全 文 ：〔收稿日期〕2010－07－05
〔基金项目〕2009 年科技部科技型中小企业技术创新基金(09C26224302028)。
〔作者简介〕刘向前（1967-），男，湖南宁乡人，教授，从事中药和天然药物活性成分研究。
8种当归属植物中紫花前胡素含量的
HPLC法测定
〔摘要〕 目的 建立测定紫花前胡素含量的高效液相色谱方法，检测 8 种当归属植物中紫花前胡素的含量并比
较其差异。方法 采用 HPLC 法，使用 AT.LICHROM ODS-C18色谱柱（250×4.6 mm，5 μm），以 pH 5.0 的磷酸-磷酸
二氢钠缓冲液（稀释 10 倍）∶乙腈（1∶1）为流动相，柱温 30 ℃，流速 1.0 mL/min，检测波长 280 nm。 结果 紫花前胡
素在 0.322～165 μg/mL 范围内线性关系良好(r=0.999 9)，加样回收率 98.6%，RSD 为 1.3%。 8 种当归属植物均含有
紫花前胡素，其中吉林产韩国当归含量最高(32.9 mg/g)，鸭巴前胡次之(0.992 mg/g)，再次为紫花前胡(0.527 mg/g)；
韩国当归和紫花前胡的花亦富含紫花前胡素。 结论 8 种当归属植物中紫花前胡素的含量存在差异，且同种植物不
同部位也存在差异。 该方法简便快捷，准确，适用于当归属及其亲缘属植物中紫花前胡素的定量分析。
〔关键词〕 当归属植物；紫花前胡素；高效液相色谱法；含量测定
〔中图分类号〕R284.1 〔文献标识码〕B 〔文章编号〕doi:10.3969/j.issn.1674－070X.2010.09.027.093.03
Determination of decursin from eight kinds
of Angelica plants by HPLC
LIU Xiang-qian, LI Li-li， ZOU Qin-peng, FENG Sheng, DAI Xiu-zheng
(Pharmacy College, TCM University of Hunan, Changsha， Hunan 410208, China)
〔Abstract〕 Objective To establish a HPLC method for the determination
of decursin, determine the content of decursin and compare the differences in eight different
Angelica plants. Method The analysis was performed on a AT.LICHROM ODS -C18 column
(250 mm×4.6 mm，5 μm) with phosphate-sodium dihydrogen phosphate buffer solvent (diluted 10
times): acetonitrile (1:1) at pH 5.0 as mobile phase． The flow rate was 1.0 mL/min．The column
temperature was 30 ℃ and the detection wavelength was 280 nm． Result The good linearity was
in the range of 0.322～165 μg/mL (r=0.999 9), and the average recovery of the method was
98.6％ with the RSD 1.3％. All eight Angelica plants contained decursin. The highest percentage
of decursin was in A. gigas Nakai. (32.9 mg/g), the second in A. decursiva f. albiflora.
(0.992 mg/g), and next in A.peucedanum decursivun (Miq.) Maxim. (0.527 mg/g). The flowers of
A.gigas Nakai. and A.peucedanum decursivun (Miq.) Maxim. were also rich in decursin. Conclu-
sion The content of decursin is different in different Angelica plants and different parts of the
刘向前 1，2*，李丽丽 2，3，邹亲朋 2，冯 胜 2，戴秀珍 2
（1．湖南中医药大学药学院, 湖南 长沙 410208；2.中南大学化学化工学院，湖南 长沙 410083；
3.鲁南制药山东新时代药业有限公司，山东 费县 273400）
2010 年 9 月第 30 卷第 9 期
Sep． 2010 Vol． 30 No． 9
湖 南 中 医 药 大 学 学 报
Journal of TCM Univ． of Hunan 93
图 1 紫花前胡素对照品的 HPLC 图
图 2 韩国当归的 HPLC 图
same specie. The methods were simple, accurate and reproducible, and can be used for the
quantitative analysis of decursin in Angelica plants and their phylogenetic plants.
