全 文 ：　５０３　
７４８－７５１．
［１１］ Ｙａｇｉｈａｓｈｉ　Ｔ，Ｍｉｚｕｎｏ　Ｍ，Ｃｈｉｎｏ　Ｂ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ
ＣＹＰ２Ｄ６＊１０ａｌｅｌｅｓ　ａｎｄ　ｃｏ－ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ＣＹＰ２Ｄ６－ｄｅｐｅｎｄ－
ｅｎｔ　ｄｒｕｇｓ　ｏｎ　ｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎｅ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｓｃｈｉｚｏ－
ｐｈｒｅｎｉａ［Ｊ］．Ｈｕｍ　Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００９，２４ （４）：３０１－
３０８．
［１２］ Ｃｈｏ　ＨＹ，Ｌｅｅ　ＹＢ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ　ａｎｄ　ｂｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｃｅ　ｅｖａｌｕ－
ａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎｅ　ｉｎ　ｈｅａｌｔｈｙ　ｍａｌｅ　ｓｕｂｊｅｃｔｓ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ＣＹＰ２Ｄ６ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ［Ｊ］．Ａｒｃｈ　Ｐｈａｒｍ　Ｒｅｓ，２００６，２９ （６）：
５２５－５３３．
（收稿日期：２０１０－０４－１６；修回日期：２０１０－０６－０７）
高效液相色谱法同时测定旱芹中
东莨菪内酯和滨蒿内酯含量
谭亮１，张琦２，范旭航２，陈晓辉１，钱忠直１，３，毕开顺１，贾英２＊ （１．沈阳药科大学药学院，沈阳　１１００１６；
２．沈阳药科大学中药学院，沈阳　１１００１６；３．国家药典委员会，北京　１０００６１）
摘要：目的　建立同时测定旱芹中东莨菪内酯和滨蒿内酯含量的高效液相色谱法，并考察旱芹中这２种成分的含量
与产地、采收期的关系，为旱芹药材的质量控制提供依据。方法　色谱柱：Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ１８柱 （２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，
５μｍ）；流动相：甲醇－水 （３２∶６８，ｖ／ｖ），流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ
－１；检测波长：３４０ｎｍ，柱温：３５℃。结果　东
莨菪内酯和滨蒿内酯的浓度分别在０．５１０　０～１０．２０μｇ·ｍＬ
－１ （ｒ＝０．９９９　４）、０．５３７　５～１０．７５μｇ·ｍＬ
－１ （ｒ＝
０．９９９　２）与峰面积呈良好的线性关系 （ｎ＝６），平均回收率 （ｎ＝９）分别为９５．１％、９６．４％。结论　该方法操作
简便，结果准确，重复性好，可作为旱芹中香豆素类成分的质量控制方法。
关键词：东莨菪内酯；滨蒿内酯；旱芹；香豆素类成分；高效液相色谱法
中图分类号：Ｒ９２７．２，Ｒ２８４．１　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１６７２－２９８１ （２０１０）０７－０５０３－０４
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－２９８１．２０１０．０７．００７
Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ　ａｎｄ
ｓｃｏｐａｒｏｎｅ　ｉｎ　Ａｐｉｕｍ　ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ　Ｌ．ｂｙ　ＨＰＬＣ
ＴＡＮ　Ｌｉａｎｇ１，ＺＨＡＮＧ　Ｑｉ　２，ＦＡＮ　Ｘｕ－ｈａｎｇ２，ＣＨＥＮ　Ｘｉａｏ－ｈｕｉ　１，ＱＩＡＮ　Ｚｈｏｎｇ－ｚｈｉ　１，３，ＢＩ　Ｋａｉ－ｓｈｕｎ１，ＪＩＡ　Ｙｉｎｇ２＊
（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００１６；２．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉ－
