全 文 ： ［收稿日期］ ２０１１－１２－０５；２０１２－０３－３０修回
［基金项目］ 国家教育部青年骨干教师访学基金项目“天然药物”［武汉中心函（２０１１）４］
［作者简介］ 梁玉勇（１９６６－），男，副教授，从事药用植物教学及科研工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｙｙ１９６６０４＠１２６．ｃｏｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１２）０５－０２３５－００１２－０５
薏苡愈伤组织的诱导与分化
梁玉勇１，左北梅２，张著明３
（１．铜仁职业技术学院，贵州 铜仁５５４３００；２．天津科技大学，天津３０００００；３．贵州省玉屏县田坪
镇长岭村薏苡基地，贵州 玉屏５５４４３１０）
［摘 要］为薏苡优良品种的脱毒快繁和基地化脱毒种苗的生产提供科学依据，以薏苡气生根、种子胚、
嫩茎为材料，研究了２，４－Ｄ、ＫＴ、ＮＡＡ不同浓度配比对愈伤组织的诱导、分化和成苗的影响。结果表明，ＫＴ
是薏苡芽分化及脱毒种苗生成的主要影响因素，气生根是诱导胚性愈伤组织及胚状体最合适的外植体，其最
佳分化培养条件为 ＭＳ＋２，４－Ｄ ０．４ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．８ｍｇ／Ｌ，最佳成苗培养基为 ＭＳ＋２，４－
Ｄ ０．４ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ １．０ｍｇ／Ｌ。
［关键词］气生根；胚状体；生长激素；薏苡
［中图分类号］Ｓ５１９ ［文献标识码］Ａ
Ｃａｌｉ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｉｘ ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ
ＬＩＡＮＧ Ｙｕ－ｙｏｎｇ１，ＺＵＯ Ｂｅｉ－ｍｅｉ ２，ＺＨＡＮＧ Ｚｈｕ－ｍｉｎｇ３
（１．Ｔｏｎｇｒｅｎ Ｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃ，Ｔｏｎｇｒｅｎ，Ｇｕｉｚｈｏｕ ５５４３００；２．Ｔｉａｎｊｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，
Ｔｉａｎｊｉｎ３０００００；３．Ｃｏｉｘ Ｌａｃｈｒｙｍａｌ－ｊｏｂｉ Ｐｌａｎｔ Ａｒｅａ，Ｃｈａｎｇｌｉｎｇ Ｖｉｌｌａｇｅ，Ｔｉａｎｐｉｎｇ Ｔｏｗｎ，Ｙｕｐｉｎｇ，
Ｇｕｉｚｈｏｕ５５４３１０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｏｘｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒａｐｉｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｎｅ ｖａｒｉｅｔｙ ｏｆ
Ｃ．ｌａｃｈｒｙｍａｌ－ｊｏｂｉ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｒｕｅ－ｆｒｅｅ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｉｎ ｐｌａｎｔ ａｒｅａ，ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｍｉｘｅｄ ２，４－Ｄ，ＫＴ，ＮＡＡ ｏｎ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｗａｓ
ｒｅｓｅａｒｃｈｅｄ．Ｔｈｅ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｏｆ ｔｈｉｓ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｗｅｒｅ ａｅｒｉａｌ ｒｏｏｔ ｏｆ Ｃ．ｌａｃｒｙｍａ－ｊｏｂｉ，ｓｅｅｄ ｅｍｂｒｙｏ ａｎｄ ｓｐｅａｒｓ．
Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ＫＴ ｗａｓ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｆａｃｔｏｒ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ．ｌａｃｒｙｍａ－ｊｏｂｉ ｓｐｅａｒｓ ａｎｄ
ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｖｉｒｕｓ－ｆｒｅｅ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ．Ａｅｒｉａｌ ｒｏｏｔ ｗａｓ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｆｏｒ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｃａｌｕｓ
ａｎｄ ｅｍｂｒｙｏｉｄ ａｎｄ ｉｔｓ ｏｐｔｉｍａｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ＭＳ ＋２，４－Ｄ ０．４ ｍｇ／Ｌ＋ ＫＴ
１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．８ｍｇ／Ｌ，ｉｔｓ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ＭＳ＋２，４－Ｄ ０．４ｍｇ／Ｌ＋ ＫＴ １．５ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ １．０ｍｇ／Ｌ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ａｅｒｉａｌ ｒｏｏｔ；ｅｍｂｒｙｏｉｄ；ｇｒｏｗｔｈ ｈｏｒｍｏｎｅ；Ｃｏｉｘ ｌａｃｈｒｙｍａｌ－ｊｏｂｉ
禾本科植物薏苡（Ｃｏｉｘ ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ Ｌ．）以干
燥种仁入药，又名薏苡仁、薏苡米、苡米、六谷子、药玉
米等，具有健脾利湿、清热排脓之功效。主产贵州、江
苏、四川、河北、辽宁等省，全国各地均有栽培。薏苡
在贵州兴义、黔东南、铜仁等地区有大面积栽培。
薏苡种植通常是农户自行留种，传统的消毒处
理通常难以彻底清除黑粉病、叶斑病病菌，病菌孢子
能够在短时间内借助风力及水流迅速传播［１］，我国
各地薏苡栽培多以当地农家品种为主，对由薏苡黑
粉病菌 Ｕｓｔｉｌ ａｇｏ ｃｏｉｃｉｓ引起的黑粉病抗性普遍较
差，黑粉病可使其产量下降３０％～５０％，严重时减产
８０％［２］。因此，薏苡脱毒苗的应用是实现其安全生产
的关键。周晓丽等［３］用薏苡叶片和种子胚轴获得再
生植株，而用薏苡的气生根获得再生脱毒植株还没有
相关报道。为拓展获得薏苡脱毒再生植株的途径，笔
者采用气生根、种子胚、嫩茎为试验材料，通过２，４－Ｄ、
ＫＴ和ＮＡＡ ３种激素不同浓度配比对胚性愈伤组织
的诱导和分化，培养薏苡再生脱毒植株，以期为薏苡
优良品种的脱毒快繁和基地化脱毒种苗的生产提供
科学依据，并减少农药施用量，使生产的薏苡符合中
药材生产质量管理规范（ＧＡＰ）的要求［４］。
１ 材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ 薏苡 为矮秆早熟薏苡品种黔东１号，取
当年生的成熟种子，采用种子作为外植体。
１．１．２ 培养基 脱毒培养基为固体培养基
（ｐＨ ５．８），ｐＨ 计采用微机型ｐＨ（ＢＰＨ－３０５），大连
贝尔分析仪器有限公司生产。１）菌检培养基。以
ＭＳ为培养基，不加任何激素，北京康倍斯科技有限
公司提供原粉。２）愈伤分化诱导及成苗培养基。
以 ＭＳ为基本培养基，分别添加不同浓度的 ＫＴ、
２，４－Ｄ和ＮＡＡ激素。
１．２ 方法
１．２．１ 薏苡种子传统消毒对比试验 ２０１１年９月
３０日用当年成熟的薏苡种子在无菌环境下采用高
温烫种（１０ｓ）、石灰水浸泡（２４ｈ）、多菌灵浸种处理
（５ｈ），将消毒处理的种子接入 ＭＳ培养基培养
贵州农业科学 ２０１２，４０（５）：１２～１６
Ｇｕｉｚｈｏｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
１０ｄ，统计种子带菌污染数、成活数，考察不同传统
消毒方法对薏苡的消毒效果。
１．２．２ 次氯酸钠和升汞对外植体的消毒效果对比
试验 以薏苡种子为外植体，在超净工作台中将
１００粒种子放入已灭菌的烧杯中，用７５％酒精浸泡
２ｍｉｎ，无菌水冲洗 ３ 次，分别倒入体积分数为
１０．０％的次氯酸钠（７５ｍＬ）和０．１％升汞，磁力搅拌
浸泡 时 间 分 别 为 ５ｍｉｎ、１０ｍｉｎ、１５ｍｉｎ、２０ｍｉｎ、
２５ｍｉｎ和３０ｍｉｎ，最后用无菌水冲洗５～８次，每个
处理重复６次。将种子材料接入盛有 ＭＳ培养基的
培养皿中培养２～５ｄ，统计种子污染率。将无菌种
子进行转接培养。培养温度（２５±３）℃，光照强度
３ ０００ｌｘ。考察次氯酸钠和升汞不同处理时间对薏
苡种子外植体污染率的影响。
１．２．３ 不同浓度２，４－Ｄ对薏苡气生根的诱导及培
养 将已发芽的无菌种子分别接入 ＭＳ＋不同浓度
２，４－Ｄ 的 培 养 基 （０．４ｍｇ／Ｌ，０．６ｍｇ／Ｌ，０．ｍｇ／Ｌ，
１．０ｍｇ／Ｌ，１．２ｍｇ／Ｌ），每瓶接５粒种子，每个培养基３
次重复，培养１５ｄ后统计气生根的条数和重量。培养
温度（２５±３）℃，光照强度３ ０００ｌｘ。考察不同浓度
２，４－Ｄ对薏苡气生根的诱导及培养的效果。
１．２．４ 不同器官外植体的愈伤组织及胚状体培养
取经无菌培养得到的薏苡苗嫩茎放到铺有滤纸的无
菌培养皿内，用解剖刀切成５～１０ｍｍ小段（接种的
嫩茎不能带有叶鞘），用解剖剪剪取诱导出的薏苡气
生根，剪口插入培养基，气生根根尖朝上；在无菌条
件下除去外包坚硬的总苞，取出种子，用１０％次氯
酸钠（７５ｍＬ）消毒２０ｍｉｎ，无菌水冲洗５～８次，放入
已灭菌的培养皿中，用解剖刀把胚和胚乳剥离出，用
作外 植 体。将 嫩 茎、气 生 根、胚 外 植 体 接 入
ＭＳ＋２，４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ １．０ｍｇ／Ｌ培养基上，
每瓶接３个外植体，每批接３０瓶，重复３次，１５ｄ后
转入ＭＳ＋２，４－Ｄ ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ １．０ｍｇ／Ｌ继代。
继代３０ｄ后，考察叶片、气生根、胚外植体培养的愈
伤组织及胚状体情况。
１．２．５ ３种激素不同浓度配比对薏苡气生根愈伤
组织芽分化及成苗的影响 用 ＭＳ作基本培养基，
分别添加不同浓度的ＫＴ、ＮＡＡ、２，４－Ｄ激素，进行３
因素３水平正交试验［５］（表１），考察３种激素对薏
苡气生根愈伤组织芽分化和成苗的影响。将气生根
愈伤组织移入设计好的培养基，每个组培瓶接５块，
表１ ３种激素不同浓度配比的薏苡组培正交试验水平
Ｔａｂｌｅ １ Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｌｅｖｅｌ ｏｆ Ｃ．ｌａｃｒｙｍａ－ｊｏｂｉ
ｕｎｄｅｒ ｔｈｒｅｅ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｍｇ／Ｌ
水平
Ｌｅｖｅｌ
Ａ
（２，４－Ｄ）
Ｂ
（ＫＴ）
Ｃ
（ＮＡＡ）
１ ０．４ １．０ ０．６
２ ０．６ １．５ ０．８
３ ０．８ ２．０ １．０
每编号２０瓶，重复２次，３０ｄ统计愈伤组织鲜重，计
算分化率及成苗率，考察 ＫＴ、ＮＡＡ、２，４－Ｄ对芽分
化及成苗的作用。
２ 结果与分析
２．１ 不同传统消毒方法对薏苡黑粉病和叶枯病病
菌的消毒效果
在无菌环境采用开水烫种、石灰和多菌灵浸种
的传统消毒方法处理薏苡带苞种子，其染菌率在
８０％以上，其中，开水烫种的为１００％，石灰浸种的
为９７％，多菌灵浸种的为８５％；污染率开水烫种和
石灰浸种的为１００％，多菌灵浸种的为９２％。说明，
传统方法对薏苡消毒的效果较差，其原因可能与薏
苡带苞播种有关。传统带苞消毒的种子在 ＭＳ培养
基上开始出现白色菌丝，随后转为淡红色，最后转为
黑色，在显微镜下观察有厚垣孢子，经李兴林教授鉴
定为薏苡黑粉病菌 Ｕｓｔｉｌ ａｇｏ ｃｏｉｃｉｓ，传统消毒的染
菌苗见图版－１。
２．２ 次氯酸钠和升汞处理对薏苡种子外植体污染
率和脱菌率的影响
