全 文 ：第 6 3卷 第 5期
20 0 3年 10 月
实 验 生 物 学 报
c A
ta B io lo gia eEx P er i m en ta l i sSin ia c
V
〔〕 1
.
36
,
N
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.
5
〔戈ot b e r 2 00 3
惹茵 4 5 5 和 5 5 r D N A 的染色体定位研究 (简报 ) `
韩永华 , ,2 开翠英 ’
( ’ 武汉大学植物发育生物学教育部重点实验室 ,
佘朝文 , 刘立华 , 宋运淳 , ” `
武汉 4 300 72 ; 2广西师范大学生命科学学院 , 桂林 541 00 4)
摘要 通过荧光原位杂交的方法确定 了 45 5 和 5 5 r D N A 序列在惹改前中期 染色体上的位置 。 尽
管具有 20 条染色体 的惹效是四倍体植物 ,但它的基因组 中只 有一个 45 5 和 5 5 r D N A 位点 。 根据
惹获前中期染 色体的核型 , 确定 45 5 rD N A 序列位于惹改第 2 号染 色体短臂上 的次级锰痕 区和随
体上 , 5 5 rD N A 序列位 于第 7 号染色体长臂靠近着丝粒处 , 5 5 r l〕N A 位点到着丝粒的百分距 离是
2 9
.
1 3 士 1 . 7 6 。
关键词 : 慧故 rD N A 荧光原位杂交
本文 200 3 年 3 月 14 日收到 。 2 0 03 年 6 月 1 5 日接受。
P H Y S I C A L M A P P I N G 0 F I
,
H E 4 5 5 A N D 5 5 r D N A
I N C 6 硬X L A C R 丫M A .双)B 1 L . 苦
I IA N Y o n g H u a l
,
2 Q x cu i Y i飞 1
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。 八 `) 2“ 又反, ar ot yr of 八砚I E fo : 了傲 nt
2侃 z记稠若 of L ife 反~
,
S H E hC ao W
e n l L IU L i H u a l S ( ) N G Y u n C h u n l
釜 “
及喇。户刀 Zen at l 召10 09 〕 , W “ h a n 协 i货sr iyt , W u h a 刀 4 3 00 7 2 :
凸记a 刀月及了i 八b~ l 乙场 i~ i
才y , 以矛1 1、 5 4 1 00 4 )
K叮 w o dr s : C . lac 厂vl n a 一o bi . rD N A . F l u o esr e e n e e i n s i t u h y b r id i z a t i o n ( F I S H )
尸
r h e g e n u s 肠 ix b e lo n g s t o t h e t r ib e M a y d e a e .
I t co n s is t s o f fo u r s p e e i e s w h o s e e h or mo 沁m e n u m b e r 、
r a n g e f
omr
Z n = 1 0 t o 4 0 o n t h e b a s e n u m b
e r x = 5
.
T e t r a p lo id S ( Z n = 2 0 ) p
r e d o m i n a t e w h il e o t h e r s ar e
l e s 、 f r e q u e n t [ ’ 〕 , T h 。 、 p e e i e 、 c . l a e 叹刃刀 0 7 砧i ( Z n =
2 0 ) w i t h m
a n y v a r ie t ie s 15 a e e r e a l o f 卯t e n t i a l ly g re a t
e co n om i
e im p
o r t a n e e a n d e u l t iv a t e d in s e v e r al w
arme
r
p ar t s o f t h e wo
r ld fo r v ar i e d u s e s lik e f ( x 〕d
,
f o d d e r
,
rn
e d i e in e an d
o rn am
e n t [2口.
T h e 4 5 5 a n d 5 5 r l〕N A co n s t i t u t e t h e n 飞。 S t im -
卯 r t an t m u l t i卯 n e f a m i li e s i n t h e e u k a r y o t i e 罗 on m e .
