全 文 ：第 26卷 第 11期
2 0 08年 11月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 26 N o. 11
Nov. 2 0 0 8
中华中医药
2520
学刊
了哥王抗肿瘤活性部位筛选
陈 扬,李艳春,马恩龙,孙立新
(沈阳药科大学药学院,辽宁 沈阳 110016)
摘 要:目的:研究了哥王 95%、75%、50% 乙醇提取物、水提物及 95% 乙醇提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙
酯、正丁醇萃取部位对肿瘤细胞的增殖抑制作用, 确定了哥王抗肿瘤活性部位。方法: 采用四甲基偶氮唑盐
(M TT )比色法考察了哥王不同提取物及 95%乙醇提取物的不同溶剂萃取部位对 H e la、SGC - 7901、Be l - 7402细
胞的抗肿瘤活性。结果: 了哥王 95%乙醇提物对 He la、SGC -7901细胞有良好的抗肿瘤活性, 其石油醚、氯仿、乙
酸乙酯萃取部位对 H ela、SGC - 7901细胞均有不同程度的抗肿瘤活性。结论: 石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部位有
较强的抗肿瘤活性, 初步确定为了哥王抗肿瘤活性部位。
关键词:了哥王;抗肿瘤活性; 活性部位
中图分类号: R284. 2; R285 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2008) 11 - 2520 -03
Pre lim inary S tudy on Anti- tumo rE ffect of Ex tracts o fW ikstroem ia indica ( L . ) C . A. M ey.
CHEN Yang, LI Yan-chun, MA En-long, SUN L i-xin
( School of Pharm acy, Shenyang Ph arm aceu ticalUn iversity, Shenyang 110016, Liaoning, C hina)
Abstrac:t Ob jec tive: To estim a te the an ti - tum o r activ ity of differen t ex trac ts and differen t parts o f 95% e thano l ex-
trac ts o fW ik stroem ia indica ( L. ) C. A. M ey. M ethods: M TT assay was applied to screen the an ti - tum or effect o f the
ex trac ts ofW ikstroem ia indica ( L. ) C. A. M ey. on 3 tumo r ce ll lines in v itro. Results: 95% e thano l ex trac ts had strong
inhib itory effect on different tum or cell line s. The anti - tumo r ac tivity o f petro leum par,t ch lo rofo rm part and e thy l acetate
part are various in v itro. Conc lus ion: Petroleum pa r,t ch lo ro form pa rt and e thy l ace ta te pa r,t which are considered as ac-
tivity par ts ofW ikstroem ia indica ( L. ) C. A. M ey. , have considerab le cy to toxic effec.t
Keyw ords:W ikstroem ia indica ( L. ) C. A. M ey. ; anti- tumo r activ ity; activ ity pa rts
收稿日期: 2008 - 06 - 16
作者简介:陈扬 ( 1983 - ) 女,辽宁人,硕士研究生,主要从事抗肿
瘤中药活性成分研究。
通讯作者:孙立新 ( 1967 - ) ,女 (满族 ),辽宁人, 副教授,硕士生导
师,主要从事抗肿瘤中药活性成分研究。
了哥王 [W ikstroem ia indica ( L. ) C. A. M ey. ]为瑞香
科荛花属植物,又名南岭荛花 ,性寒,味苦,微辛, 有毒,归肺
肝经。产于我国广东、广西、福建、海南、浙江等省区, 具有
清热解毒、消肿散结、止痛等功效。临床用于抗菌、抗病毒、
治疗肺癌等多种病证 [1 ]。有文献报道了哥王水煎剂对小
鼠子宫颈癌、P388淋巴细胞性白血病有明显抑制作用 [2 ]。
了哥王所含西瑞香素可抑制艾氏腹水癌细胞的核酸与蛋白
质合成,南荛素类化合物、牛蒡苷元、罗红松脂酚均有抗白
血病的作用。另外,了哥王含有的两种黄酮类化合物苜蓿
素和山柰酚 - 3 -O -B -D吡喃葡萄糖苷能抗 P388淋巴
细胞性白血病和抗 HV I -1 [3 - 5]。
本实验采用 M TT法研究了哥王 95%、75%、50%乙醇
提取物、水提物及 95%乙醇提取物的不同溶剂萃取部位对
肿瘤细胞的抗肿瘤活性, 初步确定了哥王抗肿瘤活性部位。
1 仪器和材料
