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紫花大叶柴胡的生药学研究



全 文 :·论著·
紫花大叶柴胡的生药学研究
作者单位:730050 兰州,兰州军区药品检验所(兰 云,盖 静,
王俊丽) ;甘肃中医学院药学系(林 丽,晋 玲)
通讯作者:林 丽,电话:0931-8765396;E-mail:xrhlin@ sina. com
兰 云,盖 静,林 丽,晋 玲,王俊丽
[摘要] 目的 对伞形科植物紫花大叶柴胡(B. longiradiatum Turcz . var. porphyranthum Shan et Y. Li)进行生药学研究。
方法 从宏观(植物形态、药材性状特征)和微观(显微组织)结构对紫花大叶柴胡鉴别特征进行研究;采用 HPLC法对其有效
活性成分进行含量检测。结果 首次详细地描述了紫花大叶柴胡根的横切面组织结构显微特征及粉末中木栓细胞、纤维、导
管、油室碎片及条状分泌物、薄壁细胞等特征;其有效活性成分柴胡皂苷 d含量为 0. 5%。结论 确定了紫花大叶柴胡的生药
学鉴定特征及其有效活性成分含量,为该资源的开发利用提供了依据。
[关键词] 紫花大叶柴胡;生药学研究;柴胡皂苷 d
中图分类号 R 222. 18 /927. 2 文献标识码 A
文章编号 1004-0188(2013)07-0712-03 doi:10. 3969 / j. issn. 1004-0188. 2013. 07. 006
Pharmacognostical study on bupleurum longiradiatum var. porphyranthum
Lan Yun1,Gai Jing1,Lin Li2,Jin Ling2,Wang Junli1 1. Drug Inspection Institute of Lanzhou Military Command,Lanzhou,Gansu,
730050,China;2. Department of Pharmacy,Traditional Chinese Medicine College of Gansu,Lanzhou,Gansu,730050,China
[Abstract] Objective To make pharmacognostical study on the umbelliferae bupleurum longiradiatum var. porphyranthum.
Methods The diagnostic characteristics of bupleurum longiradiatum var. porphyranthum including macroscopical and microscopic
constructions,such as plant morphology,texture,and tissues,were studied. The active ingredients of the herb were detected by HPLC
method. Results In this research,the microscopic characteristics of transverse section and the characteristics of cork cells,fiber,
vessel,oil cavity fragments,secretion with strip-like shape,and parenchyma cells were particularly described for the first time. The
content of the active component saikosaponin d was 0. 5% . Conclusion The diagnostic characteristics and the active ingredient
content of bupleurum longiradiatum var. porphyranthum are identified.
[Key words] bupleurum longiradiatum var. porphyranthum;pharmacognosy study;saikosaponin d
中药柴胡是伞形科(Umbelliferae)植物柴胡
(Bupleurum chinense DC.)或 狭 叶 柴 胡 (B.
scorzonerifolium Willd.)的干燥根。目前,野生柴胡
资源严重短缺,而临床所用柴胡量很大。为了保护
野生资源,我国许多地方对柴胡进行了人工栽培。
然而,个别地区分不清柴胡品种,使用或引种栽培如
银州柴胡、小柴胡,小叶黑柴胡等,大叶柴胡也在市
场上作为伪品出现〔1〕。《中华人民共和国药典》
2005 年版明确规定:大叶柴胡(B. longiradiatum
Turcz.)的干燥根茎,表面密生环节,有毒,不可当柴
胡用〔2〕。而紫花大叶柴胡(B. longiradiatum Turcz.