由表２可见，１０％次氯酸钠、０．１％升汞随着处
理时间的延长，灭菌效果越好。相同处理时间的消
毒效果０．１％升汞优于次氯酸钠，但１０％次氯酸钠
浸泡处理２０ｍｉｎ可以彻底灭菌，彻底灭菌的无菌种
子见图版－２。
２．３ 不同浓度２，４－Ｄ对诱导薏苡气生根的影响
由表３可见，ＭＳ加低浓度（低于０．８ｍｇ／Ｌ）的
２，４－Ｄ，薏苡无菌种子能正常生根，随着２，４－Ｄ浓度
升高，薏苡植物的根生长受到抑制，从而促进薏苡气
生根的生长。２，４－Ｄ浓度高于１．０ｍｇ／Ｌ后薏苡植
物气生根生长旺盛，此时气生根收获量最大。薏苡
的气生根伸向空气中，根毛浓密，白色，有很强的吸
收养分能力，诱导的气生根见图版－３。
表２ 次氯酸钠和升汞不同处理时间薏苡种子的脱毒效果
Ｔａｂｌｅ ２ Ｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃｏｉｘ ｓｅｅｄ ｕｎｄｅｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｔｉｍｅ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｈｙｐｏｃｈｌｏｒｉｔｅ ａｎｄ ｃｏｒｒｏｓｉｖｅ ｓｕｂｌｉｍａｔｅ
消毒剂
Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｏｒ
处理时间／ｍｉｎ
Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｔｉｍｅ
平均染菌率／％
Ａｖｅｒａｇｅ ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ
显著水平Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｌｅｖｅｌ
０．０５ ０．０１
１０％次氯酸钠 ５ ２６．４４ ｄ Ｄ
１０％ｓｏｄｉｕｍ ｈｙｐｏｃｈｌｏｒｉｔｅ １０ １９．３３ ｃ Ｃ
１５ １２．８９ ｂ Ｂ
２０ ０．００ ａ Ａ
０．１％升汞 ５ １９．５５ ｃ Ｃ
０．１％ｃｏｒｒｏｓｉｖｅ ｓｕｂｌｉｍａｔｅ １０ １２．００ ｃ Ｃ
１５ ０．００ ｂ Ｂ
２０ ０．００ ａ Ａ
·３１·
梁玉勇 等 薏苡愈伤组织的诱导与分化
ＬＩＡＮＧ Ｙｕ－ｙｏｎｇ ｅｔ ａｌ Ｃａｌｉ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｉｘ ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ
表３ 不同浓度２，４－Ｄ处理薏苡的气生根量
Ｔａｂｌｅ ３ Ａｅｒｉａｌ ｒｏｏｔ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ Ｃ．ｌａｃｒｙｍａ－ｊｏｂｉ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ２，４－Ｄ
浓度／（ｍｇ／Ｌ）
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
气生根条数／条Ａｅｒｉａｌ ｒｏｏｔ
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
气生根收获量
Ａｅｒｉａｌ ｒｏｏｔ ｙｉｅｌｄｉｎｇ／ｇ
Ⅰ Ⅱ Ⅲ 平均
显著水平
Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｌｅｖｅｌ
０．０５ ０．０１
０．４ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ｃ Ｃ
０．６ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ｃ Ｃ
０．８ １ ２ １ ０．０３４ ０．０６２ ０．０４５ ０．０４７ ｂ Ｂ
１ ４ ５ ３ ０．１３６ ０．１４２ ０．１２９ ０．１３６ ａ Ａ
１．２ ５ ６ ４ ０．１４８ ０．１５０ ０．１４０ ０．１４６ ａ Ａ
注：无菌种子重量（０．０９３±０．００１）ｇ，不考虑种子重量对气生根生长的影响。
