全 文 ：＊基金项目：云南省科技计划面上项目（编号：２００９ＥＣ０９３Ｍ）
作者简介：孔春芹（１９８４～），女，云南中医学院２００８级研究生，研究方向：民族医学。
通讯作者：陈清华，Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｑｈ９７８＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
小红参抗心肌缺血活性部位的筛选研究＊
孔春芹，陈 普，刘 斌，骆始华，施剑平，陈清华，指 导：张 超
（云南中医学院，云南 昆明 ６５０５００）
摘 要：目的：初步筛选小红参抗心肌缺血的活性部位。
方法：采用ｐｉｔ尾静脉注射方法制备大鼠急性心肌缺血模型。
将ＳＤ大鼠随机分为８组：正常对照组、模型组、消心痛组、复
方丹参滴丸组、小红参Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ药物组。各组均在连续灌胃
１５ｄ后造模，测定大鼠１５、３０ｓ，１、３、５、１０、２０ｍｉｎ心电图，腹
主动脉采血，制备血清测定ＡＳＴ、ＣＫ、ＬＤＨ、ＳＯＤ、ＭＤＡ含量。
结果：小红参提取物各极性段物质Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ都具有抗心肌缺
血的作用（Ｊ点位移与模型组比较Ｐ＜０．０１），以Ｃ段物质作用
比较明显；小红参各极性段物质可明显降低血清心肌酶ＡＳＴ、
ＣＫ、ＬＤＨ和 ＭＤＡ的含量，提高血清ＳＯＤ活性（Ｐ＜０．０５或
Ｐ＜０．０１），作用以Ｂ、Ｃ两段物质较为明显。结论：小红参抗
心肌缺血的活性部位主要集中在Ｂ、Ｃ段，作用可能与抗氧化
有关，具体有效成分及作用机制还待进一步研究。
关键词：小红参；心肌缺血；活性部位；实验研究
中图分类号：Ｒ２８５ 文献标识码：Ａ
文章编号：１００７－２３４９（２０１１）１１－００７０－０３
小红参又名云南茜草，为云南特有的民族药，主要分布于
云南中部和北部，是茜草科茜草属植物滇茜草的干燥根及根
茎。具有活血通经、祛风除湿、调养气血等功效。长期以来被
云南少数民族应用来治疗心血管疾病（心绞痛、冠心病），并取
得良好临床疗效。
１ 实验材料和仪器
１．１ 实验动物 ＳＤ雄性大鼠，体重（１８０±３０）ｇ，由四川省医
学科学院实验动物研究所提供，动物合格证号：ＳＣＸＫ（川）
２０１０－２２。
１．２ 药品与试剂 小红参，购自云南中医学院门诊。小红参
提取物不同活性部位Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ，由云南中医学院中药学院中
药化学分析实验室协助制备。复方丹参滴丸（天津天士力制
药有限公司，批号１００２０７），垂体后叶素（ｐｉｔ，天津生物化学制
药有限公司，批号２００９０７０２），ＳＯＤ试剂盒（南京建成生物工
程研究所），ＭＤＡ试剂盒（南京建成生物工程研究所），消心痛
（江苏方强制药有限责任公司，批号２００９１１２９）
１．３ 实验仪器 旋转蒸发仪（上海予华仪器设备有限公司），
ＡＢ－８型号大孔树脂（安徽三星树脂科技有限公司），ＢＬ－
４２０Ｅ生物信号采集系统（成都泰盟科技有限公司），台式低速
离心机（上海电机厂）。
２ 实验方法
２．１ 动物造模 参照文献方法［１～２］制备大鼠急性心肌缺血
模型。实验前一天进行ｐｉｔ敏感性筛选。（挑选标准：①具备
Ｑ－ＲＳ－Ｔ波群；②Ｊ点上升或ＳＴ段抬高或压低０．１ｍｖ以
上，Ｔ波先高耸后低平或倒置的大鼠作为实验用鼠）。正常对
照组大鼠尾静脉注射生理盐水，其余各组尾静脉注射Ｐｉｔ ０．６
Ｕ／ｋｇ，１０ｓ内匀速注射完毕。
２．２ 分组及给药 将挑选出的敏感ＳＤ大鼠６４只，随机分为
正常对照组、模型组、消心组、复方组、小红参活性部位 Ａ、Ｂ、
Ｃ、Ｄ组，每组８只。在正常饲养基础上，同时给予相应成分溶
液连续灌胃１５ｄ后复制模型。
２．３ 检测指标
２．３．１ 大鼠心电图 末次给药１．５ｈ后各组大鼠用１０％水
合氯醛０．２５ｍＬ／１００ｇ腹腔注射，麻醉后背位固定。造模前，