ｎｅｓｅ　Ｍａｔｅｒｉａ　Ｍｅｄｉｃａ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００１６；３．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ　Ｃｏｍｍｉｓ－
ｓｉｏｎ，Ｂｅｊｉｎｇ１０００６１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａｎ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ　ａｎｄ　ｓｃｏｐａｒｏｎｅ　ｉｎ
Ａｐｉｕｍ　ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ　Ｌ．Ａ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｏｒｉｇｉｎｓ　ａｎｄ　ｃｏｌｅｃｔｉｏｎ　ｐｅ－
ｒｉｏｄ　ｗｅｒｅ　ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ１８ （２５０ｍｍ × ４．６ｍｍ，５μｍ ）ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ．Ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ
ｐｈａｓｅ　ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ　ｏｆ　ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｗａｔｅｒ（３２∶６８，ｖ／ｖ）ａｔ　１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　３４０ｎｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ
ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　３５℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｈａｄ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｗｉｔｈｉｎ　０．５１０　０－１０．２０μｇ·ｍＬ
－１　ｆｏｒ　ｓｃｏｐｏ－
ｌｅｔｉｎ（ｒ＝０．９９９　４）；０．５３７　５－１０．７５μｇ·ｍＬ
－１　ｆｏｒ　ｓｃｏｐａｒｏｎｅ（ｒ＝０．９９９　２），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ（ｎ
＝９）ｗａｓ　９５．１％ｆｏｒ　ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ　ａｎｄ　９６．４％ｆｏｒ　ｓｃｏｐａｒｏｎｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ　ａｎｄ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉ－
ｂｌｅ．Ｉｔ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ　ｉｎ　Ａｐｉｕｍ　ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ　Ｌ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ；ｓｃｏｐａｒｏｎｅ；Ａｐｉｕｍ　ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ　Ｌ．；ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ；ＨＰＬＣ
　　旱芹是伞型科植物旱芹 （Ａｐｉｕｍ　ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ　Ｌ．）的带
根全草，又名药芹、香芹、野芹等，为一年生或多年生草
本，在我国南北各地均有分布，资源丰富。祖国医学证明，
旱芹性凉，味甘、辛、微苦。归肝、胃、肺经。能平肝、清
　　作者简介：谭亮，男，在读硕士研究生，主要从事天然药物降脂成分研究，Ｔｅｌ：１３９９８２０４８０６，Ｅ－ｍａｉｌ：ｔａｎｌｉａｎｇ０１１７＠１２６．ｃｏｍ
＊通讯作者：贾英，女，副教授，硕士生导师，主要从事中药质量控制、中药有效成分药动学研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｉａｙｉｎｇｓｙｐｈｕ＠ｙａ－
ｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
中南药学２０１０年７月第８卷第７期　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｓｏｕｔｈ　Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ｊｕｌｙ　２０１０，Ｖｏｌ．８Ｎｏ．７
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热、祛风、利水、止血、解毒。主治肝阳眩晕、风热头痛、
咳嗽、黄疸、小便淋痛、尿血、崩漏、带下、疮疡肿毒［１－２］。
现代药理研究表明旱芹具有抑制致癌物质、抗病毒、治疗各
种炎症、抗氧化、降压、降血脂、降血糖等作用［３－１０］。而众
多化学成分中香豆素类成分有降压、降血脂的功效［１１－１４］。
到目前为止，未见旱芹中有关这２种香豆素类成分提取分离
和含量测定的文献报道。本研究采用 ＨＰＬＣ法对东莨菪内
酯和滨蒿内酯 （结构式见图１）进行含量测定［１５－１８］，为旱芹
中香豆素类成分质量标准的建立提供了依据。
图１　东莨菪内酯 （１）和滨蒿内酯 （２）的化学结构式
Ｆｉｇ　１　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ（１）ａｎｄ　ｓｃｏｐａｒｏｎｅ（２）
１　仪器与试药
ＹＬ９１２０型高效液相色谱仪 （配备 ＹＬ９１２０型 ＵＶ／ＶＩＳ
检测器、ＨＴ－１３０型柱温箱、ＹＬ９１１１型双泵、Ａｕｔｏｃｈｒｏ－
２０００色谱工作站，韩国英麟公司）。
　　东莨菪内酯对照品 （批号：０９０２０３，纯度：≥９９％，上
海友思生物技术有限公司），滨蒿内酯对照品 （批号：
２００００１，纯度：≥９９％，中国药品生物制品检定所）；甲醇
（色谱纯，山东禹王实业有限公司化工分公司），其余试剂均
为分析纯，水为二次蒸馏水 （实验室自制）。
收集不同来源的２２批旱芹药材，经沈阳药科大学中药
学院孙启时教授鉴定为伞型科芹属植物旱芹 （Ａｐｉｕｍ　ｇｒａｖｅ－
ｏｌｅｎｓ　Ｌ．）的全草及不同月份的根、茎、叶样本 （见表１）。
表１　旱芹不同来源样品
Ｔａｂ　１　Ｏｒｉｇｉｎ　ｏｆ　Ａｐｉｕｍ　ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ　Ｌ．
样品号
（ｓａｍｐｌｅ
Ｎｏ．）
来源
（ｏｒｉｇｉｎ）
样品号
（ｓａｍｐｌｅ
Ｎｏ．）
来源
（ｏｒｉｇｉｎ）
样品号
（ｓａｍｐｌｅ
Ｎｏ．）
来源
（ｏｒｉｇｉｎ）
１ 沈阳６月根 ９ 沈阳８月叶 １７ 沈阳夏季
２ 沈阳６月茎 １０ 沈阳９月根 １８ 沈阳秋季
３ 沈阳６月叶 １１ 沈阳９月茎 １９ 河北
４ 沈阳７月根 １２ 沈阳９月叶 ２０ 新疆
５ 沈阳７月茎 １３ 沈阳１０月根 ２１ 广州
６ 沈阳７月叶 １４ 沈阳１０月茎 ２２ 韩国
７ 沈阳８月根 １５ 沈阳１０月叶
８ 沈阳８月茎 １６ 沈阳春季
　　注：１～１５号样品为自己种植，１６～２２号样品为市场购买。
　　ｎｏｔｅ：Ｎｏ．１－１５ａｒｅ　ｓｅｌｆ－ｐｌａｎｔｅｄ　ｓａｍｐｌｅｓ，Ｎｏ．１６－２２ａｒｅ　ｍａｒ－
ｋｅｔ　ｓａｍｐｌｅｓ．
２　方法与结果
２．１　色谱条件
色谱柱：迪马公司 Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ１８柱 （２５０ｍｍ × ４．６
ｍｍ，５μｍ）；流动相：甲醇－水（３２∶６８）；流速：１．０ｍＬ·
ｍｉｎ－１；检测波长：３４０ｎｍ；柱温：３５℃；进样量：２０μＬ。
２．２　溶液制备
２．２．１　混合对照品溶液　分别精密称取东莨菪内酯和滨蒿
内酯对照品各约２．０ｍｇ，置同一２ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解
并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液 （含东莨菪内酯
１．０２ｍｇ·ｍＬ－１，滨蒿内酯１．０７５ｍｇ·ｍＬ－１）。
２．２．２　供试品溶液　取旱芹样品粉末 （过４０目筛）１．０ｇ，
精密称定，置２０ｍＬ具塞试管中，加１０ｍＬ　８０％乙醇，置
８０℃水浴加热回流提取２次，２ｈ·次－１。合并提取液，并
用８０％乙醇洗涤滤渣。滤液去除溶剂，所得浓缩液按１∶１
（ｖ／ｖ）依次加石油醚、二氯甲烷萃取。将二氯甲烷萃取液减
压蒸馏除去溶剂，残渣用甲醇溶解并转移至５ｍＬ量瓶中，
用甲醇稀释至刻度，摇匀。０．４５μｍ微孔滤膜过滤后取续滤
液作为供试品溶液。
２．３　系统适应性试验
分别取对照品混合储备液、供试品溶液各２０μＬ，注入
高效液相色谱仪，记录色谱图 （见图２）。在此实验条件下，
