全 文 ：Is sN 1 61 7
曰犯3 8A cta R班 m协o cs lin 中国药理 学报 Z J 犯 抑r ; 23 ( 4 ): 32 7一 30
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n o m创 U93 7 e l ls . 】M P co u ld in h ihi t ht e e x Per s s ion o f
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Ie s i o n s o f a ht e or sc l e or s i s
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m o n co y et s 涨兄r n ot p lay a cen 的1 or le
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C川eC r n o l l co y te s 以ht e er ot het s u be n d o ht e 】ial sP a e an d
e n枉汀 加 t o het in t im a of het ar et yr
, 。劝d i双刃 lo w de n s i yt
il卯 por t ien ( ox 一L D L ) 助d o ht e r sub sO nI c e s as soc i a t ed
iw ht a ht e or ge en is s IT 以 y aP比 c iaP et in tr 出 l s fo 叮川正o n of het
mo ocn
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fo 姗 ce u s fo mr 以 t ion 〔3〕 .
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IC AK冬1 15 het i n du e it on of s户戈 iif e an d ver e朽ib le eC l l
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a ht e or g en e s is 15 on t oul y
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内喀巴l ica 动劝 u n址a . tI h aS lx光 n 州闪功刘 由以 IN IP aws允山记 ot an agt o m Ze i n d u以泪 肛肠 e s i o n 代泊 c it on an d ha d以时` n el 币沈 st on 耐vo 创泥 u lar sy s elnt 图 . T lon u gh加 c u ba往月 t刃3 7 e ls iw ht ox 一 L DL〔6〕 , we es abt il s坛刃 a
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R e义么代h & 众vel q 拍笼 n t l汕闭 .
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V记 ed by De Par tn l e n t of M ed i cal
〔为即五s try of N a tU re P lt 川u c ts in our um ~ ty
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s te ir 】切ed by ifl 加 t i o n ht 功 u hg 0 . 45 一拜m 诵1l l pe re ~
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.
A血e r E D丁A
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by i n c u b a ti n g in uC S仇 10 拜mo l/ L for 16 h at 37 ℃ ,朋d ht e n id aly z ed in p h o hsP ate b u fl 七代对 阴如 e ( BP s)叨n ta i in n g E D T A O . l n u n o l/ L for 24 h at 4 ℃ .
C e l e ul 加n ℃ 1七e h 山刀an m o n oc y t e 五n e Ur9 3 7 was比扭 i n e d if U m 〔笼11 B aJ l k in S han hg ia nI ist tu te o f
B l o 】o ig cal S c l e n c e s
,
C h i n 已记 A ca d e . y of S c le n ce s
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叨n t ia n i n g 1 0 % 企囚 加访。 e s e n 朋n . 凡 r e x pe irn l e n ts ,
U 937 cel ls at hte co 胡 u e n e e in hte id sh e s ~
p te 加阳 ted
in , e n ” 刀 一幻忱 R日随 I一 16 扣 句 r 2 4 h an d ht e . n e ` Ii u m w as
往七时团 w iht d l月七化 n t一妞别 lon s o f l五口P ( 0 , 25 , 50 ,10 拜m o 】/ L ) . 飞七e n hte U 937 ce Us ~ i n c ub a t曰 iw ht
ox L D L 即 m g / L for 48 h . 飞七e fo a ll l cel l m ed e l was“ tab li sh ed in hte e e l g ro u P iw ht o u t 】入口P 加 , t de . l b e
con
it o l g 旧 u P
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n 0 nI 川 U勺3 7 eC l l s w h i ch h a v e 加 t
切妞宜司 幼山 1州田 朗 d o x . L D L .
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uce det
朋 d 石x de iw ht 4 % p阳 fo mr a】d e hy d e for 12 h . 1七e
伪 Us w e花 山 e n taer tde w iht fr e s h 0
.
3 % iol 】℃ d o
( AM R] 昭 C O , U SA ) for 20 咖 .
