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＊　收稿日期:1998-02-14
碱茅幼穗的组织培养初报
时永杰　　刘晓强　　孙晓萍
(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所　兰州　730050)
摘要　碱茅幼穗在附加有 2.4-D1.5mg/ L的 MS 培养基中 , 暗培养条件下两周时形成 0.5cm2 大
小的愈伤组织块 , 其发生率为 43%。培养 3周后形成旺盛生长的肉黄色愈伤组织。愈伤组织的分化是
在含 KT1.0mg/ L、 NAA0.5mg/ L的 MS 培养基上 2～ 4 周时出现绿色芽点 , 继续培养 1 ～ 2 周即可得
到分化植株 , 将该植株移至不含激素的 MS 或 N 6培养基上时 , 光照条件下形成绿色分化植株。
关键词　碱茅　组织培养
The Prel iminary Report on Tissue Culture of Young Spikelet in Puccinellia distans
Shi Yongjie　　Liu Xiaoqiang　　Sun Xiaoping
　　(Lanzhou Institute of Animal Science & Veterinary Medicine , Chinese Academy of Agricultural Sci-
ences , Lanzhou , Gansu 730050)
ABSTRACT　The young spikelet of China Starg rass , Puccinellia distans in our experiment , w hen
treated with aditional cultural medium of MS , had ever formed healed callus tissue by applying 2 , 4-D 1.5
mg/ litre fo r 2 weeks under culturing conditions , and the rate of frequency was estimated at 43%.And if the
culturing trial be leng thened longer than 3 weeks , then the healed tissue would be formed in vigorous vitality
w ith flesh-yellowish color.Further on , w henever the differentiation of healed tissue w as done on by apply-
ing KT 1.0 mg/ litre and NAA 0.5 mg/ litre on the basis of MS culture by lenghthening the trial time as
long as 2 to 4 weeks , the tissue culture w ould appear the sprout point in g reen color;and if the culturing
w ork would be gone on fur ther fo r one to tw o w eeks , then the differentiated plant tissues would be obtained at
last.At this critical moment , when the plant w as transformed on the culture medium MS without hormones
o r N6 , under the condition of pho tosynthesis , the plant would be fo rmed finally into greenized differentiated
one.
Key Words:Puccinellia distans , tissue culture
　　碱茅 (Puccinellia distans)是禾本科
碱茅属多年生草本植物 , 其适应性强 , 抗
寒 、耐盐碱 、 喜湿润和盐渍性土壤 , 在
pH8.8 ～ 9.0的土壤上仍发育正常 , 是改
良盐碱地的优良牧草 。碱茅茎叶柔软 , 适
口性好 , 适宜刈割晒制干草 , 也可放牧家
畜 , 为了充分利用这一宝贵资源 , 培育优
良的碱茅品种 , 我们进行了碱茅的组织培
养研究 , 现将结果报告如下。
1　材料与方法
从田间取播种后第二年返青 , 0.5cm
长的未抽穗幼穗 , 在冰箱内 0 ～ 4℃下处
理 24 ～ 26h , 用 70%酒精表面灭菌后 , 无
菌条件下剥去幼穗外叶鞘及苞叶 , 将幼穗
接种于愈伤组织诱导培养基上 , 在温度
·16· 碱茅幼穗的组织培养初报
25±1℃条件下暗培养 , 诱导产生愈伤组
织。然后转移到分化培养基上 , 进行愈伤
组织的诱导分化 , 最后在无激素培养基
上 , 在光强为 1000 ～ 1200lx 、 光照时数 8
～ 10h/d , 温度 25±1℃条件下建成绿色
植株 。
碱茅组织培养的基本培养基为 MS 培
养基 , 蔗糖浓度 3%, 琼脂粉 0.5%, pH
值 5.8。培养基在高压锅内 , 温度 121℃、
10.29×104Pa 气压下 15min 高压灭菌。
光培养的光源为 40W日光灯 。
2　结果
2.1　愈伤组织的诱导　碱茅幼穗在附加
有2.4-D1.5mg/ L 的 MS 培养基中 , 暗
培养 1周时外植体开始膨大 , 2周时幼穗
颖花上长出颗粒状乳白色愈伤组织 , 也出
现肉黄色愈伤组织。在接种的 500个幼穗
外植体的培养基中 , 形成愈伤组织的仅
215块 , 愈伤组织的发生率 43%。培养 3
周的幼穗外植体形成旺盛生长的肉黄色松
软愈伤组织。
2.2　愈伤组织的诱导分化 　在附加有
KT1.0mg/L 、 NAA0.5mg/L 的 MS 培养
基上 , 培养 2 ～ 4周时愈伤组织上出现绿
色芽点 , 继续培养 1 ～ 2周即可得到分化
植株 , 将该分化植株移至不含激素的 MS
或N6 培养基中 , 先培养 2 ～ 4 周后 , 即
可形成绿色健壮的分化植株 , 经炼苗后移
栽到土壤之中 , 植株生长良好 。
3　讨论
3.1　关于 2.4-D的浓度　将碱茅幼穗
切段接种在含 2.4 -D 0.1 、 0.5 、 1.0 、
1.5 、 2.0mg/L 的 MS 培养基中 , 诱导愈
伤组织的形成时 , 各种浓度下均可获得愈
伤组织 , 出愈率随着培养基中 2.4-D浓
度的提高而提高 , 但超过 2.0mg/ L 的培
养基中出愈率则是下降趋势 , 表明碱茅的
愈伤组织诱导所需的 2.4-D浓度有一适
宜的范围。进一步试验证明 , 2.4-D浓
度在 1.0 ～ 2.0mg/L (1.0 、 1.3 、 1.5 、
1.7 、 2.0)范围内 , 以 1.5mg/ L 时 , 碱
茅的出愈率最高 。
3.2　关于培养基　碱茅组织培养的培养
基以 MS培养基最为理想 。据我们的试验
结果 , 其愈伤组织的诱导 、 分化均以 MS
培养基为首选培养基 , 而在建成分化植株
时 , N6 培养基亦表现良好 , 这与一般禾
本科牧草的组织培养结果有所不同 , 尚待
进一步探讨 。
　主要参考文献
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·17·四川草原　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　1998年第 2期