供试品溶液中东莨菪内酯和滨蒿内酯的分离度较好，且其他
杂质峰无干扰。
图２　混合对照品 （Ａ）和供试品溶液 （Ｂ）的高效液相色谱图
Ｆｉｇ　２　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｍｉｘｅｄ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ａ ）ａｎｄ
ｓａｍｐｌｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｂ）
１．东莨菪内酯 （ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ）；２．滨蒿内酯 （ｓｃｏｐａｒｏｎｅ）
２．４　线性关系试验
精密量取混合对照品储备液１００μＬ，至１０ｍＬ量瓶中，
加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取稀释后的储备溶
液０．１、０．２、０．５、１．０和１．５ｍＬ，分别置２ｍＬ量瓶中，
用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，另精密量取稀释后的储备
溶液２ｍＬ与上述５份一同作为标准系列溶液。取上述溶液
各２０μＬ，按 “２．１”项色谱条件下进行分析。以对照品浓
度Ｃ （μｇ·ｍＬ
－１）为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制
标准曲线并进行回归计算。得东莨菪内酯和滨蒿内酯标准曲
线回归方程分别为Ａ＝５８．３２　Ｃ＋３．４１３，ｒ＝０．９９９　４；Ａ＝
５９．２６　Ｃ＋４７．４３，ｒ＝０．９９９　２。结果表明东莨菪内酯和滨蒿
内酯浓度分别在０．５１０　０～１０．２０μｇ·ｍＬ
－１和０．５３７　５～
１０．７５μｇ·ｍＬ
－１与峰面积呈良好的线性关系。
２．５　精密度试验
取供试品溶液 （沈阳夏季旱芹）２０μＬ，按 “２．１”项色
谱条件重复进样测定６次，２个成分峰面积的 ＲＳＤ分别为
１．４％和１．０％。结果表明仪器精密度良好。
２．６　稳定性试验
取供试品溶液 （沈阳夏季旱芹），室温下放置，分别于
Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｓｏｕｔｈ　Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ｊｕｌｙ　２０１０，Ｖｏｌ．８Ｎｏ．７　中南药学２０１０年７月第８卷第７期
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０、１、２、４、６、８、１０和２４ｈ时取２０μＬ按 “２．１”项色谱
条件进行分析。结果东莨菪内酯和滨蒿内酯在２４ｈ内稳定，
ＲＳＤ分别为２．９％和２．１％。
２．７　重复性试验
称取同一旱芹样品粉末 （沈阳夏季旱芹）６份，按
“２．２．２”项下方法操作，取２０μＬ进行分析。东莨菪内酯平
均含量２５．２２μｇ·ｇ
－１，ＲＳＤ为２．０％；滨蒿内酯平均含量
２０．１２μｇ·ｇ
－１，ＲＳＤ为２．６％。结果表明方法重复性良好。
２．８　回收试验
称取已知含量的旱芹样品粉末 （沈阳夏季旱芹）９份，
每份０．５ｇ，精密称定，按低、中、高浓度分别精密加入对
照品溶液，每一浓度３份，按 “２．２．２”项下方法操作，取
２０μＬ按 “２．１”项色谱条件下进行分析，结果见表２。
表２　旱芹中东莨菪内酯和滨蒿内酯的回收试验结果 （ｎ＝９）
Ｔａｂ　２　Ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ　ａｎｄ　ｓｃｏｐａｒｏｎｅ　ｉｎ　Ａｐｉｕｍ　ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ　Ｌ．（ｎ＝９）
成分
（ｃｏｍｐｏ－
ｓｉｔｉｏｎ）
样品含量
（ｓａｍｐｌｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ）
／ｍｇ
加入量
（ａｄｄｅｄ
ｃｏｎｔｅｎｔ）
／ｍｇ
测得量
（ｍｅａｓｕｒｅｄ
ｃｏｎｔｅｎｔ）
／ｍｇ
回收率
（ｒｅｃｏｖｅｒｙ）
／％
平均
回收率
（ａｖｅｒａｇｅ
ｒｅｃｏｖｅｒｙ）
／％
ＲＳＤ
／％
东莨菪内酯 １２．６２　 ６．３０　 １８．６９　 ９６．３
１２．６１　 ６．３０　 １８．５７　 ９４．６
１２．６１　 ６．３０　 １８．７５　 ９７．５
１２．６１　 １２．６０　 ２４．３９　 ９３．５
１２．６０　 １２．６０　 ２４．５２　 ９４．６　 ９５．１　 １．３
１２．６０　 １２．６０　 ２４．６８　 ９５．９
