全 文 ：C H IN ES E HO RT IC U LTU RE A BS T RA CT S
阴行草试管苗培养研究
朱雪峰 , 陈 晴 , 董向楠 , 邹 侠 , 姜长阳
辽宁师范大学 生命科学学院 , 辽宁 大连
摘 要 为保护 野生资 源和满足需求 , 以 阴行草具 有生 长点 的嫩茎段为材朴 , 采用组 织培 养的方 法 , 进行生
长点伸长培养 、 生 长茅的生根培 养 、 试管 苗的生根继 代扩繁培 养 , 以及试管 苗移栽与 定植的研究 。 结 果证明
八 。 八 卜 。 蔗 糖 是生长点伸长生 长为生长茅的适宜培养基
蔗 糖 巧 八 。 八八 。 是生长茅生根培养和试管苗生根继代扩繁培养的适宜培养基
移栽成活率为 , 定植成活率为 。 定植试管苗当年正常开花 , 其他植物学性状与野生阴行草一致 。
关键词 阴行草 茎段 试管苗
阴 行草 枷 即 又 称 金银 茵
陈 、 吊钟花 、 灵茵陈 , 属于玄参科阴行草属一年生草本植
物 , 生长于 山坡 、 丘陵及湿草地 , 在辽宁地区的沈阳 、 大
连 、 鞍山 、 阜新 、 丹东等地有分布 , 。 阴行草全草含芹菜
素 、 日一 谷昌醇 、 三十四烷 、 三十五烷等黄酮类化学成分 ,
作为中草药使用 , 具有清热利湿 、 凉血和祛疲等功效 , 能
治湿热黄疽 、 泄泻痢疾 、 淋浊 、 痈疽丹毒 、 尿血 、 便血 、
外伤出血 、 经疼 、 闭经和跌打损伤等疾病 , , 对家养动物
的痢疾等疾病也有较好的疗效 。 虽然阴行草在辽宁地区的
分布范围较广 , 但其数量却较少 , 由于具有多种人畜药用
价值 , 长期以来 , 人们一直在进行大量的采挖药用和出售 。
这使阴行草在辽宁地区急剧减少 , 并且这种现象正在迅速
发展 。 现在 , 在大连市郊区 多 田 的范围内已经很难采
到阴行草 , 从而对人畜的药用产生一定的影响 。 为保护阴
行草的野生资源 , 满足人畜药用的需求 , 研究者对其进行
愈伤组织培养及分化的研究 。 虽然目前已有玄参科植物组
织培养的报道 匡 , 但迄今未见阴行草组织培养及分化研究
的报道 。
材料与方法
材料来源及灭菌
月中句 , 将大连旅顺菜大岭山坡上生长旺盛的阴行
草地上部采 回实验室后 , 剪掉叶片 , 保留具有生长点的嫩
茎 , 放到广 口瓶中 , 用蒸馏水反复振荡洗涤 一 次 , 移
到超净工作台上 , 用 一 , 的乙醇灭菌约 一 后 ,
用饱和的次氯酸钠溶液灭菌 山 , 再用 的
溶液灭菌 山 , 最后用无菌水漂洗 次 , 即可获得无菌
嫩茎 。
培养条件
参见鹿药的研究 。
第一作者简介 朱雪峰 一 , 女 , 本科生 就读于辽宁师
范大学生命科学学院生物技术专业 。
通讯作者 姜长阳 , 教授 。 一。 。 。 。 。。
项目来源 辽宁省大学生创新创业训练项目 辽
宁省普通高等教育本科教学改革研究项目 一 。
方法
生长芽伸长生长培养 把无菌嫩茎切成具有 个
生长点的茎段后 , 分 别接种到
, 蔗 糖 、
堪 加 蔗糖 、
蔗糖 、
, 蔗糖 、
蔗 糖 、
, 蔗
糖 种培养基上 , 进行不同培养基对生长点伸长
生长培养试验 , 重复 次 。 第 次试验每种处理接种 个
茎段 , 第 次试验每种处理接种培养 个材料 。 其中在
玲考 玛考
蔗糖 这种培养基上接种培养 个材料 。 接种时
把单芽嫩茎下切口插人培养基中 一 , , 培养的前
要放到恒温培养箱中进行暗培养 。
生长芽生根培养 把在
蔗糖 这种培养
基上培养的生长芽剪成长 左右 、 具有 个以上叶片
和生长点的茎段后 , 接种到 蔗糖 , 为基
本培养基 , 分别附加 · 、
、
、 、
、
、 , 一 、
, 一 、 , 一
的 种培养基上 , 进行不同浓度生长素配比对
生长芽生根培养的影响试验 。 试验重复 次 , 每种处理接
种培养刃个生长芽 。
试管苗生根继代扩 繁培养 把在 蔗
糖 , 培养 基
上 由生长芽培养的试管苗剪成长 , 以上 、 至少具
有 个叶片 也包括 个生长点 的试管苗茎段后 , 继续
接种 到 蔗 糖 ,
培养基上 , 进行试管苗生根继代扩繁培养 。 重
复 次 , 每次重复接种 个材料 , 连续继代扩增培养 ,
中国园艺文摘 年第 期
代 。 第 次重复试验的第 代接种培养 个材料 , 第 ,
代接种培养 个材料 。
试管苗的移栽与定植 月上句 , 把第 次重复试
验第 , 代生根继代扩繁培养的 株试管苗 , 打开培养瓶
瓶塞 , 在光照强度 一 , 条件下经过 炼苗
后 , 移栽到底部放着肥沃园土 、 上部为干净河沙的温室内
营养钵中 , 进行试管苗的移栽 。
月上句 , 把移栽成活的 株试管苗 次定植到大
连郊区的山坡上 。
移栽和定植后均按照温室栽培和野外栽培的环境进行
管理 。
结果与分析
不同培养基对生长点伸长生长培养试验
接种后 统计 见附表 , 在所试验 的 种培养
