全 文 ：镶`飞/
第啥卷 第 2期 现 代 应 用 药 学 19 8 7年 4月
· 实验研究 ·
了哥王素抗炎症作用的研究
上 海 中 医 学 院
广州医药工业研究所
王药默 张海根 朱根麟 * 汤霞芬 . 陈 蓉 *
陈凤庭
提 要 了哥王紊对二甲苯所致小鼠耳部炎症及5 一H T 引起的大 鼠足歇肿胀 的抑制作用 非常显著 。 对
大鼠蛋清性、 角叉菜胶与甲醛性足跪肿胀以及对大鼠的巴豆油气经肿肉芽 组织增生 , 也显 示明 显的 抑 制 作
用 。 此外 , 并能显著降低大鼠肾上腺 内维生素 C 含最 , 抑制角酸 引起的小鼠扭体反应。
关健词 , 了哥王素 ( D a p il n or et in ) 执炎症 二甲苯 角叉莱胶 甲醛 巴豆油
T 哥王素 ( aD p h n o r o t i n ) , 是以醚键结合
的双香豆素 。 国外曾从瑞香科和豆科植物中
提得。 国内有报道从瑞香科南岭芜花中分离
到这一成分 , 据称有改善小 鼠心肌营养性血
流量的作用 [` ]。 从瑞香科瑞香属植物白花了
哥 王 ( D a p h n 。 C h e娜 i o n i B e nt h . ) 中提 得
D a p h n o r e t i n尚属 首 次 。 白 花 T 哥 王 为粤
北一带常用草药 , 主要用于肝癌 、 肺癌和跌
打损伤等。 此药在全国中草药汇编及中药大
辞典中均未著录 。 其药理作用 , 国内外未见
详细报道 。 本文先报告其抗炎症作用 。
实验材针
aD 户加 er it n 系广州 医 药 工业研究所陈
凤庭首次提取 , 为 淡黄 色 细 针状 结 晶 ,
D 3 5 2
,
mP
.
25 6℃ , 临 用 时用 2 %丙二醇配
成混悬液 ( 以下简称 D 液 ) 。 2%丙二醇溶液为
对燎液 。
醋酸氢化考的松注射液 , 上海第九制药
厂产品 , 批号 7 7 0 7 0 4 。
5一H T , 瑞 士进 口 , 上海 化学试剂站分
装 , 批号 6 5一 0 2一 2 8
方法和结 果
1
. 对二甲笨所致小双耳部炎症的影晌
, 类海中药制药二厂中心实验室进修人员
小 鼠56 只 , 体重 19 土 1 g’ 早 占兼用 , 按
体重 、 性别分组 , 给药组 诊. D液 ( 24 m g / k g ) ,
对照组 扣。 等容积的 2%丙二醇溶液 , 氢化可
的 松 组 ip . 2 . 2 5 m g / k g , 给 药 后 3 Om i n 在
每鼠右耳正反面 涂布二甲 苯 。 . 05 ml 致炎 ,
使其发炎肿胀 。 致炎 15 m in 后将小鼠颈椎脱
臼处死 , 迅将两耳连根剪下 , 用直 径 0 . 歇m
的不锈钢圆冲对准两耳相同的部位 , 以木捶
褪击取得一个圆面 , 精确 称 取 该 圆面的重
量 , 以右耳重量减去左耳重量 , 作为右耳肿
胀重量 , 计算其平均肿胀度 万“ ,。
结果见表 1 . 显示 D 液对二甲苯所致小
鼠耳部炎症的抑制作用 , 有非常显著意义 。
表 I D 液对二甲苯所致小 鼠耳部
炎症的影响
剂量 /公斤 鼠 数 炎症肿胀度 抑翻率
i p ( n ) ( m m ) 又土 S D (% )
D
对 照
液
组
2 4 m g
1 0皿 l ::
6
.
7士 0 . 9二
1 7
.
8士 1 . 5
5
.
9士 0 . 5* -
4
,
6 士 0 . 吞一
1 2
.
3 士 0 . 6
6 3
。 份
6 4
.
0
00
ù.上1ǎ,人D 液
组化考 的松
对 照 组
2廷m g
1
。
2 5山 g
10口 1
* * P < 0
.
