全 文 ：杜香提取物抑制荷瘤 H22 小鼠生长的实验研究
刘海军 孙晋民 贾兰玲1 (中国医科大学实验技术中心一部暨中药工程实验室，辽宁 沈阳 110001)
〔摘 要〕 目的 探讨杜香提取物熊果酸的抗肿瘤作用。方法 采用水蒸气蒸馏法制备杜香提取物—熊果酸，将其作用于 H22 荷瘤小鼠模
型，计算肿瘤抑制率。结果 剂量分别为 0. 25、0. 5、1. 0 mg /kg的熊果酸对 H22 荷瘤小鼠肿瘤抑制率分别为 25. 93%、44. 39%和 65. 56%，与正常对
照组比较差异显著(P ＜ 0. 05)。结论 杜香提取物熊果酸能够抑制肿瘤细胞的生长。
〔关键词〕 杜香提取物;杜香属;抗肿瘤作用
〔中图分类号〕 R735 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202(2011)19-3743-02
Experimental study of extract from Ledum inhibiting the growth of tumor-bearing mice H22
LIU Hai-Jun，SUN Jin-Min，JIA Lan-Ling.
Experiment Technology Center of China Medical University，Shenyang 110001，Liaoning，China
【Abstract】 Objective To study the antitumor activities of extract from Ledum. Methods Extract Ledum(ursolic acid)was extrac-
ted by steam flow method，then it was injected in the tumor-bearing mice H22 models，and tumor inhibitory rate was calculated. Results The
tumor inhibitory rate of 0. 25，0. 5，1. 0 mg /kg ursolic acid groups was 25. 93%，44. 39%，65. 56% respectively，which had significant differ-
ence compared with that of normal control group (P ＜ 0. 05). Conclusions Ursolic acid can inhibit the growth of tumor cells.
【Key words】 Extract from ladum;Ericaceae ledum;Antitumor potency
基金项目:辽宁省科技厅重大科研基金资助项目(2008225021-1)
1 中国医科大学肿瘤研究所
通讯作者:孙晋民(1954-) ，女，教授，博士生导师，主要从事天然药物的
开发与利用研究。
第一作者:刘海军(1967-) ，男，讲师，主要从事天然药物的开发与利用
研究。
细叶杜香(Ledum palustre L. Var. Angustum E. Busch)是杜
鹃花科杜香属(Ericaceae ledum)常绿直立小灌木，主要分布于
我国东北(大、小兴安岭，长白山)、朝鲜、日本、西伯利亚、北美、
欧洲等地，生于比较湿润的沟谷和水甸子，种子繁殖。细叶杜
鹃的叶、枝、花和果实中含有挥发油。挥发油可以入药，有镇
咳、祛痰、平喘、扩张血管、降压、杀菌止痒等作用，对慢性支气
管炎、结肠炎、急性鼻炎、流感、咳嗽、皮肤病有一定疗效〔1，2〕。
我国对杜香油的利用始于 60 年代，主要用于医药、香料行业。
关于其体内外抗肿瘤作用至今未见报道。本研究主要探讨杜
香提取物熊果酸的抗肿瘤作用。
1 材料与方法
1. 1 主要材料与试剂 H22 小鼠肝癌细胞株由中国医科大学
肿瘤研究所提供，用昆明种小鼠传代保种;实验动物用昆明种
