全 文 ：Study on mechanism of Sanleng-Ezhu component compatibility on uterine leiomyoma rat
Yu Chenghao，Peng Teng，Du Jie，Zhang Xuemei，Feng Wenze，Shen Dongcheng
(Chengdu University of TCM，Chengdu 610075)
Objective:It is to observe the therapeutic action of Sanleng-Ezhu component compatibility(total flavonoids of Sanleng，volatile oil of
Ezhu)on model rats with uterine leiomyoma． Methods:The model of uterine leiomyoma was established with intramuscular injection of pro-
gesterone and gavage of diethylstilbestrol tablets． Ｒesults:Sanleng-Ezhu component compatibility(2:1)10g /kg，(1:1)6． 67g /kg，(1:2)
10g /kg could significantly reduce uterine leiomyoma rats＇ uterine coefficient and the diameter of both lower part of uterine horns and uterine
horn roots，and inhibit uterus smooth muscle hypertrophy，decrease the degree of hyperplasia of smooth muscle cells． Sanleng-Ezhu (1:1)6．
67g /kg，(1:1)3． 33g /kg，(2:1)10g /kg，(1:2)10g /kg could significantly reduce the content of estradiol and progesterone，could inhibit
the c-myc，wnt5b gene expression of uterine leiomyoma;Sanleng- Ezhu (1:1)1． 67g /kg could inhibit the wnt5b gene expression of uterine
leiomyoma;Sanleng-Ezhu (1:1)6． 67g /kg could inhibit the β-catenin gene expression of uterine leiomyoma。Its effective dose and dose
range was Sanleng-Ezhu component compatibility3． 33g /kg and 3． 33 ～ 10． 0g /kg． Conclusion:Sanleng-Ezhu component compatibility has
obviously therapeutic effect on uterine leiomyoma in rats，The mechanism is mainly improving the structure and the pathologic histology，regu-
lating endocrine hormone levels，reducing the content of estrogen and progesterone，and inhibiting the c-myc，wnt5b，β-catenin gene expression
of uterine leiomyoma．
Key words Sanleng(三棱);Ezhu(莪术);component compatibility;uterine leiomyoma;mechanism
绿萝花提取物对 α-葡萄糖苷酶的抑制及降血糖作用*
张晓英，张致英，王鹏翔，盛业萌，贺 学
(西藏民族学院医学院，咸阳 712082)
摘 要 目的:研究西藏绿萝花提取物对 α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶的抑制作用，以及不同糖负荷下对正常及高血糖小鼠的降
血糖作用。方法:提取正常大鼠小肠上段 α-葡萄糖苷酶，建立微量酶促反应体系，通过 IC50衡量不同提取物对酶的抑制作用;体内
