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天竺桂叶精油成分分析及其对蚊虫的毒杀作用



全 文 :第 30卷 第 9期 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 Vol.30 No.9
2010年 9月 JournalofCentralSouthUniversityofForestry&Technology Sep.2010
收稿日期:2010 -06 -12
基金项目:中南林业科技大学大学生创新实验项目(2009 -21D-GSX);湖南省自然科学基金(08JJ3028);湖南省教育厅高校重点项目
(10A132)
作者简介:申 鸽(1985-), 女 , 陕西渭南人 ,硕士研究生 , 主要从事蚊虫防治及植物源农药研究工作;E-mail:051243007@ 163.com
通讯作者:彭映辉(1964-), 女 , 湖南双峰人 ,教授 , 主要从事植物资源利用研究工作;E-mail:pengyh999@ 163.com
天竺桂叶精油成分分析及其对蚊虫的毒杀作用
申 鸽 1 , 彭映辉 1 , 秦巧慧 1 , 熊国红 2 , 扶巧梅1 , 曾冬琴 1 , 陈飞飞 1 , 张 云 1
(1.中南林业科技大学 森林植物实验教学示范中心 , 湖南 长沙 410004; 
2.国家家用杀虫用品质量监督检验中心 , 湖南 益阳 413000 )
摘 要:用水蒸汽蒸馏法从天竺桂鲜叶中提取精油 , 用 GC-MS(GasChromatography-MassSpectrometry)检测其化学成
分 , 采用浸液法研究其对白纹伊蚊和致倦库蚊的毒杀活性。结果表明:天竺桂叶精油中 , 化合物相对含量最高的成
分为 2—莰醇 (28.30%), 其它依次为桉叶油醇(20.98%)、乙酸龙脑酯(6.65%)、芳樟醇(5.94%)、α—松油醇
(5.87%)、(-)-环氧石竹烯(5.11%)等;天竺桂精油对白纹伊蚊Ⅳ龄期幼虫和蛹的 LC50值分别为 75.466、
87.508μg/mL, 而对致倦库蚊则分别是 61.804、77.654 μg/mL。结果表明天竺桂叶精油对这 2种蚊虫的幼虫和蛹均
有显著的毒杀效果。
关键词:天竺桂;精油;蚊虫;毒杀活性;化学成分
中图分类号:Q949.747.5;TQ453.3 文献标志码:A 文章编号:1673— 923X(2010)09— 0132 —05
Componentanalysisofessentialoilfromfreshleavesof
Cinnamomumjaponicumandoil sactivitytomosquitoes
SHENGe1 , PENGYing-hui1 , QINQiao-hui1 , XIONGGuo-hong2 , FUQiao-mei1 , ZENGDong-qin1 , CHENFei-fei1 , ZHANGYun1
(1.DemonstrationCenterforTeachingExperimentofForestPlant, CentralSouthUniversityofForestryandTechnology, Changsha410004,
Hunan, China; 2.NationalHouseholdInsecticideProductsQualitySupervisionandInspectionCenter, Yiyang413000, Hunan, China)
Abstract:TheessentialoilwasextractedfromCinnamomumjaponicumfreshleavesbysteamdistillation, thecompositionsof
thisoilwasanalyzedbygaschromatography-massspectrometry, andthetoxicactivityofthisoilagainst4thlarvaeandpupae
ofAedesalbopictusandCulexpipiensquinquefasciatusweredeterminedbyimmersionmethod.Themaincomponentsofthees-
sentialoilwereBorneol(28.30%), 1, 8-Cineole(20.98%), (-)-BornylAcetate(6.65%), Linalool(5.94%), (-)-
Alpha.-Terpinol(5.87%), CaryophylleneOxlde(5.11%).TheresultsshowthatthetoxicityofLC95 against4thinstarlar-
vaeandpupaeofAe.albopictuswere75.466 μg/mL, 87.508g/mL, respectively, andthetoxicityofLC95 to4thinstarlar-
vaeandpupaeofCx.quinquefasciatuswere61.804μg/mLand77.654 μg/mL.So, aconclusionisdrawnthattheessential
oilhasobvioustoxicefecttobothlarvaeandpupaeofthetwomosquitospecies.
