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无色青霉菌株 W-49 133(Penicillium chrysogenum)产生青霉素的研究 Ⅰ.以国产原料棉籽饼代替玉蜀黍浆的摇瓶培养实验



全 文 :微 生 物 季 辍
第 1卷 第 I 期 5 7一 63真 x 95 3年 4月
热色青徽菌株 w. 41 93 3 (P en ie i一 li u m
c hr vso罗n u m)崖生青徽素的研究
1
. 以团崖原料棉籽爵代替玉蜀黍桨的摇瓶培羲青验
张焉申 徐李瑛 朱涛膺
(中央生物裂品研宪所抗生素室 , 北京 )
彦生青徽素的培餐基主要成分焉玉蜀黍紧典乳糖 ,玉蜀黍紧篇殿粉工巢的副
崖品 , 而我团殿粉工巢尚未登展 , 玉蜀黍紧的取拾 ,咸想自团外腊置 , 如要大量裂
造青徽素 , 则自团外腊置 ,颇不握鸿 ,业随晗有中断之虞 ,故希望能以现有的团崖原
料代替之 。 文默 [` 1上载并多踵含氮物如古巴馒箕糖稀 ( C u b a n h i g h 一 t e s r m o l a s s e s ) ,
拜克脱睐 ( B a e t o 一 p e p t o n e ) , 狄非可酵母粉 ( D i f e o y e a s t e x t r a e t ) , 溶解肝液 ( s o l u b i-
li z e d l iv e r )
, 天阴冬菜汁 ( a s p a r a g u s 一b u t t ju i e e ) , 草汁乾粉 ( g r a s s ju i e e p o w de r ) , 米
紧 ( r i e e s t e e p ) , 棉籽爵粉 ( e o t t o n 一 s e e d rn e a l e x t r a e t ) , 肝粉 ( g r o u o d l iv e r ) , 肝浸透
液 ( l iv e r i n f u s io n ) , 舆碎肉粉 ( m e a t一 s e r a p m e a l ) 等其功效速不如玉蜀黍桨 。 F o s t e r
等氏 [2 ]曾榆及青徽菌 x 一 1 6一2 典 Q 17 6二菌株如用棉籽爵 ( 。 o t t o n 一 s e e d rn e a l ) 焉氮
的来源 , 则青徽素 的崖量业不减方全原用之玉蜀黍紧 , 甚或遇之 。 量村 、 思誉徽 、温
形凡 vlt 曾裁用水解的棉籽爵以代替玉蜀黍紧 , 桔果良好 , 但水解棉籽爵手擅繁
多 ,如青徽菌能直接利用棉籽爵 ,则可省去水解遏程 。 燕色青徽菌株 w 一 49 13 的
青徽素崖量每毫升可连 1 , 50 Q罩位 , 且不分泌色素 , 封加提辣桔晶可以减少爵多
困靴 , 但此菌株能否利用棉籽爵 , lRJ 促未加以研究 。 本文 目的篇裁用 1 3 菌株能
否直接利用棉籽爵 , 同峙业培羲 Q l 夕6 典 13 二菌株方全玉蜀黍紧舆棉籽爵雨踵培
餐基中 ,此较其生畏情况 ,典青徽素之彦量 。
菌 踵
青徽菌株篇 Q 1 76 舆 W一 49 13 , 效值愉定用之菌踵焉金黄色葡萄球菌 2 0 9P
DOI : 10. 13343 /j . cnki . wsxb. 1953. 01. 004
5 s微 生 物 攀 报 l卷
( st a P 人夕 l o co c c“ , a “ r 。 “ , ) 。
培 责 基
. 抱子培餐基
培羲基 ( l)
甘油
葡萄糖

M g S O
` . 夕H : O
K H
, P O ;
N
a C I
培餐基 ( 11)
蜂蜜

嗅月旨
水 加至
.6 0 克
1
.
0 克
2
.
0 克
10 0 毫升
理月旨
水 加至
2
. 摇瓶培餐基
培羲基 ( 111)
玉蜀黍禁 (固艘 )
乳糖
N
a
N O
s
0
.
7 5 克
0
.
7 5 克
0
. 多 克
0
.
0 0 5 克
0
.
0 0 6克
0
.
4 克
2
.
, 克
1 0 0 毫升
培羲基 ( Iv )
棉籽爵 *
乳糖
N a N O
:
K H
: P O `
M g SO
` · 7 H : O
C a C 0 3
水 加至
2
.
0 克
4
.
0 克
0
.
3 克
0
.
0弓 克
0
.
0 2 5克
4
.
0 克
4
.
0 克
0
.
3 克
0
.
0 5 克
0
.
0 2 5克
1 0 0

