全 文 ：1 9 92 年 8 月 浙江农村技术师专学报 第 3期
旱芹人工种子内培养物的形态发生
和 生 理 生 化 的 研 究 `
倪德祥 谢文凯 岑益群 蒋如敏
(复旦大学生物系 )
王鲁形
(农学 系 )
摘要 : 本文讨论有关旱芹人工种子内部培养物由体细胞脱分化产生胚性细胞 、 胚状体 , 直
到成株的过程中形态发生的问题 , 对胚性细胞所处的状态 、 胚状体筛选和畸形胚 、 胚性细胞 (团 )
或子叶胚包裹人工种子及其萌发特点 、 播种基质等等方面进行了分析比较 , 并提出一些有关旱芹
人工种子研制的基本结论 。
实验对培养物的叶绿素含量和过氧化物同工酶谱进行了测定 , 并得到了水溶性蛋白和过氧化
物酶的培养时间曲线 , 以期从生化指标探讨人工种子这一特定条件下培养物的生理生化变化 。
关键词 : 旱芹 人工种子 胚状休
植物人工种子 ( p l a n : a r , i f i e主a l s e o d ) 最初的概念由 M u r a s h i g e提出 , 即 ` 将离体培养产
生的胚状体包裹在含有养分和具有保护功能的物质中形成的 , 并在适 宜条件下能够发芽出苗
的颗粒体 ” 〔, 〕。
K a m a da 于 19 8 5年扩展了这一概念 , 认为人工种子内的培养物只要是能够 “ 发育成完 整
的个体 , 并用适当的方法保护 , 以代替植物种子进行流通 ” 即可阁 。 这一 “广义 ” 的人工种
子培养物 , 是随着包裹物的发展而兴起的 , 更由于许多重要植物不易诱导出胚状体或胚的质
量不高 , 所以发展胚状体以外的培养物如顶芽 、 腋芽 、 小鳞茎及花粉胚等等 , 就成了人工种
子研究者关注的材料 , 并已获得了一些结果 , 如 B aP a t等首先用桑树芽包埋成 功 并 在 无 菌
条件下成苗 〔3〕, 其他以芽为培养物的材料有 : 檀香 、 颗草 、 葛芭 、 直杆按 、 华腺馨术 、 花叶
芋 、 百合 、 葡萄等等 , 也都有过报道 。
本实验将旱芹人工种子内子叶期胚状体扩展至 “ 培养物” 并在 国内外首次做了胚性愈伤
组织包埋成人工种子的尝试 , 正是基于以上的想法 。
1 材料与方法
1
.
1 材料
1
.
1
.
1 外植体 : 旱芹 ( A p iu m gr va co len s L . ) 的种子 、 子叶 、 下胚轴及成体的叶片 、 叶柄
等。
1
。
1
.
2 人工种皮 : 海藻酸钠 。
带复旦大学植物学博士点和科技基金资助项目。
倪德祥、 岑益群为我校兼聘教师 。
浙江农村技术师专学报 19 92牟 8 月
.
1
.
3人工胚乳 : M S一 Z e〔 4〕。
。
2 方法
.
2
.
1胚性细胞的产生及胚状体的发生 : 天然种子表面消毒 , 无菌条 件 下 培 养 ( M S + 1
m g / 1 2
, 4 一D + 0 . s m g / 1 K T ) 约 40 天 , 得胚性愈伤组织 。 接到M S培养 基上胚
性愈伤组织转为胚状体 , 12 天左右成为适合包裹人工种子的子叶胚 。
。
2
.
2 人工种子的制作及培养成株〔“ 〕。
.
2
.
3 叶绿素含量测定 : 材料匀浆 , 丙酮萃取 , 6 3 n m 和 6 45 n m比色测定 。
.
2
.
4 水溶性蛋白含量测定 : 紫外分光光度法 。
.
2
.
5 过氧化物酶活力测定 : H Z O Z一愈创木酚反应液 与酶液混合 , 4 7 0n o s o in 读取 O . D .