0 0 1
2
. 对大鼠蛋清性足踞肿胀的影晌
大鼠29 只 , 体重 16 0士 40 9 . 早古兼用 ,
毒`
DOI : 10. 13748 /j . cnki . i ssn1007 -7693. 1987. 02. 001
按体重 、 性别 均 分 两组 , 按大鼠足耽肿胀
法 I“ l实验。 用药前先测大鼠右后足体积正常
值 , 然后分别 i p 。 D 液和等容 2 %丙二醇溶
液 , 30 m in 后在每鼠右后足礁部沈 . 注入 2%
蛋清 0 . i m l致炎 , 经专 、 1 、 2 及 4 h r , 重测
大鼠右后足欧体积 , 并与给药前比较 , 以其
差值作 为炎症肿胀指标 , 计算各组肿胀度平
均值 。
结果见表 2 , D 液对大鼠蛋清性足疏肿胀
的抑制作用 , 与对照组相比 , 差别显著 。
表 Z D 液对大鼠蛋清性足旅肿胀的影响
剂量 /公斤 动 物 鼠 给药后不同时间足琉 肿胀程 度 (皿 m ) 又士 SD
组 别
{严梦
I U I生】气
3
.
54 土 0 . 2 5*
选. 4 5 士 0 。 2 2
3
.
3 6士 0 . 17* *
4
.
3 5士 0 . 2 2
2选m g
1 2
.
sm g
I Om l
3
.
1 2 士 0 . 22 . 中
3
.
3 3 士 0 . 17二
选` 2 0士 0 。 1 2
3
.
2 5 土 0 , 1兮. *
4
.
2 5 土 0 。 2 1
2
.
9 6 士 0 . 2 1 . *
3
.
1 6 土 0 . 2 0今 .
选. 1 0 土0 . 1 1
2
.
9 2 士 0 . 1 3市
4
.
0 2 士 0 。 2 6
液组
照
D对
D 液
氢化考的松
对 照 组
3
.
1 6 士 0 . 1 3 . *
3
. 巴3 士 0 . 1 5二
4
.
1 3 士 0 . 1 6
2
.
5 6士 0 . 1 1
2
.
7 3士 0 , 1 6二
3
. 包3 土 e . 1 8
关 P < 公. e Z 关 关 P < 0 . 0 0 1
3
。 对角叉菜胶所致大眼足跟种胀 的 影
晌
大 鼠 3 0 只 , 体 重 2 2 0一 3 0 0 9 , 早占各
半 , .按体重 、 性别分组 , 依大鼠足嫌肿胀法 工“ ,
进行 。 给药后 30 m i五在每 鼠右后足疏部皮下
注入 1 % 角叉菜胶 o . l ml 致炎 。 仍按前法隔
不同时间测足 疏体积 。
结果见表 3。 与对照组比较 , D 液对角叉
菜胶所致大鼠足跃肿胀有非常显著的抑制作
用 。
表 3 D 液衬 角叉菜胶所致 大鼠足取肿胀 的影响
组 别
D 液
氢化考的松
对 照 组
剂量 /公斤 动 物 数 给药后不同时间足眯 肿胀程度 ( nt m ) 又士 S D
i p ( n )
.
l h Z h 4 h 6 1
2 4m g 1 0 0
.
4 士 0 . 乙7卑 . 0 . 5 2 士 0 . 3 9二 0 . 4 5士 0 . 3 9* . 0 . 7吐土 0 . 5 0二
1 2
.
5 m g 1 0 0
.
2 7 士 0 . 18二 0 . 17士 0 . 2 7二 0 . 1 2士 0 . 3二二 0 . 5 1士 0 . 2 5二
1 0m l 10 0
.