毫升
K H
: P O `
M g S O
` · 7 H
: O
C a C O 。
水 加至
0
.弓
1 0 0

毫升
培 羲 方 法
1
. 抱子培餐
培餐 Q l夕6 晗用培餐基 ( l) , 13 则用培羲基 (H ) , 渲梯可以各得其最好的
抱子生畏 。 置 20 毫升抱子培羲基粉大贰管 (30 x 195 毫米 ) 中 , 加棉花塞 , 在 1 5
磅赓力下消毒 40 分绩 ,放成斜面 ,冷却援用燕菌操作自抱子沙土管 内用白金耳取
出少静合抱子的沙土 , 均匀的幢能斜面 _ L , 保持在 25 “ c 豹 ,一 7 日 , 侯畏出一厚
屠深释色抱子待 , 郎可愿用 。
. 所用栩籽饼铭北京中苹裂油薇榨取遇棉籽油的乾饼 , 磨韵目徒遇蹄 , 豹可得一牛粉末 。 用钒氏测氮法
测得其中含蛋白省量 38 . 4% 。
强焉申等 : 艇色青徽菌株 W一4 913 3 崖生青徽素的研咒 L
2
. 摇瓶的培蓑
置 1 0毫升培餐基 (m )或 ( w )朴 5 0 0毫升三角瓶中 ,培餐基的 p H 在未消
毒前稠筋篇 5 . 3一 , . 7 , 在 15 磅厘力下消毒 30 分撞 , 冷却徒接踵抱子 。 抱子撷谬
液的裂法 , 保转一已握生是良好的抱子大管中 , 加入 30 毫升消毒 的蒸馏水 ,用刮
棒将抱子刮起 ,均匀的恩着在水中 , 用大口 吸液管吸出 , 每涸三角瓶接踵 , 毫升 ,
放在 25 O c 保温室摇床上摇勤之 , 摇勤速度焉每分踵 96 次 ,操勤距雕焉 2 寸 。 每
隔 24 小待加淮 。 . 1另 甲苯乙酸纳 ,培蓑铭 小峙徒 ,每天取出样品 , 测定其青徽素
效僵 、 p H 典剩爵糖量 。
分 析 手 擅
1
. 乳糖的测定 ,按照 一 s ha 任 er 舆 oS m og iy s[] 方法 , 但需注意 , 乳糖之水解需
峙较畏 ,在 12 0 O c 需待 30 分撞 , 1 0 “ C 则需 2小晗 ,乳糖水解援典糖贰剩的作用
亦较慢 ,需峙 25 分锁 。
2
. 效僧愉定 。 用杯碟法 , 就盼菌篇金黄色葡萄球菌 #I] 。
.3 全氮之测定 。 用凯氏定氮法 s[] 。
育 睑 桔 果 舆 衬 渝
1
. 此校 1 3 典 Q 1 76 二菌株在培蓑基 l( l) 典 (vI ) 中之青徽素崖量舆生是
情况 。
自表 1 中桔果看出 1 3 菌株在棉籽爵培羲基中能崖生很高的青徽素效值 , 第
七瓶在第六天每毫升郎建 7卯 罩位 ,雕略遥粉玉蜀黍紧培餐基 , 但相差甚微 , 1 7 6
菌株在棉籽爵培羲基中青徽素之崖量不如 1 3 3。 在棉籽爵培蓑基中 13 菌株 p H
穗定直至 192 :J/ 晗 , 才上异 ,能推持 p H 在 7 . 0一 7 . 8 , 封的青徽素的崖生是很有利
的 。 13 菌株的用糖量比 1夕6快 , 其在棉籽爵培餐基中消耗糖之速度典在玉蜀黍
紧培羲基中相等 , 至 14 小降其剩爵糖量皆甚微 , 袱有 0 . 39 一 0 . 51 多 , 在道待候
彦生最高效僧 。
自第一膏翰中得知 1 3 菌株可以直接利用棉籽爵 , 下面雨侗育输用不同量的
棉籽爵典不同量的乳糖 ,以求得青徽素之最高鹰量 。
2
.
1 3 菌殊在不同量的棉籽爵培羲基中所彦生的效渭 , 除棉籽爵量改燮外 ,
其他成分告照培蓑基 ( I V ) 。
60 微 生 物 攀 报 l卷
表 1比鼓 13 舆 Q 176 二菌株在雨踵培菱基中的青徽素效 f聋 (翠位 /毫升 ), p H , 舆剩
徐糖量 (百分数 ) 。
瓶貌骨薪二如翅 0 斗8 7 2 9 6 1 2 0 14 4 1 6 8 19 2
0 5 9 2 16 2 7 0 斗0 0 6 2斗 5 101 1 7 6 效可贾 5 。 5 2 7 . 7 8 7 。 9 7 . 8 5 7 . 8 7 。 7 7 . 9 2 8 。 1 6
P H 3
。必 3 。 5 3 。 1 6 2 。 3 2 1 。 夕1 1 . 3 3 0 。 6 6
糖量 0 3 6 2 1 0 2 9 6 斗8 0 6 3 2 5 1 2
5
.
5 2 7
.
7 8 7