值 , (酶活性 二 △ O . D ; : 。 / m i n · m g p r o t e i n ) 。
.
2
.
6 过氧化物同工酶的聚丙烯酞胺凝胶电泳分析 : 分离胶 7 % , 浓缩胶 3 % , 20 m A 恒流
电泳 3 hr 。 联苯胺一愈创木酚染色 。
2 结果与讨论
2
。
1 旱芹人工种子内培养物的形态发生 。
2
.
1
.
1 胚性细胞的诱导 :
以旱芹种子内的全胚或萌发后的子叶 、 下胚轴以及幼苗的叶片和叶柄等作外植体 , 经诱
导培养 , 外植体内的薄壁活细胞 , 都可以经启动 、 脱分化 , 产生匀质的薄壁组织 , 即胚性愈
伤组织 。 其外观表而呈黄白色 , 结构疏松 。 通过镜检发现 , 愈伤组织内的细胞外形并非完全
一致 , 基本为两种类型 : 一种为圆形或椭圆形 (长宽之比小于 2 ) 的细胞 , 胞体较小 , 核大
(居细胞中央 ) , 细胞质浓 , 另一类呈长形 , 胞体较大 , 核小 (靠细胞壁 ) , 细胞质稀 。 此
外 , 极个别的细胞畸形 , 如呈 “ Y ” 形 ( 图版 I 一 1 , 2) 。
进一步观察这些细胞的生长发现 : 第一类细胞中 , 有的已增大 , 细胞质变稀 , 核从中央
移至壁旁 , 液泡化程度增加 , 成为第二类细胞 , 不再继续分裂 ; 有的细胞则通过等分或不均
等分 (碎裂 ) 的直接分裂方式 (未发现有丝分裂相 ) , 进行细胞增殖 ( 图版 I 一 2 ) , 这种
细胞即为胚性细胞 。 第二类细胞则只继续伸长 , 壁增厚 , 不再分裂 , 有的甚至解体 (图版 I
一 1 ) 。 胚性细胞连续不断地进行增殖 , 形成分生细胞团 (图版 工一 3 ) 。
关于胚状体起源于单个胚性细胞还是多细胞团的问题 , 曾有不同的看法 。 旱芹材料中 ,
单个胚性细胞或成为胚状体或分化去胚性 , 这两条途径的不确定性决定了胚状体起源问题同
样不能十分肯定 。
2
.
1
.
2 胚状体的发生 :
将胚性愈伤组织接种于M S培养基上 , 继续镜检 , 发现细胞的进一步分裂呈现出 胚 状 体
发生的形态特征 (图版 工一 4 ~ g ) 。 培养至第三天时 , 已发现经振荡分散的培养物中 , 有
5 〕 。 3 % 的多细胞结构为原胚期胚状体 , 球形期 占3 1 。 5% , 还有极少量的心形胚 、 鱼雷胚和子
叶胚 。 培养至 10 一 12 天时 , 子叶期胚剧增 , 约 占总数的 40 % , 是适 合于包埋人工种 子 的 时
期 。 同时 , 也观察到一定比例的畸形胚 , 第 10 天至 15 天内 , 畸形比率平均高达 10 . 4% 。 其表
现 : 胚轴和胚根生长特别快而子叶发育停止 , 胚轴肿胀 、 子叶单侧畸形 ; 胚芽生长锥产生次
级胚状体〔“ 〕, 胚芽生长点异常分裂为二闭 , 但仍合用胚轴胚根 , 产生联体双顶胚状体 (图版
第 3期 倪德祥等 :旱芹人工种于内培养物 的形态发生和生理生化的研 究 9 2
I一 1 0~1 3) 。
结果表明 , 胚状体的发育存在不同步的现象 , 且有一定比例的畸形胚〔, 〕。 这对于农田作
物 , 为达到成熟期一致和丰产等要求 , 必须深入研究加以解决 。 然而对于期望变异 的花卉或
采收期可不同步的作物 , 也许胚状体正是理想的人工种子培养物 。
2
.
