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羊踯躅提取物对日本血吸虫虫卵肉芽肿影响



全 文 :J TCVM
年第 3 期2012
日本血吸虫病的病理基础是在肝、肠所形成
的虫卵肉芽肿,其形成机理已被证明是免疫反应。
吡喹酮对血吸虫成虫、童虫、尾蚴和毛蚴均有强大
的杀灭或抑制作用,对虫卵作用尚有争论。笔者等
发现中药羊踯躅具有灭螺作用,为了解其对日本血
吸虫虫卵肉芽肿的影响,本试验对比观察了中药羊
踯躅与吡喹酮对小鼠肝脏内日本血吸虫虫卵肉芽
肿的作用及对肉芽肿内嗜酸性粒细胞的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物
2 月龄昆明杂交种雌性小白鼠 45 只,长江大
学动物科学学院提供,每只经腹部感染日本血吸
虫复性尾蚴 15条,常规饲养。
1.2 羊踯躅
采集于湖北省荆州市附近郊区,蒸馏法提取
有效成分,灌胃给药。
1.3 实验分组
将 45只小鼠随机平均分成 3组:吡喹酮组,于
感染尾蚴后第 45 天灌胃吡喹酮,400 mg/kg,1次/d,
连续 2 d;羊踯躅组,于感染尾蚴后第 45天起灌胃
羊踯躅提取物 100 mg/kg,1次/d,连续 20 d。
1.4 虫卵肉芽肿测定及嗜酸性粒细胞计数
实验组与对照组于感染尾蚴后第 59 天起,每
隔 2 d剖杀 5-6只鼠,取左叶肝约 1 g,固定于 10%
中性福尔马林中 24 h以上,常规制作蜡块,5 μm厚
度连续切片 30张,H.E染色,每组每次测定 20-30个
由单个成熟虫卵形成的肉芽肿两个直角相交直
径,以(最长纵径+最宽横径)÷2 为平均直径,并计
Study on the activity of different preparation of divaricoside against Oncomelania
ZHAO Qiang,ZHAO Hong-mei
(College of Animal Science,Yangtze University,Jingzhou Hubei 434025,China)
Abstract:In order to study the activity of divaricatus against Oncomelania,divaricoside compounds
was obtained using organic solvent extraction and silica gel column chromatography,and made into
different preparation such as solution,granula and medicinal powder. Then they were used to kill
Oncomelania by immersion, feeding and dusting,respectively. The results indicated that divaricatus
showed extremely significant activity against Oncomelania (P<0.01)at room temperature of (25±1)℃
and water temperature of (23±1)℃,three kinds of preparations all achieved mortality rates above 90%
in 72 h,and the granula demonstrated optimal activity,then was the powder and the solution.
Key words: divaricoside;molluscicidal activity;Oncomelania
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
羊踯躅提取物对日本血吸虫虫卵肉芽肿影响
蔡 雄,赵红梅
(长江大学动物科学学院,湖北荆州 434025)
摘 要:对感染 15条日本血吸虫尾蚴的雌性小鼠分别于感染后 45 d起灌胃羊踯躅提取物
及吡喹酮,结果小鼠肝内虫卵肉芽肿平均直径和肉芽肿内嗜酸性粒细胞明显减少。试验结果表
明,羊踯躅提取物与吡喹酮对血吸虫虫卵肉芽肿的发展具有明显抑制作用。
关键词:羊踯躅;日本血吸虫;肉芽肿
中图分类号:S853.74 文献标志码:A 文章编号:1000- 6354(2012)03- 0050- 03
收稿日期:2011-12-11
基金项目:长江大学全国大学生创新性实验基金项目(091048926)
资助
作者简介:蔡 雄(1990-),男,动物医学专业在读。
通讯作者:赵红梅(1965-),女,博士,教授,研究方向:应用分
子细胞生物学。




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DOI:10.13823/j.cnki.jtcvm.2012.03.018
J TCVM
年第 3 期2012
算各组均值。对虫卵肉芽肿内嗜酸性粒细胞进行
计数,并计算各组均值。结果作统计学处理。
2 结果
2.1 两种药物对血吸虫虫卵肉芽肿的影响
结果见表 1。
表 1 小鼠肝脏内虫卵肉芽肿平均直径/μm
Table 1 The average diameter of liver granu -
loma in mice/μm
