全 文 ：收稿日期:2008-06-28
基金项目:教育部科学技术研究重点项目(DF206085);河南
省科技攻关项目(0523031800)
作者简介:陈随清 ,男 , 博士 ,教授。研究方向:中药规范化种
植及质量标准研究 ,发表论文 40余篇 ,主持十一
五科技支撑计划项目 1项 , 参编著作 5部。
山橿生物特性的初步研究
陈随清1 ,张　峰 1 ,王三姓 1 ,卢玉兵2 ,潘永峰 2
(1.河南中医学院 , 河南 郑州 450008;2.河南羚锐制药股份有限公司 ,河南 新县 465550)
摘　要　目的:研究山橿的生长发育规律 , 为山橿资源的开发利用提供科学依据。方法:以实地调查的方式观测山
橿植物生长发育情况;以高效液相色谱法(HPLC)测定山橿根种主要化学成分的动态积累变化规律。结果:描述了
山橿的生物特性 , 了解了山橿的生长发育情况及主要化学成分的动态积累变化规律。结论:研究内容可为山橿野
生资源保护开发利用 , 以及进行规范化种植提供科学依据。
关键词　山橿;生物特性;HPLC;指纹图谱;化学成分
中图分类号:S567　　　文献标识码:A　　　文章编号:1006-9690(2009)02-0046-04
PreliminaryStudyontheBiologicalPropertyofLinderareflexa
ChenSuiqing1 , ZhangFeng1 , WangSanxing1 , LuYuing2 , PanYongfeng2
(1.HenanColegeofTraditionalChineseMedicine, Zhengzhou450008, China;2.HenanLingruiPhar-
maceuticalCo.Ltd, Xinxian, 465550, China)
Abstract　Objective:TostudythebiologicalpropertyofLinderareflexaHemsl.Thisarticlecanprovide
scientificbasisforexploitingandutilizingthemedicativeresourceofLinderareflexaHemsl.Methods:
ObservethebiologicalpeopertyofLinderareflexaHemslbyutilizingthefieldworkasreaserchmethod.
DeterminethecombineddynamicstateofthemainchemicalcomponentintherootofLinderareflexa
HemslbyHPLC.Result:ThebiologicalfeatureofLinderareflexaHemslwasdescribed, thebiological
propertyoflinderareflexaHemslandthepaternofdyamicaccumulationofthemainactivecomponentpi-
nostrobinwereunderstood.Conclusion:Thisarticleprovidesascientificbasisforprotecting, exploiting
andutilizingthewildgermplasmresource;andartificalplantingofLinderareflexaHemsl.
Keywords　LinderareflexaHemsl;biologicalfeature;HPLC;fingerprint;chemicalcomponent
　　山橿(LinderareflexaHemsl)系樟科(Lauraceae)
山胡椒属植物 ,俗名土沉香 、香棍等 ,以根入药 。本
品为近代发现的民间草药 ,历代本草无记载 。功能
祛风理气 ,止血 ,主治胃痛 ,刀伤出血 ,疥癣 ,风疹等