1
.
3 人工种子制作及其萌发观察 :
滴珠法〔5 〕包埋第 10 ~ 12天的正常子叶期胚状体。 人工种子呈球形 , 其直径大小可随滴管
口径变化 (图版 工一 1 4) , 一般由培养物本身大小及所包人工胚乳量对转株率的影响而定 。
实验以 3 m m 、 5 m m 滴管口径 , 分别对子叶期胚状体 、 胚性愈伤组织细胞 ( 团 ) 进行包
埋制作人工种子 , 以期获得具有应用潜力的结果 。
表 1 子叶胚或原胚包裹的人工种子 4 Q天萌发结果
胚的种类 播种数量 发芽数 发芽率 (% ) 小植株高 ( m in ) 每颗种子出芽数
胚状体 (子叶期 )
原胚 (胚性愈伤组织 )
1 8 0
1 5 1
1 5 9
1 4 5
8 8
。
9 6
。
1 0
。
5
6
。
5
1 ~ 4
2 ~ 1 3
内舀八é
如表 1所示 , 胚性愈伤组织包埋的人工种子转株率有很大提高 , 但每颗种子产生的小植
株数量变化较大 , 这与胚性细胞 (团 ) 体积小 , 易被大量包入人工种子有关 , 从而提高了种
子成株的概率值 。 若以单个原胚包裹 , 则转株率会有显著下降〔” 〕。 从萌发形态看 (图版 工一
1 5
, 1 6)
, 两者整齐程度相似 , 但由于原胚人工种子有一个成胚过程 , 故萌发时间要晚一周
左右 , 小植株与同期包的子叶胚的植株相比 , 质量弱一些 。 生理指标上 , 叶绿素值显著较低
(见表 3 ) 说明发育程度上有一定差距 。 40 天后形态差异缩小 。
子叶胚人工种子的萌发过程观察表明 , 此过程大致与天然种子相近 , 但也有相区别的特
点 , 即出现了子叶先突破或几乎与胚根同时突破种皮的现象 (图版 工一 1 7 , 18) 。 天然种子
内 , 胚体具备特定的着生位置 、 空间方位 、 营养供给方式和种皮结构 , 胚体大小直接受胚珠
大小的限制 , 而人工种子的大小 由胚状体体积和人工胚乳量决定 , 可人为调节 , 且胚状体空
间位置是随机地处于匀质的高分子凝胶的某一部位 , 并没有利于胚根伸出的种孔之 类 的 结
构 。 因此 , 人工种子胚芽较早突破种皮的现象仍属正常萌发 。 无菌条件下萌发的种子均能长
成完整的小植株 ( 图版 工一 19) , 移至未灭菌泥土中 , 植株未出现异常 , 生长茁壮 ( 图版 工
一 2 0) , 证实了上述结论 。
2
.
1
.
