全 文 :应 用 生 态 学 报 年 ! 月 第 ∀ 卷 第 # 期
∃% &∋ ( )( ∗+ , − ∋ . / + 0 . 1 1/ &( 2 ( ∃ + / + 3 4 , ∗5 67 , ∀ 8# 9 : # ; 一# ; <
枫杨 、乌柏对钉螺毒性的研究 ‘
彭旦 明
彭镇华
周光雄
彭卫平
马 珠 宋友听 8江西中医药研究所 , 南昌 ##; ; ∀9
8安徽农业大学 , 合肥 = # 。。# ∀9
【摘要】 在自然条件下 , 研究了枫杨、乌柏叶对钉螺生理生化功能的影响 > 结果表明 , 与草
滩生态系统相 比 , 枫杨和乌柏生态系统中钉螺糖原含量 、总蛋白含量分别下降 #∀ > # 、 > !
和 =! > 、 < > ? , 谷草转氨酶 83 + ≅ 9和谷丙转氨酶 83 1≅ 9比活增高 = > ! 和 = > ∀ 倍 , 死亡率
升高 ∀= 和 < ? > 本文对抑螺化合物结构与作用关系进行了讨论 >
关链词 钉螺 枫杨 乌柏 化学成分
≅ Α Β ΧΔ ΧΕ7 Α Φ )Γ1 Χ5 Η Ι Δ ϑΧΦΔ Κ 5 Η Γ Λ Μ 1ΕΔ Κ Α ΔΓ Κ7 Γ ΙΕΔ 月+1 ΕΔ ΚΓ Α Λ Α Λ Δ Α Η Δ 6Γ ΧΓ Ν51 ΔΛ Ι ΧΙ Ο Κ Α ΠΕ Ν >1Δ Λ Ο 2Γ Λ Η ΧΛ Ο , Θ Ν Α 5 3 5 Γ Λ Ο Β ΧΑ Λ Ο , Ρ Γ Θ 5 , )Α Λ Ο 4 Α 5 Β ΧΛ 8∗ ΧΓ Λ Ο Β Χ 肠 Ι ΕΧΕ 5 Σ Δ ΑΦ ≅Κ Γ Μ ΧΣ ΧΑ Λ ΤΓ6 ∃Ν ΧΛ Δ ΙΔ 材示Μ ΧΔ ΧΛ Δ Γ Λ Μ ΡΓ Ε ΔΚΧ Γ Ρ Δ Μ ΧΥΓ , ∋ Γ Λ Δ Ν Γ Λ Ο # # ; ; ; ∀ 9 , 1Δ Λ Ο Θ ΝΔ Λ Ν 5 Γ , 1 Δ Λ Ος Δ ΧΩ ΧΛ Ο 8. Λ Ν 5 Χ . Ο Κ ΧΥ Α 6Σ 5 ΚΓ 6 , Λ ΧΞ Δ ΚΙ ΧΕ少 , 刀刁认 = # ; ; # ∀ 9一∃ Ν ΧΛ > ∗ > 刀沪户 > ( Υ Α 6 > , , ∀
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Υ Α Η 1 ; Ι 6Ε 6 Α Λ >
引 言 螺的设计及进一步选择高效抑螺树种提供科学依据 >
近年来 , 采用大规模植树造林 , 栽种杨
树 、枫杨 、乌柏等方法改变钉螺 生态环境 ,
从而控制 消灭钉螺 已成为血防新趋势 > 钉
螺在造林生境下生长 、衰老及生理生化功
能的变化及树种落叶对钉螺作用始终受到
生态学家 、血防专家 的关注 , 本文着重探讨
了枫杨 、乌柏 、草滩等不同生境对钉螺的糖
原含量 、蛋白质含量 、谷丙转氨酶 、谷草转
氨酶及死亡率的影响 , 比较了枫杨 、乌柏对
钉螺影响与草滩影响的差异 , 并从乌柏 叶
中分离 < 种抑螺化学物质 , 为生态工 程灭
= 材料与方法
= > 供试材料
钉螺取自安庆市红星乡江滩野外成螺 > 试验
点选于安庆长江滩地 , 采用 自制木框结构 、 尼龙
纱网箱封闭钉螺 8“ Β # Β ! Υ Η 9 , 土表覆盖枫
杨 、乌柏叶 ; >
= > = 试验方法
= > = > 样品处理 将钉螺软体无机械损伤取出 ,
, 林业部 、卫生部 “八五 ”科技攻关项 目“兴林灭螺 、
综合治理和开发三滩研究”的部分内容 >
年 # 月 ! 日收到 , 月 = = 日改回 >
应 用 生 态 学 报 ∀ 卷
磨成匀浆 , 加 ; > Η 6 ∋ Γ Θ % 1+ Ζ 一 ∋ Γ % : 1+ Ζ 缓冲液 取乌柏叶用乙醇渗滤 , 回收溶剂得稠膏 , 水溶解
8Ω% ! > <9 于冷冻离心机 中离心 ; Η ΧΛ 8< ; ; ;Κ · 稠膏 , 加乙酸乙醋 、正丁醇依次萃取水层 , 回收溶
Η ΧΛ 一‘ , = ℃ 9 > 分离上清液 , 备用 > 剂 , 乙酸乙酷提取物经硅胶柱层析以氯仿 : 甲醇