T h e y a r e o 堪 a n i z e d i n s e p ar a t e d e l u s t e sr , u s u al ly 10 -
ca t e d i n d i f f e r e n t e h
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e n co d i n g r ibo ~
al R N A ( 1 8
一
5
.
8
一
2 5 5 )
,
15 p r e se n t i n
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r a y s co r esr 卯dn i飞 t o t h e n u e leo l u s o gr an i z -
e r r眼 io n ( N O R ) . 5 5 rD N A , cod i飞 for t h e 5 5 五加 -
som
a l R N A
,
h a s a s im i lar
o gr an i
z a t io n ot 4 55 r D N A
.
H o w e v e r
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i t s 、 l t e a lo n g t h e e h or rn o
~
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-
v e a l e d b y a n y m o r p h o lo g ie a l e h a r a e t e r is t i e s
.
F lu o r e s
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e e n e e ; n : i t u h y b r id i z a t io n ( F I S H ) 1
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u l t o l fo
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b e e n m a p p e d o n t h e e h
omr ~
5 o f v ar i
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e e x e e l l e n t e y t o l眼i e al
m ar k
e r s fo r kar ” t y p e an al y s i s es p e e i a lly i n s p e e i e s
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n y sm
a ll an d
e q u a l e h
omr os
m
e s
.
In t h e p r e
-
s e n t p a p e r w e id e n t i fy t h e p h y s i e a l l o ca l i z a t io n o f g e n e
e lu s t e r s o f 4 55 a n d 5 5 r l ) N A i n 肠i x l a e 栏刃刀 “ 一ob i L .
var
.
fr
u
me
n at cea M
a k ion
,
w h ie h 15 a e u l t iva t ed valr
-
e t y o f C
.
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hC omr som
e s P r ea d s w e er m a d e a s d e s e r ib e d
b y so
n g a n d G u s t a fso n [ 4〕 . T h e p or b e s o f 4 5 5 a n d 5 5
朴
T h e porj ec t was
s u p op rt ed by
th e N a t ion al N
a t u r a l段 ie n e e
F o u n d a t i on of 〔: h in a ( N o
.
3 00 70 37 6 )
.
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G 〕仃巴 11 〕 n id gn au th o r , 已~ 1
: 沃爪g y C@ w hu
. 司u . cn , teI :
02 7
一
8 76 84 50 5
第 36卷 第 5期
020 3年 1 0月
实 验 生 物 学 报
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〔〕1
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36
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( ’ 武汉大学植物发育生物学教育部重点实验室 ,
佘朝文 , 刘立华 , 宋运淳 , ” `
武汉 4 300 72 ; 2广西师范大学生命科学学院 , 桂林 541 00 4)
摘要 通过荧光原位杂交的方法确定 了 45 5 和 5 5 r D N A 序列在惹改前中期 染色体上的位置 。 尽
管具有 20 条染色体 的惹效是四倍体植物 ,但它的基因组 中只 有一个 45 5 和 5 5 r D N A 位点 。 根据
惹获前中期染 色体的核型 , 确定 45 5 rD N A 序列位于惹改第 2 号染 色体短臂上 的次级锰痕 区和随
体上 , 5 5 rD N A 序列位 于第 7 号染色体长臂靠近着丝粒处 , 5 5 r l〕N A 位点到着丝粒的百分距 离是
2 9
.
1 3 士 1 . 7 6 。
关键词 : 慧故 rD N A 荧光原位杂交
本文 200 3 年 3 月 14 日收到 。 2 0 03 年 6 月 1 5 日接受。
P H Y S I C A L M A P P I N G 0 F I
,
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2侃 z记稠若 of L ife 反~
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凸记a 刀月及了i 八b~ l 乙场 i~ i
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T e t r a p lo id S ( Z n = 2 0 ) p
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5期 慧茵 4 55和 5 5 r D N A的染色体定位研究 3 95
re s e e n e e s ig n a ls o n p
rom
e t a Ph a s e e h
roms
e s a n d
in t e r p h a s e n、 , e le i i n C
.