实验以 ICＲ小鼠和四氧嘧啶高血糖小鼠为模型，在蔗糖、淀粉、葡萄糖不同负荷下，观察绿萝花提取成分对小鼠血糖的影响。结果:
在绿萝花提取物三种萃取相中，石油醚萃取相( PF) 对 α-葡萄糖苷酶的抑制作用较强，IC50比阿卡波糖还低。正丁醇萃取相( nBF) 对
α-淀粉酶的抑制作用较弱，IC50为 1． 227mg /ml比阿卡波糖的 IC50值 0． 3837 mg /ml高出 3 倍多。与体外实验结果一致，以 250mg /kg
石油醚萃取相( PF) 灌胃可降低正常 ICＲ小鼠和四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠蔗糖负荷后各时间点的血糖值，其血糖曲线下面积与蔗
糖组对比明显降低。以 250mg /kg正丁醇萃取相( nBF) 灌胃亦可降低正常 ICＲ 小鼠和四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠的淀粉负荷后各
时间点的血糖值及减少曲线下面积。以葡萄糖为负荷，分别采取 250mg /kg PF、nBF 灌胃，均不能降低正常及高血糖小鼠的餐后高
血糖。结论:西藏绿萝花成分中石油醚萃取相( PF) 对 α-葡萄糖苷酶抑制作用较强，正丁醇萃取相( nBF) 对 α-淀粉酶影响较弱，均可
降低以蔗糖、淀粉为负荷时正常及高血糖小鼠的餐后血糖，但不影响葡萄糖的吸收。
关键词 绿萝花;α-葡萄糖苷酶;α-淀粉酶;血糖
绿萝花为西藏特有珍贵植物，产于西藏寒冷地带。《藏医
养身学说》指出:西藏绿萝花主治糖尿病、冠心病、高血压等。
当地居民通过泡水饮用的方式来治疗糖尿病、高血脂等慢性疾
病。现代医学研究证实 :绿萝花降血糖的机制是通过抑制 α-葡
萄糖苷酶发挥降血糖作用，α-葡萄糖苷酶抑制剂竞争抑制小肠
刷状缘上的 α-葡萄糖苷酶，延缓寡糖或多糖转化成可吸收单糖
的过程，从而抑制糖尿病人餐后血糖［1］。
实验研究报道西藏绿萝花乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部
分有较强的 α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化作用;正丁醇萃取部分
有较强的抗氧化作用［2］。罗小文等研究发现:藏药绿萝花有明
显的降血糖活性，尤以乙酸乙酯和正丁醇部位疗效较佳［3］。本
研究将绿萝花乙醇提取物分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃
取，体外观察各部分对淀粉酶、麦芽糖酶、蔗糖酶的抑制作用筛
选出有效成分，以及考察单次口服给药对正常 ICＲ 小鼠和四氧
嘧啶高血糖小鼠蔗糖、淀粉或葡萄糖负荷餐后血糖的影响。
701中药药理与临床 2014;30(3)
* 西藏自治区第二批自然科学基金项目
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2014.03.034
1 材料与方法
1． 1 试验药物 绿萝花，购于西藏拉萨，经作者鉴定为绿萝
花。称取西藏绿萝花干花 166． 67g，粉碎，2L 70%乙醇浸泡过
夜，超声波辅助搅拌处理 2h，过滤，同样条件重复一次，合并滤
液，用旋转蒸发器减压浓缩上述浸提液，去除乙醇回收浓缩液，
分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取(等体积分三次萃
取)浓缩液，再分别用旋转蒸发仪浓缩，并真空干燥，得到各部
分的浸膏，正丁醇相浸膏 0． 51g，乙酸乙酯相浸膏 0． 3g，石油醚
相浸膏 0． 43g。
阿卡波糖片(拜糖苹)，德国拜耳公司，产品批号:BJ12892。
1． 2 动物 ICＲ小鼠，雄性，20-23g 购于南方医科大学实验动
物中心，许可证号:SCXK(粤)2011-0015。
1． 3 试剂 石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、蔗糖、淀粉(广州化学
试剂厂分析纯)、四氧嘧啶(美国 Sigma 公司)、α-淀粉酶(美国
Sigma公司)、Bradford 蛋白浓度测定试剂盒(上海近岸科技有
限公司 /欣百诺生物)葡萄糖氧化酶试剂盒(上海抚生实业有限
公司)。
1． 4 仪器 旋转蒸发仪(ＲE-5299 )，分光光度计(UV752)，酶
标仪(iMAＲK美国)。
1． 5 方法
1． 5． 1 α-葡萄糖苷酶提取 雄性大鼠，禁食 3h，处死，取小肠
上段(自十二指肠约 10 ㎝)，用预冷的生理盐水冲洗两次，放在
平皿中，用玻片刮取粘膜层，按 1:10 比例用 NaCl-KCl 缓冲液稀
释并匀浆，20000g离心 30min(4℃)，沉淀用预冷的生理盐水洗
两次，均在 20000g 离心 30min，最后沉淀用生理盐水按 1:5 稀
