全 文 ：收稿日期：2006-11-23
作者简介：张知侠(1961-),女,陕西户县人,咸阳师范学院化学系高级工程师,西北农林科技大学在读硕士研究生。
2007年4月 咸阳师范学院学报 Apr.2007
第22卷 第2期 JournalofXianyangNormalUniversity Vol.22No.2
独活始载于《神农本草经》,列为上品,具祛风除
湿、通痹止痛之功效,为临床常用中药材。商品主产
于浙江、湖南、甘肃、四川、陕西等地。短毛独活是独
活的地方习用品种,其精油为其主要有效成分之一。
国内外学者对其医用活性进行了大量研究,分离出
许多抗肿瘤、消炎镇痛的活性成分,然而作为农用杀
菌活性成分的研究却很少见报道。无公害农药服务
研究中心冯俊涛[1]、韩建华[2]等分别对我国西北地区
的植物源农药进行了筛选,对短毛独活粗提物的杀
菌活性进行了初步测试,发现离体条件下对玉米大
斑病菌、辣椒疫霉病菌和番茄灰霉病菌有较强的杀
菌活性。本文拟对短毛独活精油的化学成分及杀菌
作用进行研究,旨在为短毛独活精油杀菌作用的开
发利用提供依据。
1.材料与方法
1.1植物材料
短毛独活(Heracleammoelendorfi)根采自陕西
秦岭。经阴干后粉碎,过30目(494μm)筛后于-25℃
冰箱中保存备用。
1.2供试菌种
玉米大斑病菌 (Exserohilumturcicum (Pass)
LeonardQSuggs);
稻瘟病菌(Pyriculariaoryzaecar);
番茄叶霉病菌(Fulriafulva(cooke)CiferiFulvia);
苹果炭疽病菌 (GlomerelacingulataSchret
Spauld);
油菜菌核病菌 (Sclerotiniasclerotiorum(Lib)de
Bary);
小麦赤霉病菌(FusariumgiaminearumSchw);
番茄灰霉病菌(BotrytiscirereaPersexFrs);
番茄早疫病菌 (Alternariasolani(El,etMart)
JohnesetGrout);
小麦纹枯病菌(RhizoctoniacerealisVanelerHo-
eren);
棉花枯萎病菌 (Fusariumoxysporumf.spvynde
(Atk)SyndereeHansen);
烟草赤星病菌(AlternariaalternataKeissler);
黄瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporum(Schl.)f.sp.
cucumerinumOwen);
辣椒疫霉病菌(PhytophthoracapsiciLeonian);
小麦全蚀病菌(Gaeumannomycesgraminis(Sace)
ArxOlivier);
以上病原菌均由西北农林科技大学无公害农药
研究服务中心提供,试验中辣椒疫霉病菌用 V8培
养基培养,其余病菌用PDA培养基培养。
1.3精油提取[3]
称取短毛独活根粉碎样100g,置于 500mL三角
瓶中,加入 300mL石油醚(沸程 30-60℃)静置过夜,
再放入超声波提取器中提取 3h,抽滤后滤渣再以
300mL石油醚同样条件下萃取2次。合并三次所得
滤液,浓缩成浸膏状。加入5倍体积丙酮置于-18℃
冰箱过夜,滤去析出沉淀物,滤液浓缩后即得溶剂法
萃取所得精油。重复提取三次。采用公式(1)计算精
油提取率。
精油提取率= 精油质量
短毛独活样品质量
×100% (1)
1.4精油抑菌活性测定
采用生长速率法[4]测试短毛独活精油的杀菌活性,
选用玉米大斑病菌、番茄叶霉病菌等十二种病原菌。
配制短毛独活精油的丙酮溶液:采用石油醚萃取
的精油配制成浓度为1500!g/mL的母液,然后将其
进行稀释配成浓度分别为1500g/mL、1200#g/mL、
短毛独活精油提取及抑菌作用研究
张知侠
(咸阳师范学院 化学系,陕西 咸阳 712000)
摘 要:用石油醚提取获得短毛独活精油,采用生长速率法测试短毛独活精油的杀菌活性。
结果表明:短毛独活精油对12种供试真菌均具有不同程度的抑菌作用,其中对小麦纹枯病菌的
抑制率最强,达到100%;其次是油菜菌核病菌、辣椒疫霉病菌,达到80%以上;而对玉米大斑病
菌、稻瘟病菌的抑制率相对较低。
关键词:短毛独活;精油;提取;抑菌作用
中图分类号:S482.292文献标识码:A 文章编号:1672-2914(2007)02-0033-02
【化学与材料科学研究】
StudiesonAntifangalEfectandCompoundsofHeracleammoelendorfi
ZHANGZhi-xia
(DepartmentofChemistry,XianyangNormalUniversity,Xianyang,Shaanxi71200,China)
Abstract:TheAntifungalactivityofessentialoilsfromHeracleammoelendorfiextractedbypetroleumwere
testedagainst12pathogenicfungiinvitrobygrowthratemethod.ItshowedthatessentialoilsfromHeracleam
moelendorfiappearedtohaveAntifungalactivitiestoalpathogenicfungistasistestedinvariousdegrees.Under
theconditionstexted,ithasthestrongestinhibitoryefecttoRhizoctoniacerealisVanelerHoeren(Inhibitoryrateis
100%);andthenextisSclerotiniasclerotiorum(Lib)deBary、PhytophthoracapsiciLeonian(Inhibitoryrateareal
morethan80%).