Keywords:Cinnamomumjaponicum;essentialoil;mosquitoes;insecticidal;chemicalcomponent
  植物精油是从植物中提取的芳香物质 ,古代人
们即已认识到植物精油具有治疗和杀菌作用。因为
天然植物精油具有低毒或无毒 ,对皮肤不会产生灼
热感 ,气味清新 ,使用后无药物残留 、易降解 、对环境
无污染等许多优点而受到国内外研究者的高度关
注。彭映辉和曾冬琴等 [ 1-3]研究了广藿香 、一摸香
和竹叶花椒等对蚊虫的毒杀驱避作用 , Alejandro
Lucia等[ 4]研究了埃及伊蚊对桉树精油挥发物的敏感
DOI :10.14067/j.cnki .1673-923x.2010.09.020
第 9期  申 鸽 ,等:天竺桂叶精油成分分析及其对蚊虫的毒杀作用 
性 , Byung-HoLee等[ 5]研究了桃金娘科植物精油的熏
杀活性和桉叶油醇对储粮害虫的作用 , Mitsuyoshi
Yatagai等 [ 6]研究了金千层叶精油对螨虫的毒杀效
果。上述研究都表明植物精油是良好的杀虫剂原料。
天竺桂 Cinnamomumjaponicum为樟科樟属植
物 ,产于我国且分布广泛 ,常绿乔木 ,叶可常年采摘 ,
全株含精油 。已有研究证明 ,天竺桂叶精油具有消
炎 、抑菌作用 。本研究选用天竺桂叶精油 ,研究其对
2种常见蚊虫(白纹伊蚊 Aedesalbopictus,致倦库蚊
Culexpipiensquinquefasciatus)幼虫和蛹的毒杀作用。
1 材料与方法
1.1 精油制备
新鲜天竺桂叶材料于 2008年 8月采集于中南
林业科技大学内 ,用水蒸汽蒸馏法提取 ,所得精油淡
黄色 ,出油率 0.52%,精油密度 0.96 g/mL。经无水硫
酸钠干燥后 ,收集于棕色玻璃瓶 , 4 ℃冰箱保存 ,备用。
1.2 供试蚊虫
供试白纹伊蚊和致倦库蚊由湖南省疾病预防控
制中心提供 ,饲养条件:室温(25 ±2)℃、相对湿度
(80±2)%、光照 14 ∶10(L∶D)h、幼虫饲料小麦粉
∶酵母粉∶鸡肝粉 =2 ∶1 ∶0.05 [ 7] 。
1.3 化学成分分析
天竺桂精油挥发性组分采用 GC— MS法 (气相
色谱 -质谱联用)分析 ,测试仪器为 Agilent6890 GC
和 5973 MS系统 ,弹性石英毛细柱(HP— 5 MS, 30 m
×250 μm ×0.25 μm)。
样品处理:将天竺桂精油用乙酸乙酯(色谱纯)
稀释 2 000倍 ,充分摇匀。
升温程序:柱温从 40 ℃保持 1 min, 以 20
℃·min-1的速度升温至 100 ℃,保持 2 min;再以
20 ℃· min-1升温至 220 ℃, 保持 2 min;最后以
20 ℃· min-1升至 280 ℃,保持 5 min。色谱参数:
载气为高纯氦 ,总流速 40 mL· min-1 ,柱内流速 1.1
mL·min-1 ,进样口温度 250 ℃,进样量 1 μL。 GC
和 MS接口温度 270 ℃。质谱条件:电子轰击能量
70 eV,离子源温度 230 ℃,扫描质量范围(m/z)15
~ 500 amu。采用 Wiley275标准谱库进行检索。
1.4 毒杀活性测试
吸取一定量上述天竺桂叶精油 ,用 99.7%的无
水乙醇完全溶解 ,然后加去氯水稀释制成 1 000
mg·L-1的精油母液。于常温 (25 ±2 ℃)、相对湿
度(60±10)%条件下进行 2种蚊虫幼虫及蛹的毒
杀实验。通过预实验确定毒杀所需精油浓度范围 ,
并在此范围内设定适当浓度梯度。本实验所需精油
毒杀浓度如表 1所示 。
表 1 测定蚊虫各龄期幼虫及蛹的 LC50值所需的天竺桂叶
精油浓度
Table1 ConcentrationsofCinnamomum japonicumoilfor
testingLC
50
valuestodifferentlarvaeandpupae
ofmosquitoes (μg· mL-1)
试虫
龄期 白纹伊蚊 致倦库蚊
Ⅰ 15, 20, 25, 30, 35, 40 20, 25, 30, 35, 40
Ⅱ 15, 25, 35, 45, 55, 65 25, 30, 35, 40, 45, 50
Ⅲ 20, 50, 80, 110, 140 20, 30, 40, 50, 60, 70
Ⅳ 20, 50, 80, 110, 140 40, 50, 60, 70, 80, 90
蛹 40, 60, 80, 100, 120, 140 40, 60, 80, 100, 120
  按表 1中的浓度梯度配制好精油溶液各