= > = > = 钉螺 3 1≅ 、3 + ≅ 总蛋白含量测定 3 1≅ 、 , 甲酸 [ , , ; > =∴ < , , ; > = 梯度洗脱 , 所得固
3 + ≅ 测定采用 &0 ∃ ∃ 动力法 , 总蛋白含量采用双 形物再经硅胶 % 湿柱和干柱反复洗脱 > 依次得晶
缩脉终点法 > 、 6 、 & 、 ς > 经硅胶 3 薄层与聚酞胺层析检测
= > = > # 钉螺糖原含量及死亡率测定 每隔 = 一 # 为单一斑点 > 正丁醇提取物经聚酸胺层析柱洗
个月 , 由试验点抽取一定数量的钉螺采用 敲击法 脱 , =; ?醇洗部分再经硅胶以氮仿 : 甲醇 : 甲酸
测死亡率 , 用葱酮显色法测糖原含量 , 以分析纯 系统洗脱对应于 & 、 ς 的无色针 晶 , [; ?醇洗部
葡萄糖作标准曲线 , 将 + 2 值转换成 3 Λ 含量 > 分再经硅胶柱层析得含 & 、 6 黄色粉末 > 对 < 种
= > = > < 乌柏叶化学成分的提取分离及结构鉴定 化合物进行分析 , 确定其化学结构 >
表 6 不同生境下钉螺生理生化功能 比较
≅ Γ ϑ 6Δ ∃ Α Η Ω Γ Κ ΧΙΑ Λ Α Φ 1Ν7Ι ΧΑ 6Α Ο ΧΥ Γ6 Γ Λ Μ ϑ Χ伙 Ν ΔΗ ΧΥ Γ 6 Φ5 Λ Υ ΕΧΑ Λ Ι ; > 加1Δ Λ Ι ΧΙ Γ Ε Μ ΧΦΦΔΚ ΔΛ Ε 七Γ ϑ ΧΕ Γ Ε
作用时间
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8Η Α Λ ΕΝ 9
乌 柏 > : Δϑ ΧΦΥ Κ5 。 枫 杨1 > Ι ΕΔ 刀+1 ΕΔ Κ Γ
糖原含量 3 67 Δ Α Ο Δ Λ Δ Α Λ Ε Δ Λ Ε 印 Ο · ΕΛ Ο 一 , 9 = # > 士 [ > > ;士 > ! ∀ > ; 士 ; >
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死亡率 Ρ Α Κ Ε Γ 6ΧΕ 7 8? 9 = # = =
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总蛋白含量 ≅ Α ΕΓ 6 Ω Κ Α Ε Δ ΧΛ Υ Α Λ Ε Δ Λ Ε 8Ο · / 一 , 9 ; > !∀ 士 ; > ! ‘ ; > ! <士 ; > = > > ∀ !士 ; > [
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朴 Ω ] ; > ; >
# 结果与分析
# > 枫杨 、乌柏对钉螺生理生化功能的影
响
从表 可见 , 草滩钉螺在不 同时期其
糖原含量亦有所不同 , 总体呈下降趋势 , 枫
杨 、乌柏生态 系统对钉螺的影响与作用时
间有关 > 作用 时间为 = 个月 内则糖原含量
无明显变化 , 当 < 个 月时 , 糖原含量则明显
下降 > 对钉螺死 亡率 的测定也 出现类似的
结果 , 草滩钉螺 在观察 的 个月 内其死亡
率在 = 一 # ?之间 ,而枫杨 、乌柏生态系统钉
螺则从作用时 间 < 个月起就 明显上升 , 表
明小生态环境的改变对钉螺生理变化的效
应 , 需要有一段时间的累积 , 这与灭螺药物
不同 > 对钉螺转氨酶及 总蛋白含量的测试
结果表明 , 乌柏生境中钉螺 3 1≅ 、3 + ≅ 比
活及总蛋白含量 明显下降8Ω ] 。> ; 9 , 枫杨
生境中钉螺 3 + ≅ 比活及总蛋 白含量 明显
下降 , 而 3 1 ≅ 比活未明显改变 ,
# > = 结构鉴定
晶 & : 山蔡酚 ,黄色粉末 , 熔点 = !< > 一
= ! ∀ > ; ℃ , 熔于 乙醚 、 乙酸 乙酷 、丙酮 、 甲醇
和 乙醇等 > 硅胶 3 和聚酞胺簿膜层析为单
一斑点 , 喷 .& ∃ # 显亮黄色 , 紫外灯下显亮
黄色荧光 > 喷 0 Δ∃ # 显污绿色 , 紫外灯下无