var. porphyranthum Shan et Y. Li)为大叶柴胡的变
种,其是否具有与大叶柴胡类似的毒性,未见报道。
为了实现资源的有效利用,本试验对在天水地区采
集的紫花大叶柴胡进行生药学研究,为临床用药深
入研究提供参考。
1 材料及设备
1. 1 实验材料 紫花大叶柴胡样品采自于天水党
川,经甘肃省药品检验所朱俊儒主任药师鉴定为伞
形科植物紫花大叶柴(B. longiradiatum Turcz.)的干
燥根及根茎。标本保存在甘肃中医学院生药标本
室;柴胡皂苷 d对照品购自甘肃省药品检验所(中国
食品药品检定研究院,批号:110778-2004021) ;水合
氯醛、稀甘油、二甲苯、乙醇分析纯石蜡、无水乙醇均
为分析纯,甲醇、乙腈为色谱纯,娃哈哈纯净水。
1. 2 仪器 KQ-250 高频数控超声波清洗仪;
Aagilent Technologies 1200 高效液相色谱仪(美国安
捷伦) ,ZORBAX Edipse XDB-C18 色谱柱(4. 6 mm ×
250 mm,5 μm) ;G131513 二极管阵列检测器;BS
224 S 型电子天平;尼康 80i 显微成像分析系统;
Olympus生物显微镜;UPH-I-5T型纯水机;电热恒温
水浴锅(HH-S11-2) ;D101 型大孔吸附树脂柱(内径
2. 5 cm,长 25 cm) ;药典筛 80 目;AP-01P型真空泵;
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回旋式切片机 (德国莱卡 2235 型)。
2 方法与结果
2. 1 基源鉴别 紫花大叶柴胡为伞形科植物,多年
生草本,植株高大,可达 150 cm。根状茎及根圆锥形
弯曲,长 3 ~ 9 cm,直径 3 ~ 8 mm,外皮有明显的节和
节间,作蚯蚓头状,棕褐色粗糙皱缩,着生少数细根。
主根质坚硬,不易折断,断面平整,根茎中空。茎上
有细棱,紫色。叶片大型,椭圆形或匙状椭圆形,长
10 ~ 18 cm,宽 2 ~ 4. 5 cm,基部心形或具叶耳,上部
叶较少,披针形或卵形,7 ~ 9 脉,基部心形,抱茎。
花枝腋生。伞形花序宽大,多数伞辐 3 ~ 9,总苞 1 ~
5,开展,黄绿色,披针形。小总苞片 5 ~ 6 片,等大,
披针形或倒卵形 3 ~ 5 脉,小伞形花序有花 5 ~ 16,紫
色。生长于海拔 800 ~ 1500 m 的山坡丛林下,或山
沟阴湿地以及阴湿草坡。见图 1。
图 1 紫花大叶柴胡标本及根茎
2. 2 紫花大叶柴胡的性状鉴别 紫花大叶柴胡根、
茎性状特征,见表 1、图 1。
表 1 紫花大叶柴胡根及根茎性状特征比较
特征 根茎 根
形状
长圆柱形略弯曲,顶端有
残茎
呈圆锥形或圆柱形
外表面
圆柱形,有节和节间,有残
留叶基
棕色至棕褐色,有 2 ~ 3 分

质地 坚硬不易折断 坚韧
断面 黄白色,中空 黄白色,纤维性强
气味 气微,微有麻舌感 气微,味微,苦涩
2. 3 显微特征
2. 3. 1 紫花大叶柴胡根的横切面组织特征 木栓
层较厚,其下有 7 ~ 8 层栓内层细胞;皮层较窄,散在
7 ~ 8 个油室及裂隙;韧皮部较宽偶见油室,射线宽;
形成层成环;木质部较宽,占木质部 1 /2,导管断续
成切向排列,在中间部位纤维多角形,壁厚,木化。
见图 2。
2. 3. 2 紫花大叶柴胡根的粉末特征 粉末制片:将
药材捣碎过 80 目药典筛,取粉末少许用水合氯醛和
稀甘油透化装片,显微镜下观察。木栓细胞呈黄棕
色,多角形或长方形;纤维成束或散在,长棱形或钝
圆;导管多为网纹导管,螺纹,环纹导管少见;木纤
维,成束或散在,末端渐尖;油管碎片,黄棕色不规则
形成条状分泌物;薄壁细胞,类圆形,内含有油细胞。
见图 3。
图 2 紫花大叶柴胡根横切面组织
1.木栓层; 2.韧皮部; 3.油室; 4.木质层; 5.韧皮射线; 6.木纤