1. 1 仪器与试剂 MCO - 18A IC型二氧化碳培养箱 (日
本三洋 ); BCN - 1360B型生物洁净工作台 (北京东联哈尔
仪器制造有限公司 ); SPECTRA MAX p lus型酶标仪 (M o lec-
u la rDev ices公司 ); RPM I1640 ( G IBCO invitregen co rpo ra tion
Lo .t No. 1285082); 胎牛血清 (天津 TBD公司 Lo .t No. 0701
-3100); 二甲基亚砜 (天津市博迪化工有限公司 ); M TT
[溴化 - 3 - ( 4, 5 -二甲基 - 2 -噻唑基 ) - 2, 5 -二苯基四
氮唑 ] (美国 S igm a); 5 -Fu标准品由王晶老师惠赠。
1. 2 药材 了哥王药材饮片购于河北安国市童铃药材有
限公司,由沈阳药科大学孙启时教授鉴定。
1. 3 细胞株 人宫颈癌 H ela细胞、人胃腺癌 SGC - 7901
细胞、人肝癌 Be l- 7402细胞为贴壁细胞,均由本实验室传
代保种。
2 方 法
2. 1 样品溶液制备 了哥王饮片分别用 95%、75% 、50%
乙醇和水回流提取 3次,每次 1h, 浓缩得相应浸膏。
用少量水将 95%乙醇提取物浸膏分散依次用石油醚、
氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取, 回收溶剂得不同溶剂萃取部
位浸膏。
取 95%、75%、50%乙醇提取物、水提取物和 95%乙醇
提取物石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位浸膏适量,
溶于 DMSO中, 加药前用培养液稀释成 300、100、30、10Lg
# m L- 1。
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DOI：10.13193/j.archtcm.2008.11.217.cheny.065
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2. 2 阳性药 5 -Fu的制备 以微量 DMSO溶解 5 - Fu标
准品,加药前用培养液稀释成 50、10、2、0. 4Lg# mL - 1,培养
液中 DMSO终浓度不超过 3j 。
2. 3 细胞培养 以 RPM I - 1640培养基作为基础配制成
内含 10% FBS、100U# mL - 1青霉素和 100Lg# mL - 1链霉素
的细胞培养液。在浓度为 5% CO2的 37e 培养箱中传代培
养。待细胞生长达到对数生长期即可用于实验。
2. 4 体外增殖抑制实验 采用 MTT法。取对数生长期的
He la、SGC -7901、Be l- 7402细胞, 分别以 4 @ 104、5 @ 104、6
@ 104 ce lls# mL - 1密度接种于 96孔培养板中, 每孔 100LL,
培养 24h后加药,给药组剂量为 300、100、30、10Lg# m L - 1。
阳性对照组给药剂量为 50、10、2、0. 4Lg# m L -1。同时设阴
性对照组及空白组。每组均设 3复孔, 每孔加药 100LL。
培养 48h后, 除去培养液及药液, 每孔加 5 g# L - 1 M TT
10LL和培养液 100LL, 继续培养 4h, 除去培养液及 MTT,每
孔加 DMSO 150LL, 微型振荡器振荡 10m in, 用酶标仪在
K492nm下测 OD值, 计算抑制率、IC50值 [6] (注: IC50为半数有
效抑制浓度 )。
生长抑制率% = 1 (对照组平均 OD值 -用药组平均
OD值 ) /(对照组平均 OD值 -空白组平均 OD值 )2 @
100%
3 结 果
了哥王 95%、75%、50%乙醇提取物及水提物对 3种
肿瘤细胞的增殖抑制结果见表 1。了哥王 95%乙醇提取物
的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位对 3种肿瘤细
胞的增殖抑制结果见表 2。
表 1 了哥王 95% 75% 50%乙醇提取物及水提物对 3种肿瘤细胞的增殖抑制结果
药物
Hela
剂量
( Lg# mL - 1)
抑制率
(% )
IC50
( Lg# mL - 1)
SGC - 7901
剂量
(Lg# mL - 1)
抑制率
(% )
IC50
(Lg# mL - 1)
Bel - 7402
剂量
( Lg# mL - 1)
抑制率
(% )
IC50
(Lg# mL -1) Z
95%
乙醇
提取物
300 68. 02? 8. 51 169. 45 ? 2. 81 300 50. 21 ? 1. 87 369. 89 ? 5. 46 300 - -
100 24. 52? 0. 52 100 34. 93 ? 6. 17 100 -
30 16. 98? 1. 57 30 25. 26 ? 0. 47 30 -
10 9. 65? 1. 97 10 21. 48 ? 0. 44 10 -
75%乙醇
提取物
300 49. 26? 0. 35 > 300 300 48. 43 ? 2. 49 > 300 300 - -
100 16. 41? 1. 58 100 29. 25 ? 0. 15 100 -
30 15. 29? 1. 78 30 24. 57 ? 1. 21 30 -
10 13. 44? 1. 60 10 23. 03 ? 0. 48 10 -