4 有关人工胚乳和播种基质的人工种子形态发生问题 :
人工胚乳中大量元素 、 微量元素和糖分对旱芹人工种子的萌发有一定的影响 (待发表 ) 。
胚乳中含不同浓度寡聚糖 ( 蔗糖 、 葡萄糖 、 麦芽糖 ) 的人工种子播种于 1 / 2 M S无 糖
基质上 , 40 天转株率见图 1 , 结果表明 6 %麦芽糖为最优 ,且浓度因子的作用比寡糖种类因子
的作用更为显著 。 从形态观察 (图版 亚一 1 ) . 6 %糖浓度的种子出苗速度快 , 生长健壮 ,
真叶出现早 , 3 %则次之 , 1 %组生长极缓慢 。 寡糖中 , 含麦芽糖的种子真叶伸展最早 , 根
长和苗高均优于葡萄糖 、 蔗糖组 。 叶绿素含量的测定结果也支持以 上 结 论 (见表 4 ) 。 实
验又以形态指标出发 , 观察胚状体在寡糖基质上的胚根生长情 况 (表 2 ) , 却 发 现 3 %糖
浓度对成苗过程最有利 , 特别在根的发生上 , 与包裹后的胚状体在无糖基质上的萌发比较 ,
3 Q浙江 农村技术师专学报 1 9 9 2年 8月
不难发现由于播种基质的不同 , 人工胚 乳的糖分存在向基质的渗漏问题 , 对这一问题的探讨
是人工种子技术走向实际应用的必然课题之一 。 已经尝试的试图解决渗漏的方法有 : 活性炭
的脱一吸附作用 〔7 ) 、 养分微包裹和添加多糖 〔“ 〕等 。
本实验以马铃薯提取液 (主要为可溶性淀粉 )
和玉米淀粉代替人工胚乳中寡糖 , 探讨不易泄漏 的
淀粉多糖是否能为旱芹人工种子所利用的问题 。 结
论基本是否定的 (图版 亚一 3 ) , 除 2 %玉米淀粉处
理有极为缓慢的萌发外 , 其余均在 25 ~ 50 天内呈黄
色而死亡 。
在无机营养方面 , M S一 2 〔4 〕基础上改变了微 量
元素成份 的人工胚乳M S一 Z a , Z b , Z e , Z d ,
其人工种子 40 天萌发转株情况如图版 亚一 2 , 其中
, , 一 ,一 、 一 , 一 一 , , , ` , _ _ 一 , _ . _ , , 名
MS 一 2 b, 2 “ 转株情况好于其他两者 , 形态 上M一
一 Z c 子叶伸展及真 叶分化均较快 , 是最理想 的 胚
乳成分 。
丁 . ,阅争
图 1 不同浓度的寡糖作人工胚乳糖
分的40 天转株率柱状示意图
表 2 三种寡糖处理的未包裹胚状体生根情况
处理 发根数量 小植株材料鲜重
(条 ) ( g )
平均发根量
( 条 / g鲜重 )
根长
( m m )
植株发根百分率
( % )
80459714382
3104614927In
é
48O
U2
。
3
2
。
8
OUǐ日甘n
n
.比Jt了丹`内b污八U八匕nOJ自行`O一匀
Qdt八`J片`月任8.…1孟勺山noCJJ.
3 0
。
7:
八OQ口
葡萄糖 1 %
3 %
6 %
蔗 糖 l %
3 %
6 %
麦芽糖 1 %
3 %
6 %
2 1
1 6 8
4 6
7 5
2 5 7
1 3 6
3 5
1 9 0
8 0
2
.
2 旱芹人工种子及有关培养物的生理生化 :
2
.
2
.
1 培养物的叶绿素含量测定 :
2
.
2
.
1
.
1 胚性愈伤组织 (原胚 ) 或子叶期胚状体包埋制作人工种子 , 萌发 40 天时测定 每 克
小植株 (包括人工种皮部分 ) 的叶绿素含量 , 结果 (表 3 ) 支持了 “ 两者在发育程度上有差
异 ” 的结论 。
表 3 子叶胚或原胚包襄的人工种子在叶绿家含皿上的差异 ( 40 天 )
叶绿素含量 伽 g / g人工种子 ) 胚状体 (子叶期 ) 原胚 (胚性愈伤组织 )
叶绿素 a
叶绿素b
总量
3 6
。
7
3 5
。
6
7 2
。
3
1 4
。
7
1 2
。
0
2 6
。
7
第 3期 倪德祥等 :旱芹人工种 子内培养物的形态发生和生理生化的研究
2
.
2
.