释，500g离心 10min(4℃)，上清液 Bradford测定蛋白浓度后，分
装于﹣ 20℃保存［4］。
1． 5． 2 α-葡萄糖苷酶活性抑制 蔗糖和麦芽糖在 α-葡萄糖苷
酶的作用下分解为葡萄糖，通过测定反应体系中葡萄糖生成量
的多少，判定样品对 α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用［5］。实验采
用 96 微孔板为反应载体，最终反应体积 50μl，其中包括 1mg /L
α-葡萄糖苷酶提取液 25μl，10mg /ml 底物溶液 5μl，待测样品
20μl，37℃温孵 40min。采用葡萄糖氧化酶法，在 505nm 测定吸
光度(A)，以葡萄糖的生成量计算 α-葡萄糖苷酶的活性;同时
设定空白对照，酶活性对照。根据药物不同浓度下对酶活性的
抑制百分率计算出 IC50，以衡量受试药物对酶活性的抑制强度。
同时以阿卡波糖为阳性药物检验筛选模型的有效性。
抑制率(%)=(对照-样品)/(对照 －空白)× 100%
1． 5． 3 α-淀粉酶的抑制作用 α-淀粉酶是水解 a-1，4 糖苷键
的淀粉水解酶，通过测定反应体系中淀粉的剩余量(碘一淀粉
法)的多少，确定样品是否对淀粉酶活性有抑制作用。实验采
用 96 微孔板为反应载体，最终反应体积 50μl，其中包括 α-淀粉
酶 30μl，待测样品 20μl，混合均匀，37℃反应 15min，每孔加入
0． 04%可溶性淀粉溶液 100μl，混合后，37℃反应 10min，每孔加
入 0． 1mol /L 碘溶液 50μl，混匀后，于 660nm 下测测定吸光度
(A)。根据不同浓度样品对应不同的抑制率，以药物浓度为横
坐标，以抑制率为纵坐标作图得到抑制活性曲线，计算样品对
淀粉酶的抑制活性 IC50。同时以阿卡波糖为阳性药物检验筛选
模型的有效性。
抑制率(%)=样品 /(对照-空白)× 100%
1． 5． 西藏绿萝花提取物对正常及高血糖小鼠多种糖负荷后
血糖升高的影响 ICＲ 小鼠和 Alloxan 高血糖小鼠各自分为 4
组，每组 5 只，一组口服糖溶液作为正常对照组，一组口服糖溶
液与阿卡波糖混合液作为阳性对照组，其余两组分别口服糖溶
液与石油醚萃取部分(PF)、正丁醇萃取部分(nBF)混合作为给
药组。动物禁食过夜后，取 0min血样后，以蔗糖溶液、蔗糖溶液
与阿卡波糖混合液及蔗糖溶液与藏药绿萝花提取物石油醚萃
取相(PF)、正丁醇萃取相(nBF)混合液灌胃，其中蔗糖剂量为
4． 0g /kg、阿卡波糖 10mg /kg、PF、nBF (250mg /kg)。灌胃后
30min、60min、120min 取血，测定 0min、30min、60min、120min 的
血糖，计算各组血糖曲线下面积。AUC =(BG0 + BG30)× 15 /60
+(BG30 + BG60) × 15 /60 +(BG60 + BG120) × 30 /60
2 结果
2． 1 西藏绿萝花提取物对 α-葡萄糖苷酶的抑制作用 西藏绿
萝花提取物对蔗糖酶麦芽糖酶的抑制作用分别见表 1、表 2。
表 1 不同浓度的绿萝花提取物对蔗糖酶的抑制率(%)
组别
剂量(mg /ml)
0． 25 0． 5 1． 0 2． 0 4． 0 8． 0
提取物石油醚相 48． 20 54． 30 65． 20 79． 60 89． 80 91． 80
提取物乙酸乙酯相 40． 50 45． 80 55． 40 70． 10 85． 50 89． 20
提取物正丁醇相 36． 30 40． 40 48． 20 61． 60 79． 50 80． 30
阿卡波糖 47． 40 49． 00 54． 20 69． 00 86． 10 92． 00
表 2 不同浓度的绿萝花提取物对麦芽糖酶的抑制率(%)
组别
剂量(mg /ml)
02． 5 0． 5 1． 0 2． 0 4． 0 8． 0
提取物石油醚相 47． 90 53． 90 64． 90 83． 40 89． 00 91． 00
提取物乙酸乙酯相 39． 00 45． 00 56． 00 74． 60 87． 50 90． 00
提取物正丁醇相 36． 00 40． 10 48． 00 61． 40 79． 40 80． 00
阿卡波糖 47． 00 48． 40 51． 40 70． 20 89． 50 93． 20
2． 2 西藏绿萝花提取物对 α-淀粉酶的抑制作用
表 3 不同浓度的绿萝花提取物对淀粉酶的抑制率(%)
组别
剂量(mg /ml)
02． 5 0． 5 1． 0 2． 0 4． 0 8． 0
提取物石油醚相 42． 20 57． 80 86． 10 90． 10 91． 00 92． 30