１２．５９　 １８．９０　 ３０．５９　 ９５．２
１２．５８　 １８．９０　 ３０．４７　 ９４．７
１２．６０　 １８．９０　 ３０．３３　 ９３．８
滨蒿内酯 １０．０７　 ５．０３　 １４．８３　 ９４．７
１０．０３　 ５．０３　 １４．９７　 ９８．３
１０．０６　 ５．０３　 １５．００　 ９８．３
１０．０３　 １０．０５　 １９．９０　 ９８．２
１０．０６　 １０．０５　 １９．７１　 ９６．０　 ９６．４　 １．７
１０．０５　 １０．０５　 １９．５１　 ９４．１
１０．０４　 １５．０８　 ２４．６９　 ９７．２
１０．０５　 １５．０８　 ２４．３７　 ９５．０
１０．０６　 １５．０８　 ２４．５５　 ９６．１
２．９　样品含量测定
分别取不同产地的旱芹样品粉末１．０ｇ，精密称定，每
个产地３份，分别按 “２．２．２”项下方法操作，取２０μＬ按
“２．１”项色谱条件进行分析。测定了２２批旱芹 （包括根、
茎、叶及不同产地全草）中东莨菪内酯和滨蒿内酯含量，结
果见表３。
３　讨论
３．１　提取条件选择
①提取溶剂浓度：考察了提药溶剂浓度７０％、８０％、
９０％。结果表明８０％乙醇提取效率最高；②提取时间：考
察了提药时间每次分别为６０、９０、１２０、１５０ｍｉｎ。结果表明
提药时间为１２０ｍｉｎ时已基本提取完全；③溶剂萃取次数：
考察了溶剂的萃取次数１、２、３、４次，结果表明石油醚、
二氯甲烷分别萃取３次时已基本提取完全。
表３　东莨菪内酯和滨蒿内酯的含量测定结果 （ｎ＝３）
Ｔａｂ　３　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ　ａｎｄ　ｓｃｏｐａｒｏｎｅ（ｎ＝３）
样品编号
（ｓａｍｐｌｅ
Ｎｏ．）
含量 （ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ
ｓａｍｐｌｅ）／μｇ·ｇ－１
东莨菪内酯
（ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ）
滨蒿内酯
（ｓｃｏｐａｒｏｎｅ）
样品编号
（ｓａｍｐｌｅ
Ｎｏ．）
含量 （ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ
ｓａｍｐｌｅ）／μｇ·ｇ－１
东莨菪内酯
（ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ）
滨蒿内酯
（ｓｃｏｐａｒｏｎｅ）
１　 １３．５６　 １０．１３　 １２　 ２４．６１　 ２９．６１
２　 ２５．６５　 １１．６１　 １３　 ２９．３２　 ９．１３
３　 ２８．３４　 １４．７３　 １４　 ３２．１５　 １３．２２
４　 ２４．２４　 ９．２１　 １５　 １７．４９　 ２４．９３
５　 ２８．０６　 １４．５９　 １６　 ２５．２２　 ２０．１２
６　 ２１．５５　 １９．５０　 １７　 ２８．７６　 ３６．３４
７　 ２９．２４　 ９．８９　 １８　 ２７．２６　 ３４．０７
８　 ２９．４８　 １２．８５　 １９　 １６．５５　 ９．６３
９　 ３０．５６　 ２８．６７　 ２０　 １６．５８　 １７．３８
１０　 ２１．３３　 １０．９３　 ２１　 ４９．３５　 ２４．４８
１１　 １９．２２　 １４．２６　 ２２　 １９．５７　 ２４．２３
３．２　色谱条件选择
① 本研究采用等度洗脱即可达到物质色谱峰的分离度
要求，而梯度洗脱虽减短了出峰时间，但色谱峰分离度达不
到要求，故选用等度洗脱。②对不同的流动相：乙腈－水、
甲醇－水洗脱体系进行了考察，经分析可知甲醇－水洗脱体系
可达到分离度要求，且峰形较佳，故选用甲醇－水。③在
１９０～４００ｎｍ进行紫外扫描，东莨菪内酯在３３８ｎｍ处有最
大吸收，而滨蒿内酯在３４３ｎｍ处有最大吸收，选中间波长
３４０ｎｍ进行分析，结果各色谱峰分离度良好，故选３４０ｎｍ
作为分析检测波长。
３．３　供试品制备时须注意的问题
在供试品的制备中若提药后直接加二氯甲烷萃取，经
ＨＰＬＣ分析发现：色谱峰很多，对该两个成分造成一定干
扰，无法分离。故在用二氯甲烷萃取前先加石油醚萃取，以
除去部分杂质，减免干扰峰的出现，使两者与其他杂质峰分
离度均＞１．５。
３．４　小结
由实验结果可知：①东莨菪内酯在旱芹不同部位的含量
依次为茎＞叶＞根；滨蒿内酯在旱芹不同部位的含量依次为
叶 ＞ 茎 ＞ 根；②从６月到１０月，旱芹根中东莨菪内酯的
含量逐渐增加，１０月时含量最高；滨蒿内酯的含量有一定
上下波动，９月时含量最高；③从６月到１０月，旱芹茎中
东莨菪内酯的含量有一定上下波动，１０月时含量最高；滨
蒿内酯的含量有增加的趋势，７月时含量最高；④从６月到