1
。
2含不同浓度寡糖的人工种子萌发 04天后 , 测定叶绿素含量 , 结果 (表 4 ) 支 持 了
“ 6 %麦芽糖最优 , 且浓度因子的作用大于寡搪种类因子的作用 ” 这一结论 。
表 4 三种寡格处理的人工种子叶绿寮含 t 侧定结果
叶绿素含量 伽 g / g人工种子 ) 葡萄糖 蔗 糖 麦芽糖
1 % 3 % 6 % 1 % 3 % 6 % 1 % 3 % 6 %
叶绿素 a 2 . 5 1 5 . 6 2 2 。 2 4 一 0 7 。 9 1 7 J 4 。 3 8 一9 2 4 一 2
叶绿素 b 3 . 8 1 9 . 2 4 8 . 8 7 . 3 3 6 . 5 4 6 . 1 5 . 0 2 7 . 4 5 2 。 4
叶绿素总量 6 . 3 3 4 . 8 7 1 . 0 1 1 . 3 4 4 一 4 6 3 一 8 9 。 3 3 6 一 3 7 6 。 6
2
.
2
.
2 培养物水溶性蛋 白含量的测定 :
人工种子与天然种子在水溶性蛋白含量上有一定差异 (表 5 ) 。 天然种子含大量的贮藏
蛋白 , 萌发时转为可溶性蛋白 (一般认为是功能蛋白 ) 参与生理过程 , 人工种子胚状体中的
蛋白则低 30 %左右 。 天然种子外植体培养过程中 , 由于 K T 、 2 . 4一 D 等生长调节剂的存在 ,
细胞分裂速度很快 , 不利于蛋白积累 ; 此时的细胞疏松 , 细胞间含水量大 , 造成胚性愈伤组
织蛋白水平较低 。 胚性细胞 (团 ) 向胚状体的发育过程中 , 可溶性蛋白在短时间内成倍地增
长 , 至胚状体包入人工种子一周后达到峰值 (图 2 ) 。 此后随组织分化程度的提高而降低 。
表 5 组织培养材料中水溶性蛋白含里和过妞化物醉活力的洲定
材料编号 被测培养物 培养时间进程
(天 )
蛋白浓度
( m g / m l )
带
过氧化物酶活力
( O D
。
/ m i
n · g鲜重 )
萌发的天然种子 7
胚性愈伤组织 60
胚状体 (子叶期 ) 72
人工种子培养一周料 80
人工种子培养四周料 1 01人工种子长成的成体 1 30
4
。
1 7 9
0
。
8 6 7
2
。
5 8 5
2
。
9 3 4
0
。
9 6 5
0
。
2 4 4
0
。
4 0 1
0
。
4 3 7
4
。
7 3
3
。
3 2
2
。
3 0
0
。
0 6 6 5
,土勺é八04
.之众几巳ō入健讯浑识球划
n.Ul
,`
6川八U,ó ,“
(火飞,之怠邻洲迫关荤
带 1 克新鲜材料制得蛋白提取液 5 m l。 米 带
2
.
2
.
3 培养物中过氧化物酶活力的测定 :
人工种子制作流程 的组织培养过程中 , 材料的
发育阶段 、 发育程度不同 , 可反映在过氧化物酶活
力的变化上 (表 5 ) 。 天然旱芹种子 萌 发 至 7 天
时 , 测得的酶活力较大 , 但由于大量贮藏物质和保
护结构的存在 , 以单位鲜重计算的酶量就 相 对 较
低 。 胚性细胞的分裂增殖 , 只是一个数量的增加 ,
没有细胞分化发育的变化 , 酶活曲线平 稳 。 在 M S
上生长的胚状体 , 酶活急剧增高 , 在子叶期 ( 7 2 d) 达
到高峰 (图 2 ) ,为 4 . 7 3 O D . / Iin n · g , 二表 明胚状体
这一特殊发育过程其生理生化变化是十分剧烈的 。
只刚活组 织 (不 包括人工种皮 )
+声
衣 O 会
`。 7 2 吕。 20 1 13 0 时间进程 (关 )
图 2 人工种子培养物的水溶性蛋 白
和过衷化物酶活 变化动态曲线
人工种子选择胚状体作为培养物 , 对于有效地在这一特殊阶段实现人工调控是非常有利的 。
浙江农村技术师专学报 19 92年 8月
2
。
2
。 4有关材料过氧化物同工酶的聚丙烯酸胺凝胶电泳分析 :
酶谱 (图 3 )可分成三个区域 : P OI
P O亚 , P O 皿 , 各有 一 条 较 深 的 谱 带
P O I
: 、
P O I
: 、
PO I 作为特征 带 。 P O I
区除天然旱芹成体的叶柄无 P O I :外 , 各
材料基本相同 。 P O 亚区的比较显示 , 人工
种子得到的旱芹成体兼有叶片 、 叶柄外植
体的谱带特征 , 是否与来源于这两者的体
细胞组织有关 , 上述图谱尚不能肯定 , 亦
不能作为外植体与相应来源的胚状体之间
同工酶表达相关联的直接证据 。
N争 2 3 4 0 b 7 .