提取物乙酸乙酯相 20． 30 44． 70 89． 10 90． 20 92． 50 93． 60
提取物正丁醇相 23． 20 30． 00 43． 00 64． 70 71． 00 82． 90
阿卡波糖 42． 50 46． 40 85． 60 91． 60 92． 80 93． 60
表 4 西藏绿萝花提取物对 α-葡萄糖苷酶及 α-淀粉酶的抑制作用
提取物
IC50(mg /ml)
蔗糖酶 麦芽糖酶 淀粉酶
提取物石油醚相 0． 34 0． 34 0． 33
提取物乙酸乙酯相 0． 56 0． 56 0． 51
提取物正丁醇相 0． 82 0． 84 1． 23
阿卡波糖 0． 46 0． 48 0． 38
2． 3 西藏绿萝花提取物对对正常及高血糖小鼠餐后血糖升高
的影响 西藏绿萝花提取物石油醚相(PF)和正丁醇相(nBF)
对正常及高血糖小鼠蔗糖、淀粉、葡萄糖负荷后血糖升高的影
响，见表 5 ～表 10。
801 中药药理与临床 2014;30(3)
表 5 西藏绿萝花提取物石油醚相(PF)和正丁醇相(nBF)对正常 ICＲ小鼠蔗糖负荷后血糖升高的影响(珋x ± s，n = 5)
组别
鼠数
(只)
剂量
(mg /kg)
血糖(mmol /L)
0 min 30min 60min 120min
AUC
(mmol． h /L)
对照组 5 5． 05 ± 0． 13 13． 29 ± 0． 21 12． 14 ± 0． 08 11． 31 ± 0． 32 22． 66 ± 0． 29
阿卡波糖 +蔗糖 5 10 5． 10 ± 0． 21 9． 07 ± 0． 10 8． 57 ± 0． 09 8． 26 ± 0． 19 16． 37 ± 0． 13*
提取物石油醚相 +蔗糖 5 250 5． 12 ± 0． 15 7． 48 ± 0． 11 7． 34 ± 0． 05 7． 17 ± 0． 11 14． 12 ± 0． 13*
提取物正丁醇相 +蔗糖 5 250 5． 08 ± 0． 09 10． 21 ± 0． 54 9． 56 ± 0． 22 8． 96 ± 0． 21 18． 09 ± 0． 25*
与对照组相比 * P ＜0． 05(下同)
表 6 西藏绿萝花提取物石油醚相(PF)和正丁醇相(nBF)对 Alloxan高血糖小鼠蔗糖负荷后血糖升高的影响(珋x ± s，n = 5)
组别
鼠数
(只)
剂量
(mg /kg)
血糖(mmol /L)
0 min 30min 60min 120min
AUC
(mmol． h /L)
对照组 5 16． 84 ± 0． 06 23． 19 ± 0． 18 22． 44 ± 0． 09 21． 51 ± 0． 25 43． 39 ± 0． 10
阿卡波糖 +蔗糖 5 10 16． 81 ± 0． 03 20． 12 ± 0． 07 19． 32 ± 0． 05 18． 96 ± 0． 09 38． 24 ± 0． 06*
提取物石油醚相 +蔗糖 5 250 16． 87 ± 0． 04 18． 85 ± 0． 74 18． 39 ± 0． 06 18． 12 ± 0． 10 36． 50 ± 0． 02*
提取物正丁醇相 +蔗糖 5 250 16． 67 ± 0． 16 21． 43 ± 0． 44 20． 55 ± 0． 30 19． 69 ± 0． 25 40． 10 ± 0． 34*
表 7 西藏绿萝花提取物石油醚相(PF)和正丁醇相(nBF)对正常 ICＲ小鼠淀粉负荷后血糖升高的影响(珋x ± s，n = 5)
组别
鼠数
(只)
剂量
(mg /kg)
血糖(mmol /L)
0 min 30min 60min 120min
AUC
(mmol． h /L)
对照组 5 5． 00 ± 0． 09 13． 62 ± 0． 28 12． 64 ± 0． 18 11． 83 ± 0． 13 23． 45 ± 0． 33
阿卡波糖 +淀粉 5 10 5． 02 ± 0． 14 9． 76 ± 0． 18 8． 87 ± 0． 09 8． 35 ± 0． 12 16． 97 ± 0． 21*
提取物石油醚相 +淀粉 5 250 4． 97 ± 0． 07 8． 77 ± 0． 21 7． 78 ± 0． 06 7． 18 ± 0． 07 15． 05 ± 0． 15*
提取物正丁醇相 +淀粉 5 250 4． 99 ± 0． 12 11． 41 ± 0． 37 10． 54 ± 0． 40 9． 41 ± 0． 11 19． 56 ± 0． 36*
表 8 西藏绿萝花提取物石油醚相(PF)和正丁醇相(nBF)对 Alloxan高血糖小鼠淀粉负荷后血糖升高的影响(珋x ± s，n = 5)
组别
鼠数
(只)
剂量
(mg /kg)
血糖(mmol /L)
