全 文 ：FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食 品 科 技
2008年 第 33卷 第 12期
Study on antimicrobial effect of the extract from Lophatherum gracile
Brongn
LIU Xiao-rong，ZHANG Yuan-yuan
(Department of Food, Guangdong Industry Technical College, Guangzhou 510300)
Abstract: Antimicrobial character of the extract from Lophatherum gracile Brongn. was studied. The results
showed that the extract could effectively inhibit the growth of bacterium, but not obviously to fungi. The MIC
(Minimum Inhibition Concentration) was as follows: 6.2% to Staphylococcus aureus, 12.5% to Streptococcus
haemolyc, Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli. The extract also had very good temperature stability
and it could be effective from pH 4~9. Antimicrobial effect on several common food of extract was obvious.
Key words: Lophatherum gracile Brongn; extract; antimicrobe
食品的腐败变质主要由微生物引起[1]。食品生
产、加工和贮藏过程中，防腐剂有很重要的应用
价值。由于某些合成防腐剂具有一定的毒副作用，
人们趋向于使用天然物质作为食品防腐剂。目前，
筛选具有抑菌作用的天然食品防腐剂已成为食品
科学领域研究的一个热点。
淡竹叶为禾本科多年生草本植物淡竹叶
(Lophatherum gracile Brongn.)的茎叶。野生于山坡
林下或沟边阴湿处，分布于长江流域和华南、西
南地区[2]。据《现代实用中药》，淡竹叶具有“清凉
解热，利尿。治热病口渴，小便涩痛，烦热不寐，
牙龈肿痛，口腔炎”的功效。
本文对淡竹叶提取物的抑菌效果作一些探索，
以讨论其作为天然防腐剂的应用前景。
1 材料和方法
1.1 材料
淡竹叶购自中药店；供试果蔬为色泽均匀、
新鲜、表面无破损的葡萄、青椒和番茄。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、溶血
收稿日期： 2008-04-06
基金项目： 广东省科技工业攻关项目(2007B080701004)。
作者简介： 刘晓蓉(1973—)，女，硕士，讲师，主要从事食品微生物方面的研究与教学工作。
淡竹叶提取物抑菌作用的研究
刘晓蓉， 张媛媛
(广东轻工职业技术学院食品系，广州 510300)
摘要： 研究淡竹叶提取物的抑菌性能。结果表明：提取物对所试细菌有较强的抑制作用，而对
霉菌的抑制效果不明显；对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为 6.2%，对溶血性链球菌、绿脓杆
菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度都是 12.5%；耐热性好；抑菌 pH范围在 pH4~9之间；具有良好的
防腐保鲜效果。
关键词： 淡竹叶；提取物；抑菌
中图分类号： Q 946.8 文献标志码： A 文章编号： 1005-9989(2008)12-0211-03
提取物与应用
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DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2008.12.077
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食 品 科 技
2008年 第 33卷 第 12期
表 1 淡竹叶提取物的抑菌效果
供试菌株 抑菌圈直径/mm
金黄色葡萄球菌 25
溶血性链球菌 23
绿脓杆菌 20
大肠杆菌 16
黑曲霉 -
常见青霉 -
注：抑菌圈直径为5个重复的平均值；“-”表示没有抑菌效果或直径
小于10mm。
表 2 淡竹叶提取物的最低抑菌浓度(MIC)
提取物浓度
供试菌株
金葡菌 链球菌 绿脓杆菌 大肠杆菌
1/2 - - - -
1/4 - - - -
1/8 - - - -
1/16 - + + +
1/32 + + + 2+
1/64 + 2+ 2+ 2+
1/128 2+ 2+ 2+ 3+
1/256 2+ 3+ 3+ 3+
1/512 3+ 3+ 3+ 3+
不加提取物 3+ 3+ 3+ 3+
MIC/% 6.2 12.5 12.5 12.5
注：“+”表示肉汤浑浊，“+”前数值越大表示越浑浊；“-”表示
肉汤澄清。
性链球菌(Streptococcus haemolyc)、绿脓杆菌(Pseu-
domonas aeruginosa)、大肠杆菌 (Escherichia coli)、
黑曲霉(Aspergillus niger)、常见青霉(Penicillium fre－