. 口名口 口刀含翻 口口二口 `二口 习 口习二习 ` J 占I J
【互互习 区〕 仁交 ]
i
,〔夕 1 1
L交习 矛了) z :
圆 面 哪 兹器孟
` 二刀 仁二二 J P口 皿
四 圈 圈 泛勿 阴 可
图 3 组织培养物的过衷化物 同了醉谙理 .式阁
a 见表 5 。
3 小 结 b 天然种子来源的早芹成体的叶片
。
c 天然种子来源的早芹成体 的叶柄 。
旱芹胚性细胞和胚状体的发生过程是比较典型的 ; 畸形胚比例在发生途径中小于 10 % ,
一般不适合于制作人工种子 ; 胚性细胞 (团 ) 的包裹使人工种子的制作流程有所简化并提高
了转株数量和比率 , 是除体细胞胚 、 不定芽 、 花粉胚 、 小鳞茎等包容物之外的一个 初 步 尝
试 ; 播种基质对人工胚乳成分的泄漏及胚根的生长有重要影响 。
人工种子不同于天然种子 , 其中的生命活力部分由于来源和种子结构 、 营养状 况 的 不
同 , 造成萌发时的形态差异 , 其生理生化特点表现在 : 体细胞胚生命活动在胚性细胞一胚状
体一小植株之间的时期最为活跃 ( 60 ~ 8 。天 ) , 过氧化物酶有突出的峰值 , 蛋白含量有成倍
的提高 ( 图 2 ) , 生物量增加最为显著 。 关于体细胞胚近似于合子胚还是近似于体 细 胞 组
织 , P A G E分析尚不能确定 , 有待深入研究 。
参 考 文 献
1 M u r a s h i g e T
.
T h e i m p a e t o f p l a n t t i s s u e e u l t u r e o n a g r i e u l t u r e
,
I n
: F r o n t i e r s
0 f P l a n t T i s s u e C u l t
.
C a l g a r y U n i v
.
P r e s s
,
C a n a d a
, ( 1 , 78 ) 1 5~ 2 6
2 K a m a d a H
. 气 r t i f i e i a 1 S e e d . I n : P r a e t i e a l T e e h n o 1o g y o n t h e M a s s P r o d u e t i o n o f
C l o n a l P l a n t s ( R
.
T a n a d a e d
.
)
,
C M C P u b l i s h e r
,
T o k y o
,
( 105 5 ) 魂s
3 B a p a t V
.
A
. ,
M
.
M h a t r e
,
P
。
S
.
R a o P r o p a g a t i o n o f M o r u s i n d i e a L
.
( M u l b e r r 了)
b y e n e a p s u l a t e d s h o o t b u d s
,
P l a n t C e l l R e p
。
( 1 9 5 7 ) 6 : 30 3~ 3 0 5
4 纪才圭 , 倪德祥 , 沈大棱 , 毛家犀 , 鞠耐霜 。 人工种子的种皮强度 。 复旦学报 ( 1 9 9 1 )
3 0 ( 4 ) : 3 8 8~ 吕9 1
5 倪德祥 , 蒋如敏 , 张蓓 , 岑益群 , 沈大棱 , 纪才圭 。 旱芹人工种子的研制 。 复旦学报 , ( 199 1 )
3 0 ( 4 ) : 3 6 8~ 3 7 4
6 倪德祥 , 川芍叶离体培养中体细胞胚发生的研究 。 自然杂志 , ( 1 9 8 8 ) 1 ( 6) , 47 6~ 4 7
7 黄学林 , 傅家瑞 , 孙景欣海藻酸钠作为首指种胚和贡柑体胚包裹胶囊的特性。 中山大学学报 ( 自
然科学论丛 ) ( 1 9 8 9 ) , 1 8 , 9 9~ 1 0 5
8 R e d e n b a u g h K
。 ,
D
.