用ＢＬ－４２０Ｅ生物信号采集系统采集ＩＩ导联正常心电图
５ｍｉｎ，造模后，分组记录各组注射ｐｉｔ完毕后１５、３０ｓ，１、３、５、
１０、２０ｍｉｎ的心电图。
２．３．２ 血清心肌酶（ＡＳＴ 、ＣＫ、ＬＤＨ）及超氧化物歧化酶
（ＳＯＤ）和丙二醛（ＭＤＡ）含量待大鼠心电图记录完毕后，腹主
动脉取血，低速离心 ３０００ｒ／ｍｉｎ，１５ ｍｉｎ，取血清保存于
－２０℃冰箱，送云南中医学院第一附属医院检测。
２．３．３ 统计学方法 使用ＳＰＳＳ １７．０软件进行处理，所有数
据均用均数±标准差（－ｘ ±ｓ）表示，采用单因素方差分析。
若满足正态方差齐性，用ＬＳＤ法进行分析。方差不齐时，用
Ｔａｍｈａｎｅ’ｓ Ｔ２法。
３ 结果
３．１ 对大鼠急性心肌缺血心电图的影响 见表１。由表１看
出：①模型组与正常对照组比较，缺血后各时间点Ｊ点与正常
对照组比较均有显著性差异（Ｐ＜０．０１），提示造模成功；②各
药物组与模型组比较具有统计学意义（Ｐ＜０．０１），表明各药物
对急性心肌缺血后２０ｍｉｎ内都有不同程度的预防治疗作用；
０７ 云 南 中 医 中 药 杂 志 ２０１１年第３２卷第１１期
③各药物组与正常组比较：在急性心肌缺血后５ｍｉｎ时间段
与正常对照组比较具有显著差异（Ｐ＜０．０５），表明正常对照组
与药物治疗组之间有差异；在缺血后１０ｍｉｎ，Ｃ药物组与正常
组比较没有显著性差异（Ｐ＞０．０５），在缺血后２０ｍｉｎ，Ｂ药物
组与正常组比较没有显著性差异（Ｐ＞０．０５），提示Ｂ段、Ｃ段
物质对心肌缺血具有稳定、显著的保护作用。
表１ 大鼠急性心肌缺血心电图变化（ｎ＝８）
组别
心电图Ｊ点位移／ｍｖ
１５ｓ ３０ｓ １ｍｉｎ ３ｍｉｎ ５ｍｉｎ １０ｍｉｎ ２０ｍｉｎ
正常组 ０．０２±０．０１ ０．０４±０．０１ ０．０２±０．０１ ０．０２±０．０１ ０．０８±０．０１ ０．０３±０．０１ ０．０２±０．０１
模型组 ０．１９±０．０４＊＊ ０．２０±０．０５＊＊ ０．１８±０．０４＊＊ ０．１８±０．０４＊＊ ０．１５±０．０４＊＊ ０．１５±０．０５＊＊ ０．１８±０．０９＊
消心组 ０．１１±０．０２＃＃ ０．１０±０．０３＃＃ ０．０９±０．０３＃＃ ０．０８±０．０１＃＃ ０．０９±０．０５＃ ０．１０±０．０３＃ ０．０８±０．０３＃＃
复方组 ０．１１±０．０５＃＃ ０．０９±０．３３＃＃ ０．１０±０．１５＃＃ ０．０９±０．０４＃＃ ０．０９±０．０５＃ ０．０７±０．０５＃＃ ０．１０±０．０６＃
Ａ组 ０．１０±０．０６＃＃ ０．１０±０．０５＃＃＊０．０６±０．０２＃＃ ０．０８±０．０２＃＃ ０．０８±０．０３＃＃＊０．０７±０．０２＃＃＊０．０９±０．０６＃
Ｂ组 ０．０８±０．０４＃＃＊０．１０±０．０７＃＃＊０．０８±０．０３＃＃＊０．０６±０．０３＃＃＊０．０７±０．０２＃＃＊０．０８±０．０５＃＃＊０．０６±０．０３＃＃
Ｃ组 ０．０７±０．０４＃＃＊０．０９±０．０３＃＃＊０．０５±０．０４＃＃＊０．０８±０．０４＃＃＊０．０８±０．０４＃＃＊０．０６±０．０２＃＃ ０．０７±０．０４＃＃＊
Ｄ组 ０．０８±０．０６＃＃＊０．０９±０．０３＃＃＊０．０６±０．０３＃＃＊０．０９±０．０５＃＃＊０．０６±０．０４＃＃＊０．０８±０．０５＃＊ ０．１０±０．０５＃＊
注：与正常组比较，＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１；与模型组比较，＃Ｐ＜０．０１，
＃＃Ｐ＜０．００１
３．２ 对大鼠急性心肌缺血心率的影响 见表２。由表２看
出：①模型组与正常对照组比较，缺血后各时间点心率与正常
组比较均有显著性差异（Ｐ＜０．０１），提示造模成功；②各药物
组与模型组比较：Ｃ药物组与模型组比较具有统计学意义
（１５ｓ，Ｐ＜０．０５），Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ药物组与模型组比较，在缺血后
３０ｓ，１、３、５、１０、２０ｍｉｎ内没有显著差异（Ｐ＞０．０５），但对缺血