0 min 30min 60min 120min
AUC
(mmol． h /L)
对照组 5 16． 84 ± 0． 06 23． 19 ± 0． 18 22． 12 ± 0． 09 21． 51 ± 0． 25 43． 15 ± 0． 12
阿卡波糖 +淀粉 5 10 16． 81 ± 0． 03 20． 12 ± 0． 07 19． 28 ± 0． 12 18． 88 ± 0． 10 38． 17 ± 0． 08*
提取物石油醚相 +淀粉 5 250 16． 87 ± 0． 04 18． 85 ± 0． 07 18． 19 ± 0． 18 18． 08 ± 0． 09 36． 33 ± 0． 14*
提取物正丁醇相 +淀粉 5 250 16． 73 ± 0． 22 21． 98 ± 0． 32 20． 80 ± 0． 14 20． 29 ± 0． 44 40． 92 ± 0． 22*
表 9 西藏绿萝花提取物石油醚相(PF)和正丁醇相(nBF)对正常 ICＲ小鼠葡萄糖负荷后血糖升高的影响(珋x ± s，n = 5)
组别
鼠数
(只)
剂量
(mg /kg)
血糖(mmol /L)
0 min 30min 60min 120min
AUC
(mmol． h /L)
对照组 5 5． 00 ± 0． 11 13． 70 ± 0． 12 12． 36 ± 0． 30 11． 32 ± 0． 55 23． 03 ± 0． 17
阿卡波糖 +葡萄糖 5 10 5． 06 ± 0． 14 13． 50 ± 0． 31 12． 59 ± 0． 17 11． 21 ± 0． 09 23． 07 ± 0． 27
提取物石油醚相 +葡萄糖 5 250 5． 03 ± 0． 16 13． 71 ± 0． 10 12． 32 ± 0． 20 11． 27 ± 0． 16 22． 98 ± 0． 18
提取物正丁醇相 +葡萄糖 5 250 5． 13 ± 0． 17 13． 58 ± 0． 21 12． 29 ± 0． 21 11． 22 ± 0． 21 22． 90 ± 0． 21
表 10 西藏绿萝花提取物石油醚相(PF)和正丁醇相(nBF)对 Alloxan高血糖小鼠葡萄糖负荷后血糖升高的影响(珋x ± s，n = 5)
组别
鼠数
(只)
剂量
(mg /kg)
血糖(mmol /L)
0 min 30min 60min 120min
AUC
(mmol． h /L)
对照组 5 16． 90 ± 0． 10 24． 18 ± 0． 29 23． 34 ± 0． 36 22． 02 ± 0． 16 45． 02 ± 0． 28
阿卡波糖 +葡萄糖 5 10 17． 09 ± 0． 15 24． 45 ± 0． 28 23． 43 ± 0． 28 21． 19 ± 0． 24 44． 84 ± 0． 43
提取物石油醚相 +葡萄糖 5 250 17． 15 ± 0． 23 24． 17 ± 0． 30 23． 50 ± 0． 27 21． 82 ± 0． 24 44． 90 ± 0． 35
提取物正丁醇相 +葡萄糖 5 250 17． 23 ± 0． 26 24． 46 ± 0． 35 23． 29 ± 0． 30 21． 82 ± 0． 30 44． 92 ± 0． 32
3 讨论
目前，2 型糖尿病患者首先通过调整饮食和增加运动控制
血糖，当效果不佳时，一般选用口服降血糖药如:双胍类、磺酰脲
类等降低空腹血糖，但随着病程的发展，胰岛素的使用使不可
避免的［6］。然而，大部分 2 型糖尿病患者存在胰岛素抵抗，使
得胰岛素的剂量会明显增加，为防止高胰岛素血症及高胰岛素
血症引起的低血糖现象，糖尿病患者常联合使用胰岛素增敏剂
或 α-葡萄糖苷酶抑制剂，协助控制血糖从而减少外源胰岛素的
用量［7］。
临床研究表明:采用饮食干预及胰岛素联合治疗 1 型糖尿
病或其他口服控制不佳的 2 型糖尿病时，阿卡波糖是一种耐受
性好并且有效的药物，它能使餐后葡萄糖波动减小，早餐后高血
糖下降，并且在午餐前使血糖水平得到优化。此外，联合应用阿
卡波糖能使夜间低血糖的发生次数减少［8］。然而，阿卡波糖结
构类似于寡糖，具有较广抑制酶谱，除对双糖水解酶的活性具有
较强的抑制作用外，还能够抑制 α-淀粉酶，故食物中的碳水化
合物在药物的作用下，包括未完全水解的淀粉、寡糖等物质进入
小肠下端，在肠道菌群的作用下异常发酵生成短链脂肪酸、CO2
及 H2，导致肠鸣、腹胀、腹泻、腹痛等不良反应［9］。
近年随着中草药资源的广泛研究和开发，从天然植物中提
取 α-葡萄糖苷酶抑制剂的研究成为热点。唐本钦［10］等研究广
901中药药理与临床 2014;30(3)
东桑叶并分离出抑制 α-葡萄糖苷酶活性的化合物。林玉桓［11］
等从虎杖筛选出 α-葡萄糖苷酶抑制活性成分，并初步鉴定为多