症 。近代《中国植物志 》[ 1] , 《浙江药用植物志》[ 2] ,
《中药大辞典 》[ 4] , 《全国中草药汇编 》[ 5]等均有记
载 。目前国内外对山橿的研究还很少 ,作为地方用
药 ,在河南省大别山区民间用于治疗慢性胃炎 ,胃溃
疡等 ,被收入《河南省地方药材标准 》[ 3] 。现代研究
证明临床疗效确切 ,河南省羚锐制药股份有限公司
以山橿根为主要原料成功开发出了中成药制剂 “胃
痛宁片”,于 2003年 获 “国药准字 ”批号 ,现已收入
国家基本药物目录。但山橿为多年生灌木 ,生长缓
慢 ,野生资源再生能力较差。因此 ,我们对山橿的生
物学特性进行了研究 ,为开展规范化种植研究和保
护开发山橿野生资源提供科学依据。现报道如下 。
1　植物形态
落叶灌木 ,高 1 ～ 3 m,幼时有绢状短柔毛。叶
互生 ,纸质 。倒卵状 、椭圆形或阔披针形 ,长 5 ～ 22
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第 28卷第 2期
2009年 4月 　　　　　　　　　　　　　 中 国 野 生 植 物 资 源ChineseWildPlantResources　　　　　　　　　　 　Vol.28 No.2Apr.2009
cm,宽 3 ～ 12cm,先端渐尖 ,基部阔锲形或圆形 ,全
缘;表面深绿色 ,无毛 ,背面绿苍白色 ,被柔毛 ,老时
脱落 ,侧脉 5 ～ 8条 ,叶柄长 5 ～ 20 mm。伞形花序腋
生 ,总花梗长 2 ～ 4 mm, 多具 5花 。花梗长 4 ～ 7
mm,被黄褐色柔毛 ,花被片 6 ,椭圆形 ,黄绿色 。雄
蕊 9,排列 2轮 ,外轮 6枚 ,内轮 3枚 ,内轮 3枚基部
有腺体 ,花药 2室 ,内向瓣裂 。核果球形 ,绿色 ,成熟
后变成红色 ,直径 5 ～ 8 mm,果柄长 1.5 ～ 2cm。种
子圆形 ,黑褐色有白色花纹 ,直径 4 ～ 6 mm,种皮薄 ,
子叶 2枚 ,肥厚 ,黄白色 ,胚较小。花期 3 ～ 4月 ,果
期 7 ～ 8月。
2　生长发育习性
山橿主要分布于我国的河南 、安徽 、湖北 、湖南 、
浙江 、江西 、广东 、广西等省区 ,属暖温带温暖湿润性
气候。一般生长海拔 200 ～ 1 200 m的在山地树林
下 、灌木丛中 ,多生长在土层深厚 、土壤肥沃 、半阴凉
的环境中。药材主产于河南省信阳市的狮河区 、新
县等地 。为此我们在山橿药材主产区的河南信阳市
狮河港区 、新县 、安徽省的金寨县等进行了实地调
查 ,调查了山橿植物的生物特性及资源情况 ,采集了
植物标本和药材样品。山橿以种子繁殖 ,每年 2月
底至 3月初种子萌发 , 1年生幼苗 ,高度 10 ～ 20cm,
基部有 1个分枝或无 。 2年生苗高度 50 ～ 100 cm,
基部分枝 2 ～ 5个;3年生高度 100 ～ 150 cm,基部分
枝 4 ～ 7个。以后随着年限延长 ,高度生长逐渐缓
慢 ,高一般 200 ～ 300 cm,基部分枝增快 ,形成丛生
灌木状 ,如 10年生山橿基部分枝多达 20 ～ 40个。
调查中发现 ,山橿地上茎一般生长 7 ～ 12(15)年 ,一
丛灌木中常有几个或多个死亡的地上茎 ,从根部生
长出新的分枝 。山橿根的生长发育情况是:一年生
根长 16.6 cm,上部周长 1.4 cm;二年生根长 26.9
cm,上部周长 2.6 cm;三年生根长 39 cm,上部周长
5.6 cm;四年生根长 47 cm,上部周长 6.6 cm;六年
生根长 58 cm,上部周长 7.7 cm。花芽在每年的 8
月中下旬形成 ,冬季休眠 ,第二年 3月初开花 ,花期
15 ～ 20天 , 7月底果实成熟 。
3　山橿的化学成分动态积累规律
样品一部分由作者自己采集 ,另有一部分由河
南省羚锐制药有限公司提供 ,参见表 1。经作者鉴
定为樟科 (Lauraceae)山胡椒属植物山橿 (Lindera
reflexaHemsl)的根 ,标本存于河南中医学院生药研
究室 。