50%
乙醇
提取物
300 46. 59? 0. 37 > 300 300 34. 90 ? 0. 36 > 300 300 - -
100 19. 60? 0. 56 100 26. 05 ? 1. 68 100 -
30 16. 94? 0. 58 30 21. 62 ? 1. 70 30 -
10 15. 07? 0. 95 10 20. 22 ? 4. 95 10 -
水提物
300 72. 15? 0. 64 - 300 40. 72 ? 0. 37 > 300 300 - -
100 - 100 24. 06 ? 2. 81 100 -
30 - 30 20. 12 ? 2. 02 30 -
10 - 10 18. 92 ? 1. 15 10 -
5 - Fu
50 79. 07? 0. 46 1. 72 ? 0. 33 50 74. 13 ? 1. 51 4. 38? 2. 02 50 54. 71 ? 3. 27 30. 10 ? 2. 57
10 64. 32? 1. 05 10 64. 23 ? 7. 81 10 38. 37 ? 0. 80
2 61. 75? 6. 80 2 40. 92 ? 1. 07 2 29. 06 ? 3. 99
0. 4 30. 34? 1. 58 0. 4 22. 60 ? 1. 70 0. 4 15. 65 ? 1. 53
表 2 了哥王 95%乙醇提取物的石油醚 氯仿 乙酸乙酯正丁醇萃取部位对 3种肿瘤细胞的增殖抑制结果
药物
Hela
剂量
( Lg# mL - 1)
抑制率
(% )
IC50
( Lg# mL - 1)
SGC - 7901
剂量
(Lg# mL - 1)
抑制率
(% )
IC50
(Lg# mL - 1)
Bel - 7402
剂量
( Lg# mL - 1)
抑制率
(% )
IC50
( Lg# mL - 1)
石油醚
萃取
部位
300 94. 30? 1. 15 93. 86? 5. 42 300 74. 65 ? 1. 77 72. 57 ? 0. 21 300 62. 12 ? 0. 18 278. 68? 1. 56
100 41. 26? 6. 84 100 48. 32 ? 0. 98 100 4. 11 ? 0. 44
30 6. 42? 1. 72 30 32. 36 ? 0. 83 30 0. 51 ? 4. 64
10 - 10 28. 25 ? 1. 26 10 -
氯仿
萃取
部位
300 90. 92? 1. 64 112. 06 ? 3. 20 300 90. 78 ? 1. 20 72. 93 ? 6. 29 300 77. 22 ? 1. 99 116. 44? 5. 85
100 59. 50? 1. 75 100 35. 92 ? 2. 33 100 46. 10 ? 2. 01
30 1. 99? 0. 19 30 19. 41 ? 0. 87 30 14. 25 ? 0. 39
10 - 10 18. 30 ? 1. 03 10 -
乙酸
乙酯
萃取
部位
300 90. 02? 1. 83 101. 21 ? 4. 68 300 84. 43 ? 1. 45 63. 66 ? 1. 52 300 27. 15 ? 4. 34 -
100 51. 10? 5. 52 100 51. 78 ? 2. 72 100 -
30 7. 43? 1. 12 30 27. 97 ? 0. 42 30 -
10 - 10 20. 83 ? 1. 03 10 -
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药物
Hela
剂量
( Lg# mL - 1)
抑制率
(% )
IC50
( Lg# mL - 1)
SGC - 7901
剂量
(Lg# mL - 1)
抑制率
(% )
IC50
(Lg# mL - 1)
Bel - 7402
剂量
( Lg# mL - 1)
抑制率
(% )
IC50
( Lg# mL - 1)
正丁
醇萃
取部
位
300 33. 22? 3. 69 - 300 19. 33 ? 0. 62 - 300 - -
100 7. 72? 2. 81 100 14. 15 ? 2. 90 100 -
30 - 30 - 30 -
10 - 10 - 10 -
收稿日期: 2008 - 06 - 17
作者简介:包桂花 ( 1969 - ) , 女 (蒙古族 ) ,内蒙古通辽人, 讲师,
2006级博士研究生,主要从事蒙药教学科研工作。
通讯作者:康廷国 ( 1955 - ),男,教授,博士研究生导师,研究方向:
中药鉴定与药品品质评价研究。
4 结论与讨论
从表 1可知: 了哥王 95%、75%、50%乙醇提取物及水
提物对 H ela、SGC - 7901细胞较敏感, 对 Be l -7402细胞不
敏感。且了哥王 95%乙醇提取物抗肿瘤活性好于其它 3
种提取物。
进一步考察了 95% 乙醇提取物的不同萃取部位的抗
肿瘤活性。从表 2可知:石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃
取部位抗肿瘤活性存在差异。石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取
部位对 H ela、SGC - 7901细胞抗肿瘤活性强。从 IC50值看,
He la细胞:石油醚 ( 93. 86 ? 5. 42) >乙酸乙酯 ( 101. 21 ?