9 2 7

9 7

8 7

8 5 7

9 5
2 1 7 6 效僵 3 . 6 5 3 。 63 3 。 1 2 2 。 3 1 1 . 8 3 1 . 3 2 0 。 7 0 8 . 2 6
, p H 0 8 0 0 67 0
糖量 5 。 5 2 8 。 0 9 8 . 3 3
3

6 5 0

3 3 0
.
2斗
3 13 3 效悄 6 6 3斗5 斗斗6 8咚0 8 0 0 8 。 7 8
p H 7

7 2 7

5 2 7

5 6 7

7 2 7
.
9 8
糖量 3 。 3 8 2 。 6 1 。 3 2 0 。 8 9 6
3 8 2 2 0 斗8 04 卫3 3 效仅 O 7 。 7 . 5 7 斗斗0 7 2 0 7 。 3 5 8 3 2 8 . 6 8
p H 弓。 5 2 3 。 4 2 。 8 5 7 ` 5 6 7 。 6 8 0 。 6 8 . 11
糖量 3 。 6 5 1 0 2 7 0 1 . 9 5 1。 15 7。 5 0。 2 2
0 6

3 5 7
.
1 8 2 9 4 斗6斗 0 . 7斗5 1 7 6 效便 6 。斗 3 。 5 1 3 。 4 6 . 95 7 . 13 5 1 2 8。斗1
PH 3

8 2 9 0 2

0 6 1

5 5 7
.
7 3
糖量 7 。 2 5 0 。 2 4
3

3 3
6 1 7 6 效值 0 13 3斗0 3 6 8 斗2斗 5斗5 8。 2 5
p H 6

4 6

3 9 7

5 6

8 7

1 3 7

6
糖最 3 。 8 3 。 7 2 2 . 6 2 。 16 l 。 6 5 0 。 2 5
0 9 0 斗5 67 13 3 效僵 6 。斗 7 。 5 2 7 . 2 6 8 0 夕5 0 6 0 8 8 。 3 2
P H 3