注:两用药组虫卵肉芽肿平均直径均明显小于同期对
照组(P<0.05-0.01)。
表 2 药物对虫卵肉芽肿内嗜酸性粒细胞的影响
Table 2 The amounts of eosinophilic granulocyte
in liver granuloma in mice
2.2 两种药物对血吸虫虫卵肉芽肿内嗜酸粒性
细胞数目的影响
嗜酸性粒细胞数从第 65 天逐渐减少,药物
组除第 75 天嗜酸性粒细胞数目与对照组无差
异(P > 0.05)外,其余各期则明显少于对照组
(P<0.05或 P<0 .01)。结果见表 2。
3 讨论
羊踯躅提取物主要活性成分及其作用机理尚
不明确,可能具有调节细胞免疫功能,对免疫抑制
的宿主可恢复其免疫功能。血吸虫病感染动物细
胞免疫处于低水平,羊踯躅提取物可促进血吸虫
病动物的细胞免疫。本实验小鼠经羊踯躅提取物
治疗后,从感染尾蚴后第 60-120 天,肝内虫卵肉
芽肿平均直径较对照组显著减小(P<0.05-0.01),
表明羊踯躅提取物对已形成的虫卵肉芽肿有明
显抑制作用。服用羊踯躅提取物后,除第 75 天肉
芽肿内嗜酸性粒细胞数与对照组无差异外,第
85-120天则与对照组差异显著(P<0.05-0.01),
提示羊踯躅提取物对肉芽肿的抑制作用在已形成
的肉芽肿中、后期可能通过减少肉芽肿内嗜酸性
粒细胞而实现。
实验用治愈剂量吡喹酮治疗感染日本血吸虫
尾蚴的小鼠,结果表明治疗组小鼠肝内虫卵肉芽
肿直径较对照组明显减小(P<0.05-0.01),说明吡
喹酮可抑制已形成的肉芽肿进一步发展,有学者
认为吡喹酮可能通过破坏成熟虫卵内毛蚴或破坏
虫卵抗原,从而减轻肉芽肿的形成和发展。这可能
是吡喹酮作用的一个方面。杨元清等认为吡喹酮
可使沉积于宿主组织虫卵周围的细胞反应明显减
轻或基本消失,特别是抑制中性粒细胞和嗜酸性
粒细胞在成熟虫卵周围的聚集。本试验观察到用
吡喹酮治疗后,虫卵肉芽肿内嗜酸性粒细胞平均
数在第 65 天、85-120 天均较对照组明显减少,说
明吡喹酮也可使肉芽肿内嗜酸粒性细胞减少,而
使虫卵肉芽肿减小。
345.2±23.0
216.8±17.1
215.8±16.4
181.5±15.4
163.5±13.5
感染尾蚴
后天数
对照组 羊踯躅提取物 吡喹酮组
ē±SD ē±SD P值 ē±SD P值
60
75
85
105
120
398.1±35.9
383.1+21.4
364.2+26.2
343.2+25.4
322.1+12.0
<0.05
<0.01
<0.05
<0.05
<0.01
358.2±24.3
298.6±12.4
318.7±11.6
236.7±14.8
256.5±11.8
<0.05
<0.01
<0.05
<0.01
<0.01
Influence of Rhododendron molle extraction on egg granuloma
caused by Schistosoma japonicum
CAI Xiong,ZHAO Hong-mei
(College of Animal Science,Yangtze University,Jingzhou Hubei 434025,China)
Abstract:Female mice infected with 20 cercaria of Schistosoma japonicum were divided into 3
groups. GroupⅠwere fed with praziquantel on 45th post-infection for successive 2 days,groupⅡwere
fed with Rhododendron molle extraction on 45th post-infection for successive 20 days,and group Ⅲ was
as control. Then mice liver granuloma was observed in different period. The results showed that group Ⅰ
and Ⅱ were reduced obviously on the average diameter of liver granuloma and amounts of eosinophilic
74.8±10.7
36.5±13.2
21.5±5.4
11.8±1.2
5.2±1.6
感染尾蚴
后天数
对照组 羊踯躅提取物 吡喹酮组
ē±SD ē±SD P值 ē±SD P值
65
75
85
105
120
105.1±8.2
46.5±15.1
45.4±8.0
28.1±4.2
13.0±5.0
<0.05
>0.05
<0.05
<0.05
<0.01
70.0±9.6
32.7±5.2
20.5±4.3
5.8±2.8
3.9±0.6
<0.05
>0.05
<0.05
<0.01
<0.01




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granulocyte,which indicated divaricoside and praziquantel could obviously inhibit the development of
egg granuloma caused by Schistosoma japonicum in mice.
