免费文献传递   相关文献

山鸡椒提取物不同组分抑菌活性初步研究



全 文 :人类大量使用化学农药来保护农作物免遭病
虫害的侵袭,但是化学农药的毒性、残留和污染等
问题日益受到人们的重视,于是,人们开始寻找生
物农药。 山鸡椒(Litsea cubeba)又名山苍子,木姜
子 ,黑木姜子 ,香叶等 ,多年生落叶小乔木 ,樟科
(Lauraceae)木姜子属植物。 前人曾报道山鸡椒提取
物对棉花枯萎病菌有明显的抑制作用 [1]。 本文通过
山鸡椒提取物分离得到的不同组分对几种植物病
原菌的抑制作用的研究,为山鸡椒作为植物源杀菌
剂进一步研究提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试菌种 小麦赤霉病菌 (Fusarium gramin-
earum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cirerea)、杨树溃疡
病菌 (Dothiorella gregaria)、 稻瘟病菌(Pyricularia
grisea)、苹果霉心病菌(Trichoticum roseum)均由井
冈山大学植物病理研究所提供。
1.1.2 样品及处理 山鸡椒枝条采自井冈山自然
保护区。 常温下阴干,粉碎备用。
1.1.3 植物提取物的制备 将粉碎的山鸡椒用
95%的乙醇分别提取 3 次, 每次 72 h 后过滤,合并
3次滤液,减压浓缩得提取物浸膏[2]。
1.1.4 山鸡椒提取物不同组分的制备 将 1.1.3 制
备的提取物采用硅胶层析柱进行分离。 固定相采用
100-200目的硅胶填充。用不同极性大小的洗脱液,
按极性从小到大依次洗脱。得到 5个组分,分别对 5
个组分进行抑菌活性测定。
1.2 实验方法
1.2.1 山鸡椒提取物不同组分抑菌活性测定 山
鸡椒提取物不同组分对病原菌菌丝生长的作用采
用生长速率法 [3]测定。 对菌丝生长抑制作用设 1 个
浓度为 1 mg / mL, 取 1.1.4 所制备的样品 l mL 于灭
菌的 10 mL 试管中, 加入 9 mL 50 ℃左右 PDA,摇
匀,倒入灭菌培养皿中即成。
1.2.2 菌丝生长抑制率计算公式[4-6]
菌落直径(mm)=测量菌落平均直径-菌饼直径(6mm)
抑制率= (对照菌落直径-菌饼直径)-(处理菌落直径-菌饼直径)
对照菌落直径-菌饼直径 ×100%
2 结果
山鸡椒提取物不同组分对 5 种病原菌菌丝生
长的抑制作用结果表明:在供试浓度为 1 mg / mL 时,
各个组分对几种植物病原真菌均有一定的抑制活
性,尤其对番茄灰霉病菌和杨树溃疡病菌的抑制效
果较为明显,特别是组分 2 对所有供试真菌的抑制
效果最好,除稻瘟病菌其余 4 种病原菌抑制率均在
69%以上, 其中对苹果霉心病菌抑制率达到 90%以
上(见表 1)。
表 1 山鸡椒提取物不同组分对 5 种病原菌菌丝生长的抑制作用
山鸡椒提取物不同组分抑菌活性初步研究
朱 峰,殷帅文,高小燕,陈春霞,党兵涛
(井冈山大学 生命科学学院, 江西 吉安 343009)
[摘要]以山鸡椒为植物材料,测定其乙醇提取物不同组分对几种植物病原菌的抑制活性。结果表明,在供试浓度
为 1 mg / mL时,各个组分对几种植物病原真菌均有一定的抑制活性,尤其对番茄灰霉病菌和杨树溃疡病菌的抑
制效果较为明显,特别是组分 2 对所有供试真菌的抑制效果最好,其中对苹果霉心病菌抑制率达到 90%以上。
有望从组分 2分离得到抑菌活性强的有效成分。 山鸡椒作为植物源杀菌剂值得进一步研究。
[关键词] 山鸡椒;提取物;抑菌活性
[中图分类号] Q946.33 [文献标识码] A [文章编号] 1673-4718(2009)04-0014-02
收稿日期:2008-12-11
基金项目:江西省自然科学基金项目(2007GQN1687);江西省教育厅项目(赣教技字[2007]327 号).
作者简介:朱 峰(1985-),男,江西九江人,2005级学生;通讯作者:殷帅文(1978-),男,湖南长沙人,副教授,博士,主要从事天然产物研究与开发.
