全 文 ：收稿日期:2014-08-28
作者简介:武月红（1975-），女，内蒙古包头人，硕士，主要研究方向为植物学、微生物学。
自 20 世纪 40 年代以来，化学农药因其品种多、见效快、使
用方便、价格低廉等特点而在农药市场中占据主导地位。 然而，
由于人们对化学农药的不合理使用和农药本身固有的缺点，致
使化学农药在使用中产生了环境污染、人畜中毒、农药残留等问
题。随着人们生活质量的提高和环保意识的增强，开发对人畜安
全、无污染、低毒、低残留的生物农药已成为农药领域研究的新
热点。 植物源农药作为生物合理性农药的一部分，其开发研究
一直是新农药研究的热点课题之一。植物源农药来源于自然，能
在自然界降解，一般不会污染环境及农产品，在环境和人体中积
累毒性的可能性不大， 对人和牲畜相对安全， 对害虫天敌伤害
小，具有低毒、低残留的特点，能够保持农产品的高品质。 因此，
植物源农药具有广阔的市场。
绿萝（Epipremnum aureum），为天南星科麒麟叶属的植物，
又名黄金葛，自古以来在世界广泛分布，原产中美、南美的热带
雨林地区，目前在上海、江苏、福建、台湾、广东、广西等地均有人
工园林居室养植。 绿萝藤长数米，节间有气根，随着生长年龄的
增加，茎增粗，叶片也越来越大。 叶互生，绿生，少数叶片也会略
带黄色斑驳，全缘，心形。
本实验选取的绿萝品种为青叶绿萝, 购自内蒙古包头市花
苑大型花卉市场，分批次采取了植物的叶片、枝条和根。 本实验
用绿萝植物的叶片、 枝条和根的乙醇提取物对三种细菌性病害
金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌进行了抑菌效果的对
比和分析,该研究结果对提高绿萝的经济价值，筛选和开发新型
植物源杀菌剂具有重要意义，同时也为研发新型生物农药、提高
农产品的品质奠定理论基础。
1 材料和方法
1.1 供试植物
绿萝植物的叶片、枝条和根（购自内蒙古包头市花苑大型花
卉市场）。
1.2 供试菌种
三种细菌性病害大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球
菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌 （Bacillus subtilis）（包
头师范学院微生物实验室提供）。
1.3 化学试剂
牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂粉、NaNO3、K2HPO4、KCl、MgSO4·
7H2O、FeSO4、蔗糖、乙醇、甘油、蒸馏水、无菌水、双蒸水。
1.4 主要实验设备
高压蒸汽灭菌锅、索氏提取器、旋转蒸发仪、超净工作台、恒
绿萝不同部位提取物抑菌效果的比较分析
武月红
（包头师范学院 生物科学与技术学院，内蒙古 包头 014030）
摘 要：实验采用滤纸片扩散法测定了绿萝叶片、枝条、根部的乙醇提取物对三种细菌性病害金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大
肠杆菌（Escherichia coli）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）抑菌效果的对比和分析。 用液体悬浮培养法分别测定了绿萝不同部位的乙醇提
取物对三种细菌的最小抑菌浓度（MIC）。 实验结果表明：绿萝不同部位的乙醇提取物对供试细菌均表现出较强的抑菌作用；绿萝不同部
位对同一种供试细菌的抑菌活性大小表现为：根与茎的抑菌活性相差无几，且都大于叶片；绿萝不同部位提取物对相同供试细菌抑菌活
性表现为：对金黄色葡萄球菌抑菌活性>对大肠杆菌抑菌活性>对枯草芽孢杆菌的抑菌活性；相同部位的乙醇提取物对不同细菌的最小
抑菌浓度（MIC）表现较大差异。
关键词：绿萝不同部位提取物；抑菌作用；金黄色葡萄球菌;大肠杆菌;枯草芽孢杆菌
中图分类号:S682.36 文献标识码:A 10.3969/j.issn.1007-0907.2014.05.005 文章编号:1007-0907(2014)05-0013-03
Comparative Study on Antibacterial Effects of Plant Extracts from
Different Parts of Epipremnum aureum
WU Yue-hong
(Faculty of Biological Sciences and Technology of Normal College of Baotou, Baotou 014030,China)
Abstract: Filter paper dispersion method was used to determine the antibacterial effects of the ethanol extracts of different parts
of Epipremnum aureum, on Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Bacillus subtilis. The minimum inhibitory
concentrations (MIC) of different parts of Epipremnum aureum were also determined by the liquid suspension culture method.
The results showed the ethanol extractions of different parts of Epipremnum aureum all expressed certain bacteriostatic activity.
The radicular and cauline extractions of Epipremnum aureum showed similar bacteriostasis and were both better than leaf. The
different parts of Epipremnum aureum extractions bacteriostatic activity was Staphylococcus aureus > Escherichia coli > Bacillus
subtilis. The same parts of Epipremnum aureum extractions differed in the MIC to various bacterial.