对照品球松素 、银松素 、乔松素由本实验室从山
橿中提取 ,经过 1HNMR、13CNMR鉴定 , HPLC法测定
其纯度分别为为 99.8%、99.1%、98.7%。
表 1　山橿样品目录表
编号 采集时间 产地 年限 编号 采集时间 产地 年限
SJ1 20040718 河南省新县(羚锐公司) SJ13 20051018 河南省新县(羚锐公司)
SJ2 20050616 河南省新县(羚锐公司) SJ14 20051113 河南省新县江淮岭
SJ3 20050712 河南省新县江淮岭 SJ15 20051116 河南省新县(羚锐公司)
SJ4 20050712 河南省新县田铺 SJ16 20060308 河南省新县(羚锐公司)
SJ5 20050712 河南省新县江淮岭 SJ17 20060308 河南省新县(羚锐公司)
SJ6 20050725 河南省信阳市狮河港 SJ18 20060308 河南省新县(羚锐公司)
SJ7 20050925 河南省新县江淮岭 2年 SJ19 20060502 河南省西峡县 10年
SJ8 20050925 河南省新县江淮岭 3年 SJ20 20060727 河南省新县江淮岭 15年
SJ9 20050925 河南省新县江淮岭 SJ21 20060727 河南省新县江淮岭 11年
SJ10 20051003 安徽省铜陵市凤凰山 4年 SJ22 20060728 河南省新县江淮岭 3年
SJ11 20051003 安徽省铜陵市凤凰山 6年 SJ23 20060728 河南省新县江淮岭 4年
SJ12 20051003 安徽省铜陵市凤凰山 3年
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第 2期　　　　　　　　　　　　　　　　陈随清 , 等:山橿生物特性的初步研究 　　　　　　　　　　　　　　　　
3.1　实验方法
3.1.1　供试品溶液的制备　取山橿药材 0.5 g,粉
碎过 24目筛 ,精密称定 ,用 50倍量的醋酸乙酯超声
提取 30 min,滤过 ,取续滤液稀释 5倍 ,作为供试品
溶液。
3.1.2　色谱条件　色谱柱:依利特 HypersilODS2
C18色谱分析柱(5 μm, 4.6 mm×250 mm)。流动
相:甲醇 -水 , 程序性梯度洗脱:0 ～ 5 min甲醇
(50%※65%);5 ～ 15 min,甲醇(65%※ 75%);15
～ 40 min,甲醇(75%※100%);纯甲醇保持 5 min。
检测波长:297nm;柱温:30℃;流速:1.0 mL/min。
3.1.3　指纹图谱及共有指纹峰的标定　参照 《中
药注射剂指纹图谱研究的技术要求 》(暂行),并根
据 23批供试品 HPLC图谱 ,生成了对照指纹图谱 ,
见图 1。
图 1　山橿对照指纹图谱
现代研究证明球松素为其主要有效成分 ,因此
选球松素为参照峰 [标号为 5(S)] ,并选择 HPLC色
谱图中可以用于反映药材内在质量的峰作为共有
峰 ,依次标号为 1、2、3、4、5(S)、6、7、8、9、10、11、12、
13。其中 1号峰为银松素 , 2号峰为乔松素。
3.2　实验结果
3.2.1　山橿根 、茎 、叶 、果中化学成分的比较　将山
橿药材根 、茎 、叶 、果按相同的方法制备供试品溶液 ,
在上述色谱条件下检测 HPLC色谱指纹图谱 ,结果
见图 2。
由上图可以看出山橿根的色谱图提供的信息最
丰富 ,色谱峰最多 ,茎和叶次之 ,果实最少。结果表
明中药传统入药部位的科学性;但茎的色谱图中还
有两个峰(a和 b)峰面积积分明显比根中色谱图对
应峰面积积分要大得多 ,对色谱峰(a和 b)的指认
S1:根;S2:叶;S3:茎;S4:果实
图 2　山橿药材根 、茎 、叶 、果的色谱图
尚待进一步的研究 。
3.2.2　不同生长年限的山橿根中化学成分的比较
将不同生长年限的山橿根粉碎 ,按相同的方法
制备供试品溶液 ,在上述色谱条件下检测 HPLC色