Ｎｏｔｅ：Ｓｔｅｒｉｌｅ ｓｅｅｄ ｗｅｉｇｈｔ（０．０９３±０．００１）ｇ，ｓｅｅｄ ｗｅｉｇｈｔ ｗｉｔｈｏｕｔ ｃｏｎｓｉｄｅｒｉｎｇ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ａｅｒｉａｌ ｒｏｏｔｓ．
２．４ 不同器官外植体对诱导胚性愈伤组织和胚状
体的影响
薏苡气生根、成熟胚、嫩茎３种外植体各自接种
于ＭＳ＋２，４－Ｄ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ １．０ｍｇ／Ｌ培养基，
都诱导出愈伤组织，其中，气生根诱导的愈伤组织增
重最大，而且紧实，绿黄色。气生根接种３ｄ后可见
空气中一端膨大出现细小的乳黄色愈伤组织，２５～
３０ｄ愈伤组织快速棒状增粗（图版－４）；棒状愈伤继
代培养后分化出细小的乳头愈伤（图版－５）；随后棒
状愈伤乳头转为淡黄绿色，有光泽、紧实，成刺猬状
分化（图版－６）；每个刺状乳头分化１个裂片，部分呈
针状叶胚状体（图版－７）；针状叶胚状体也易与愈伤
组织分离，进一步长成根茎叶齐全的脱毒再生植株
小苗（图版－８）。接种后１０ｄ薏苡胚盾片处有微量肿
胀，接种１５ｄ小盾片上的愈伤组织膨大为乳白色颗
粒状，接种后２０ｄ开始现类似叶针点芽。接种后１５
ｄ嫩茎两头肿大成浅黄色，接种后２５ｄ产生淡黄色
的愈伤组织，该愈伤组织易褐变死亡。由表４可知，
气生根是诱导胚性愈伤组织及胚状体最合适的外植
体，优于成熟胚和嫩茎。
２．５ 不同生长调节剂配比对气生根愈伤组织芽分
化及成苗的影响
由表５～６看出，３种激素对分化率的影响为
Ｂ（ＫＴ）＞Ａ（２，４－Ｄ）＞Ｃ（ＮＡＡ），其中，Ｂ和 Ａ因素
对分化率影响极显著（Ｐ＜０．０１），Ｃ因素对分化率
影响不显著。直观看出，最优分化培养条件为
Ａ１Ｂ２Ｃ２，与极差分析结果相吻合，即最优分化培养
条件为 ＭＳ＋２，４－Ｄ ０．４ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ １．５ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ ０．８ｍｇ／Ｌ。
对成苗率的影响为 Ｂ（ＫＴ）＞Ｃ（ＮＡ Ａ）＞Ａ
（２，４－Ｄ）。其中，Ｂ和Ｃ因素对成苗率影响均极显著
（Ｐ＜０．０１），Ａ对成苗率影响不显著。最优成苗培
养基 组 合 直 观 表 现 为 Ａ２Ｂ２Ｃ３ （ＭＳ＋２，４－Ｄ
０．６ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ １．０ｍｇ／Ｌ），但与
极差分析结果不吻合，故取 Ａ１Ｂ２Ｃ３（ＭＳ＋２，４－Ｄ
０．４ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ １．０ｍｇ／Ｌ）组合进
行最优成苗率培养基配方检验。结果表明，Ａ１Ｂ２Ｃ３
（ＭＳ＋２，４－Ｄ ０．４ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
１．０ｍｇ／Ｌ）组合的成苗率为７７．７３％，成苗率和幼苗
长 势优于Ａ２Ｂ２Ｃ３。故最优成苗培养基组合为
表４ 不同器官外植体诱导愈伤组织及胚状体试验结果比较
Ｔａｂｌｅ ４ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｇａｎｓ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｃａｌｕｓ ａｎｄ ｅｍｂｒｙｏｉｄ
外植体
Ｅｘｐｌａｎｔ
接种量／ｇ（ｘ±ＳＤ）
Ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ
ｑｕａｎｔｉｔｙ
愈伤组织收获量／ｇ
Ｃａｌｕｓ
ｙｉｅｌｄｉｎｇ
愈伤组织诱导率／％
Ｃａｌｕｓ
ｉｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ
胚状体诱导率／％
Ｅｍｂｒｙｏｉｄ
ｉｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ
生长状态
Ｇｒｏｗｉｎｇ