5 6士 0 . 3 9 0 . 83士 0 . 2 3 工 . 0 8土 0 . 4 7 1 . 5 5士 0 . 遥3
关 矢 P < 0 . 0 0 1
4
. 对大眼甲醛性足雄肿胀的影晌
取体重 13 0一 1 7 0 9 大鼠 14 只 , 早乙各半 ,
按体重 、 性别分组 , 实验方法同前 。 给药后
30 m in 在每鼠右后足耽部皮下注射 2 . 5%甲醛
溶液
影响
0
.
l lm 致炎 , 观察 D 液对实验性炎症的
结果见表 4 。 与对照组比较 ,
醛引起的大鼠足嫌肿胀 , 在第 5 、
D 液对甲
第 6天有
表 4 D 液对大 鼠甲醛性足取肿胀的影响
一一 . ,~一目 . . ~ . ”一曰 . . . . . .晚 . ~ ” 即 r . 匀 . 一一~ .一一 ~ 职二一 . . .一一 ~ .一 .剂量 /公斤 动物数组 别 致 炎 后 不 同 时 间 肿 胀 程 度 ( m ln ) 天士 SD2 d 3 d 吐 `1 s d
D 液
对照组
2褪功g
I Cm l
1 d
0
.
2 7 士 0 . 3 0
0
.
4又士 0 . 33
1
.
4 士 0 . 6 1 0 . 6吐士 0 . 5 1 0 . 3 9 土 0 . 4 3 0 ` 0 7 土 0 , 00 8 . 0 . 1 9 士 0 . 2色.
1
.
3 6 士 0 . 5 7 1 00 土 0 、 S G 0 . 7 9 土 0 5 4 0 . 6 4 土 0 . 选9 0 . 与马士 0 3 5
立护声 . 由 户 一 . ` 才 二甘` 【 韶` ` ` ` 盛 门妇护 闷曰口曰 . . J . 洲.阮 `之口 . ` J一” `二 `` J . 二 ` 街 . 笼瑞` 目山 . ` ` J 加民 ` . . “ J乙 ~ ~ 冬 `岛 ` J 闷` ` “ ~ 』 ` . 户 . 如 目` . 月 曰 . 如胃 . 巴 .曰卜门. . . 口门 抽曰. J . 曰. 口. 习州目 . . 自.脚 山臼`口 J . . J . ` . J , . ` 曰 ` 己 ` . J 叹 ` ` 、山 J` 诵确` 月 . 脚日田 ` ` 点八 二 目 ` 盆 ` 、 山 J , ` 翻 山 ` ` ` J J 己 ,试 曰 `召` 幼
* P < 0
.
05
.
2
.
显著的抑制作用。
5
. 对大鼠巴豆油气班肿的影晌
取体重 2 2 0一 6 1 09 大鼠〕 5只 , 按 R o b e rt
法￡` 1造型 , ` 在大鼠形成巴豆油气囊肿后 , 每
天勿 D 液 24 m g / k g , 对 照 组 iP Z% 丙二醇
溶液 , 连续七天 , 第七天处死 。 给药组 8 只
动物的肉芽组织及胸 腺 重 量 分别为 p. 98 士
0
.
63 9及 0 . 32 士 0 . 05 9 , 对照组 7只动物分别
为 2 . 3 1士 1 . 35 9及 0 . 29 士 0 . 03 9 。 二者比较 ,
肉芽组织差异非常显著 ( P < 0 . 001 ) , 胸腺无
显著性差异。
6
. 对 5一 H T引起的大鼠足耽肿胀的影响
取体重 1 40 一 1 8 0 9大鼠16 只 , 早 古兼有 ,
按体重 、 性别 均 分两 组 , 给药 30 m in 后于
大鼠右后 足 辟 健 膜 下 注 入 0 . 02 % 5一 H T
o
.
l m l
, 以后每小时用自制软尺测足 肿 胀一
次 , 以给药前周 长 为 正 常值 , 给药前后之
差为肿胀度 , 观察 D 液的抗 5一H T 作用 。
结果见表 5 。 与对照 组 比 较 , D 液 对
5一H T 引起的足跳肿胀有显著的抑制作用 。
表 S D 液时 5一 H T 所致大鼠足奈肿胀的影响
. 口阳曰幽 , . . ` , . . . , . . 口口. 七. . . . . . . . . . . , `即 . . . . . 曰 曰` ` . . . . , 曰曰 . 钊 . , . . . ` . . . . 限 , , . . 于` , , . , , . . . . , . . . . . . . . . . . . . 国 . . . 巨刀 . . . . . . 州 . . . . , . . . . . . . . . . . r . . . . . . . . . . . . 叫 . 口 . . . 尸 . . . r , 卜. 1 : . , 尸 , 已抽一. 口 , , . 二 , 民 . . . , . , 翻 . , 于 咬, . . . , .