〔Key words〕 Angelica Miq.Plants; Decursin; HPLC; determination of content
伞形科 （Umbelliferae）当归属 （Angelica）植物是一个
温带性属，全球分布约 90 种，该属植物大多为常用中药，
具有补血、活血、调经止痛、祛风除湿的药用价值 [1-3]。 特别
是近年来韩国学者从韩国当归中提取得到的紫花前胡素
（decursin）在治疗白血病、糖尿病性高血压以及降低肾毒
素等方面具有显著效果， 它能强烈抑制由肿瘤促进剂
TPA 所致的磷脂的磷酰化作用， 是一个有望开发成治疗
肿瘤等疾病药物的活性物质 [4-7]。 本研究首次系统地对该
属 8 种植物中紫花前胡素进行定量分析， 为寻找富含紫
花前胡素药用植物资源和当归属植物的进一步开发利用
提供了实验依据。
1 实验材料
1.1 仪器
LC-10AT 型高效液相色谱仪（配备 SPD-10A 型紫外
可见检测器和 CBM-102 型色谱工作站，日本岛津公司）；
2100 型紫外分光光度计 （北京莱伯泰科仪器有限公司）；
AUW-120D型电子分析天平（日本岛津公司）；FZ102 中草
药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。
1.2 试药
实验选用的 8 种当归属植物经韩国庆熙大学药学院
YOOK CHNAGSOO 教授鉴定，分别为中国当归 A.sinene-
sis(Oliv.) Diels.（产地四川）、 日本当归 A.acutiloba(Sieb.et.
Zuce.) （产地延边）、韩国当归 A.gigas Nakai.（产地韩国、
吉林）、丽江当归 A.likiangensis Wolff.（产地云南）、杭白芷
A.dahurica (Fisch.Ex Hoffm.) Benth.et Hook.f.ex Franch.et
Sav.cv.Hangbaizhi（产地浙江）、祁白芷 A.dahurica(Fisch.Ex
Hoffm.) Benth,et Hook.f.ex Franch.et Sav.cv.Qibaizhi（产地
河北 ）、紫花前胡 A.peucedanum decursivun (Miq.) Maxim.
（产地湖南）、 鸭巴前胡 A.decursiva f. albiflora.（产地吉
林），自然干燥后备用。
1.3 试剂
对照品紫花前胡素（由韩国食品药品监督局提供，批
号 20091027-3，纯度大于 98%）。 乙腈、甲醇为色谱纯，乙
醚、磷酸、磷酸二氢钠、氢氧化钠、十二烷基磺酸钠均为分
析纯，水为去离子水。
2 方法与结果
2.1 溶液制备
2.1.1 对照品溶液制备 精密称取紫花前胡素对照品
8.25 mg， 甲醇溶解 ， 定容至 50 mL， 超声 10 min，经
0.45 μm 微孔滤膜过滤，即得浓度为 0.165 mg/mL 紫花
前胡素对照品溶液。
2.1.2 供试品溶液制备 分别称定中国当归、日本当归、
丽江当归、杭白芷、祁白芷、紫花前胡、鸭巴前胡 7 种当归
属植物根的粗粉及紫花前胡花的粗粉 10.0 g， 加乙醚
100 mL 回流提取 4 h，过滤，提取液回收乙醚后，残渣用
甲醇溶解，转移至 50 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。经
0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。而韩国当归的供试品制备，
则分别称取其根和花的粗粉 1.00 g， 同样提取定量至
50 mL，再精密量取 1 mL 至 10 mL 量瓶中，加甲醇至刻
度，摇匀，经 0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。
2.2 色谱条件
色 谱 柱 ： AT.LICHROM ODS -C18 柱 （250 mm ×
4.6 mm，5 μm）；流动相：pH 5.0 的磷酸-磷酸二氢钠缓冲
液 (磷酸二氢钠 1.56 g, 加水使溶解成 1 000 mL， 再加
1%的磷酸溶液调节 pH 5.0)（稀释 10 倍）-乙腈 （1∶1）；柱
温：30 ℃；流速：1.0 mL/min；检测波长：280 nm；进样量：
10 μL，该条件下的对照品和韩国当归的 HPLC图见图 1~
2。 其余药材中检测图未列出。
2.3 线性关系
精密量取对照品溶液适量， 用甲醇稀释至浓度分别为
165、82.5、41.2、20.6、10.3、5.16、2.58、1.29、0.645、0.322 μg/mL