小鼠 60 只，雌雄各半，体质量 18 ～ 22 g，由中国医科大学实验
动物中心提供;杜香采集地为黑龙江省加格达奇克河地区，由
齐齐哈尔大学生命科学与工程学院刘庆华教授馈赠。
1. 2 杜香提取物熊果酸的制备 采用水蒸气蒸馏法，置杜香
于圆底烧瓶内于 67℃回流提取，合并流液，过滤冷藏备用。
1. 3 H22 荷瘤小鼠模型建立 取 H22 细胞，加入含 10%胎牛
血清的 RPMI1640 培养液，调整细胞密度为 5 ～ 6 × 106 /ml，取
0. 2 ml细胞悬液接种于昆明种小鼠背部皮下，建立实体瘤小鼠
模型。
1. 4 动物实验 建立实体瘤小鼠模型后，将小鼠平均分成 4
组，每组 15 只，实验组(熊果酸组)腹腔分别注射 0. 25、0. 5、
1. 0 mg /kg熊果酸;正常对照组给予生理盐水，按 0. 1 ml /g 等容
注入。连续给药 5 d后停药，观察 20 d，取皮下接种的实体瘤组
织称重，计算肿瘤抑制率，实体瘤肿瘤抑制率(%)= (对照组小
鼠瘤质量-实验组小鼠瘤质量)/对照组小鼠瘤质量 × 100%。
1. 5 统计学分析 采用 SPSS13. 0 软件，以 x ± s 表示，组间差
异比较采用单因素方差分析，LSD检验。
2 结 果
腹腔注射杜香提取物对小鼠荷瘤 H22 腹水瘤的生长具有
明显抑制作用，呈一定剂量依赖关系，且对荷瘤动物的体重增
长没有影响，提示杜香提取物无毒性。见表 1。
表 1 杜香提取物对小鼠荷瘤 H22 腹水瘤的
生长抑制作用(x ± s，n =15)
组别
剂量
(g /kg)
动物体重
用药前 用药后
瘤重
(g)
抑瘤率
(%)
对照组 － 19. 1 30. 5 3. 456 ± 0. 929 －
实验组 0. 25 18. 6 28. 6 2. 456 ± 0. 7431) 25. 93
0. 50 18. 9 29. 9 1. 862 ± 0. 8061) 44. 39
1. 00 20. 0 28. 9 1. 862 ± 0. 8061) 65. 56
与对照组比较:1)P ＜ 0. 05
3 讨 论
谈华等〔3〕报道杜香挥发油对青霉菌和金黄色葡萄球菌有
抑制和杀灭作用，不同菌类、菌体对杜香挥发油的敏感程度不
·3473·刘海军等 杜香提取物抑制荷瘤 H22 小鼠生长的实验研究 第 19 期
同，酵母菌最敏感，青霉菌和金黄色葡萄球菌次之。Tomohi-
ko〔4〕等研究发现杜香中熊果酸提取物对人舌鳞癌细胞株有抑
制作用;Murakami〔5〕等认为杜香成分中含有一种抗氧化活性成
分。关爽等〔6〕研究表明杜香熊果酸提取物对遗传损伤有保护
作用。Thaloor等〔7〕发现熊果酸能抑制细胞微管的形成和破坏
已形成的微管，降低 53 kD和 72 kD金属蛋白酶的明胶降解活
性，减少 72 kD 金属蛋白酶的转录和表达，认为熊果酸的抗血
管生成作用是通过调节血管生成中蛋白水解酶的活性而实现
的。杜香熊果酸提取物能降低细胞微核的发生率，实验结果表
明不同浓度杜香提取物 0. 25、0. 5、1. 0 mg /kg 对荷瘤 H22 小鼠
腹水瘤的生长有明显的抑制作用，且与阴性对照组有显著差
异，可见在不同剂量下，杜香提取物有明显抗肿瘤作用。
有关中药杜香有效成分的抗肿瘤实验研究已经有一定成
果，但仍然存在不足，如中药有效成分的分离和纯化还需进一
步加强，以及中药有效成分抗肿瘤机制尚需进一步阐明等;这
是我们后续探究的重点。
4 参考文献
1 林克勤 . 杜香生物活性物质〔J〕. 国土与自然资源研究，1995;17
(1) :73-6.
2 Huang MT，Ho CT，Wang ZY，et al. Inhibition of skin tumorigenesis by
rosemary and its constituents carnosol and ursolic acid〔J〕. Cancer Res，
1994;54(3) :701.
3 谈 华，刘庆华 . 细叶杜香挥发油抑菌和杀菌作用的研究〔J〕. 齐齐
哈尔大学学报，2005;21(3) :33-6.