剂蚤 / 公斤
组 别 动物数
1 P
D 液 琴4m g s
对照 组 I Om 1 8
致 炎 后 不 同 时 间 肿 胀 程 度 ( m nr ) 又土 SD
1 h Z 五 3 h 选五 s h
0
.
7 2 士 0 . 16 0 . 3 8 土 0 . 1 5 * 0 . 2 8 士 0 。 1 5 . * 0 . 1台士 0 . 0 5 . * 0 . 16 士 0 . 0 8 . 0 . 1 士 0 . 0 3 .
0
,
7 6 士 0 . 0 8 0 . 6选士 0 . 1 7 0 . 5 5士 0 . 1 6 心 . 3 8 士 0 . 0 9 0 3 上 0 . 1 0 . 2 任 士 0 . 12
* P ( 0
.
0 5 关关 P ( 0 . 0 1
7
. 对大鼠肾上腺 内 维 生 家 c 含 量的
影响
大鼠20 只 , 体重 2 40 士 3鲍 , 早 色各半 。
采用 2 。 4一二硝基苯拚显色法 I” J , 按 性 别和
体重均分成两组。 分别腹腔注射 D 液及对照
液 , 共 5 日。 于第 5 日 勿药物后 24 h剖取肾
上腺 ,测维生素 C 含量 。 结果如表 6 。 与对照蕴比较 , D液降低大鼠肾上腺 内 v it 一c 含量
差异非常显著 。
表 6 村大鼠肾上腺 内 V it 一C 含量
的影响
诊 0 . 7% 醋酸溶液 o . l m l/ 1g0 , 观察小鼠扭体
反应 12 分钟 , 统计 10 分钟 内的扭体次数 , 结
果见表 7 。 与对照组比较 , D `液能非常明显
地抑制小鼠扭体反应 , 表明 D 液对醋酸引起
的小 鼠痛觉 , 具有显著的镇痛作用 。
表 7 D 液 对醋酸引起小 鼠扭体
反应的影响
药 物 剂最 /公斤
1p
动物数
(只 )
1 0分钟内扭休次 数 又士 SD P 值
D 液
对限组
2感也 g
I Om l ::
2
.
7士 0 . 7
1 6
.
7 土 3 . 2
< 0
.
0 01
剂量 /公斤 动物数组 别
D液
对照
V i*
一
C 含量 (林g八 0 0垃 g )
肾上腺 (湿 重 ) 夭士 SD
D 液
呢替吮
对照组
2 4m g
1 5叮 t g
1 0 m 呈
2
.
9 士 1 , 2
2
.
3 士 0 . 8
1 4
。
8 土 1 . 8
< 0
.
0 0 1
< 0
.
0 0 1
八甘UO,山心工J上
i p ( n )
_
_
_ _
_ _
_
_ _
_ _
_
_ 一一一一一 . . . . , . 目. 二 . 巴。 . . . . . . . . . . .2选m g1 0 m l :: 2 3 4 . 6 8 土 59 . 2 2 . *3后心. 2 3 土 8 1 . 7 4
关 关 P < 0 . 0 0 ]
8
. 镇痛试验
( 1 ) 醋酸引起的小鼠扭体反应
小鼠5 0只 , 早忿各半 , 体 重 2 0 士 2 9 ,
分组后分别 ip 受试药物 。 给药 h1 后 , 每 鼠
( 2 ) 热板法
小鼠 70 只 , 体重 19 士 2g , 早性。 随机分
组 , 分 别 i p D 液 3 6 . 4m g / k g 、 2 4m g / k g ;
呱替定 50 m g / k g 及等容量的对照液 。
按热板法要求 , 挑选反应敏 感 稳 定 小
鼠 , 比较给药前后痛闭变化 。 结果上述两个
剂量的 D 液略有镇痛作用 ,但无统计学意义 。
又取小 鼠 20 只 , 体重2 0士 之g , 罕性。
随机分成二 组 。 分 别 于尾 静 脉 注 射 D 液
24 m g / k g 和对照液 , 观察给药前后 的痛闭变