al e谬 n a一 ob i . H y b r id i z a t io n
s i g n a l s a P P e ar e d r e d a dn t h
e e h or mo som
e s s h o w e d
b l u e a f t e r co u n t e sr t a i n e d b y s t er P t a v id in 一 C y3 a n d
1〕A l〕 1 . T h e e x p e r im e n t a l d a t a , in e lu d i n g d e t e e t i o n
r a t e
,
amr
r a t io o f t h e e h
onr som
e s w i t h s i g na l
s , a n d
far
e t io -n l e n g t h ( F L )
v a l u e
,
hw
i e h w a s t h e p e r e e n t
-
眼 e o f t h e d is t a n e e for m d e t e e t i o n s i t e ot t h e e e n -
t r o n l e r e
,
w e r e s u n l n l a r i z e d i n T a b le 1
.
T h e d a t a i n
T a b l e 1 a n d F ig u r e 1 s ho w
e d t h e r e w a s 5 1眼 le h y -
b r id iz a t i o n s i t e o f t h e 4 5 5 a n d 5 5 rD N A
r e s P e e t i v e ly
i n C
.
l a c 7) n j a 一ob i g e
nom
e
.
T h e 4 5 5 r l ) N A p or b e
w a s h y b r id i z e d ot t h e e n t i r e s a t e l l i t e o n t h e s h o r t a mr
o f e h or mo som
e 2 a n d t h e s i g n a l w a s v e r y s t or n g
( F ig
.
l
,
A 一 B )
.
T h i s h y b r id iz a t i o n p a t t e r n w a s O n ly
fo u n d e d i n l e w p l a n t s p e e i e s〔6」. r h e 4 5 5 rD N A w as
m a i n l y h y l ) r id iz e d to t h e s e co n d a r y co n s t r i e t i o n in
s a t e l li t e d e h or mo ~
e s in m os t p la n t s p e e ie s
.
T h e 5 5
r D N A w a s m
a p p e d o n t h e lo n g a mr
o f t h e e h
omr
-
som
e 7
、
c lo s e t o t h e c e n t or me
r e r e g i o n ( F i g
.
1
,
D 一
E )
.
T h e F I
刀 v al u e w a S 2 9
.
13 士 1 . 7 6 . N o s ig n al s
w e er d e t e e t e d o n t h e o t h e r e h r 。 刀1 〔) , 刀 1 1 e s f o r t h se e t w o
p or b e s
.
T wo
s ig n a l s o f b o t h 4 5 5 a n d 5 5 r D N A w e r e
d e t e e t e d i n t h e i n t e r p h a s e n u e l e u s
, : e s p e e t iv e ly ( F ig
.
1
,
C
,
F )
.
T h e d e t e e t i o n r a t e ( a bo
u t 1 0 0 % ) o f 4 5 s
a n d 55 rD N A h y b
r id i z a t io n s i g r l a l s a t i n t e r p h a s e e e l ls
w as h i g h e r t h an t h a t a t t h e p
omr
e t a p h a s e s p er a d s
.
I t
m ig h t b e e x p la in e d t h a t d u r i n g t h e in t e r p h a s e t h e t a r
-
g e t s e q u e n e e w i t h low
e r d眼 r e e o f co n d e n s a t io n w a s
h y b r id i z e d e a s i ly
.
T a b l e l
Por be
T
o回 n u n l l〕e r of由哭四司 e e lls
L地 t e e t io l l
r a t e
n d 5 5 r DN A
R a t io o f lon g
t o s ho
r t aJ 门1 1
I h e l飞s ul st o f n SH o f 4 55 a n
I n ( ) r e
11 C
.
la c叮明a -j o b i
F L
( % )
Ch f 曰 1】l〔泛汇】1l l e
日 r t n
2
.
6 0士 0 .
1
.
17 士 0 .
10 0
29
.