50 mL,置于三角瓶中 ,向每瓶溶液中浸放 20只实
验试虫进行毒杀活性测试 , 24 h后观察试虫的死亡
数。此过程不喂食 ,死亡以用尖头物体刺激后不能
移动为准 [ 8] 。每个实验设 3个重复 ,并用与精油溶
液相对应浓度的酒精作对照实验。
1.5 数据处理
试虫的死亡数取 3次重复的平均值 ,校正死亡
率用 Abbot公式 [ 9]计算:
校正死亡率 =处理死亡率 -对照死亡率
1-对照死亡率 ×100%。
采用 SPSS18.0软件计算白纹伊蚊和致倦库蚊
的 LC50 、LC95值 、回归方程以及 95%置信限区间 。
2 结果与分析
2.1 天竺桂叶精油的化学成分分析
对天竺桂叶精油进行 GC— MS分析 ,其离子图
见图 1,化学成分定性分析及相对含量(以面积归一
化法测得)结果见表 2。由图 1可知 ,共检出了 41
个峰 ,谱库比对共检出化学成分有 39种 ,匹配度大
于 85%(37种)的占精油总量的 95%;在检出的成
分中 , 相对含量较高的组分依次为莰醇 -2
(28.301 3%)、桉叶油醇(20.981 8%)、乙酸龙脑酯
(6.648 0%)、芳樟醇 (5.941 9%)、 α—松油醇
133
   中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 第 30卷
(5.865 7%)、(-)-环氧石竹烯(5.109 9%)等。
2.2 天竺桂叶精油对 2种蚊虫的毒杀活性
天竺桂叶精油对白纹伊蚊 、致倦库蚊蛹和各龄
期幼虫的毒杀结果见表 3。由表 3可知 ,天竺桂叶
精油毒杀白纹伊蚊和致倦库蚊幼虫和蛹 24 h的
LC50值随着幼虫龄期的增长而增加;毒杀蛹的 LC50
值最高 ,分别为 87.508 μg/mL和 61.804 μg/mL。
比较精油对 2种蚊幼虫的毒杀结果 , 致倦库蚊幼
图 1 天竺桂叶精油的总离子流图
Fig.1 ThetotalioncurrentofCinnamomumjaponicumleavesessentialoil
表 2 天竺桂精油化学成分
Table2 ChemicalcompositionsofessentialoilextractedfromCinnamomumjaponicumleavesanalysedbyGC— MS
序号 保留时间 /min 化合物 分子式 分子量 CAS号 峰面积百分比 匹配度
1 5.243 水芹烯 l-Phelandrene C10H16 136.13 99— 83— 2 0.000 481 86
2 5.356 α-蒎烯.alpha.-Pipene C10H16 136.13 80— 56— 8 0.008 363 97
3 5.574 莰烯 Camphene C10H16 136.13 79— 92— 5 0.004 116 98
4 5.816 桧烯 Sabinene C10H16 136.13 3387— 41— 5 0.008 732 96
5 5.916 β-蒎烯.beta.-Pinene C10H16 136.13 127— 91— 3 0.006 196 96
6 5.951 β-月桂烯 beta.-Myrcene C10H16 136.13 123— 35— 3 0.000 481 97
7 6.288 3-蒈烯.Delta.3-Carene C10H16 136.13 13466— 78— 9 0.000 578 91
8, 9 6.416, 6.503 4-异丙基甲苯ParaCymene C10H14 134.11 99— 87— 6 0.043 749 7 95
10 6.574 柠檬烯 Limonene C10H16 136.13 138— 86— 3 0.029 987 98
11 6.65  桉叶油醇 1, 8-CINEOLE C10H18O 154.14 470— 82— 6 0.209 818 98
12 6.836 2-羟基苯甲醛 Benzaldehyde C7H6O2 122.04 90— 02— 8 0.000 953 96
13, 14 7.177, 7.429 顺-A, A-5-三甲基-5-乙烯基四氢化呋喃-2-甲醇 Cis-LinaloolOxide C10H18O2 170.13 5989— 33— 3 0.007 529 91
15 7.588 芳樟醇 Linalool.l C10H18O 154.14 78— 70— 6 0.059 419 96
16 7.728 3-庚炔 3-Hexyne C6H10 82.08 928— 49— 4 0.002 222 74