ｓｔａｔｕｓ
气生根 Ａｅｒｉａｌ ｒｏｏｔ ０．００５ ６±０．００１ ０．０５６ ３±０．００７ ３ ９２．７４ ８１．５６ 淡黄绿色、有很多胚状体
成熟胚 Ｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏ ０．０２１±０．００１ ０．０８４±０．００４ ２ ８７．３５ ６２．３１ 褐黄色、有少量胚状体
茎Ｓｔａｌｋ ０．０３５±０．００１ ００．０７６±０．００２ ６ ２５．４７ ０ 乳黄色、无胚状体
表５ 不同激素调节剂配比的芽分化率及成苗率
Ｔａｂｌｅ ５ Ｔｈｅ ｂｕｄｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｔｏｃｋｉｎｇ ｐｅｒｃｅｎｔ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｑｕａｎｔｉｔｙ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
因素水平／（ｍｇ／Ｌ）
Ｆａｃｔｏｒ ｌｅｖｅｌｓ
Ａ
（２，４－Ｄ）
Ｂ
（ＫＴ）
Ｃ
（ＮＡＡ）
分化率／％
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ
Ⅰ Ⅱ 平均
Ａｖｅｒａｇｅ
成苗率／％
Ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｒａｔｅ
Ⅰ Ⅱ 平均
Ａｖｅｒａｇｅ
１ ０．４ １．０ ０．６ ５６．１３ ５８．８０ ５７．４７ ４４．１２ ４５．２５ ４４．６９
２ ０．４ １．５ ０．８ ７４．１４ ７６．１７ ７５．１６ ４６．６４ ４８．７３ ４７．６９
３ ０．４ ２．０ １．０ ３９．１２ ４３．２５ ４１．１９ ３１．０１ ３３．８３ ３２．４２
４ ０．６ １．０ ０．８ ４８．８１ ４６．８３ ４７．８２ ３１．１１ ３２．８１ ３１．９６
５ ０．６ １．５ １．０ ７０．６２ ７２．５４ ７１．５８ ６０．０６ ５８．１２ ５９．０９
６ ０．６ ２．０ ０．６ ３９．０１ ３６．１８ ３７．６０ ２０．５４ ２６．２２ ２３．３８
７ ０．８ １．０ １．０ ３８．１２ ４０．１３ ３９．１３ ３３．２３ ３６．１１ ３４．６７
８ ０．８ １．５ ０．６ ６１．３６ ６２．１５ ６１．７６ ５３．２４ ５２．４１ ５２．８３
９ ０．８ ２．０ ０．８ ３８．０６ ３４．１１ ３６．０９ ２２．１３ ２２．２５ ２２．１９
·４１·
贵 州 农 业 科 学
Ｇｕｉｚｈｏｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
表６ 薏苡正交试验极差分析的分化率和成苗率的Ｋ及Ｒ值
Ｔａｂｌｅ ６ Ｋａｎｄ Ｒｖａｌｕｅｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｔｏｃｋｉｎｇ ｒａｔｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃ．ｌａｃｒｙｍａ－ｊｏｂｉ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｒａｎｇｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
项目
Ｉｔｅｍ
分化率 Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ
Ａ（２，４－Ｄ） Ｂ（ＫＴ） Ｃ（ＮＡＡ）
成苗率Ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｒａｔｅ
Ａ（２，４－Ｄ） Ｂ（ＫＴ） Ｃ（ＮＡＡ）
Ｋ１ １７３．８２ １４４．４２ １５６．８３ １２４．８ １１１．３２ １２０．９０
Ｋ２ １５７．００ ２０８．５０ １５９．０７ １１４．４３ １５９．６１ １０１．８４
Ｋ３ １３６．９８ １１４．８８ １５１．９０ １０９．６９ ７７．９９ １２６．１８
ｋ１ ５７．９４ ４８．１４ ５２．２８ ４１．６０ ３７．１１ ４０．３０