化 。 结果给药组与对照组比较 , 未见显著性
差异 。
9
。 对幼龄大吸脚膝和粉上膝皿量 的影
晌
取体重 65 一 9昨 幼年大鼠18 只 , 罕舌各
半 , 均分二组 。 分别 iP D 液 24 m g k/ g和对照
液 10 耐 / k g, 共 5 日 , 第 6 日处死动物 , 摘除
胸腺和肾上腺 , 秤湿重 。 结果见表 8 。 经统
计学处理 , 二者无显著性差异 。
表 S D 液时胸腺和 肾上腺重量的影响
组 别 剂量 /公斤 , 印 动物数 ( n ) 肾上腺 重量天士 SD ( m g / i 。。 g体重 ) 胸腺重盘又土 S D (饥 g / 1 0 0 9体重 )
D 液 2 4 m g 9 1 0 . 7 3士 1 . 5 8 ` 1 3 6 . 2 5土 1 6 . 8 0
对照液 i o m l e 1 1 . 1 9士 3 . 0 4 1 3 7 . 6逃士 2 3 . 5。
10
. 对小眼单核巨曦细施吞曦劝能的影
晌
用炭廓清率测定法 。 取 台性小鼠 20 只 , 体
重 2 2 + 2 9 ,均分二组 。第一组加 。 液 2 4 m g / k g ,
第二组对照 。 连续给药 5 天 , 于末次给药后
二小时由尾静脉注入 20 %印度墨 汁 0 。 3 m l,
于 2和 20 分钟分别从眼眶静脉穴取血 2 0川。
依法测定炭廓清率 。 结果为
D液组 3。 2 7只 1 0一 2土 1 . 8 5 x i 0一 “
对照组 1 . 7 8只 1 0一 2士 8。 5 6 x 1 0一 2
组间比较 P < 0 . 05
结果说明 D液可促进单核巨噬细胞的吞
噬功能 。
n
. 急性毒性
采用序贯法测定 D液对小鼠的急性 L D。。
( i P
.
)结果为 7 4 . 3。士 2 . 3 9 m g k/ g ( P = 0 . 9 5 ) 。
讨论和小结
白花了哥王在民间除用于肝 癌 和 `肺 癌
外 , 也用于抗感染 。 其化学成分甚少研究 。
从中提得的 D aP hn o er t in , 其抗 炎 作用 , 尚
未见报道 。
本文用多种炎症模型研究了 p 液的抗炎
症作用 。 结果表明 : 它对二甲苯所致小鼠耳
部炎症及 5一H T 所致大 鼠足腑肿胀 , 有 非常
明显的抑制作用 , 对大鼠蛋清性 、 角叉菜胶
与 甲醛性足蹂肿胀 , 也有显著的抑制作用 。
表明它对炎症早期出现的毛细血管通透性增
高 、 渗出增加及水肿等现象 , 均有良好的抗
炎症作用 。
D 液对大鼠巴豆油气囊肿的肉芽组织增
生 , 也有明显的抑制作用 。 显示它对增殖期
炎症 , 也有抗炎作用 。 这可能有利于抑制癖
痕形成 。
本文初步探讨了 D 液抗炎症 作 用 的 机
制 , 它可显著降低大鼠肾上腺内 vi t一C 的 含
量 , 但对幼年大鼠胸腺和肾上腺重量无明显
影响 。 其作用机制尚待进一步研究 。 又因为
它能非常明显地抑制小鼠的扭体反应 , 具有
非麻醉性镇痛药的性质 , 故对炎症性疼痛会
表现 良好的镇痛效果 。 本品毒性不大 , 又 由于
它可促进单核巨噬细胞的吞噬功能 , 更有利
于炎症的早 日恢复 , 预计本品将可成为临床
上有希望 的抗炎镇痛药 。
参 考 文 献
〔1〕 广州市药检所 : ,飞, 草药通讯 ( 3 ) : 1 , 1马7 8
〔2〕 林志彬 等 : 中草药 ( 2 ) : 2 3 , i仑8 1
〔3〕 林志彬等 . 中国药理学报 ( 1 ) : 6 0 , 1仑8 0
仁4 〕 津田恭介等 : 药效评价 ( 1 )药理试验 法 ( .上 )
P
.
7 12
,
1仑7 1
〔们 徐叔云等 ` 药理实验方法学 P , 匀7 0 . 1日8 3
一
4 -