的溶液。 在上述色谱条件下，依次进样，记录色谱图。 以对
照品浓度 X（μg/mL）为横坐标，色谱峰面积 A 为纵坐标绘
t/min
t/min
湖南中医药大学学报 2010 年第 30 卷94
（本文编辑 徐爱良）
表 2 韩国当归和紫花前胡不同部位紫花前胡素
含量的比较 （n=3）
制标准曲线，得回归直线方程：
A=3 433X-511，r=0.999 9（n=10）
结果表明紫花前胡素在 0.322～165 μg/mL 范围内线
性关系良好。
2.4 精密度试验
精密量取 82.5 μg/mL 对照品溶液， 按照上述色谱条
件， 连续进样 6 次， 记录紫花前胡素峰面积， 平均值为
286.8，色谱峰峰面积的相对标准偏差 RSD 为 1.08%，表明
本法精密度良好。
2.5 重复性试验
取紫花前胡粗粉 5 份，每份 10.0 g，精密称定，按照
“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，在上述色谱条件下分
别测定紫花前胡素的含量，得平均含量为 10.5 mg/g，RSD
为 1.1%，表明本法重复性良好。
2.6 稳定性试验
取同一份紫花前胡供试品溶液在室温下放置，分别于
0、3、6、9 h在上述色谱条件下测定， 测得紫花前胡素峰面
积的 RSD为 1.2%，表明紫花前胡素至少在 9 h内稳定。
2.7 加样回收率试验
取已知含量为 10.5 mg/g 的紫花前胡粗粉 9 份，每
份 2.0 g， 精密称定， 每组为 3 份， 各组分别精密加入
10.31 μg/mL 对照品溶液 3、4.5、6 mL，按照“2.1.2”项下方
法制备供试品溶液，在上述色谱条件下测定峰面积，计算
回收率，得该方法的平均回收率为 98.6%，RSD为 1.3%。
2.8 样品测定
按照“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，每个样品平
行 3 份，在上述色谱条件下测定，记录峰面积，按照外标
法计算紫花前胡素的含量，结果见表 1~2。
3 讨论
本文首次利用 HPLC 法系统地定量出 8 种当归属植
物中紫花前胡素的含量。 通过文献 [8]比较和预实验，反复
对影响色谱分离的因素进行比较， 最终确定了最佳色谱
条件， 建立了紫花前胡素的定量分析方法。 经方法学验
证，该方法简便快捷、准确，适用于当归属及其亲缘属植
物中活性成分紫花前胡素的定量分析。 同时，研究表明紫
花前胡素可能为当归属植物的共有成分， HPLC 测定方
法为其质量控制提供重要的实验依据。
结果表明，8 种当归属植物均含有紫花前胡素， 其中
韩 国 当 归 含 量 最 高 （32.9 mg/g）， 鸭 巴 前 胡 次 之
（0.992 mg/g），再次为紫花前胡（0.527mg/g），最低者为日
本当归 （0.472mg/g），比韩国当归低约 700 倍 ；而杭白芷
（60.9 μg/g）和祁白芷（54.2 μg/g）中的含量较接近。 不同
产地的药材中含量稍有差异，如韩国当归，产于吉林的是
产于韩国的 1.25 倍；药材不同部位含量差异明显，根中含
量明显高于花中 （见表 2）。 但花中亦富含紫花前胡素
（4.4 mg/g），可以考虑作为新的药源开发。
紫花前胡素是近年来研究较多的一类具有抗肿瘤活
性的物质，对多种恶性肿瘤具有强烈的抑制作用，将有望
开发为新一类的抗癌药物。 研究结果表明，8 种当归属植
物中均含较高的紫花前胡素， 为当归属植物的开发利用
提供了实验依据。
参考文献：
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表 1 8 种当归属植物（均为根）中紫花前胡素
含量测定 （n=3）
样 品
韩国当归（韩国产）
韩国当归（吉林产）
鸭巴前胡
紫花前胡
杭白芷
祁白芷
丽江当归
中国当归
日本当归
产地
韩国
吉林
吉林
湖南
浙江
河北
云南
四川
延边
药材中含量（μg/g）
26.2×103
32.9×103
9.9×102
527.00
60.93
54.15
9.28
0.60
0.47
RSD（%）
0.6
0.3
0.4
0.6
0.6
0.4
0.5
0.5
0.5
样 品
韩国当归（韩国产）
韩国当归（韩国产）
紫花前胡（湖南产）
紫花前胡（湖南产）
部位
根
花
根
花
药材中含量（μg/g）
26.2×103
4.40×103
5.30×103
64.3
RSD（%）
0.6
0.5
0.6
0.5
刘向前，等 8 种当归属植物中紫花前胡素含量的 HPLC 法测定第 9 期 95