17 8.479 6, 6-二甲基-2-亚甲基二环 [ 3.1.1] -3-庚醇 Bicyclo C10H16O 152.12 5947— 36— 4 0.001 805 86
18 8.612 左旋樟脑 Bicyclo C10H16O 152.12 464— 48— 2 0.012 996 98
19 9.075 莰烯-2BorneolL C10H18O 154.14 464— 45— 9 0.283 013 95
20 9.192 4-萜烯醇 Terpinen-4-OL C10H18O 154.14 562— 74— 3 0.019 043 98
21 9.266 2-(4-甲基苯基)丙-2-醇 P-Cymen-8-OL C10H14O 150.10 1197— 01— 9 0.005 224 83
22 9.455 α-松油醇(-)-Alpha.-Terpineol C10H18O 154.14 10482— 56— 1 0.058 657 91
134
第 9期  申 鸽 ,等:天竺桂叶精油成分分析及其对蚊虫的毒杀作用 
续表 2 
Continuedtable2 
序号 保留时间 /min 化合物 分子式 分子量 CAS号 峰面积百分比 匹配度
23 10.177 甲酸酯 Bornylformate C11H18O2 182.13 7492— 41— 3 0.002 236 91
24 10.458 香芹酮 Carvone C10H14O 150.1 99— 49— 0 0.002 856 98
25 11.315 乙酸龙脑酯(-)-BornylAcetate C12H20O2 196.15 5655— 61— 8 0.066 48 99
26 11.522 香芹酚 Phenol C10H14O 150.1 499— 75— 2 0.000 904 87
27 12.826 乙酸橙花酯 Nerylacetate C12H20O2 196.15 141— 12— 8 0.001 351 90
28 13.278 乙酸香叶酯 GeranylAcetate C12H20O2 196.15 105— 87— 3 0.001 52 90
29 13.466 反式-水合蒎醇 Trans-Sobrerol C10H18O2 170.13 42370— 41— 2 0.001 903 86
30 13.688 β-榄香烯◆ Beta-Elemene C15H24 204.19 515— 13— 9 0.000 966 91
31 14.574 s-(+)-5-(1-Hydroxy-1-methylethyl)-
2-methyl-2-cyclohexen-1-one C10H16O2 168.12 60593— 11— 5 0.003 149 91
32 14.816 豆香素 Counarin C9H6O2 146.04 91-64-5 0.002 906 97
33 14.900 乙酸桂酯 2-Propen-1-ol, 3-phenyl-, acetate C11H12O2 176.08 103— 54— 8 0.012 064 96
34 17.327 榄 [香 ]醇 Elemol C15H26O 222.2 639— 99— 6 0.010 362 93
35 18.042 (+)spathulenol C15H24O 220.18 105983 0.047 597 98
36 18.187 (-)-环氧石竹烯 CaryophyleneOxide C15H24O 220.18 1139— 30— 6 0.051 099 99
37 18.251 gamma.-Gurjunene C15H24 204.19 22567— 17— 5 0.005 56 97
38 18.450 白菖烯 Calarene C15H24 204.19 17334— 55— 3 0.006 063 96
39 18.807 5-甲基-3-辛炔 3-Octyne, 5-methyl C9H16 124.13 62108— 33— 2 0.004 637 86
40 19.252 δ.B-瑟林烯 delta.-Selinene C15H24 204.19 5951— 61— 1 0.003 33 96
41 19.790 β-桉叶醇.beta.-Eudesmol C15H24 204.19 473— 15—4 0.008 343 96
表 3 天竺桂叶精油对蚊虫幼虫及蛹的毒杀活性
Table3 InsecticidalactivityofessentialoilsfromleavesofCinnamomumjaponicumagainstlarvaandpupaofmosquitoes