糖。我们期望能够发现对 α-葡萄糖苷酶抑制作用强而对 α-淀
粉酶相对弱的成分，这将会减少胃肠道药物的不良反应。
本实验研究表明:以蔗糖、麦芽糖为底物时，绿萝花的三种
萃取相对 α-葡萄糖苷酶均有抑制作用，其中石油醚萃取相(PF)
抑制作用最强，半数抑制率 IC50 分别为 0． 3378mg /ml、0．
3403mg /ml，比阳性对照药阿卡波糖 IC50低;正丁醇萃取相
(nBF)抑制作用最弱，IC50值明显高于阿卡波糖;乙酸乙酯萃取
相(EAF)抑制作用中等，但不及阿卡波糖。以淀粉为底物时发
现 PF对 α-淀粉酶亦有较强的抑制作用，其半数抑制率 IC50为
0． 337 mg /ml，比阿卡波糖的半数抑制率 IC50还低。显然，石油
醚萃取相(PF)对酶的抑制作用比较广泛，我们推测其在降低餐
后血糖的同时可能会出现类似阿卡波糖的不良反应，并不是理
想的餐后降血糖药。正丁醇萃取部分(nBF)对 α-淀粉酶的抑制
作用较弱，其半数抑制率 IC50为 1． 227mg /ml，比阿卡波糖的 IC50
值 0． 3837 mg /ml高出 3 倍多。经过体外实验，我们发现绿萝花
提取物石油醚萃取部分(PF)α-葡萄糖苷酶的抑制作用明显，正
丁醇萃取部分(nBF)对 α-淀粉酶的抑制作用较弱。
为了进一步验证体外实验的结果，我们以正常 ICＲ 小鼠和
四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠为模型，采用蔗糖、淀粉、葡萄糖为
负荷，主要观察石油醚萃取相(PF)和正丁醇萃取相(nBF)对小
鼠餐后血糖的影响。与体外实验结果一致，在以蔗糖为负荷时，
石油醚萃取部分(PF)均可降低正常 ICＲ 小鼠和四氧嘧啶诱导
的高血糖小鼠餐后各时间点的血糖值，其血糖曲线下面积与蔗
糖组对比明显降低，比阳性对照药阿卡波糖的效果略佳。正丁
醇萃取部分(nBF)也可降低正常 ICＲ小鼠和四氧嘧啶诱导的高
血糖小鼠的蔗糖负荷后各时间点的血糖值及减少曲线下面积，
但是效果不如 PF显著。以上结果提示:石油醚萃取部分(PF)
能够显著抑制正常及高血糖小鼠体内的 α-葡萄糖苷酶，使其在
蔗糖存在时，血糖升高的幅度降低。此外，我们以淀粉为负荷进
行同样的实验，结果如下:正丁醇萃取部分(nBF)可降低正常
ICＲ小鼠和四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠餐后血糖及曲线下面
积，但降低幅度远低于 PF，且低于阿卡波糖。
上述实验提示:与体外实验结果一致，正丁醇萃取部分
(nBF)抑制 α-淀粉酶的作用较弱，抑制作用明显低于石油醚萃
取部分(PF)和阿卡波糖。这提示我们该萃取部分在体内的胃
肠道反应将可能低于阿卡波糖。最后，我们的实验采用葡萄糖
为负荷进行实验，由于葡萄糖是单糖，石油醚萃取相(PF)和正
丁醇萃取相(nBF)对正常小鼠和四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠的
餐后血糖均无影响，与阿卡波糖作用相同，不直接影响葡萄糖
自肠道的吸收。
通过上述实验，我们发现西藏绿萝花成分石油醚相(PF)对
α-葡萄糖苷酶抑制作用较强，正丁醇相(nBF)对 α-淀粉酶影响
较弱，故我们推测:绿萝花在降低餐后血糖的同胃肠道反应可
能低于阿卡波糖，这将为西藏绿萝花作为 α-葡萄糖苷酶抑制剂
作为餐后降血糖药物的开发提供有力的支持。
参考文献
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Scindapsus aureus extracts on α-glucosidase inhibition and hypoglycemic effect
Zhang Xiaoying，Zhang Zhiying，Wang Pengxiang ，Sheng Yemeng，He xue
(Medical college of Tibet university for nationalities，Xianyang Shaanxi 712082)
Objective:To detect the inhibitory effect of Tibet Scindapsus aureus extracts on α-glucosidase and α-amylase，as well as hypoglycemic
effect after different glycemic load in normal and hyperglycemic mice．Methods:We extract the normal rat intestinal α-glucosidase and estab-