W巴兹 e m b 10 t 加9 1卜e p ro t e in s胡 l p l e s we re
d认刘 v曰 朋 d 加11闭 in 功 e川盯山 b u fe r fo r 10 111” 1 . 1七e
pro te i n co n eC n tra t i o n was
es 山九劝记 by 功w ry m e ht ed 阁 .
劝e amS P】e s w e te ht e n se Par 助团 by SD S
一
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m 。油倒 l e s ( B fo R月 d ) at 35 v for 16 h . An e r b】oc kl n g
iw ht ul s( hy如 x yn 犯ht y】) 班川 n o f 坦ht an e b u fe 压刘 so l u石o n伪 n倒而n g T w e ll 20 ( BT sT ) , hte m e m b任口 es w e花
In e u加 te d 诚 ht ht e PnIU 田下 助 6饮刘 y in r】卫 sT .
S叹幻 n ds 叮 朋石伙刘i es in T BsT w e 佗 目dde 田l d i n cu 加比d
ofr 2 h at ~
妞m拌口吐眠 . B o nU d ~ n ds 叮朋石次山 e s w e re de t ce 挂月 u s l n g an EC L de t eC it o n sy s t en l
( Am e 比抽叨 P加趁 m a c i a B lo teC h ) .
N o rt 五e . b l o t 加9 To倒 RN A aws iosl a t以 1 if u m
hte U9 37 eC U
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(B oc 丽 n g e r Man n h e面 ) . l h e ifl t e rs
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so ℃ in p re hy b ir d iaZ ti o n so l U it on . H洲b ir d iaZ t io n w as
t h e ll 详rfo n n曰 侧山 5 m g / L of [ 。 一犯 P ] C r p 一 labe led
IC A M
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n o n 们 a li趾泊 a g a l ll s t hte is g n a 】o f 〔 ;AP DH
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朋 a l y z e d iw ht s n l a l玉 v lew so if w a re ( F U ir。 ) . 丁、 e c o n ℃ c t ed d e们 s lty 初 ht hte so ftw are ~
p l o t t ed as a pe rC e l l tag
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S加 t 1S it C S A l l 抚污 u l ts a l℃ s h o 认叨 as 无 士 5 .
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sA sh o w n in iF g
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IC A h工1 w a s es t im a ted to be a be u t 15 一 fol d , w h ihc
初 d i c a ted ht a t ft ,an l c e l s cou ld ig ve a s t
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E s peC i al ly w 卜e n tre a t e 《j侧山 IM P 10 尸m o F L , hte K : AM . 1 roP t e 山 le v e
缸化 a哭 d by 79 % c o m par ed to ht a l of 6〕 a l ll e e l s .
I C戌M 门1 功丑N A l e v e ls in f n 曰。 c e ls a n d ht e
s iS N 1 7 6L 引淡妇 A c 扭 几明 n以习1 S i n
Bm l a iP as @秘1 . 由c ne . 那 . c n
中国药理学报 2阴助r ; 23 (4 )
R l』1/ F自 x肠 ~ 2 1 一创 74 ~ 2 6四 32 9
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曰呻H -口Zr
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一UA之留咬日1 .呈Q工山补勺三公召
Co . t ro l Fo
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袋引豪f产
f.自1 5以H -价锐工离工引卜导
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一。奋 a咬冰比`丫芝切回.卜写留
Co nt ro l F o . m e e ll , 2 5 即 10
IM p (仁m o lL/ )
F l g 2
.
W七s t e r n b】o it 飞 田目邓 15 of ht e e x P er s io n of
IC A M
.
1 in L心3 7 f加m e e 】15 a n d t h e e肠ce t of 】五度P . A )
p or et in ~
曰川赶那此 d 勿 V叭拐 et r n b】o t in g . )B cor ·
r e c et d d e sn iyt
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, 旧曰kr vi e w so ft w田龙 梢吸 s P】o t de as
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r c e l 鞠笋 of c o n it ” 】 明习ue . n = 3 . 雳 土 5 .
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01 珑 c o n it ” 】 g 旧 u p . 勿 > .0 05 , 毕 < .0 01 毋
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.