ｋ２ ５２．３３ ６９．５０ ５３．０２ ３８．１４ ５３．２０ ３３．９５
ｋ３ ４５．６６ ３８．２９ ５０．６３ ３６．５６ ２６．００ ４２．０６
Ｒ １２．２８ ３１．２１ ２．３９ ５．０４ ２７．２１ ８．１１
注：１，传统消毒的染菌苗；２，无菌种子；３，诱导的气生根；４，棒状愈伤组织；５，乳突愈伤组织；６，刺猬状分化；７，针状叶胚状体；８，再生植
株；９，成活的脱毒植株。
Ｎｏｔｅ：１，Ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ ｓｅｅｄ ｂｙ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ；２，Ｓｔｅｒｉｌｅ ｓｅｅｄｓ；３，Ｉｎｄｕｃｅｄ ａｅｒｉａｌ ｒｏｏｔｓ；４，Ｒｏｄ－ｓｈａｐｅｄ ｃａｌｕｓ；５，Ｍａｓｔｏｉｄ ｃａｌｕｓ；
６，Ｈｅｄｇｅｈｏｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ；７，Ａｃｉｃｕｌａｒ ｌｅａｆ ｅｍｂｒｙｏｉｄ；８，Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｐｌａｎｔ；９，Ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖｅｄ ｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｐｌａｎｔ．
图版 薏苡愈伤组织的诱导与分化结果
Ｆｉｇ． Ｔｈｅ ｃａｌｉ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ．ｌａｃｒｙｍａ
Ａ１Ｂ２Ｃ３，即 ＭＳ＋２，４－Ｄ ０．４ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ １．５ｍｇ／Ｌ
＋ＮＡＡ １．０ｍｇ／Ｌ。选择生长健壮、根系发达、带
３～４叶的试管苗放置培养室外炼苗２～３ｄ后，用镊
子小心将苗取出，洗去根部培养基，用８００倍多菌灵
消毒后，栽入已灭菌的蛭石基质（蛭石∶河沙＝２∶
１）中，成活的脱毒植株（图版－９）移栽适宜温度为
２０～２５℃，注意保湿。移栽１周后，每周喷施营养液
１～２次，４０ｄ左右即可移至大田定植，移栽成活率
达９０％以上。
３ 小结
１）目前，薏苡种植通常是农户自己留种，所采
用的传统消毒处理对黑粉病、叶斑病消毒不彻底。
试验结果表明，开水烫种、石灰和多菌灵浸种等传统
消毒方法处理薏苡带苞种子，其染菌率在８０％以
上，因此，对薏苡种子的消毒不宜采用传统消毒法。
２）组织培养时外植体的消毒试剂多为升汞，而
升汞为剧毒化学试剂，被列为公安部管制化学药品，
因此，组织培养时外植体消毒处理急需寻找替代消
毒试剂。试验结果表明，１０％次氯酸钠浸泡处理
２０ｍｉｎ的消毒效果与０．１％升汞浸泡１５ｍｉｎ的处理
效果相当，说明，次氯酸钠可替代升汞作为外植体消
毒试剂。
３）薏苡为单子叶植物，种子能耐高浓度２，４－Ｄ，
而高浓度２，４－Ｄ对植物的根生长有抑制作用。因
此，ＭＳ加高浓度的２，４－Ｄ，薏苡植物的根生长受到
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梁玉勇 等 薏苡愈伤组织的诱导与分化
ＬＩＡＮＧ Ｙｕ－ｙｏｎｇ ｅｔ ａｌ Ｃａｌｉ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｉｘ ｌａｃｈｒｙｍａ－ｊｏｂｉ
抑制，而促进薏苡气生根的生长。试验结果表明，
２，４－Ｄ浓度高于１．０ｍｇ／Ｌ后薏苡的气生根生长旺
盛，气生根收获量大。
４）在薏苡气生根、成熟胚、嫩茎３种外植体中，
气生根是诱导胚性愈伤组织及胚状体最合适的外植
体，优于成熟胚和嫩茎。对气生根进行组织培养时，
其最优分化培养条件为 ＭＳ＋２，４－Ｄ ０．４ｍｇ／Ｌ＋
ＫＴ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．８ｍｇ／Ｌ，最优成苗培养基组