lish a micro-enzymatic reaction system，then evaluation different extracts of enzyme inhibition by IC50 ． In vivo ，taken ICＲ mice and alloxan
induced hyperglycemic mice as the model，we observe the effects of Scindapsus aureus extracts on mouse postprandial glucose after sucrose，
starch，glucose loads． Ｒesults:In three phase extractions of Scindapsus aureus，petroleum ether extract phase (PF)for α-glucosidase inhi-
bition is stronger，IC50 lower than the positive control drug acarbose． However ，extract by N-butanol(nBF)present a weak inhibitory effect on
α- glucosidase，the value of IC50 is 1． 227mg /ml as many as 3 times of acarbose＇s 0． 3837 mg /ml． Consistent with the in vitro results，the pe-
troleum ether extract phase(250mg /Kg)(PF)by intragastric administration could decrease glucose levels at each time after sucrose load in
normal ICＲ mice and alloxan-induced hyperglycemic mice． Compared with the sucrose group，the area under the curve (AUC )of blood glu-
011 中药药理与临床 2014;30(3)
cose decrease significantly，P﹤ 0． 05，as well as the hypoglycemic effect better than acarbose． The N-butanol phase (nBF)by intragastric
administration(250mg /kg )may also decrease glucose levels after starch load in normal ICＲ mice and alloxan-induced hyperglycemic mice at
each time and reduce the area under the curve，but the effect is not so clear as PF． As glucose the load，PF or nBF by intragastric administra-
tion(250mg /kg)can neither reduce postprandial hyperglycemia in normal and hyperglycemic mice． Conclusion:Tibet Scindapsus aureus ex-
tracts with petroleum ether (PF)for α-glucosidase inhibitory effect is obviously，n-butanol phase (nBF)effect on α-amylase is weak，both of
them can decrease postprandial blood glucose in normal mice and hyperglycemic mice on the load of sucrose and starch without affecting the
absorbtion of glucose．
Key words Scindapsus aureus(绿萝花);α-glucosidase;α-amylase hypoglycemic
波棱瓜子乙酸乙酯提取物对小鼠免疫性肝损伤的影响
*
陈 璐，张 梅＊＊，李春沁，何春杨，雷有成
(成都中医药大学药学院，中药材标准化教育部重点实验室，
中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，成都 611137)
