全 文 ：HPLC法测定 6种当归植物中紫花前胡素的含量
吕　兰(浙江杭州市中医院　杭州　310007)
摘要:目的　建立了 6种当归植物中紫花前胡素的含量测定方法 , 明确当归属 6种植物中紫花前胡素含量 ,并对其进行比较。方法　HPLC
法 , 色谱柱:TIANHE C18(250mm ×4.6mm , 5μm),流动相 H3PO 4-NaH2PO4 缓冲液(稀释 10倍):乙腈(1∶1),流速:1mL·min-1 ,检测波长:270nm。
结果　紫花前胡素在 0.343～ 175μg·mL -1之间线性关系良好(r=0.9999),平均回收率:99.3%(n=5), RSD:1.5%。结论　6种植物中 ,每种
植物的紫花前胡素含量有差异 ,且同一种植物里部位不同 ,前胡素含量也不同。建立的 HPLC法简便易行 ,准确效率高 ,在实验研究中适用于当
归类植物的紫花前胡素的定量测定。
关键词:当归属植物;紫花前胡素;HPLC;含量
中图分类号:R969.4　文献标识码:A　文章编号:1006-3765(2011)-07-0089-02
作者简介:吕兰 ,女(1983.2-)。毕业于浙江中医药大学。职称:中
药师。从事专业:中药学。联系电话:13867461408
　　伞形科(Umbelliferae)当归属(Angelica)植物在全球上大
约分布有 90 种植物 , 常常被用作中药 ,其中当归始载于《神农
本草经》 ,具有补血活血 、调经止痛 、润肠通便的作用。当归属
植物具有补血 、活血 、调经止痛 、祛风除湿的临床药用价
值〔1 ～ 3〕。最近研究表明 , 从当归属植物中提取的紫花前胡素
对治疗白血病 、糖尿病 、高血压 、降低肾毒素 、抑制幽门螺杆菌
等具有很好的疗效。本研究首次全面的对 6 种最常见的当归
属植物进行定量分析测定其所含紫花前胡素的含量 , 为今后
当归属植物的开发和研究 、新药物的研发具有重要作用。
1　实验材料与方法
1.1　实验材料
1.1.1　仪器:LabAlliance 高效液相色谱仪 , LabAlliance 紫外
检测器 , Anastar色谱工作站 , 2100 型紫外分光光度计 , AUW-
120D型电子分析天平 , FZl02中草药粉碎机 , LabAlliance空气
泵 ,H66025 型超声清洗仪。
1.1.2:试剂:色谱纯:乙腈 、甲醇 , 分析纯:乙醚 、 NaOH ,
H3PO4 , NaH2PO4 ,十二烷基磺酸钠 , 水:去离子水(实验室自
制)。
1.1.3　试药:6 种当归属植物分别为中国当归 、日本当归 、韩
国当归 、丽江当归 、杭白芷 、紫花前胡 , 均购于安国药材市场 ,
经过专家鉴定均为正品。药品经自然干燥后使用。
1.2　方法
1.2.1　色谱条件:流动相:H3PO 4-NaH2PO 4 缓冲液(稀释 10
倍):乙腈(1∶1);检测波长:270nm , 带宽 4nm , 参比波长
320nm , 带宽 80nm;柱温:30℃;流速:1.0mL·min-1;色谱柱:
T IANHE C18(250×4.6mm , 5um;进样量:10μL , 该条件下对
照品和韩国当归的 HPLC 图(见 1-2), 其余未列出。
1.2.2　试样制备
1.2.2.1　对照品溶液制备:精密称取紫花前胡素对照品
8.75mg ,用甲醇溶解所称取的紫花前胡素得到 50mL 溶液 ,
超声处理 15min , 经 0.50μm 微孔滤膜滤过 , 得到紫花前胡素
对照品溶液 0.175mg·mL-1
1.2.2.2　供试品溶液制备:精密称取中国当归 、日本当归 、韩
国当归 、丽江当归 、杭白芷 、紫花前胡植物根及紫花前胡花粗
粉 10.0g ,用乙醚 150mL 回流提取 5h ,过滤 , 将提取液回收乙
醚后 , 用甲醇溶解残渣 ,定量至 50mL , 经 0.50μm 微孔滤膜滤
过。
图 1　紫花前胡素对照品的 HPLC图
图 2　韩国当归的 HPLC图
2　结果
2.1　方法学考察
2.1.1　精密度考察:精密量取 87.5mg·mL -1对照品溶液 , 按
1.2.1 色谱条件 ,连续进样 5次 , 分别记录下紫花前胡素峰面