荧光 > 镁粉一盐酸反应 显玫瑰红色 , 二氯氧
错反 应显黄 色荧 光 , 加 柠檬酸 显黄 绿色 >
Ρ Α 6ΧΙΝ ΔΝ 反 应 阴 性 , 证 明 为 黄 酮 醇 ·
, ⊥ 入黔% 8Λ Η 9 : = ∀ ∀ > ; , = # > < ; 8Ι Ν 9 , # = = > < ;
# 期 彭旦明等 : 枫杨 、乌柏对钉螺毒性的研究
8ΙΝ 9 , # ∀ ∀ > ; 8黄酮醇 9> 加诊断试剂情况如
下 : 加 . &∃# : = ∀ [ > < ; , # ; > ; 8Ι Ν 9 , # # > [ ;
8 ΙΝ 9 , < = ∀ > ; ; Ζ 加 . &∃ # _ % ∃ & : = ∀ [ > < ; ,
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分子式为 Δ : 。% : 。+ 。 , 理论值为 = [ ∀ > ; < ! ! >
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Μ , ∗一 = > ; % Σ , ∃ ∀ 一% 9 , ∀ > 8&% , ∗β = > ;
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8∃ , 9 , < > ; 8∃ 。 9 , ! > [ = 8∃ , 9 , ; < > ; !
8∃ &。9 , = # > = # 8∃ & , 9 , # ; > < 8∃ Θ 9 , ∀ > # ;
8∃ Γ , 9 , ∀ ; > = ∀ 8∃ Ζ , 9 , ∀ > # ; 8∃ 。, 9 , # ; > <
8∃ 。, 9 >
晶 & : 没食子酸 乙酷 , 无色细针 晶 , 熔
点 ; 一 = ℃ 8∃ % #∃ &一Ρ Δ+ % 9 , 易溶 于 乙
醚 、 乙酸 乙酷 , 溶于丙酮 、 甲醇 、 乙醇 > 0Δ ∃ #
显 色 呈 墨 绿 > % − Ρ ) 测 得 分 子 量 为
[ > ; < ∀ , 分子式为 ∃ , % , 。+ 、 , 理论计算值
为 [ > ; = [ > Ρ ) Η α Σ 8? 9 : [ 8Ρ 十 ,
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8∃ 。9 , < > ∀ # 8∃ , 9 >
晶 & :裕皮素 , 黄色颗粒状 , 熔点 # # >
一 # ℃ , 溶于 甲醇 、丙酮 、 乙酸 乙醋等 , 硅
胶 3 及聚酞胺薄膜薄层 均为单一黄色斑
点 , 喷 ? . &∃ # 乙醇 液显亮黄 , 紫外灯下
显亮黄荧光 Ζ 喷 ? 0 Δ ∃& 。 呈草绿色 , 紫外
灯下无荧 光 > 加镁粉一盐酸 显玫瑰红 Ζ加二
氯氧错显黄色 , 再加 柠檬 酸后 显黄绿色 >
Ρ Α6Χ ΙΥ Ν 反 应 阴 性 , 证 明 为 黄 酮 醇 >
, ⊥ 入黔% Λ Η : = > < ; , # ; < > ; ; 8ΙΝ 9 , # ! ; > < ; >
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加 ∋ Γ + . Δ _ % #⎯ + : : = > < ; , # ; < > ; ; 8Ι Ν 9 ,
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分 子 式 为 ∃ 6。 % 6。 ; ! , 理 论 计 算 值 为
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89 ∃ β ; 9 , ∀ ; , , # , # , = < ,
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内标 9 , 占8Ω Ω Η 9 : ∀ > = ! 8Σ % , Μ , ∗ β = > ; % Σ ,