不同
组分
小麦赤霉病菌番茄灰霉病菌杨树溃疡病菌 稻瘟病菌 苹果霉心病菌
a b a b a b a b a b
1 17.65 56.77 15.50 70.90 18.90 58.72 15.65 47.70 9.05 72.77
2 14.10 69.94 13.60 76.72 13.55 75.84 12.65 58.54 7.05 90.63
3 24.35 31.91 25.50 40.28 19.90 55.52 19.75 25.47 12.85 38.84
4 30.40 9.46 27.50 34.15 22.80 46.24 14.45 54.20 12.80 39.29
5 29.65 12.25 23.40 46.71 27.75 30.40 21.00 18.70 20.25 -
CK 32.95 38.65 37.25 24.45 17.20
注:(1)“a”表示菌落直径 / cm,“b”表示抑制率 / %;(2)不同组分
浓度均为 1 mg /mL;(3)菌饼直径为 6 mm;(4)“-”表示有促进作用。
第 30 卷 第 4 期
2009 年 4 月
井冈山学院学报(自然科学)
Journal of Jinggangshan University(Science and Technology)
Vol.30 No.4
Apr.2009
第 30 卷 第 4 期
(责任校对:彭晓冬)
3 讨论
植物病原菌对农业和林木业造成重大影响。 小
麦赤霉病是世界性的小麦病害之一。 我国各地均有
发生,引起苗枯、茎腐穗腐。 番茄灰霉病是一种世界
性重要病害[7]。 它是危害蔬菜、水果和花卉等作物的
重要真菌病害之一,尤其在大棚生产的蔬菜及水果
上,灰霉病菌引起花及果实的腐烂,损失严重。 有报
道表明山东省微山县杨树溃疡病普遍发生,2004 年
发病株率高达 15%~41%,影响了树木的正常生长发
育,严重者整株死亡。 此外还有许多不同种类的植
物病原菌都在对农业和林木业造成严重影响。 从植
物中寻找具有农药活性的物质是新农药创制的一
条重要途径[7],因此具有重要意义。
本研究结果表明山鸡椒提取物不同组分对大
部分供试真菌菌丝生长抑制效果较好, 其中组分 2
对供试真菌菌丝生长抑制作用明显,尤其是对苹果
霉心病菌的抑制率达到 90%以上,推测组分 2 中含
有抑菌活性强的物质,有望从中分离得到抑菌活性
强的有效成分。 山鸡椒在我国大部分地区均有分
布,其中江西分布广泛,其中井冈山和庐山分布较
多。 因此有可能开发出无公害植物源杀菌剂。 针对
组分 2的抑菌活性成分的分离纯化还在继续中。 山
鸡椒作为植物源杀菌剂值得进一步研究。
参考文献
[1]张应烙,尹彩萍,赖伟明,等.井冈山 47 种植物提取物对几
种病原菌的生物活性[J].江苏农业科学,2005(4):51-53.
[2]赵红艳,张淑颖,张玲,等.木姜子乙醇提取物抑菌活性研究
[J].贵州大学学报:自然科学版,2008,25(5):543-545.
[3]吴文君.植物化学保护实验技术导论[M].西安:陕西科学技
术出版社,1988.
[4]杨从军,孟昭礼,郭景,等.番茄茎叶提取物对 8 种植物病原
菌的生物活性初步研究[J].植物保护,2005,31(1):28-31.
[5]冯俊涛,祝木金,于儒平,等.西北地区植物源杀菌剂初步筛
选[J].西北农林科技大学学报,2002,30(6):129-133.
[6]孙丽艳,魏雄辉,韦宇,等.博落回总生物碱提取方法的研究
[J].药物分析杂志,2003(23):15-17.
[7]吉冈宏辅.天然生理活性物质的探索与农药开发[J].农药译
丛,1985,7(1):1-7.
Study on fungicide activity of different fractions
of Litsea cubeba extract
ZHU Feng, YIN Shuai-wen, GAO Xiao-yan, CHEN Chun-xia, DANG Bing-tao
(School of Life Science, Jinggangshan University, Ji′an 343009, China)
Abstract: The bioactivity of different fractions of Litsea cubeba extract was tested with several kinds of fungi.
The results show that under the concentration of 1mg / mL, all of the fractions had the inhibiting effect to
tested fungi, especially to Botrytis cirerea and Dothiorella gregaria. Furthermore, we find that the second
fraction had the best inhibiting effect to the hypha growth of al1 tested fungi and had more than 90%
inhibiting rates to Trichoticum roseum. It was hopeful to separate efficient element from the second frac-
tion.
Key words: Litsea cubeba; extract; antifungal activity
朱 峰,殷帅文,高小燕,等:山鸡椒提取物不同组分抑菌活性初步研究 15