１０月，旱芹叶中东莨菪内酯的含量有减小趋势，８月含量最
高；滨蒿内酯的含量逐渐增加，９月含量最高；⑤广州旱芹
全草中东莨菪内酯含量最高，河北、新疆含量最低；沈阳夏
季旱芹全草中滨蒿内酯含量最高，河北含量最低。


参考文献
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（收稿日期：２０１０－０３－３１；修回日期：２０１０－０５－１１）
用ＬＣ／ＬＣ－ＵＶ系统建立全血中环孢霉素Ａ自动化测定方法
谷利民１，肖轶雯２，彭真２，李焕德２，王峰２＊ （１．湖南省张家界市人民医院药剂科，湖南 张家界　４２７０００；中南大
学湘雅二医院临床药学研究室，长沙　４１００１１）
摘要：目的　建立自动化ＬＣ／ＬＣ－ＵＶ系统建立全血中环孢霉素 Ａ测定方法。方法　ＬＣ１ 色谱柱ＦＲＯ－ＸＢ　ＣＮ （２０
ｍｍ×４．６ｍｍ，１０μｍ，ＡＮＡＸ），流动相为水－乙腈＝３５∶６５ （ｖ／ｖ），流速为１．０ｍＬ·ｍｉｎ
－１，中央处理体系温度
为４０℃，ＬＣ２ 系统中分析色谱柱为ＡＣ－ＣＮ （２００ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ，ＡＮＡＸ），流动相为乙腈－水，采用梯度系
统，０～１５ｍｉｎ流动相中乙腈比例从４０％直线上升到５３％，流速为０．７ｍＬ·ｍｉｎ－１。转移辅助流速为０．７ｍＬ·
ｍｉｎ－１。目标物转移窗口为２．２０～３．２０ｍｉｎ；定量环为５００μＬ，样品用乙腈预处理。结果　环孢霉素Ａ在０．０２６～
１．０１０μｇ·ｍＬ
－１与峰面积线性关系良好，平均相关系数为０．９９９　１，萃取回收率在１０１．０％～１０３．０％，最低定量浓
度为０．０１３μｇ·ｍＬ
－１。日内ＲＳＤ＜５％ （ｎ＝６），日间ＲＳＤ＜５％ （ｎ＝１８），准确度在１００．３％～１０２．６％。结论　
用自动化ＬＣ／ＬＣ－ＵＶ系统建立的环孢霉素Ａ测定方法人为干预步骤少、准确性与精密度良好，方法开发、运行及
控制自动化程度高，适合于环孢霉素Ａ血药浓度测定及动力学研究。
关键词：ＬＣ／ＬＣ－ＵＶ；治疗药物监测；环孢霉素Ａ；质量控制
中图分类号：Ｒ９２７．２　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１６７２－２９８１ （２０１０）０７－０５０６－０４
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－２９８１．２０１０．０７．００８
ＬＣ／ＬＣ－ＵＶ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ａｕｔｏｍａｔｅｄ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ　Ａ　ｉｎ　ｗｈｏｌｅ　ｂｌｏｏｄ
ＧＵ　Ｌｉ－ｍｉｎ１，ＸＩＡＯ　Ｙｉ－ｗｅｎ２，ＰＥＮＧ　Ｚｈｅｎ２，ＬＩ　Ｈｕａｎ－ｄｅ２，ＷＡＮＧ　Ｆｅｎｇ２＊ （１．Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｚｈａｎｇｊｉａｊｉｅ，
Ｚｈａｎｇｊｉａｊｉｅ　Ｈｕｎａｎ　４２７０００；２．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｓｅｃｏｎｄ　Ｘｉａｎｇｙａ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００１１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａｎ　ａｕｔｏｍａｔｅｄ　ＬＣ／ＬＣ－ＵＶ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｐｒｏｐｏｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ　Ａ
　　作者简介：谷利民，男，主管药师，主要从事临床药学工作，Ｔｅｌ：１３９７４４９８００８，Ｅ－ｍａｉｌ：０３２４８００８＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ 　　＊通讯作者：王
峰，男，主管药师，主要从事色谱新技术研究与复杂基质中化合物色谱分析，Ｔｅｌ：（０７３１）８５５５７０９６，１３９７４８０５３２６，Ｅ－ｍａｉｌ：Ｒｏｉｔｅｃｈ
＠１２６．ｃｏｍ
Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｓｏｕｔｈ　Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ｊｕｌｙ　２０１０，Ｖｏｌ．８Ｎｏ．７　中南药学２０１０年７月第８卷第７期