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8∃ 。9 , > ; 8∃ ∀ 9 , ∀ > 8∃ ! 9 , < > ∀ < 8∃ : 9 ,
! > ! [ 8∃ , 9 , ; < > ; = 8∃ 6。 9 , = > < < 8∃ : , 9 ,
应 用 生 态 学 报 ∀ 卷
= # > ∀ [ 8∃ Θ , 9 , < > [ ! 8∃ #· 9 , < ! > ; 8∃ ‘, 9 ,
> ∀ ! 8∃ ) , 9 , ∀ > 8∃ 。, 9 >
晶 ∋ : 没食子酸 , 无色棒状结 晶 , 熔点
= # [ 一 = < ; ℃ , 分解 , 可溶于丙酮 、 乙酸 乙酷 、
甲醇 、 乙 醇 , 与 0Δ ∃& ∗ 反应 显墨绿色 , 澳 酚
蓝显黄色 , 加 ∋ Γ + % 碱液显污绿色 , % − Ρ )
测 得 分 子 量 为 ! ; > ; = # ∀ , 分 子 式 为
∃ !% ‘+ 。 , 理论计算值为 !; > ; = , Ρ ) Η α Σ
8? 9 : ! ; 8Ρ _ , ; ; 9 , # 8Ρ _ 一+ % , ! = # < 9 ,
# 8 > [ 9 , = 8Ρ 十 一∃ ++ % , = ! > ! ; 9 , ; !
8 > [ < 9 , ! 8 = > ! ! 9 > , ⊥ 人黔% Λ Η : = = < > < ,
= ! > = > &− 7甄乳。Η 一‘: # # ; ; 8一+ % 9 , ∀ ; 8χ ∃
一 ; 9 , ∀ ; , < < ; , < = ; , # < ; , ; = ; , [ ; ,
! ; ; > &% ∋ Ρ − 8 ∃ 2 # ∃+ ∃ 2 # , ≅ Ρ ) 9 , 占
8Ω Ω Η 9 : ! > 8Θ% , Μ , ∗β = > ; . Κ 一 % 9 , # ∃ ∋ Τ
Ρ − 8∃2 Ι∃+ ∃ 2 # , ≅ Ρ) 9 , 占811 Η 9 : = = > ; ∀
8∃ : 9 , ; > ! 8∃ Θ 9 , < > ; 8∃ # 9 , # [ > ∀ #
8∃‘ 9 , < > 8∃ ) 9 , ; > ; = 8∃ ∀ 9 , ∀ [ > ; ∀
8∃ ! 9 >
< 讨 论
和构成 比例 , 进而影响钉螺等有赖湿土擎
生的生物物种的生存环境 , 影响它 们对必
需微量元素的吸收 , 起到 了抑制钉 螺等的
生长繁殖 Ζ 另一方面 , 这些成分 也有可能直
接进入钉螺体内 , 影响对金属离子依顽的
酶的活性 , 使钉螺体内生化进程受到干扰
和破坏 , 进而影 响 它们 的生存 、生 长和繁
衍 > 当然 , 乌柏叶中这些有机化学物质对钉
螺影响的真正效应如何 尚需进一步研究 >
根据实验结果 , 可以认为钉螺小 生态
环境的改变 , 包括原来 良好生存的植被条
件变化 、丰富适宜的食物变化 、枫杨和乌柏
落叶中某些毒性成分如没食子酸 、棚皮素
等 , 当时间累积到一定程度后 , 钉螺对营养
物质 的摄取发生障碍 , 毒性成分发生毒性
效应 , 造成糖原含量下降 , 能源储备受到威
胁 , 引起钉螺调用蛋白质作能源 , 转氨酶 比
活力变化 , 蛋白质分解加快 , 总蛋白含量下
降 , 造成死亡率升高 >
从乌柏 叶分离出 的主要化 学成 分来
看 , 属 = 种类型 , 即黄酮型和多酚型 , 而这 =
类化合物又有 一个共同的特点 , 即含有多
个酚经基 > 这些酚轻 基结构具有较活泼的
氢和强负 电性的氧 , 因此极易与金属离子
结合或络合 , 形成 酚盐或络合物 > 可以设
想 , 乌柏落叶中这些成分的存在 , 极有可能
与泥土 中的多种微量矿物元 素结合或络
合 , 改变土壤或水中微量元素的存在形式
参考文献
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