S l a d e
,
P
.
V i s s
,
J
。
A
.
F u i i i E
o e a P s u 1a t i o n o f s o m a t i e e m b r 了 0 5
i n s y
刀 t h e t i e s e e d e o a t s , I诬o r t S e i e n e e , 1 0 8 7 , 2 2 ( 5 ) : 吕0 3~ 5 0日


肠第 3期 倪德祥等 :旱芹人工种予内培养物的形态发生和生理生化的研 究
STD UI E O S N MO RPH E E O N S GI S N AD PH Y I O S LO GI C A LC I } AN GE F O S
C U LTI VI T ANT GI S SE US下 NC E LE Y RAF I I T RCI S A LE ED S
N iD ex ian g X i eWn ek a iC hn eg Y iqn u J in a g Ru m in g
( Bi ol og yD ePa r tm en t
, F u D a n U n i v e r s i t y )
W a n g L u t o n g
( A g r i e u l t u r e D e P a r t m e n t )
A b s t r a e t
: T h e P r o b l e m s r e l a t e d t o e e l e r y a r t i f i e i a l s e e d
s o n m o r p h o g e n e s i s o f
e u l t i v a t i n g t i s s u e s i n t h e P r o e e s s f r o m d e d i f f e r e n e t i a t i o n o f s o m a t i e
e e l l s
,
e m b r y o g e n e s i s t o P l a n t f o r m a t i o n w e r e d i s e u s s e d
。
T 五15 P a P e r a l s o a n a l y s i s e d s t a t e o f
e m b r 了 o n i e e e l l s , s e l e e t i o n o f e m b r y o i d , a b e r r a n t e tn b r y o i d , e o a t i n g a n d
g e r 皿 i n a t i o n o f e m b r y o n i e e e l l s / e m b r y o i d a n d m e d i u m f o r s o w n e t e . T 五e r e f o r e , s o m e
f u n d a m e n t a l e o n e l u s i
o n s o f e e l e r y s e e d s P r e P a r a t i o n 五a 丫 e b e e n 功 a d e .
10 o r d e r t o p r o b e i n t o p h 了s i o l o g i e a l e h a n g e s i n t h e s p e e i a l e o n d i t i o n o f
s了 n t h e t i e s e e d , w e t e s t e d i s o z y m o g r a m s o f p e r o x i d a s e a n d e o n t e n t s o f e h l o r o p h y l l
i n t i s s u e s
。
M o r e o v e r
,
d y o a m i e e u r v e o f w a t e r d i s s o l v e d p r o t e i n a n d a e t i v i t y o f
P e r o 二 i d a s e w e r e o b t a i n e d .
K e y W o r d s
: C e l e r y , A r t i f i e i a l S e e d , E m b r y o i d
(上接第 53 页 )
2
。
5 红蜘蛛是主要病虫害 , 应及时加以防治 。
8 初步评价
3
.
1 甜夏橙晚熟耐贮 , 并可留树过冬 , 对延长柑桔供应时间 , 调整上市时间很有帮助 。
3
.
2 甜夏橙果实美观 、 大小适中 , 而且种子单胚 , 是进行柑桔杂交育种的好材料 。
3
.
3 甜夏橙果汁风味浓郁 , 并有香味 , 是良好 的制汁和加工做粒粒 橙的原料 。
因甜夏橙种植的时间还不 长 , 范围也不大 , 对其特性的认识和产品的深度加工利用还有
待进一步深入 。