8 书3 。 6 1。 8 8 7 。 1 7 . 2 5 7 。 6 8
糖最 0 8 1 1 。 3 3 0 。 5 1 0 。 2 6
6

4 7

6 5斗58 1 3 3 效值 3 8 3 . 3 8 2 9 0 5 2 0 7。 12 5 7 0 5 5 1 8 。 5 6
p H
.
7

55 7

1 5 1

1 7

2 5 7
.
8
糖量 2 。 5 1 。 8 0 .脚 0。 2 3
公 1 , 2 , 3 , 4瓶保用培菱墓 ( 111) ; 5 , 6 , 7 , 8 瓶用培菱篆 ( I v ) 。
自表 2 中的桔果看出以 2多棉籽爵篇最通宜 , 在此培蓑基中 1 3 菌株粉 120
小峙彦生每毫升 80 4 罩位的青徽素 , 用糖亦甚快 。 1 3 菌株在 3 % 棉籽爵培羲基
中至 14 小晗始能彦生每毫升 5” 草位 ,用糖量亦较慢 。 至粉在 4多棉籽爵培蓑
基中 ,其青徽素彦量倒减 , 至 1科 小晗每毫升袱有 3 86 罩位 , 糖之消耗援慢 , 此黯
典第一育输精果不符 ,在第一育输中 1 3 菌株培植放 4多棉籽爵培羲基中其效僧
篇每毫升 7 50 草位 , 以徒曾一再重覆疽烟育输 ,但告未得到此韶锋 ,可能原因郎所
用棉籽爵批鱿不同 , 在第一育阶所用的棉籽爵或爵是所含抑制物拯微 , 典以徒所
1 期 张焉申等 : 蒸色青徽菌株 W 一4 91 3崖生青徽素的研究 L
表 1 2 3菌株在不同量的棉籽解培盖墓中所康生的青徽素缪 (单位/毫升 ), p H舆剩徐糖量 (百分数 ) 。
乡厌策 霖爵粤奥翅 斗8 7 2 9 6 12 0 l斗斗 16 8
1 % 效值 1 36 3 9 0 5 5 2 8 0呼 5 2 8 夕6 2
2 p H 7

3 5 7
.
5 9 8

2 7

6 2 8

0 5 8

1 5
糖最 3 。 斗7 2 . 93 2 . 1 l 。 7 0 . 87 0 。 4 7
2 2 效僵 1 2任 3 9 3 6 8 0 6 6 6 6 7 2 6 09
P H 7

2 5 8
.
0 8

0 7
.
8 8 7

8 8 8

2
糖量 3 . 斗2 2。 6 8 1 。 9 9 l 。 2 8 0 . 7 7 0 。 4 7
3 3 效渭 1 2 2 2 2 5 斗4斗 斗0 5 5斗0 斗7 2
p H 7

4 5 7

8 5 7

9 5 7
.石7 7 。 5 6 7 。 斗5
糖最 3 。 7 3 。 1 3 …, · 5 , 2 . 1 9 l 。 3 6 0。 9 1
斗 3 效悄 1 3 8 2 5 2 斗3 2 斗8 0 5 5 5 4 9 0
p H 7

3 5 夕。 7 4 7。 8 5 7 。 7 9 7 . 5 8 7。 6 5
糖量 3 . 13 2。 5 1 . 9 7 1。 3 0 . 8 9
5 斗 效僧 1 1 5 19 8 2 8斗 2 0 8 2 9 6 3 1 6
P H 7
.
5 8

0 7
.
8 5 7
.斗 7 . 6 6 7。 8
糖最 3 。 8 2 3 . 7 2 . 9 7 2 . 4 7 l 。 8 l 。 斗5
6 4 效值 1斗2 2 2 5 2 6 8 3 2斗 3 86 2 8 8
p H 7
.斗5 7 . 9 7 . 8 5 夕 . 5 9 7 .石8 8 , 0
糖故 3 . 5 2 。 6 7 2 . 3 1 1 . 7 l 。 2 8
用的棉籽爵不同 。
3
.
1 3 菌株在不同量的乳糖培羲基中所彦生的青徽素效值 , 除棉籽爵改用
篇 2多舆乳糖量更换外 ,爵均按照培费基 ( Iv ) 。
表 3 中指 出不 同量的乳糖封朴青徽素崖量亦有影馨 , 1 3 菌株在 2多乳糖培
蓑基中 ,至 1 20 小降可崖生每毫升 7 20 罩位 ,剩除糖量拯微 , p H _ E升 。 用 3多乳
糖培羲基在 1科 小晗其效僧可建每毫升 80 0 罩位 ,剩躲糖量亦拯微 。 用 4务乳糖
培蓑基在 120 小待可崖生每毫升 7 40 翠位 , 剩躲糖量尚有 1 . 57 并 , 第五瓶槽破燕
靓输 ,现袱用第六瓶之桔果下桔渝似乎不狗 , 但可叁考表 2 中 1 、 2 、 雨瓶的桔果 ,
因其所用培蓑基成分典表 3 中 5 、 6 、 雨瓶相同 , 其桔果最高焉每毫升 80 4 罩位 ,
业不比用 3多乳糖培餐基的效僵高 ,焉筋省乳糖补而同待能得到高的效僵故以用
3多乳糖焉最通宜 。
徒以上桔果得知 1 3 菌株可以直接利用棉籽爵 , 笠崖生相富高的 青徽素效
2 6微 生 物 攀 我 l卷
表 1 3 3菌株在不同量的乳糖培菱基中所彦生的青徽素效值 (翠位 /毫升 ). p H, 舆
剩除搪量 (百分数 ) 。
瓶球 森钾纽翅…一 7 2 9 6 1 2 0 1斗斗 1 6 8}
1 % 效值 5 0 3 1 5 斗8 6 7 0 0 5 7 0 3 10
2 p H 7