Keywords: Extractions of different parts of plants; Bacteriostasis; Minimum inhibitory concentration (MIC)
内蒙古农业科技 2014（5）：13～15
Inner Mongolia Agricultural Science And Technology
表 1 绿萝不同部位提取物对三种供试细菌最小抑菌浓度实验结果
注：“+”多表示细菌生长多，“-”表示无菌生长
部位 供试细菌
不同浓度下各提取物的混浊度
0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.6 0.65
根部 黄色葡萄球菌 ++ + － － － － － －
茎秆 ++ + － － － － － －
叶片 ++ ++ + － － － － －
根部 大肠杆菌 ++ ++ + － － － － －
茎秆 ++ ++ + － － － － －
叶片 ++ ++ ++ + － － － －
根部 枯草芽孢杆菌 ++ ++ + － － － － －
茎秆 ++ ++ + － － － － －
叶片 ++ ++ ++ + － － － －
温培养箱、恒温水浴锅、电子分析天平、冰箱、显微镜、微波炉、打
孔器、过滤器（含无菌滤膜）、剪刀、移液枪、Peteroff-hauser 记菌
器、血球计数板、涂布器、接种环、镊子、试管、离心管（1.5mL）、滤
纸、剪刀、封口膜、玻璃棒、三角瓶、烧杯、培养皿、酒精灯等。
1.5 实验方法
1.5.1 菌种的活化 在超净工作台上分次以无菌操作将供试细
菌从试管斜面以划线法转接到牛肉膏蛋白胨管斜面固体培养
基，每种细菌各接 5 管左右备用，每种真菌分别接 5 管斜面，操
作中注意严格无菌操作，同时要做好相应的记号避免菌种混乱。
细菌转接好以后放入 37℃恒温培养箱培养 24～48h，使菌体达到
最壮生长状态，冰箱冷藏备用。
1.5.2 样品提取液的制备 分批次采取新鲜完好的绿萝叶片、
枝条和根， 参考晏卫红等方法 [3]， 无菌操作,75%酒精消毒 60s,
0.005%高锰酸钾溶液消毒 30s,再用无菌水冲洗 3 次, 自然烘干，
得到样品材料。
1.5.2.1 绿萝叶片提取液的制备 将准备好的绿萝叶片用无菌
剪刀剪碎，准确称取 50g，用无菌滤纸将其裹好并放入索氏抽提
管内,用 95%的乙醇回流抽提 2h。 如此反复共提取 250g 叶片提
取物，将 5 次提取液收集合并，放入旋转蒸发仪，将提取液旋转
蒸发蒸干，称干物质 5g 用 5mL 无菌蒸馏水完全溶解即为 1g/mL
的样品提取液，将原液通过无菌滤膜过滤以除去杂菌。实验时还
需要用无菌蒸馏水取一定量原液配成 0.9g/mL、0.8g/mL、0.7g/
mL、0.6g/mL、0.5g/mL、0.4g/mL、0.3g/mL 的稀释液，加原液一共 8
个浓度梯度，放无菌离心管标识清楚，冰箱冷藏备用。
1.5.2.2 其它部位植物提取液的制备 将准备好的绿萝的枝条
（无菌剪刀剪碎）和根部，同绿萝叶片的提取液的制备方法一样，
分别制备好整株植物提取 1g/mL 的原液， 通过无菌滤膜过滤以
除去杂菌，实验时用无菌蒸馏水配成 0.9g/mL、0.8g/mL、0.7g/mL、
0.6g/mL、0.5g/mL、0.4g/mL、0.3g/mL 的稀释液， 放无菌离心管标
识清楚，冰箱冷藏备用。
1.5.3 抑菌活性的测定 细菌菌悬液的制备。 分别选取经过
24～48h 培养后菌体生长状态最为旺盛的大肠杆菌、金黄色葡萄
球菌、枯草芽孢杆菌各 1～2 管，在超净工作台上无菌操作，注意
做好标记。
以大肠杆菌为例：先往大肠杆菌试管斜面中倒入 2mL 左右
无菌水，用灼烧灭菌的接种环轻轻刮动斜面的菌种，反复震荡，
直接得到较浓的菌悬液， 在显微镜下以 Peteroff-hauser 记菌器
计数菌体个数，经过稀释，调至浓度为含细菌菌体 106～108个/mL
的假单胞杆菌菌悬液，冰箱冷藏备用。
金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌悬液制备方法相同。
滤纸片的浸泡。 用打孔器取直径 7mm 的滤纸片，灭菌后将
滤纸片分别放入绿萝不同部位提取物的各个稀释梯度提取液及
对照无菌水中浸泡 2h，待用。
对比相同浓度下绿萝不同部位提取物对三种供试细菌的抑
菌活性 在超净工作台中严格按照无菌操作要求， 把提前配制
好的牛肉膏蛋白胨固体培养基融化后倒入直径为 120mm 的平
皿 ， 冷却凝固后用移液枪分别吸取三种供试细菌的菌悬液