摘 要 目的:观察藏药波棱瓜子乙酸乙酯提取物对卡介苗( BCG) 加脂多糖( LPS) 联合诱导免疫性肝损伤小鼠的保护作用。
方法:采用卡介苗联合脂多糖诱导造成免疫性肝损伤小鼠模型，ig 给予波棱瓜子乙酸乙酯提取物( 0． 25、0． 35、0． 51g /kg) 连续 12d，
比较各组脏器指数，测定小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶( ALT) 、天冬氨酸氨基转移酶( AST) 、一氧化氮( NO) 的含量及肝脏组织匀浆
中超氧化物歧化酶( SOD) 、丙二醛( MDA) 含量，HE染色切片观察肝组织病理学变化。结果:波棱瓜子乙酸乙酯提取物( 0． 25、0． 35、
0． 51g /kg) 可显著降低免疫性肝损伤小鼠的肝脏指数及脾脏指数;改善肝脏组织病理学变化; 降低肝损伤小鼠血清中 ALT、AST 水
平; 升高肝匀浆中 SOD活性，降低 MDA含量;但对血清中 NO含量无显著影响。结论:波棱瓜子乙酸乙酯提取物对 BCG + LPS诱导
小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用。
关键词 波棱瓜子，乙酸乙酯提取物，免疫性肝损伤
波棱瓜子为葫芦科波棱瓜属植物波棱瓜 Herpetospermum
caudigerum Wall．(H． pedunculosum (Ser．)Baill)的干燥成熟种
子。具有清腑热，胆热的功效，治疗赤巴入脏腑，肝、胆热症(肝
炎，胆囊炎)，消化不良等症。化学成分研究表明波棱瓜子主要
含有脂肪酸类、木脂素类及苯呋喃类成分［1，2］;现代药理研究表
明波棱瓜子具有抗化学性肝损伤、抗氧化、抗疲劳及抑制 HB-
sAg、HBeAg、HBV-DNA、抗鸭乙肝病毒等作用［3 ～ 7］。波棱瓜子乙
酸乙酯提取物(HE)中主要含有木脂素、香豆素类成分，是波棱
瓜子治疗肝胆疾病的重要有效成分，但目前未见波棱瓜子有效
部位对卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)诱发小鼠免疫性肝损伤保
护作用的研究报道。相关研究表明临床上乙型病毒肝炎，其肝
损伤主要是由免疫介导［8］，故采用免疫性肝损伤模型更有利于
我们研究和筛选治疗乙肝的药物。本研究探讨 HE 对 BCG 联
合 LPS诱导的免疫性肝损伤的影响，为进一步研究其有效物质
基础及机制奠定基础。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 波棱瓜子，2012 年 9 月购于四川甘孜，经成都
中医药大学药学院裴瑾教授鉴定为葫芦科植物波棱瓜 Herpeto-
spermum caudigerum Wall．(H． pedunculosum (Ser．)Baill)的干
燥成熟种子;联苯双酯滴丸，浙江医药股份有限公司新昌制药
厂，批号:110805，每丸 1． 5mg。
1． 2 动物 昆明种小鼠，SPF级，雄性，60 只，体重 18 ～ 22g，购
于成都达硕实验动物有限公司，动物合格证:SCXK(川)2008-
24。
1． 3 试剂 卡介苗(BCG，北京天坛生物制品研究所，批号:
20120312);脂多糖(LPS，美国 sigma，型号:L2880);丙氨酸氨基
转移酶(ALT，批号:20130523)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST，
批号:20130518)、超氧化物歧化酶(T-SOD，批号:20130516)、丙
二醛(MDA，批号:20130520)、总蛋白(TP，批号:20130518)、一
氧化氮(NO，批号:20130515)试剂盒(南京建成生物工程研究
所)。
1． 4 仪器 UV1100 紫外分光光度计。
1． 5 方法
1． 5． 1 波棱瓜子乙酸乙酯提取物的制备 取波棱瓜子粗粉，移
入圆底烧瓶，用 10 倍、8 倍、6 倍量的 95%乙醇水浴回流提取三
次，时间分别为 2h、1． 5h、1． 5h。合并提取液，旋蒸蒸发回收乙
醇得浸膏，冷却。浸膏分层后将上层绿色油状物弃去，用石油醚
洗涤下层黄色固体。黄色固体水分散后用乙酸乙酯萃取 3 次，
干燥得棕黄色粉末，即为波棱瓜子乙酸乙酯提取物，其提取率约
1． 25%。根据给药剂量，用 0． 5% CMC-Na 溶液混悬，2 ～ 8℃保
存，备用。
1． 5． 2 小鼠免疫性肝损伤造模及给药方案 将 60 只昆明小鼠
111中药药理与临床 2014;30(3)
* 基金项目: 四川省科技支撑项目( 2013SZ0114) ＊＊通讯作者
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2014.03.035