积平均值为 288.7 , 其 RSD 为 1.10%, 证明本实验方法精密
度良好。
2.1.2　稳定性考察:对同一份供试品溶液在 20℃条件下分
别在 0 、4 、8 、12h 不同时间 , 在 1.2.1 条件下进行测定 ,其 RSD
为 1.12%, 说明紫花前胡素在 12h 内是相对稳定的。
2.1.3　线性相关考察:精密量取对照品溶液 5mL , 用甲醇将
·89·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 23 No.7 2011
其稀释至 175 、87.5 、43.75 、21.88、10.94 、5.47、2.74、1.37 、
0.685 、0.343mg·mL -1 , 在1.2.1 条件下 , 按顺序进样 ,并分别
记录色谱图。然后绘制标准曲线(横坐标:对照品浓度 X(mg
·mL-1), 纵坐标:色谱峰面积 A), 我们可以得到同归直线方
程:
A=3433X-512 , r=0.9999(n=10)
表明紫花前胡素在 0.343 ～ 175mg·m L-1之间线性关系
良好。
2.1.4　加样回收率考察:精密称取前胡素含量为 10.5mg·
g -1的紫花前胡粗粉 12 份 ,每份 2.0g ,每组为 4 份 , 各组分别
精密加入 10.31μg·mL -1对照品溶液 3 、4.5 、6 、7.5mL , 按
1.2.2.2 标准制备溶液 ,在 1.2.1 条件下测定峰面积 , 然后根
据所得峰面积计算回收率 , 得到的结果为平均回收率为
99.3%, RSD为 1.23%。
2.1.5　重复性考察:精密称取紫花前胡粗粉 8 份 , 每份
10.0mg ,按 1.2.2.2 方法制备供试品溶液 , 在 1.2.1 条件下
分别测定含量 , 然后得到平均含量为 10.3mg·g -1 , RSD 为
1.07%, 表明该实验的可重复性良好。
2.2　样品测定　按照1.2.2.2方法制备溶液 , 每种样品制各
平行 5份 , 在 1.2.1 条件下进行测定 ,记录下每次测定的峰面
积 ,并根据外标法计算各样品中紫花前胡素的含量 , 结果(见
表 1)。
表 1　6种不同当归属植物中紫花前胡素含量测定结果(n=5)
样品 产地 含量(μg·g -1) RSD(%)
韩国当归 吉林 33.1×103 0.4
紫花前胡 湖南 545.24 0.4
杭白芷 浙江 67.33 0.6
丽江当归 云南 9.28 0.3
中国当归 四川 0.62 0.4
日本当归 延边 0.45 0.5
在被测定的 6 种当归属植物中 ,均含有紫花前胡素 ,韩国
当归(吉林产)内紫花前胡素含量最高 , 紫花前胡(湖南产)次
之 ,接下来为杭白芷(浙江产)、丽江当归(云南)、中国当归(四
川)、日本当归(延边)。
3　讨论
本实验利用 HPLC 法对 6 种当归属植物中所含的紫花前
胡素进行了定量测定 , 在实验过程中 , 利用国外文献作为参
考 , 进行了大量的预实验 ,从样品的选择 、色谱条件的设定 、和
到样品溶液的配制等 , 不断地进行修正和确定 , 从而建立了对
当归属植物中可能共有的紫花前胡素的测定方法。并且该方
法经实验方法学验证 , 不仅简单方便易行 , 而且实验的严谨
性 、准确定 、稳定性 、可重复性等都经得起考验 , 适用于当归类
植物中紫花前胡素含量的测定。
紫花前胡素对于治疗白血病 、糖尿病 、高血压以 、降低肾
毒素等具有很好的疗效 , 并且能够抑制幽门螺旋杆菌 , 而幽门
螺旋杆菌与胃十二指肠溃疡 、胃炎 、胃癌等疾病有密切关系。
不仅如此 , 紫花前胡素还能够有效抑制肿瘤促进剂 TPA 所致
的磷脂磷酰化作用 , 在治疗肿瘤的实验研究中 , 具有被开发成
为抗肿瘤药物的成分〔4 ～ 7〕。
而且近来研究表明〔8〕 ,当归属植物中 ,同一种植物内不同
部位所含紫花前胡素的含量也是不同的 ,在将来的研究中 , 研
究当归属不同器官内前胡素的含量可能会提供开发药物的新
药源。
参考文献
〔1〕李丽丽 , 刘向前 , 张晓丹.当归属植物研究进展〔 J〕.中成药 ,
2009 , 31(4):601-607.