0.2mL，分散滴到平皿上，以灭菌的涂布器涂布均匀，使菌悬液渗
入到培养基中。 用无菌镊子分别夹取相同浓度下浸泡绿萝不同
部位提取液并基本沥干的滤纸片 （无菌水浸泡的滤纸片为空白
对照）等距放在同一个平皿内，对比相同浓度下绿萝不同部位提
取物对三种供试细菌的抑菌活性。共做 8 个浓度梯度，每个梯度
做 3 组重复。 置恒温培养箱中 37℃下培养 24h 后，测量抑菌圈
直径大小，取其平均值作为实验结果。
1.5.4 最小抑制浓度（MIC）的测定 用液体悬浮培养法测定绿
萝不同部位提取物对三种供试细菌的最小抑菌浓度 （MIC），具
体操作过程如下：取灭菌试管 8 管，用记号笔标注好，分别用移
液枪加入过滤除菌的绿萝不同部位提取物 （浓度为 1g/mL）
6.5mL、6.0mL、5.5mL、5.0mL、4.5mL、4.0mL、3.5mL、3.0mL， 然 后
分别加入灭菌并冷却至 40℃以下的液体牛肉膏蛋白胨培养基
定容至 10mL。分别接入细菌悬液 0.2mL，混匀。以无菌蒸馏水作
空白对照，37℃下震荡培养,每隔 2h 观察 1 次，视培养液变浑浊
为长出细菌，而培养液澄清为无细菌长出。以供试菌能抑制生长
的最低添加量为该提取物的最低抑菌浓度(MIC)，结果见表 1。
2 结果与分析
2.1 相同浓度下绿萝不同部位乙醇提取物对三种供试细菌的
抑菌活性比较
通过图 1、图 2、图 3 可以看出，绿萝不同部位乙醇提取物对
三种被测试细菌在一定浓度下都表现出了抑菌作用。 不同部位
提取物对供试细菌的抑菌作用表现为:根部提取物抑菌作用>茎
秆提取物抑菌作用>叶片提取物抑菌作用；相同部位对不同供试
细菌的抑菌作用表现为：对金黄色葡萄球菌抑菌作用>对大肠杆
菌抑菌作用>枯草芽孢杆菌抑菌作用。
2.2 最小抑菌浓度的测定结果
通过表 1 可以看出， 绿萝不同部位乙醇提取物对供试细菌
的最小抑菌浓度差异较为明显， 根部和茎秆提取物的抑菌效果
最好， 对三种供试细菌的最小抑菌浓度均为 0.35～0.40g/mL，即
当提取液浓度大于 0.35～0.40g/mL 时，表现较强的抑菌作用。 叶
14 内 蒙 古 农 业 科 技 No.5
片提取物的最小抑菌浓度在 0.45～0.50g/mL 以上才能表现抑菌
作用，对三种供试细菌的抑菌作用最弱。
3 结论与讨论
通过绿萝不同部位乙醇提取物对三种供试细菌进行抑菌实
验，结果表明绿萝是一种整株都具有较强抑菌作用的植物，特别是
根部和茎秆提取物的抑菌作用最强， 对三种供试细菌在较低浓度
时就表现出一定的抑菌作用。 此外，绿萝的叶片提取物也具有一定
抑菌效果，但是必须在浓度较大时抑菌效果才表现较为明显。
实验仅采用了乙醇做提取溶剂， 因而不一定能将极性和非
极性较强的生物活性物质全部提取出来。 由于时间和条件限制
并未做多种极性不同溶剂之间的平行提取， 今后如进一步研究
应尽量采用各种极性不同的溶剂做平行提取。
植物的活性成分与植物的生长情况和分布情况有很大的关
系，这会导致植物提取物的质量也会有差别。 此外，绿萝对微生
物的抑制作用与绿萝自身生理特性、季节等诸多因素有关。绿萝
作为家庭绿化植物之外， 还可以进一步研发其杀菌和药用方面
的作用，使绿萝抑菌成分的效果发挥到最大。
本实验是用植物粗提物进行测试， 但有些植物样品中活性
成分甚微，因而在供试浓度下未表现较强的活性。 另外，对于杀
菌剂而言，有的在离体条件下没有活性，但在活体植物上则表现
出极强的抑菌活性，实验仅初步进行了离体实验，这些在今后的
研究中应引起注意。
如何对北方地区生长良好的室内美化植物绿萝进行药用提
取物方面的开发研究，是我们要进一步开展的课题。
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（责任编辑 吴云霞）
图 3 绿萝不同部位乙醇提取物对枯草芽孢杆菌的抑菌效果
图 1 绿萝不同部位乙醇提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果
图 2 绿萝不同部位乙醇提取物对大肠杆菌的抑菌效果
抑
菌
圈
直
径
/m
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植物提取物浓度/(g/mL)
植物提取物浓度/(g/mL)
植物提取物浓度/(g/mL)
绿萝根提取物
绿萝茎提取物
绿萝叶提取物
绿萝根提取物
绿萝茎提取物
绿萝叶提取物
绿萝根提取物
绿萝茎提取物
绿萝叶提取物
5 期 武月红：绿萝不同部位提取物抑菌效果的比较分析 15
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