全 文 ：米槁精油对半夏镰刀菌的抑制作用研究
张　娜１，武孔云２
（１．贵阳中医学院，贵州 贵阳５５０００２；２．贵阳学院，贵州 贵阳５５０００５）
摘　要：目的：明确米槁精油对半夏镰刀菌的抑制作用。方法：以半夏镰刀菌为供试菌种，采用生长速率
法测定不同浓度米槁精油的抑菌活性。结果：米槁精油对半夏镰刀菌有较好的抑制作用，其作用大小与
精油的浓度相关，浓度越大，抑制作用越强。结论：米槁精油在较低浓度下对半夏镰刀菌有较高的抑制
作用，可将其作为新型植物源生物农药的来源。
关键词：米槁精油；抑菌活性；半夏镰刀菌；生长速率法
中图分类号：Ｒ２８５．５　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１５）０１－００１５－０２
ＤＯＩ：１０．１１９５４／ｙｔｃｔｙｙ．２０１５０１００８
收稿日期：２０１４－０９－０６
作者简介：张娜（１９８９－），女，贵阳中医学院硕士研究生，研究方向为天然产物化学。
　　米槁（Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ　ｍｉｇａｏ　Ｈ．Ｗ．Ｌｉ）为樟科（Ｌａｕｒａｃｅ－
ａｅ）樟属木本植物，药用部位为其干燥成熟果实，为中国贵州
省苗族、布依族民间习用药材［１］。有关文献资料证明米槁
果实的挥发油具有明显的体外体内抗菌、抗病毒、杀虫等功
效［２］，并证实该挥发油中不含对人体有害的黄樟醚［３］。目
前，对于米槁体外抗菌作用的研究一般以金黄色葡萄球菌、
白色葡萄球菌和致病性大肠杆菌等为供试菌种，而对于植
物病原真菌抑制作用的研究较少。本课题以半夏镰刀菌［４］
为供试菌种，测定其对半夏镰刀菌的抑菌活性，期望找到新
的抗病资源，为植物源杀菌剂的开发提供参考依据。
１　材料与方法
１．１　材料
供试药材：米槁果实购于贵州宏宇药业有限公司，并由
贵阳学院武孔云教授鉴定。供试菌种：半夏镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉ－
ｕｍｓｐ．）由贵州省农业科学院中药材研究所曾令祥老师提
供。培养基：采用马铃薯琼脂固体培养基［５］。试剂：吐温－
８０，５０％多菌灵可湿性粉剂，纯化琼脂粉，葡萄糖，无菌水。
仪器：烘箱，手提式粉碎机，恒温培养箱，高压灭菌锅，个人
无菌操作台，分析天平（感量０．１ｍｇ），基础实验器材。
１．２　实验方法
１．２．１　精油制备　采用水蒸气蒸馏法［６］提取米槁精油，
经无水亚硫酸钠干燥后置于棕色瓶中备用。
１．２．２　试液配制　取一定体积的精油与等体积的吐温－８０
均匀混合后，用无菌水定容至一定体积，配制成２００ｍＬ／Ｌ
的溶液，然后采用倍比稀释法将其依次用无菌水稀释成
１００ｍＬ／Ｌ，５０ｍＬ／Ｌ，２５ｍＬ／Ｌ，１２．５ｍＬ／Ｌ浓度梯度的溶液，
备用。依相同方法配制相同系列浓度的吐温－８０溶液为阴
性对照。用无菌水配制系列浓度（８００ｍｇ／Ｌ，４００ｍｇ／Ｌ，
２００ｍｇ／Ｌ，１００ｍｇ／Ｌ，５０ｍｇ／Ｌ）的多菌灵溶液为阳性对照

。
肿瘤生长抑制率（％）＝
模型组平均瘤重－治疗组平均瘤重
模型组平均瘤重
×１００％
２．３　结果
各组肺癌Ｌｅｗｉｓ组小鼠瘤重及肿瘤生长抑制率见表１。
表１　各组肺癌Ｌｅｗｉｓ小鼠瘤重及肿瘤生长抑制率
分组 ｎ 瘤重（ｇ） 肿瘤生长抑制率（％）
模型组 １５　 ２．７５±０．４２０ －
低剂量组 １５　 ２．３５±０．５６０＊ １４．５５
高剂量组 １５　 ２．１７±０．４７０＊＃ ２１．０９
顺铂组 １５　 １．４２±０．３９１＊△ ４８．３６
注：与模型组比较，＊Ｐ＜０．０１；与顺铂组比较，△Ｐ＜０．０１。
３　讨论
从表１可以看出，与模型组（生理盐水组）比较，石见穿
多糖组和顺铂组对肿瘤的生长抑制率均明显增高，并且都
具有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。说明石见穿多糖注射液对于
肺癌Ｌｅｗｉｓ小鼠有明显治疗作用，但治疗效果较顺铂有较
大差距。石见穿多糖的高剂量组对肿瘤生长抑制率较低剂
量组高，其作用机理和量效关系值得下一步深入研究。
参考文献：
［１］　谢永富．石见穿的研究进展［Ｊ］．中国处方药，２００７，９（６６）：
７８，７５．
［２］　雷涛，孟繁钦，王艳芳．石见穿化学成分及药理研究进展［Ｊ］．
海峡药学，２０１０，２２（１２）：３７－３９．
［３］　黄河清，王世聪，陆顺意，等．中药祛毒扶正汤对肺癌小鼠血
清ＴＫ１表达及肺癌细胞周期影响的实验研究［Ｊ］．光明中
医，２０１３，２８（８）：１５７２－１５７５． （责任编辑：宋勇刚）
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１．２．３　抑菌试验　采用菌丝生长速率测定法［７］测定各试