quentans)：广东省微生物研究所提供。细菌用营养
肉汤和营养琼脂培养；霉菌采用 PDA培养基。
1.2 方法
1.2.1 淡竹叶提取物的制备 淡竹叶茎叶 1 g 干
燥，粉碎加入乙醇 20 mL回流提取 3次加入减压
浓缩成 1 mL，得到提取物。
1.2.2 菌悬液的制备 将上述菌用相应斜面培养
基活化 2次，以无菌生理盐水配制成菌体或孢子
浓度为 106~107 cfu/mL的菌悬液，备用。
1.2.3 抑菌作用的测定[3] 选用直径为 9 cm的培
养皿，每皿加 15 mL培养基，凝固后，移取各种
菌悬液 0.5 mL分别加入各平板上，涂布均匀，每
皿平稳、等距离放置 3个灭菌牛津杯，于其中滴
加提取物，对照加无菌生理盐水。每菌 5个重复。
霉菌 28 ℃培养 72 h，细菌 37 ℃培养 24 h。移去
牛津杯，量取各抑菌圈直径。
1.2.4 最低抑菌浓度(MIC)的测定[4] 提取物进行 2
倍稀释。取 10支无菌试管，各加灭菌营养肉汤 1
mL，第 1 管加原提取液 1 mL，混匀后吸取 1 mL
于第 2管，混匀后吸取 1 mL于第 3管，依次类推
到第 9管，弃去 1 mL，第 10管改加 1 mL无菌生
理盐水作为对照，然后每管内加入菌悬液 0.1 mL，
摇匀，37 ℃培养 24 h。结果判定：肉汤清亮透明
表示无细菌生长 (-)，肉汤浑浊表示有细菌生长
(+)，以能抑制细菌生长的提取物最高稀释度作为
其最低抑菌浓度。
1.2.5 耐热性的测定 将提取物分别在 60、80、
100 ℃下处理 15 min，按 1.2.3量取抑菌圈直径。
1.2.6 抑菌 pH范围的测定[5] 用自来水配制细菌
培养液，分装试管，配成 2份 pH4~9系列培养基，
分别取pH4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、
9，称为系列 1、系列 2；用提取物代替自来水，
同法配制 2 份 pH4~9 系列培养基，称为系列 3、
系列 4。
上述培养基均不灭菌，系列 1、3放入冰箱冷
藏，系列 2、4放入 37 ℃恒温箱培养 48 h。
以系列 1、3作对照，蒸馏水为空白试剂(吸光
度 A 吸=0)，用分光光度计分别测定相应 pH下的吸
光度 A吸系列值。
1.2.7 防腐保鲜初步试验 样品处理：供试葡萄、
青椒和番茄洗净、沥干；防腐初试：将果蔬样品
放入提取物中浸泡 2 min，取出晾干；装入无菌、
干燥的一次性碗中。每处理 5个重复，33 ℃阴凉
处存放 8 d。肉眼观察样品的变化情况。
2 结果与分析
2.1 提取物抑菌效果的测定
淡竹叶提取物的抑菌情况见表 1。
由表 1可知，淡竹叶提取物对所试细菌都具
有一定的抑菌效果，抑制作用的强弱顺序为：金
黄色葡萄球菌>溶血性链球菌>绿脓杆菌>大肠杆
菌；而对黑曲霉和常见青霉的抑菌效果不明显。
2.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定
提取物对供试细菌的最低抑菌浓度见表 2。
从表 2 可以看出，随着提取物浓度的增大，
抑菌能力也逐渐增强；不加提取物的对照试管内，
肉汤培养基很浑浊；提取物对金黄色葡萄球菌的
最低抑菌浓度最小，为 6.2%，对溶血性链球菌、
绿脓杆菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度都是 12.5%。
2.3 耐热性的测定
提取物与应用
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表 3 不同温度处理淡竹叶提取物的抑菌效果(mm)
供试菌株 对照 60 ℃ 80 ℃ 100 ℃
金葡菌 26 25 25 24
链球菌 24 23 24 22
绿脓杆菌 20 22 23 20
大肠杆菌 15 15 13 14
注：对照为不经处理的提取物；抑菌圈直径为5个重复的平均值。
pH
值
系列 2 系列 4
A吸 培养现象 A吸 培养现象
4 0.015 澄清 0.012 澄清
4.5 0.449 浑浊 0.012 澄清
5 0.455 浑浊、有沉淀 0.150 澄清
5.5 0.485 很浑浊、有沉淀 0.156 澄清
6 0.533 很浑浊、有大量沉淀、有菌膜 0.181 较澄清
6.5 0.544 很浑浊、有大量沉淀、有菌膜 0.184
较澄清，
稍有沉淀
7 0.492 很浑浊、有大量沉淀、有菌膜 0.157 澄清
7.5 0.482 很浑浊、有沉淀浑浊 0.125 澄清
8 0.469 浑浊、有沉淀 0.093 澄清
8.5 0.454 浑浊、有沉淀 0.031 澄清
9 0.411 浑浊、有沉淀 0.026 澄清
表 4 不同 pH系列培养物的吸光度值和培养现象
表 5 提取物对几种常见果蔬的防腐保鲜情况
时间/d 食品 对照 处理
0
葡萄 果实饱满，呈光亮的紫色 果实饱满，呈光亮的紫色
青椒 果硬，光滑，呈深青色 果硬，光滑，呈深青色
番茄 果硬，光滑，色彩鲜艳 果硬，光滑，色彩鲜艳
4
葡萄 有失水现象，枝干枯，枝果连接松散
果硬，枝果连接
紧密
青椒 果轻微失水，略呈黄色 稍变软，色泽不变化
番茄 表皮微皱缩，色彩鲜艳 果硬，光滑，色彩鲜艳
8
葡萄 软腐，颜色黑紫，汁液渗出，枝果分离 变软，颜色深紫
青椒 严重软腐，汁液渗出，黄红色
褐斑，松软，
无汁渗出
番茄 变软，颜色变深，梗脱落 稍萎蔫，仍保持硬度
注：对照为不浸泡提取物的样品。
提取物分别在 60、80、100 ℃下处理 15 min
后，测得其抑菌圈直径如表 3所示。
由表 3可得，经过高温处理的提取物，抑菌
效果与对照比较无显著差异，表明提取物对热具
有良好的稳定性。