基上 , 生长培养的生长点均可不同程度的生长成为生长
芽 。 但在
蔗糖 这种培养基上的效果最好 。 不仅
其伸长生长率达到 、 生长芽的高度最高 , 而且外观
上生长芽生长最旺盛 。 次重复试验的结果一致 。 这说明
玛考
蔗糖 这种培养基是阴行草生长点伸长生长为生长
芽的适宜培养基 。
附表 不 同浓度的细胞分裂素对愈伤组织分化培养的影响
培养基 生长个数 生长率 生长芽平均高度 生长芽长势
一
十 十 十 十 蔗糖 十
十 十 十 十 蔗糖 十
十 十 十 十 蔗糖 十
十 十 十 十 蔗糖 十
十 十 十 十 蔗糖 十十
十 十 十 十 蔗糖 十
注 为对照 , 培养基 十 蔗糖 十十 长势好 十 长势一般 一 不生长 未注单位为 。 表中数据为 次试验平均结果 。
不同浓度生长素配比对生长芽生根培养的影响
接种后 犯 统计结果证明 , 在 与不
同浓度的 , 一 配合使用的培养基上 , 培养的生长芽不
能生根生长为试管苗 , 而在 与不 同浓度
的 、 配合使用的培养基上 , 培养的生长芽能不同
程度的生根生长为试管苗 。 其中在
生长素配比的培养基上 , 培养的生长芽生根
生长 为试管 苗 的效果 最好 。 在
生长素配比的培养基上 , 次重复试验的结果
如下 平均生根率为 、 试管苗平均高度为 、
平均每株试管苗生长 条根 , 并且试管苗外观上叶片伸
展 、 根为白色 、 生长旺盛 。 这证明
这种 生 长素配 比是 阴行草生长 芽生根培养
为试管苗 的理想生长素配比 , 也就是说 蔗糖
, 培养基是阴行
草生长芽试管苗培养的适宜培养基 。
试管苗生根继代扩繁培养
把试管 苗茎段接种 到 蔗糖 ,
培养基上进行试管苗生根继
代扩繁培养的结果证明 为 个生根继代扩繁培养周
期 , 能培养出一代外观上几乎与生长芽生根培养 犯 为
个培养周期培养的试管苗一致的试管苗 , 但生根继代扩
繁培养的试管苗其外观上略粗壮 、 每株试管苗增加 个
叶片 , 使叶片间距缩短 。 接种培养茎段平均生
根率为 , 平均每个生根继代扩繁培养周期的繁殖系
数为 。 按照这个速度 株试管苗 年能繁殖出 万多
株试管苗 。 这一结果证明 蔗糖 ,
培养基也是阴行草试管苗生
根继代扩繁培养的适宜培养基 。
试管苗的移栽与定植
移栽后 , 进行统计 , 成活 株 , 移栽成活率为
。 定植后 统计 , 成 活 株 , 定植成活率为
。 定植成活的试管苗 刃 左右进人旺盛生长期 , 当
年正常开花 , 但花期延后 左右 。 其他植物学性状与野
生阴行草一致 。
结论与讨论
快速繁殖是植物组织培养研究应用最广泛 的技术 ,
在以往的组织培养快速繁殖研究中 , 有的采用愈伤组织分
化不定芽的方法进行快速繁殖 , 有的采用不定芽分化继
代的方法进行快速繁殖 ` , 还有的是采用上述二者结合的
方法进行快速繁殖 。 该研究采用试管苗生根继代扩繁培
养的方法进行 , 其繁殖速度是 株试管苗 年能繁殖出约
万株试管苗 。 从表面上看 , 这种繁殖方法的繁殖速度最慢 ,
但是 , 由于采用这种方法繁殖的试管苗生长旺盛 、 根系发
达 、 几乎没有无效苗和变异苗 , 并且其移栽的成活率也很
高 。 所以 , 从有利于生产的角度看 , 采用这种生根继代扩
繁培养的方法进行试管苗的快速繁殖是一种理想技术 。
该研究中 , 在生长芽生根培养阶段 , 犯 为 个培
养周期 , 其生长芽的生根率为 而在相同的培养条
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中国园艺文摘 年第 期
表 不同处理扁桃成活率调查
处理 对照 磷肥水蘸根 尿素 十 号 抗旱造林粉 调查时间 月 日
重复
重复
重复
比对照成活率提高
注 调查株数均为 株 , 栽植时间为 月 巧 日 。
表 不 同地理位置各处理扁桃树新梢平均生长量情况
不同地理位置
处理
山脊 川 山中
对照
磷肥水蘸根
尿素 十 号
抗旱造林粉
结论
不同激素处理对扁桃栽植成活率有一定的影响 。 采
用 尿素 号泡根成 活率 比对 照提高
, 采用抗旱造林粉泡根成活率比对照提高 。
不同激素处理对新梢生长量有一定的影响 。 用
尿素 号泡根栽植比对照新植生长量提高
了 抗旱造林粉泡根栽植比对照新植生长量提高了
。
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件下 , 进行试管苗的茎段生根继代扩繁培养 , 周期缩短为
, 并且生根率提高到 。 后者不仅培养周期缩短
, 且生根率提高 , 。 产生这种现象主要与以下原因
有关 后者的材料生长粗壮 , 对培养环境具有更强的适
应性 这种材料本身就是在相同的培养基上培养生长的 ,
使其在接种前已经对这种培养基产生一定的适应性 。
参考文献
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