13士 1 . 76 翁
095
%(一482
94514 55
r
l〕N A 90
5 5 r l〕N A 1 10
苦 : s t
an
e
l
a r d d e vi a t ion ; S
: s h o r t
arnL
; L
: 10 n g
~
T h e p r e s e n t r e s u l t s o f f e r r e d t h e f i r s t er p o r t o f
t h e p h y s ica l m a p p i眼 o f t h e 4 5 5 a n d 5 5 rD N A i n C .
la c尹勺刀刀 a j ob i . OF r C
二
la c 尹, 2` a j ob i
,
t h e er C O g n i t i o n
o f t h e m e t a p h as
e e h or mo 印m e w a s d i f f i e u l t d u e t o
e h
aomsr
l s im i l a r i t y i n mo
r p h o l笔 y [ 7〕 . H O w e v e r ,
P or m e t a P h a s e e h
omr sorn
e s of C
.
l a c月刀 n a 7 ob i
s h o w e d ob
v io u s l ) A P I d i f f e r e n t ial s t a i n i n g
.
B ase d
o n
t h e D A I
〕
1 f l u o r e s e en
e e b a n d in g p a t t e rn s
,
w e h a v e
con
s t r u e t e d a q u a n t i t a t i v e e h r
om som
e m a p o f C
.
l a c长, n a 一 o bi ( u n p u b l i s h e d d a t a )
.
B a s e d o n t h e m a p
,
w e co n f i n l飞e d t h a t t h e 4 5 5 a n d 5 5 r DN A w e r e
m a p p e d o n t h e s h o r t amr
o f e h
onr
so me 2 an d
t h e
lo n g
~
o f e h or
mos
e 7 o f C
.
l a c 吮刃 n ` , ob i , r e -
s p e e t iv e ly
.
T h e e h
orn
so m e 2 w a s e as ily id e n t if i e d
b y i t s s e co n d ar y co n s t r i e t i o n
,
co r r e s l 〕o n d ign t
o t h e
n u e leo l u s o塔 a n i z e r r e g io n (N O R ) , o n t h e Sh o r t amr
.
M 6 r veo
e r , e h or mo some
2 w as l〕A l 〕 1 i n t e sn e ly s t a i n e d
in t e mr ian l
o f t h e sho
r t a
mr
a n d a or
u n d t h e e e n
-
t or m
e er er g i o n s
.
T h e a mr ar
t io o f e h or mo so m
e s w i t h
5 5 rD N A
s i g n a l w a s 1
.
17 士 0 . 0 5 , w h i e h 昭 r e e s w i t h
t h e a mr ar
t i o o f C
.
la c勺刃 z a 一ob i e h
omr som
e 7 o n
q u a n t i t a ti v e e h r o m o
som
e rn a p
.
T h e e h
orn
o
som
e 7
w i t h i n t e n s e l妒甲 1 f l u o r es e e n e e o n t h e w ho l e e h r o r l l O -
som
e w a s al so e a s i ly d is t i n g u i s h e d f
omr
o t h e r e hor orn
-
黝m e s , w h ie h o n ly s ho w e d ih t e n s e D A P I f luo r e s e e n e e
on t h
e t e
mr i
n a l a n d o/ r i n t e r s t it i al r e g io n s
.
I t h a s b e e n d emo
n s t ar t e d t h a t C
.
la c 护) 竹汉之J 口占i
a n d i t s m an y
v
ar i
e t ies w it h Z n = 2 0 e h
omr osm
e s a r e
t e t r a p l o id s e o n s i s t i呢 o f t wo g e n o me s o f 5 e h or mo -
so me
s e a e h [ 8〕 . 氏 w e ve r , i n t h is s t u d y , t h e p iort e s
4 5 5 a n d 5 5 1」)N A r e v e al e d s i n g l e h y b r id i z a t i o n s i t e
r e s p e e t iv e ly i n C
.
l a c Z-y 刀 Za 一 o b i g e n orn
e
.
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