N o rt] 比m b】o城gn 印份 ly s i s of ht e e x Per s s io n of
I C A M
.
1 in L月3 7 加倒m e e l】5 a n d lt l e e f 七 tC of 】M P . A )
功丑N A 从旧 s a 川al ” 配 d 勿 h随川比m bl o地昭 . B ) cor ·
r e c t e d ds sn i yt 幼 ht 51 1旧kr 访 e w so ft w出限 钊日5 lP o加纽 as
a ep rC e n 恤ge of e o n杠” 】 , 日】ue . n = 3 . 叉 土 5 .
cP < .0 01 珑 c o n it ” 1 91旧 u p . 勿 > .0 05 , 毕 < .0 01 珑
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w a s 加 n n al i双对 ag ian st het is gn al of G A PD H an d het
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sA s h o认叽 in 瑰 3 , a ft e r In c u ba ted
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B ut ht e m丑N A le v el in 协护 t代级 t ed ce n s dec er as ed
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已江11e s t ty ep of a ht e or sc le or ict
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丘b or Por l i fe ar tlve P代犯 e s s by ht e l r c a P a c iyt ot fo n n一 5 g or w ht fac ot sr in p art ic u lar lP a t e l e t~ d e ir v edg or w ht acr t o r 〔10 , “ 〕 as we ll as 1 1〔` 2 〕 , 邢 a (`3 〕 , an dv as c u lar e n do ht e la 脚 w ht fac oftr `叼 .几 s otn e r a z ( 4〕 h va e fo u n d a s腼9 exn er s slon o r
IC A入-4 1 on e n d o het l al cel ls
, 而 c or Ph a g e s , an d sm o o ht
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s c l e e l l
s o f het
al 上el ℃ s e leor s i s P laq Ue s
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w h il e n o n n al
a rt e ir al c el ls o u t s lde 协明 p e s g i v e w以水e r or en g a it v e
r e a c it o n s
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杨鹏远 , 苟耀诚“ , 李 凯 3
(第二军医大学 药学院药理教研室 , ”长海 医 院胸心
外科 , 上海 2 (协幻3 , 中国 ) ;
黄兴华 , 蒋建明 , 余 龙
(复旦大学遗传学研究所 , 上海 么协铭3 , 中国 )
关键词 泡沫细胞 ; 细胞间粘附分子 一 1 ; 欧芹素乙 ;
低密度脂蛋白类 ; 蛋白质印迹法 ; R NA 印迹法
目的 : 研究在人类单核细胞系 9U 37 泡沫细胞 中 , 细
胞间粘附分子 一 1 ( IC AM 一 l) 的表达水平 , 观测欧芹素
乙 (欧前胡 内酷 , 翻佯m ot ir n , IM p )对 CI A M 一 l 表达的
抑制作用 . 方法 : 将 U 93 7 细胞与 80 m留 L 氧化 低
密度脂蛋 白孵 育 48 h , 建立 U93 7 泡沫细胞模 型 .
在培养基中预加入不同浓度的 l州田 ( 0 , 25 , 50 , l田
,
、
om “ )L
. 采用 we s emt bl o in gn 检测 cI A入1
一
1的蛋白
表达 ; 采用 oN rt h e m bl o it gn 检 测 CI AM一 1 的 m R N A
水平 . 结果 : 泡沫细胞中 CI A M 一 1 的表达显著高 于
正常 U 9 3 7细胞 . CI AM一 1的蛋白和 m RN A 水平分别
是正 常 U 9 3 7 的 15 和 10 倍 . 经 IM P 沁 和 10
吕m ol / L预处理后 , 泡沫细胞 中 CI A M 一 1 的 高表达被
显著抑制 . 当 IN于 浓度达到 10 拌mo U L 时 , cI A M -
1 的 蛋 白水 平降 低 了 79 % , 爪RN A 水 平 降低 了
74 %
. 结论 : 经 氧化低密度 脂蛋白孵育后 , U 9 37
泡沫细胞中 CI AM 一 1 呈现高表达 , 】M P 能显著抑制这
种表达 .
(责任编辑 吕 静 )
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