Key words: Rhododendron molle;Schistosoma japonicum;egg granuloma
苏子提取物对高脂血症大鼠模型血脂水平的影响
朱楼英 1,余建国 2,方远书 1
(1.金华市食品药品检验所,浙江金华 321000;2.金华职业技术学院)
摘 要:采用高脂饮食法建立大鼠高脂血症模型,分别测定正常对照组、高脂模型组、苏子
提取物低剂量组( 0.1 g /mL)、中剂量组(0.5 g /ml)、高剂量组(1.0 g/mL)血清中的 TC、TG、
LDL-C、HDL-C 含量,研究苏子提取物( EPS)对大鼠模型高脂血症血清血脂水平的影响。结果
表明,EPS 能显著降低大鼠血清中的 TC、TG、LDL-C水平,提高血清中 HDL-C 的含量,提示
EPS 具有一定的调节血脂作用。
关键词:苏子提取物;高脂血症;大鼠模型;血脂
中图分类号:S853.74 文献标志码:A 文章编号:1000- 6354(2012)03- 0052- 03
收稿日期:2012-03-07
基金来源:浙江省实验动物科技项目(2007F80014)
作者简介:朱楼英(1977-),女,助理兽医师,主要从事实验动
物管理和实验研究。
高脂血症( hyperlipidemia,HLP)是一种严重
威胁人类健康的疾病,是非酒精性脂肪肝病[1,2]及动
脉粥样硬化 [3]等心脑血管疾病的重要病理基础,防
治高脂血症是预防这些疾病的有效措施。笔者等利
用高脂饮食法建立大鼠高脂血症模型,观察苏子提
取物对高脂血症动物模型血清血脂水平的影响,并
对其可能的作用机制进行探讨,以期为中药苏子的
合理利用和新药开发提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药物 苏子提取物(EPS):由金华市食品
药品检验所中药实验室制备,药物浓度为 1 mL
(含原生药 1 g)。
1.1.2 试验动物 清洁级大鼠模型 30 只,雌雄
各半,体重(2.0±0.2) kg,金华市食品药品检验所
实验动物中心提供。
1.1.3 试剂 胆固醇购自上海伯奥生物有限公
司,猪脂市售,鸡蛋市售;总胆固醇(TC)检测试剂
盒、甘油三酯(TG)检测试剂盒、高密度脂蛋白胆
固醇(HDL-C)检测试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇
(LDL-C)检测试剂盒购自北京中生北控科技股份
有限公司,超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒、微
量丙二醛(MDA)检测试剂盒购自南京建成生物工
程研究所。
1.1.4 仪器 Oylmpus Au560 全自动生化检测仪
(日本),CF12RX/9RX低温中速离心机(日本),5648
型恒温箱(上海医疗器械厂),721 型分光光度计
(上海第三分析仪器厂),FSH-II 高速匀浆机(江
苏金城国胜实验仪器厂)。
1.1.5 饲料 基础饲料为常规大鼠饲料;高脂饲
料配方为胆固醇 1%、鲜蛋黄 15%、猪脂 10%、基
础饲料 74%。
1.2 方法
1.2.1 EPS制备 准确称取苏子适量,置于小三
角瓶中,按 40∶1加入水,在 90 ℃水浴中浸提 2次,
每次 45 min,用纱布粗滤;合并浸提液,用 18%的
HCl调节 pH 值至 2.0-2.5,抽滤;上清液用乙酸乙
酯(溶剂比为 1∶2)萃取 3 次,合并萃取液,旋转蒸
发除去乙酸乙酯,最后定容至 1.0 mL 提取液含原




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