses the pollen viability of lily.The results
showed that the germination rate w as only 4.7% on the medium added w ith no chemi-
cals , and as high as 79.7%on the medium added w ith 10% sucrose , 100 mg ·L-1 Bo ric
acid and 0.02 mg ·L -1Zn2+.The sto rage enviro nment affecting the pollen vitality w ere
also evaluated.It indicated that the pollen g rain stored in cold and dry environment could
keep the pollen vitality longer.
Key words:Lilium longi f lorum;germination rate;storage;pollen;viability
037 Comparative Study on Water Use Efficiency of 4 Bermudagrass Varieties
FEI Yong-jun ,LIAO Qi-rong ,ZENGXuan 　 Col lege o f Hort icul tur e and Garden ing ,Y ang tz e Un iver sity , J ing zhou ,Hubei 434025 , Ch ina
Abstract:The net photosynthesis rates and t ranspiration rates of 4 bermudag rass varie-
ties(Jackpot ,Common , 040459/680 and Xinnong No.1)planted on vegetation concrete
condition were measured.Their w ater use efficiencies(WUE)were calculated.The re-
sult s indicated that the difference level of photosynthesis were higher than those of tran-
spiration rate and water use efficiency;The water use ef ficiency of 4 bermudag rass varie-
ties f rom high to low was:Common(3.69), 040459/680 (3.56), Jackpo t(3.31), Xin
nong N o.1 (3.16);There were remarkable co rrelation among the net photosynthesis
rate , the transpiration rate and water use efficiency of 4 bermudagrass varieties.
Key words:Cynodon dacty lon L.;net photosynthesis rate;transpiration rate;water use
efficiency
040 Study on the Testing of Seed Viability of Leersia hexandra with Triphenyl Ttetrazolium
Chloride Method
ZHU Gui-cai 　 Col lege o f Li f e Sciences , Sun Yatsen Un iver sity , Guang zhou , Guangdong 510275 , Ch ina;Col lege o f Hor ticu lture and Gardening , Yang tz e Universi ty , J in gzhou , Hubei 434025 , China
YAO Zhen , LUO Chen-mei
ZHOUWen-lin 　 Col leg e o f Hort icul ture an d Gardening ,Y angtz e Univer sity ,J ing zhou , H ubei 434025 , China
YANGZhong-yi 　(Col lege o f Li fe S ciences , Sun Yatsen Universi ty , Guang zhou, Guangdong 510275 , China)
Abstract:In order to research the conditions of determining seed viability of Leersia
he xandra with T TC(triphenyl tetrazolium chloride)method , the seed viability of Leer-
sia hexandra was determined under the conditions of different temperature(25 ℃, 30 ℃
and 35 ℃)and T TC concentration(0.5%and 1.0%)during the period of different dye-
ing time(0 ～ 48 h).The results showed that under the conditions of the temperature of
35 ℃, the T TC concent ration of 0.5% and at the dyeing time of 30 h , the dyeing effect
w as best.They could be the mos t appropriate condition to determine Leersia hexandra
seed viability.
Key words:Leersia he xandra ;seed viability;triphenyl tetrazolium chloride
042 Research on Appraisal Method for Economic Value of Gardening Trees in Courtyard
GAO Huan-zhang ,HUANGGuang-yuan 　 Col lege o f Hort icul tu re and Garden ing , Yang tz e Univer sity , J ing zhou ,H ubei 434025 , Ch ina
CHENG Shu-bing 　(Bureau o f Land scape Arch itecture o f J in gzhou City , J ing zhou , H ubei 434100 , China)
GENGHong-wei 　(B ureauo f Landsca pe Arch itecture o f Hong an County , Hong an , H ubei 436100 , China)
Abstract:According to the most popular guide for plant appraisal-N orth American CT-
LA2000 and the present status of internal research , research on arbor and shrub on
western campus of Yang tze U niversity has was done.It s total economic value has been
evaluated by measuring the quantitative guide line of g row th , surveying the market price
of corresponding species , analyzing influencing facto rs of economic value and adjus ting
the weighed coefficient of influencing factors.The results showed that the application
process w as simple , rapid , highly practical , and is suitable fo r the actual situation of the
current g ardening trees economic value.
Key words:gardening trees;value appraisal;Yang tze University
051 Identification and Virulence of Two Enterococcus Strains Isolated from Ducks
HAN Mei-hong 　(Co llege o f Animal S cience ,Yangtze Universi ty , J ingzhou , Hubei 434025 , Ch ina)
GU Chang-qin　(Co llege o f Animal Medicine , H uazhong A gr icul tural Univer sity ,Wuhan , H ubei 430070 , China)
Abstract:The morphological , cultural characters , biochemistry characters of tw o En-
· Ⅳ·