2.4 抑菌 pH范围的测定
培养 48 h后，系列 2、4 的 A 吸值和培养现
象见表 4，空白对照分别为系列 1、系列 3。
由表 4可见，系列 4的吸光度值小于同 pH值
的系列 2，且系列 4 的浑浊度、沉淀量都小于同
pH 值的系列 2，系列 4 的各试管都未出现菌膜，
而系列 2 在 pH6~7范围内均出现菌膜。说明了系
列 4中杂菌生长浓度明显低于系列 2，表明提取物
在 pH4~9 条件下都具有较好的抑菌效果。此外，
多数菌在 pH7 附近生长旺盛，而在 pH 较低范围
内生长不好，是因为低 pH本身对细菌已具有一定
的抑制作用。
2.5 防腐保鲜结果
根据食品的不同性质，腐烂速度的不同，选
用葡萄、青椒和番茄作为研究对象，观察其外观
形态的变化。结果见表 5。
由表 5可得，经过提取物处理的果蔬贮藏效
果明显好于未经处理的。未处理的葡萄已经出现
腐烂，果枝分离；而经过保鲜的葡萄仅松软，尚
未出现褐斑。同样，未处理的青椒已经腐烂；而
经过保鲜的虽然出现褐斑，却未腐烂。番茄在贮
藏过程中，外观形态变化不是很大，未处理的变
软了，梗脱落；而经过处理的仍保持硬度。
3 结果与讨论
本实验中，淡竹叶提取物对所试细菌具有比
较好的抑制作用，而对所试霉菌的抑菌效果不明
显，抑菌浓度较低，pH 作用范围广，热稳定性
好。对果蔬的初步保鲜效果明显，可以延长食品
的贮藏期。
植物中的某些提取物如萜烯类、生物碱、类
黄酮、甾类、酚类、独特的氨基酸和多糖等都具
有杀虫和抗菌活性。资料表明，至少有 1389种植
物可能作为杀菌剂[6]。淡竹叶提取物的抑菌机理有
待进一步研究，食品在保鲜过程中生理特征的变
化有待深入探讨。
参考文献：
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Study on the extraction technology of chondroitin sulfate from squid
cartilage
CHEN Xiao-e, FANG Xu-bo, Yu Hui, SONG Ru
(School of Food and Pharmacy, Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316004)
Abstract: This article introduced a method of preparation chondroitin sulfate (Chs) from the squid cartilage
systemicly, the experimental procedures were performed by dilute alkali extraction and enzyme hydrolysis, the
technological parameter was optimized by orthogonal experimental design, and its physical and chemical char－
acteristics were also determined. The result shows the optimal techniques obtained are 4% alkali extracting at
40 ℃ with material and solvent ratio 1∶2.0, the optimum conditions of enzymatic hydrolysis temperature 55 ℃,
time 10 h and enzyme amount 2%. Under this condition, the white powder of Chs is obtained at yield rate of
23.1% and the purity of 90.21%, the main qualitative index of product conforms to standard requirements per－
fectly. Being identified by spectroscopic analysis, the main content of the product is Chs-C.
Key words: squid; chondroitin sulfate; extraction technology; identification
收稿日期： 2008-04-21
基金项目： 浙江省科技攻关项目(2007C12081，2007C33065)。
作者简介： 陈小娥，女，浙江浦江人，博士，主要从事海洋生物资源综合利用。
鱿鱼软骨中硫酸软骨素的
提取工艺研究
陈小娥， 方旭波， 余 辉， 宋 茹
(浙江海洋学院食品与药学学院，舟山 316004)
摘要： 对鱿鱼软骨提取硫酸软骨素的方法进行较系统的研究，实验采用稀碱浸提与蛋白酶水解
相结合的加工工艺，运用正交试验法对提取工艺参数进行优化，并对产品的质量指标进行了检
验。结果表明最佳提取工艺参数为：碱提取时料液比为 1∶4，碱浓度 2%，碱提温度 50 ℃；木瓜
蛋白酶的酶解温度为 55 ℃，酶量 2%，酶解时间 8 h，制备的硫酸软骨素为白色粉末，得率为
23.1%，纯度 90.21%，各项质量指标均符合标准要求。光谱分析法结构鉴定结果表明它的主要成
分为硫酸软骨素 C。
关键词： 鱿鱼；硫酸软骨素；提取工艺；鉴定
中图分类号： TS 254.9 文献标志码： A 文章编号： 1005-9989(2008)12-0214-04
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