4 Tomohiko Kutsuna，Zheng HC，Hekmat Osman Abdel-Aziz，et al. High JC
virus load in tongue carcinomas may be a risk factor for tongue tumorigen-
esis〔J〕. Virchows Archiv，2008;452(4) :405-10.
5 Murakami S，Takashima H，Sato-Watanabe M，et al. Ursolic acid，an an-
tagonist for transforming growth factor TGF-1〔J〕. FEBS Lett，2004;566
(1) :55-9.
6 关 爽，卢 静，刘 静 . 杜香熊果酸提取物对小鼠遗传损伤的保
护作用〔J〕. 癌变畸变突变，2009;21(1) :68-9.
7 Thaloor D，Singh K，Sidhu GS，et al. Inhibition of angiogenie differentia-
tion of human umbilieal vein endothelial cells by cureumin〔J〕. Cell
Growth Differ，1998;9(4) :205-12.
〔2010-11-15 收稿 2011-03-07 修回〕
(编辑 徐 杰)
苦丁茶提取物对 D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆的影响
周卫华 米长忠 吴仕筠 钟 飞 (吉首大学医学院，湖南 吉首 416000)
〔摘 要〕 目的 观察苦丁茶提取物对 D-乳糖致衰老模型小鼠学习记忆能力及抗氧化能力的影响。方法 40 只小鼠随机分为正常组，模型
组，低剂量组处理组(10 g /kg) ，高剂量组处理组(20 g /kg) ，0. 8% D-gal皮下注射 6 w建立衰老小鼠模型，同时灌胃给予不同剂量苦丁茶提取物。6 w
后用 Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力，处死小鼠检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力以及丙二醛(MDA)含量。结果 与模型组相比，
不同剂量处理组小鼠学习记忆成绩均明显提高(P ＜ 0. 05) ，脑组织 SOD活力升高(P ＜ 0. 05) ，MDA含量下降(P ＜ 0. 05)。结论 苦丁茶提取物可改
善 D-gal衰老模型小鼠的学习记忆能力，其机制可能与其具有抗氧化能力有关。
〔关键词〕 D-半乳糖;学习记忆;苦丁茶
〔中图分类号〕 Q946. 8 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202(2011)19-3744-03
Effect of Ilex Kudingcha extracts on learning and memory disturbance in aging mice by D-galactose
ZHOU Wei-Hua，MI Chang-Zhong，WU Shi-Jun，et al.
Jishou University School of Medicine，Jishou 416000，Hunan，China
【Abstract】 Objective To observe effects of Ilex Kudingcha extracts on learning and memory function and antioxidative ability of ag-
ing model mice induced by D-galactose. Methods 40 mice were randomly divided into control，model，low dose treated (10 g /kg) ，high dose
treated groups (20 g /kg). Senile model mice were established by D-galactose hypodermic injection for 6 weeks. The different doses of Ilex
Kudingcha extracts had been administered to two therapy groups. After 6 weeks all the mice of different groups were tested with Morris water
maze. Then the mice were killed and assayed of superoxide dismutase (SOD)and malondialdehyde (MDA)in the brain. Results All the
treated mice showed better ability (P ＜ 0. 05)in learning and memory in comparison with model mice. The SOD activity in the brain in-
creased (P ＜ 0. 05)and the MDA content decreased (P ＜ 0. 05)in comparison with model mice. Conclusions Ilex Kudingcha extracts im-
proving the learning and memory dysfunction in aging model mice maybe by modulation of the anti-oxidative ability.
【Key words】 D-galactose;Learning and memory;Ilex kudingcha CJ Tseng
基金项目:湖南省科技厅资助项目(2001fj3202)
第一作者:周卫华(1978-) ，男，讲师，硕士，主要从事中医药抗衰老研
究。
苦丁茶是我国南部和西南部民间一种常用植物，民间使用
历史悠，其主要分布在桂、粤、黔、琼等地，苦丁茶作为一种植
物药茶在我国西部和南部地区广泛的各民族中被广泛饮用。
现代药理学研究表明其具有清热解毒、杀菌消炎、健胃消积、止
·4473· 中国老年学杂志 2011 年 10 月第 31 卷