合 ＭＳ＋２，４－Ｄ ０．４ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
１．０ｍｇ／Ｌ。
４ 讨论
１）在薏苡胚状体分化培养过程中，２，４－Ｄ的浓
度因消耗而渐渐减弱，避免了高浓度的２，４－Ｄ抑制
薏苡根的生长，而ＮＡＡ、６－ＢＡ促进薏苡胚状体长芽
生根，从而可获得更多薏苡脱毒苗。通过２，４－Ｄ、
ＮＡＡ、６－ＢＡ不同浓度的配比，可以实现薏苡愈伤诱
导、增值及生根成苗的一步培养［６］。
２）薏苡气生根脱毒为无性繁殖，可以保留植株
优良性状，能够短时间内迅速大量薏苡优良植株，用
于大规模生产性状稳定的薏苡优良种子；薏苡脱毒
苗也可以通过种子脱毒进行有性繁殖获得，其培养
时间短，不需要炼苗直接移栽，成本低，易推行，但植
株性状不稳定，仅用于育种研究。
［参 考 文 献］
［１］ 宋德勋．药用植物栽培学［Ｍ］．贵阳：贵州科技出版
社，２０００：２９１－２９２．
［２］ 朱立强，刘根节．薏苡黑穗病的防治［Ｊ］．特种经济动
植物，２００５（１０）：３９．
［３］ 周晓丽，杨文杰，奚春荣，等．薏苡的组织培养及其过
氧化物酶分析［Ｊ］．东北师范大学学报：自然科学版，
１９９１（１）：９９－１０２．
［４］ 无公害中药材生产技术编辑委员会．无公害中药材生
产技术［Ｍ］．北京：中国农业出版社，２００５：１０－１４．
［５］ 王良信．实用中药材田间试验守则［Ｍ］．北京：中国医
药科技出版社，２０００：４１－４４．
［６］ 颜昌敬，黄剑华．小麦组织培养一步成苗［Ｊ］．上海农
业学报，１９８６（２）：１９－２５．
（责任编辑：姜 萍
櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁櫁
）
（上接第１１页）
２．３ 品质
２００９年经贵州省师范大学分析测试中心检测，
贵阳试点黔椒７号的干物质、ＶＣ、辣椒碱和二氢辣
椒碱含量分别为１９．４％、１６８ｍｇ／１００ｇ、０．００４ ５％和
０．００１ ８％，分别比对照 （遵椒 ２ 号）高 １．３６％、
１．３２％、３．１１％和２．８９％，属中等辣味线椒新品种。
３ 特征特性及栽培技术要点
３．１ 特征特性
黔椒７号株高６２．２ｃｍ，开展度６２ｃｍ×５０ｃｍ，
分枝次数１３．９５次，单株结果２５．９１个，平均单果鲜
重１２．３８ｇ，单果干重２．８０ｇ，果长１６．４４ｃｍ，果宽
１．７６ｃｍ，果型指数９．３４，在贵州全生育期为２００ｄ
左右，定植到始收为５８ｄ，始收到完熟为５０ｄ，属于
制干线椒中早熟、耐采收、高产新品种。果面微皱，
鲜椒干物质含量１９．４％，ＶＣ 含量１６８ｍｇ／１００ｇ，辣
椒碱 和 二 氢 辣 椒 碱 含 量 分 别 为 ０．００４ ５％ 和
０．００１ ８％，味微辣，田间表现抗逆性强，结果性好，
平均单产干椒２７９．９８ｋｇ／６６７ｍ２。
３．２ 栽培技术要点
１）贵州暖热地区１０月中旬播种，１月中旬定
植；温热地区１１月中旬播种，２月中旬定植；温和地
区１２月下旬播种，３月中旬定植；冷凉地区２月中
旬播种，４月中旬定植。定植密度３ ３００穴／６６７ｍ２
左右，双株定植规格３５ｃｍ×５０ｃｍ，单株定植规格为
２５ｃｍ×３０ｃｍ。
２）针对该品种早熟、挂果多的特点，适当提早
播种，适当密植可增加早期产量。
３）增施基肥，早施、勤施追肥。
４）黔椒７号品种适宜做制干辣椒早熟栽培，适
宜贵州辣椒产区或省外相似生态区栽培。采用大
棚、拱棚、地膜等设施栽培，经济效益更佳。
［参 考 文 献］
［１］ 夏兴勇．第六届全国辣椒产业大会暨贵州国际辣椒节
开幕［Ｊ］．辣椒杂志，２０１１（３）：１４．
［２］ 张绍刚，张太平，龙明树，等．贵州辣椒产业及优势区
域布局［Ｊ］．中国蔬菜，２００８（１１）：５－７．
［３］ 胡明文．贵州辣椒产业现状与发展策略［Ｊ］．贵州农业
科学，２００５，３３（增刊）：９８－１００．
［４］ 李锡香，张宝玺．辣椒种质资源描述规范和数据标准
［Ｓ］．北京：中国农业出版社，２００６．
（责任编辑：陈 静）
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贵 州 农 业 科 学
Ｇｕｉｚｈｏｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