植物材料 试虫 幼虫龄期 LC50(LC95)/(μg· mL-1) 回归方程
95%可信限区间
LCL
LC50(LC95)
UCL
LC50(LC95)
卡方值
χ2
I 28.102(44.498) Y=0.100 X-2.819 25.469 (39.765) 30.842(53.361) 0.704
II 35.462(56.233) Y=0.079 X-2.808 31.468(50.618) 39.292(65.610) 0.918
白纹伊蚊 II 71.010(107.035) Y=0.046 X-3.242 62.177(95.016) 80.018(129.361) 0.700
IV 75.466(118.064) Y=0.039-2.914 X 68.331(105.606) 83.334(139.952) 0.965
蛹 87.508(127.687) Y=0.041 X-3.582 78.974(116.535) 95.091(147.654) 1.491
天竺桂叶精油
I 29.642(38.160) Y=0.193 X-5.724 27.852(35.725) 31.363(41.311) 2.613
II 39.758(56.789) Y=0.966 X-3.840 37.102(51.582) 42.780(66.823) 1.795
致倦库蚊 II 53.870(79.539) Y=0.064 X-3.452 44.931(66.601) 66.979(125.219) 7.370
IV 61.804(85.980) Y=0.068 X-4.205 57.441(79.540) 66.012(96.842) 0.990
蛹 77.654(129.260) Y=0.032 X-2.475 68.062(113.937) 86.965(159.160) 1.296
   P<0.01。
虫对天竺桂叶精油更为敏感 ,除 I、I龄期 LC50值稍
高于白纹伊蚊外 , II、IV龄期和蛹的 LC50值均低于
白纹伊蚊。
3 讨 论
本研究中 ,天竺桂叶精油化学成分以 2 -莰醇
(Bornel)最高 ,相对含量占 28.30%,其次为桉叶油
醇(20.981 8%)、乙酸龙脑酯(6.648%)等。这与
蔡建秀等认为天竺桂叶精油化学成分以 2 -莰醇
(Bornel)26.03%为主 ,其后分别为匙叶桉油烯醇
(10.57%)和桉叶油醇(7.15%)[ 10]有较明显的差
异 ,材料采集时间及地点上的差异可能是原因之一 ,
因为同一种芳香植物中 ,其精油含量高低及成分的
差异与植株年龄 、不同生长发育期 、生长季节 、立地
条件等因素有关[ 11] 。
JunweiZhu等人 [ 14] 的研究显示阿胶木油对白
纹伊蚊 4龄期幼虫的 24 hLC50值为 78 μg· mL-1 ,
VeenaPrajapati等人[ 15]的研究显示茴香精油对白纹
伊蚊和致倦库蚊 4龄期幼虫的 LC95分别是 115.7 、
135
   中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 第 30卷
149.7 μg· mL-1 ,曾冬琴等人[ 1]研究表明广藿香精
油对白纹伊蚊蛹 24 h的 LC50值为 187 μg/mL。本
研究结果显示 ,天竺桂精油对蚊幼虫的毒杀效果与
阿胶木相近 ,明显优于茴香精油;对蚊蛹的毒性显著
高于广藿香精油 。 Obeng-Ofori、Tunc、Erler、Kordali
等人[ 16-19]的先后研究表明 2—莰醇 、桉叶油醇 、4 —萜
烯醇 、乙酸龙脑酯对谷象和澳洲赤眼蜂具有很好的
毒杀效果。 Stamopoulosa等 [ 20]的研究表明 4 —萜烯
醇 、柠檬烯 、桉叶油醇及芳樟醇对杂拟谷盗整个生长
期都有很强的毒杀作用。因此 ,天竺桂精油的良好
杀虫效果与其含有 2—莰醇 、桉叶油醇 、乙酸龙脑酯 、
芳樟醇 、α—松油醇等具有杀虫作用的化合物有关 。
天竺桂叶精油中的芳樟醇及柠檬烯等成分还被报道
对蚊虫具有良好的驱避效果 [ 21 -22] ,因此 ,下一步将
继续研究其对蚊虫的驱避效果 ,为筛选环保型的蚊
虫驱杀精油提供基础资料 。
参考文献:
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[本文编校:谢荣秀 ]
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