4. 68) >氯仿 ( 112. 06 ? 3. 20)萃取部位; SGC细胞: 乙酸乙
酯 ( 63. 66 ? 1. 52) >石油醚 ( 72. 57 ? 0. 21)、氯仿 ( 72. 93 ?
6. 29)萃取部位。
由此 ,可初步确定了哥王抗肿瘤活性部位为石油醚、氯
仿、乙酸乙酯萃取部位。
参考文献
[ 1 ] 谢宗万.全国中草药汇编 (上册 ) [M ]. 2版.北京:人民出版
社, 1996: 10 -12.
[ 2 ] 李国雄. 中药抗癌成分 (综述 ) [ J ].国外医学# 药学分册,
1985( 3) : 135.
[ 3 ] Kuo -H s iung Lee, K iyosh iTagahara, H ideyo Suzuk,i et a.l An-
ti tumor agen ts, 49 tricin, Kaemp ferol- 3 - 0 beta -D - glu copyr-
anoside and ( + ) nortrachelogenin, an tileukem ic p rincip les from
w ik seroem ia ind ica [ J]. Nat p rod, 1981, 44 ( 5 ) : 530 - 535.
[ 4 ] Tosh ih iko H irano, M an abuGotoh, K itaro Oka. Natural flaron ids
and lignans are potent cy tostatic agen ts against human leukem ic
H L - 60 cells [ J ]. Life Sc,i 1994, 55 ( 13) : 1061.
[ 5 ] Ke H u, H isayosh i Kobayash ,i A ijun Dong, et a.l Ant ifunga,l
an tim i totic and an ti -H IV - 1 agen ts from the roots ofW iks tro-
em ia indica [ J ]. P lan ta M edica, 2000, 66( 6) : 564 - 567.
[ 6 ] 徐叔云,卞如濂,陈修, 等.药理实验方法学 [M ].北京: 人民
卫生出版社, 1982: 1785 - 1786.
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蒙药光明盐四味汤散的源流及研究进展
包桂花1, 2,康廷国 1,巴根那2,白明刚 2, 包同力嘎2
( 1. 辽宁中医药大学,辽宁 沈阳 110032; 2. 内蒙古民族大学,内蒙古 通辽 028041)
摘 要:对光明盐四味汤散的源流及其近年来相关化学成分、药理作用及其药学等现代研究进展进行了文献
综述,为该蒙药的进一步深入研究和推广开发应用提供了参考。
关键词:光明盐四味汤散;源流; 现代研究;文献综述
中图分类号: R291. 2 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2008) 11 -2522 - 04
Mongolia B right Four Salt F lavo r Soup and the O rigins of the Sca tte red Research
BAO Gui-hua1, 2, KANG T ing-guo1, BA Ggn-na2, BA IM ing-gang2, BAOTONG L i-ga2
( 1. Liaon ing Un iversi ty of Tradit iona lCh ineseM ed icine, Shenyang 110032, Liaon ing, C hina;
2. InnerMongolia NationalUn iversity, Tongliao 028000, InnerM ongolia, C hina)
Abstrac t: Fu ture of the fou r sa lt flavo r o f the soup powder and its o rig in in recent years rela ted to chem ical com posi-
tion, pharm aco log ical e ffects, such a sm edicine and m ode rn research litera tu re rev iew conduc ted fo rM ongo lia to furthe r
promo te the deve lopm en t of an in -depth study and p rovide a reference.
Keyw ords: bright four sa lt flavo r soup powder; o rig ins; modern resea rch; L itera tu re Review
光明盐四味汤散, 别名毛勒日达布斯 - 4、毛勒日 -达
布斯 - 4汤、扎木萨 ) 4汤、扎木撒西汤、四味光明盐汤散、
明盐四味汤、四味光明盐汤 [1~ 5 ], 是蒙医、藏医临床常用煮
散制剂。本品由光明盐、荜茇、诃子、干姜 4味药材组成, 具
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