谱指纹图谱 ,结果见图 3。
S1:SJ8;S2:SJ7;S3:SJ21;S4:SJ20;S5:SJ22;S6:SJ23
图 3　不同生长年限山橿色谱图
由上图可以看出:不同年限的山橿药材在上述
条件下所得的色谱图均与对照指纹图谱一致。 2年
生的山橿药材色谱图中 ,各个共有峰峰面积明显小
于 3年生 、4年生 、11年生山橿药材色谱图各色谱峰
峰面积;3年生 、4年生和 11年生山橿药材色谱图中
各色谱峰峰面积没有显著差异;而 15年生山橿药材
色谱图中各色谱峰峰面积稍低。结果表明了山橿有
效成分的动态积累规律 ,采收期的确定尚需结合药
材的产量综合评价 。
3.2.2　不同产地山橿药材化学成分比较
—48—
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　中 国 野 生 植 物 资 源　　　　　　　　　　　　　　　　第 28卷
将不同产地的山橿根粉碎 ,按相同的方法制备
供试品溶液 ,在上述色谱条件下检测 HPLC色谱指
纹图谱 ,结果见表 4。
表 4　山橿药材指纹图谱相似度分析
样品 相似度 样品 相似度 样品 相似度
S1 0.969 7 S9 0.967 1 S17 0.977 5
S2 1.000 0 S10 0.969 6 S18 0.956 9
S3 0.880 8 S11 0.973 5 S19 0.940 2
S4 0.967 6 S12 0.962 1 S20 0.949 1
S5 0.968 8 S13 0.643 6 S21 0.947 9
S6 0.907 2 S14 0.929 3 S22 0.879 5
S7 0.990 6 S15 0.967 2 S23 0.968 1
S8 0.955 5 S16 0.952 9 对照指纹图谱 1.0000
　　结果显示:不同产地山橿药材在上述色谱条件
下分析所获得的指纹图谱 ,以共有模式为参照进行
相似度分析 ,其相似度除 S13(河南省西峡县 ,地域
属伏牛山区)为 0.643 6外 ,其余均在 0.85以上 。
参考国家药典委员会颁布的中药注射剂色谱指纹
图谱实验研究技术指南 (试行)以及相关文献 ,除
特殊药材外 ,一般情况下 ,习惯以相似度为 0.90和
0.80作为划分优质药材 、质量一般药材和伪品药材
的界限 ,说明山橿药材化学成分一致性较好 ,比较稳
定 。当然 ,由于样品数量的局限性 ,该问题还有待进
一步研究。
4　讨　论
(1)在本研究中 ,供试液的制备 ,考虑到黄酮类
成分是山橿的主要有效成分 ,结合黄酮类化合物的
性质及在化学成分的系统性分离中黄酮类成分的主
要富集部位 ,我们采用醋酸乙酯作为提取溶剂;并考
察了醋酸乙酯与甲醇两种提取溶剂对黄酮类成分的
提取率。结果显示:醋酸乙酯提取率较高 ,且其他成
分的干扰较少 ,基于提取溶剂最大限度的提取有效
目标成分和尽可能去除干扰成分的原则 ,故选醋酸
乙酯作溶剂。
(2)山橿药材的液相指纹图谱的建立 ,检测器
的选择方面 ,基于目标成分黄酮类化合物的化学性
质 ,我们选择了紫外检测器作为山橿指纹图谱的检
测器 。另外实验还进行了方法学考察 ,结果符合国
家药典委员会颁布的 “中药注射剂色谱指纹图谱实
验研究技术指南(试行)”的要求。
(3)不同生长年限的山橿药材高效液相指纹图
谱的研究表明 , 2年生的山橿各色谱峰峰面积明显
较小;而从 4年至 11年生山橿药材各色谱峰峰面积
没有显著差异;15年生的山橿药材各色谱峰峰面积
有所降低 。山橿的传统采收年限在 8年以上 。植物
生长年限较长 ,加之对其采收又是破坏性的 ,资源恢
复比较困难 ,因此制定山橿合理科学的采收年限对
山橿的资源保护具有重大意义 ,也必将带来可观的
经济效益 。
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(上接第 4页)
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