维群; 7.形成层; 8.木射线; 9.裂隙
图 3 紫花大叶柴胡药材粉末( × 400)
1.导管; 2.纤维; 3.油管碎片; 4.薄壁细胞; 5.木栓细胞
2. 4 HPLC色谱法测定柴胡皂苷的含量〔3〕
2. 4. 1 标准品溶液制备 精密吸取已知浓度的柴
胡皂苷 d(1. 06 mg /ml)1. 5 ml于样品瓶中即得。
2. 4. 2 样品溶液的制备〔4〕 紫花大叶柴胡药材粉
碎,过 60 目药典筛,精密称取 2. 0082 g,置索氏提取
器中,加甲醇 100 ml回流提取至无色,滤过,滤液置
水浴上蒸干,加水 20 ml 溶解,用乙醚萃取两次(各
20 ml) ,弃去乙醚液,再用正丁醇提取 3 次(40 ml、
40 ml、20 ml) ,合并正丁醇液,静置,取上清液置水
浴上蒸干,残渣用甲醇 10 ml 溶解,放冷,通过 D101
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型大孔吸附树脂柱,用甲醇 100 ml 洗脱,收集洗脱
液,置水浴上蒸干,残渣用甲醇溶解,并转移至 10 ml
容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,经微孔滤膜
(0. 45 μm)滤过,即得。
2. 4. 3 色谱条件 ZORBAX Edipse XDB-C18 色谱
柱(4. 6 mm × 250 mm,5 μm) ;流动相甲醇∶水
(77∶23) ;检测波长:204 nm;流速:1. 0 ml /min;柱
温:室温 25 ℃。进样量 10 μl;理论塔板数不低于
4000,柴胡皂苷 d与相邻峰分离度良好(图 4、5)。
图 4 对照品柴胡皂苷 d的 HPLC色谱图
图 5 样品紫花大叶柴胡的 HPLC色谱图
2. 4. 4 线性关系的考察 精密吸取对照品柴胡皂
苷 d溶液 2、4、6、8、10 μl,注入高效液相色谱仪中,
分别测定柴胡皂苷 d 的峰面积;以峰面积值(Y)对
进样量 X(μl)进行线性回归,发现二者有良好线性
关系,回归方程为:Y = 1068X - 43. 68(r = 0. 9985)。
2. 4. 5 样品含量测定结果 取同一批次药材各 3
份,按 2. 4. 2 项下方法制备供试品溶液,按 2. 4. 3 项
下色谱条件进样测定,精密吸取样品液 10 μl,注入
高效液相色谱仪,记录峰面积,依据回归方程,计算
柴胡皂苷 d的含量为 0. 5%。
3 讨论
柴胡皂苷 d、a、c 均为热不稳定物质,提取分离
时易发生化学变化。当柴胡皂苷降解后,生理活性
大大降低。本研究采用大孔树脂去杂分离柴胡皂苷
效果较好,建立了很好的条件体系,为今后分离纯化
奠定基础。柴胡为常用中药,其近缘品种较多,同属
植物在我国分布的有 36 种、17 变种,外观形态上区
别不十分明显,且有的为地方习用品。柴胡属植物
几乎均含有柴胡皂甙 a、d,且成分相差不大。本研
究发现,紫花大叶柴胡中柴胡皂苷 d含量达 0. 5%。
由于尚不能确定其是否有毒,为用药的安全性,
应进一步对甘肃省紫花大叶柴胡进行资源、炮制、化
学成分、药理毒理学等多方面的调研。甘肃省是我
国柴胡的主要产区之一,品种复杂,有关甘肃省药用
柴胡及混淆品种以往文献记录不多,其中紫花大叶
柴胡就是其中之一。辨别其生药特征,为临床用药
提供安全保障有非常重要意义。
【参考文献】
〔1〕 毛学勇,唐生斌. 柴胡及其混伪品的性状比较[J]. 中药材,
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〔4〕 赵磊,吴福祥,张耀邦,等.甘肃地产药材空心柴胡的质量评价
[J].中国现代应用药学杂志,2006,23(6) :457.
(收稿日期:2013-03-28)
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