〔2〕周国莉 ,刘宇婧 ,刘塔斯 ,等.白花前胡和紫花前胡挥发油成分的
分析〔J〕.湖南中医药大学学报 , 2010 ,30(6):26-28.
〔3〕向亚平 ,黄进华 ,鲁建云 ,等.当归拈痛汤联合西药治疗顽固性皮
肤瘙痒的临床观察〔J〕.湖南中医学院学报 , 2006 , 26(2):31-32.
〔4〕Hatanoa R , Takanoc F , Fushiya S , et a1.Water-soluble ext ract s from
Angelica acutiloba Ki tagaw a enhancee hematopoiesis by ac-tivat ing im-
mature erythroid cells in mice wi th 5-f luorou racil-induced anemia〔J〕
.Experimen tal Hematology , 2004 ,(32):918-924.
〔5〕李丽丽 ,刘向前 ,高敬铭 ,等.中 、日 、韩当归中挥发油成分研究和
总香豆素含量的测定〔J〕.中国药师 , 2009 , 12(10):1 344-1 347.
〔6〕王芳 ,李东.当归的化学及药理研究进展〔J〕.中国药房, 2003 , 14
(10):630-631.
〔7〕Young Goo Kang , Jang Hoon Lee ,Hee Jeong C hae et al.HPLC Anal-
ysi s and Ext ract ion M ethods of Decursin and Decu rsinol Angelate in
Angelica gigas Roots〔J〕.Kon.J.Pharmacogn , 2003 , 34(3):201-205.
〔8〕刘向前 ,李丽丽等.8种当归属植物中紫花前胡素含量的HPLC法
测定〔J〕.湖南中医药大学学报 , 2010 ,9 , 30(9):93-95.
作者简介:陈雅萍 ,女(1983.2-)。毕业于福建中医学院。职称:药师。联系电话:13799376364
HPLC测定肝爽颗粒中丹参酮ⅡA 的含量
陈雅萍(福州常春药业有限公司 福州 350003)
摘要:目的　建立肝爽颗粒中的丹参酮ⅡA 的含量的测定方法。方法　采用高效液相色谱法 ,色谱柱为 kromasiL-C18(250×4.6mm , 5μm),检
测波长为 270nm ,流动相为甲醇-水(82.5∶17.5),柱温为 30℃,流速为 1.0mL·min-1。结果　丹参酮ⅡA的含量在 215.6～ 1078μg 范围内与峰
面积呈良好的线性关系 , r=0.9999 ,平均回收率为 98.5%, RSD=1.04%(n=5)。结论　本方法操作简便 ,快速 ,结果准确可靠。
关键词:肝爽颗粒;丹参酮ⅡA;HPLC;含量测定
中图分类号:R927.2　文献标识码:A　文章编号:1006-3765(2011)-06-0090-03
·90·
海峡药学　2011年　第 23卷 第 7期