液对半夏镰刀菌的抑制效果。将配制好的系列浓度的精油
溶液、吐温－８０溶液和多菌灵溶液分别加至已接种好且已知
直径的菌落上，完全覆盖菌丝，３次重复，并以无菌水为空白
对照，２６℃恒温培养，待空白对照菌落接近培养皿边缘时，
以十字交叉法测定菌落直径，计算抑制率。按公式计算抑
制率：
菌丝生长抑制率＝（对照菌落菌丝生长量－处理菌落
菌丝生长量）／对照菌落菌丝生长量×１００％
２　结果与分析
２．１　３种试液的抑菌效果
采用生长速率法分别测定米槁精油、多菌灵和吐温－８０
对半夏镰刀菌的室内抑制作用，结果见表１。由表１可知，
不同浓度下的米槁精油和多菌灵对半夏镰刀菌均有抑制作
用，并且抑制率随浓度的增加而增加；而吐温－８０对半夏镰
刀菌没有明显抑制作用。
表１　３种药剂对半夏镰刀菌菌丝生长的抑制效果
药剂名 浓度
净生长量
（ｃｍ）
抑制率
（％）
抑制概率
值（Ｙ）
对数浓度
（Ｘ）
无菌水ＣＫ ─ ２．６６　 ０ ─ ─
多菌灵 ５０（ｍｇ／Ｌ） ０．３４　 ８７．２５　 ６．１４　 １．７０
１００　 ０．２８　 ８９．３６　 ６．２５　 ２．００
２００　 ０．２６　 ９０．３７　 ６．３０　 ２．３０
４００　 ０．２３　 ９１．２４　 ６．３６　 ２．６０
８００　 ０．１６　 ９３．９５　 ６．５５　 ２．９０
米槁精油１２．５（ｍＬ／Ｌ） １．１０　 ５８．７４　 ５．２２　 １．１０
２５　 ０．７４　 ７２．２１　 ５．５９　 １．４０
５０　 ０．３８　 ８５．６０　 ６．０６　 １．７０
１００　 ０．３２　 ８７．８９　 ６．１７　 ２．００
２００　 ０．２６　 ９０．１８　 ６．２９　 ２．３０
吐温－８０　１２．５（ｍＬ／Ｌ） ２．４２　 ９．１０　 ３．６７　 １．１０
２５　 ２．８２ －６．１３ ─ １．４０
５０　 ２．６６　 ０ ─ １．７０
１００　 ２．５０　 ５．９８　 ３．４４　 ２．００
２００　 ２．６４　 ０．５６　 ２．４６　 ２．３０
２．２　抑制作用与药剂浓度的相关性分析
用ＳＰＳＳ１７．０软件对药剂处理结果进行统计分析，计算
抑制率和回归方程，统计结果如表２所示。由表２可知，多
菌灵与米槁精油的回归方程的相关系数均在０．９５以上，说
明抑制作用与药剂浓度呈正相关。
表２　米槁精油与多菌灵的回归方程
药剂名 回归方程 相关系数ｒ
多菌灵 Ｙ＝０．３１０　４Ｘ＋５．６０４　４　 ０．９６７　７
米槁精油 Ｙ＝０．９０４　４Ｘ＋４．３３０　３　 ０．９５９　５
３　讨论
本研究结果显示，米槁精油对半夏镰刀菌有较好的抑
制作用，且在浓度为１２．５ｍｌ／Ｌ时，抑制率为５８．７４％，说明
其低浓度下也表现出较好的抑制作用。然而，本研究只是
对米槁精油的粗提物进行了室内抑菌活性的测定，其具体
的抑菌活性成分有待明确。同时，本研究对于半夏镰刀菌
的抑制作用只着眼于对菌丝的抑制效果，其作用机制也需
做进一步研究。根据研究结果，有必要进行针对性的深入
研究，为充分、合理利用植物资源以及进一步开发植物源杀
菌剂提供依据。
参考文献：
［１］　赵立春，邱明华，邱德文，等．苗药大果木姜子果实挥发油
化学成分研究［Ｊ］．西北药学杂志，２００９，２４（５）：３５３．
［２］　陈达，杨佃志．大果木姜子不同组方提取物体外抗菌试验研
究［Ｊ］．中国民族民间医药，２０１０，１９（１８）：４２－４４．
［３］　李天祥．米槁精油提取与分离及其化学成分的研究［Ｄ］．天
津：天津大学，２００４．
［４］　曾令祥，李德友．贵州地道中药材半夏病虫害种类调查及综
合防治［Ｊ］．贵州农业科技，２００９，１５（１）：９２－９５．
［５］　赵永强，张成玲，张薇，等．４种杀菌剂对烟草根黑腐病菌
的室内毒力测定［Ｊ］．中国烟草学报，２００９，３７（１）：４９．
［６］　国家药典委员会．中国药典［Ｍ］．一部．北京：化学工业出版
社，２００５：１３６－１３７，１４３，附录：５７－５８．
［７］　吴文君．植物化学保护实验技术导论［Ｍ］．西安：陕西科技
出版社，１９９８：３．
（责任编辑：宋勇刚）
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Ｚｈａｎｇ　Ｎａ１，Ｗｕ　Ｋｏｎｇｙｕｎ２
（１Ｇｕｉｙａｎｇ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ　５５０００２，Ｃｈｉｎａ；
２Ｇｕｉｙａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｚｈｏｕ　５５０００５，Ｃｈｉｎａ）
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