6 8 7
.
2 8 7
. 斗4 7 。 9 2 8 。 2 8 。 5
糖量 1 . 9 8 1 . 0 8 0 。 弓5 0 。 2 6
2 2 效侧 夕1 呼3 2 5 5 5 7 2 0 5 0 8 22 5
P H 7

7 2 7

3 6 7

6 2 7
.
6 2 8

3 8

6
糖量 1 . 9斗 l 。 0 9 0 。 6 4 0 。 2 7
3 3 效值 7斗 斗3 2 斗2 0 6 8 0 8 00 斗8 6
p H 7

74 7

3 6 7

6 6 7
.
7 5 8

0 5 8
.
2 5
糖量 2 。 7 8 l 。 9 1 l 。 3 1 0 。 6 7 0。 3斗
4 3 效值 7 6 斗2 0 3 9 9 6 3 2 7 9 0 3 3 6
PH 7
. “ 7 。 4斗 7 . 79 7 。 8 8 . 0 5 8 。 3 5
糖量 2 。 7 8 l 。 8 4 l 。 2 6 0 。 6 2 0。 3 5
5 4 效渭
p H
糖量
6 4 效下聋 8 4 2 83 3 6 6 7斗0 7 2 6 5 9 1
p H 7
。 必 夕. 斗2 7 . 8 7 。 8 5 7 . 9 5 8 。 0
糖量 3 。 7 1 2 . 7 7 2 . 2 7 l 。 5 7 0 。 9 6 O 。斗7
僵 ,现用摇床速度太慢 , 空氧供抬量不足 , 如换以旋斡摇床供拾大量空氧 , lRJ 其效
僧很可能再提高 , 峙简亦或可精短 , 根檬文献 le] 上载 1 7 6 菌株在玉蜀黍紧培羲基
中其青徽素崖量每毫升可建 2 , 10 罩位 , 但不甚通宜放棉籽爵培餐基 , 业且 菜76
分泌黄色素 , 势粉以徒提燎及拮晶都有妨暇故不如攫用 1 3 菌株焉宜 , 培羲 1 3
菌株的其他原料如乳糖 , N a N O 。 , C aC O : 等智保团崖 , 将来如探用 1 3 菌株 ,大
量裂造青徽素 ,则所用原料皆可 自拾 ,特 slJ 是棉籽爵 ,来源矍富 , 值格低廉 ,每斤祈
人民孵 7 0 元 , 较甜玉蜀黍紧每斤离元 ,相差殊撷 。
精 渝
燕色青徽素菌株 w 一 49 1 3 可以直接利用棉籽爵 , 在摇瓶培餐中其效值每毫升可
蓬 80 0 罩位 ,棉籽爵的最趟量篇 2 . 0多 , 乳糖焉 3 . 0多 。
韶榭 : 本育翰承强淑置 、李茜 、宋洗三同志偏助做效值愉定及糖量分析特此
瑟榭 。
1 期 强焉申等 : 然色青徽菌株 w 一 49 13 3崖生青徽素的研究 L
金 考 文 献
B o w d e n
,
J
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P
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s et r , J
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w
. ,
H
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B
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w 。记印 f , D . p e : lm a n , 工 . E . M c D a in el , B . L . w a lk e r, a n d D . H e n d l认 ,
1
.
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.
19 4 6
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5 1
,
69 5
.
s h a f e r
,
p
.
A
.
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S o m o g y
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1
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B
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B
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H
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紊村 、 焉零激 、踢非凡 , 中奉新会鬃辍 , 1 950 , 1 ( 1) , 月。
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