Keywords:Heracleammoelendorfi;essentialoils;extract;inhibitoryefect
由表1可见,短毛独活精油对供试的 12种病原
菌菌丝生长都表现出一定的抑菌活性。且精油浓度
越大,抑菌作用越强。其中小麦纹枯病菌的抑制率最
强,达到 100%;其次是油菜菌核病菌、辣椒疫霉病
菌,达到 80%以上;而对玉米大斑病菌、稻瘟病菌的
抑制率相对较低,说明该精油具有广谱抗菌性。可初
步确定短毛独活精油中含有较高的活性成分,具有
强烈的抑菌活性,分离这些活性成分,并进一步做抑
菌实验,有可能发现具有新型杀菌活性的先导化合
物,值得进一步研究。
参考文献:
[1]冯俊涛,祝木金,于平儒等.西北地区植物源杀菌剂初步筛
选[J].西北农林科技大学学报,2002,30(6):134-138.
[2]韩建华,祝木金,冯俊涛等.27种植物抑菌活性初步筛选[J].
西北农林科技大学学报,2002,30(6):139-142.
[3]曾虹燕,周朴华,唐艳林.石香薷精油提取的比较研究[J].天然
产物研究与开发,2003,15(2):135-136.
[4]吴文君.植物化学保护试验技术导论[M].西安:陕西科学技
术出版社.1987.
11000!g/mL、750g/mL、500#g/mL、225$g/mL的系
列溶液,把配制的不同浓度的短毛独活精油溶液分
别加入 PDA培养基 (辣椒疫霉病菌用 V8培养基)
中。制成带毒的培养基平面,在平面上接种供试的病
原菌,在26℃下培养,96小时后通过卡尺用十字交
叉法测量供试真菌菌落生长直径,取其平均值。根据
公式(2)和公式(3)计算菌丝生长抑制率。
菌落生长直径(mm)=两次直径平均值—4.0(菌饼直径) (2)
菌落生长抑制率=
对照菌落生长直径-外理菌落生长直径
对照菌落生长直径
×100% (3)
2结果与分析
2.1精油的收率与理化性质
用石油醚萃取的短毛独活精油为黄色透明液
体,具有浓烈的辛香气味,其收率为2.73%。
2.2短毛独活精油杀菌活性测试结果
采用生长速率法测试石油醚萃取短毛独活精油对
12种供试病原菌菌丝生长的抑制作用结果(见表1)。
表1短毛独活石油醚萃取精油对12种病原菌菌丝生长的抑制率
供试真菌 抑制率(%)
1500%g/mL 1200&g/mL 1000’g/mL 750(g/mL 500)g/mL 225*g/mL
玉米大斑病菌 43.8 37.2 29.7 21.7 16.8 11.6
稻瘟病菌 42.6 36.1 31.3 28.9 21.7 15.1
番茄叶霉病菌 54.0 47.2 41.1 38.0 28.8 24.0
苹果炭疽病菌 76.5 64.6 56.2 35.0 24.8 19.0
油菜菌核病菌 90.0 84.0 80.0 80.0 80.0 80.0
小麦赤霉病菌 63.5 51.8 42.2 36.5 31.1 26.9
番茄灰霉病菌 77.6 66.4 59.8 53.9 40.2 35.8
番茄早疫病菌 65.5 57.9 46.4 35.3 30.1 21.0
小麦纹枯病菌 100 100 100 100 100 100
棉花枯萎病菌 87.4 74.9 66.5 53.0 44.2 38.9
辣椒疫霉病菌 100 87.5 82.4 80.2 77.1 73.3
黄瓜枯萎病菌 78.0 70.2 63.4 58.3 49.1 42.5
·34· 咸阳师范学院学报 第22卷