后心率改善均有上升趋势，提示 Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ对ｐｉｔ导致的急性
心肌缺血心率降低改善作用不明显。
表２ 大鼠急性心肌缺血心率变化（ｎ＝８）
组别
心率／次·ｍｉｎ－１
１５ｓ ３０ｓ １ｍｉｎ ３ｍｉｎ ５ｍｉｎ １０ｍｉｎ ２０ｍｉｎ
正常组 ４４５±５８ ４４１±６１ ４４７±５０ ４３４±４５ ４３４±４７ ４２５±５１ ４１３±３６
模型组 ３３３±９９＊＊ ３１６±７５＊＊ ２６９±８２＊＊ ２８４±６５＊＊ ２９７±７０＊＊ ３１６±９２＊ ３２１±９６
消心组 ４３０±１８＃ ３４０±９３ ２９２±１５９ ３０９±１２６ ３１５±１００ ３４４±１２４ ３５９±１２６
复方组 ３８２±６８ ３５１±９４ ２４９±１０５ ２６４±５６ ２７０±６０ ３１０±５０ ３２６±９５
Ａ组 ３８８±１１６ ３８６±１１５ ４０４±１５６＃ ２８０±５０ ３００±４２ ３３４±７８ ３２５±９４
Ｂ组 ４０５±４６ ３７９±５２ ３１３±８１ ２８６±６４ ３００±４８ ３２６±６４ ３７２±７９
Ｃ组 ４２４±４３＃ ３６５±４８ ２４３±８０ ２３８±８２ ２５７±６６ ２２８±７５＃ ２５７±１２８
Ｄ组 ３７４±１０５ ４０６±１５８ ３２９±１０５ ３３１±７９ ３４５±７６ ３７５±１０８ ３６０±１０９
注：与正常组比较，＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１；与模型组比较，＃Ｐ＜０．０５。
３．３ 对急性心肌缺血大鼠心肌酶的影响 见表３。由表３看
出：①模型组与正常对照组比较，缺血前后大鼠血清心肌酶有
显著性差异（Ｐ＜０．０５），提示造模成功；②各给药组与模型组
比较，大鼠血清心肌酶差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５），表明
各药物对急性心肌缺血后心肌损伤有不同程度的预防保护作
用；③各药物组的治疗效果以Ｂ药物组效果较为明显。
表３ 对血清心肌酶的影响（－ｘ ±ｓ，ｎ＝８）
组别 ＡＳＴ／Ｕ／Ｌ ＣＫ／Ｕ／Ｌ ＬＤＨ／Ｕ／Ｌ
正常组 １３９．３８±３１．７５ ２０１４．７５±９０５．９１ １１５１．１３±３２３．２４
模型组 １８３．５±３１．１６＊＊ ３０６５．７５±１４８９．３５＊ １４５４．３７±４１９．６６＊
消心组 １２４．７５±７．９８＃＃＃ １９８８±６７５．０９＃ ８９１±２２３．５６＃＃＃
复方组 １２６．６３±２３．６２＃＃＃ ２１９２±７６３．３５＃ ６４９．３８±２１４．６４＃＃＃
Ａ组 １０８．２５±１９．７５＃＃＃ １５３７．７５±６４８．６２＃＃＃ ６１６．８８±１３２．２９＃＃＃
Ｂ组 １０１．８８±２０．１１＃＃＃ １１７５．５±４３８．２４＃＃＃ ５０６．５±２６６．９＃＃＃
Ｃ组 １２５．８７±２１．７８＃＃＃ １６２３．５±６２４．７３＃＃＃ ９８５．５±３６３．９２＃＃
Ｄ组 １２５．０±１８．６８＃＃＃ １９９１．２５±６８１．７９＃ ９７０．８８±３１８．６６＃＃
注：与正常对照组比较，＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１；与模型组比较，
＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１，＃＃＃Ｐ＜０．００１
３．４ 对急性心肌缺血大鼠超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及丙二醛
（ＭＤＡ）含量的影响 见表４。由表４看出：①各给药组与模
型组比较：ＳＯＤ 及 ＭＤＡ 均有差异具有统计学意义（Ｐ＜
０．０５），表明各药物对急性心肌缺血均有提高ＳＯＤ活性，降低
丙二醛含量，从而对心肌缺血发挥预防治疗的保护作用；②各
药物组的治疗效果：在提高ＳＯＤ活性上以Ｃ物质明显；在降
低丙二醛含量上以Ｂ物质作用明显。
表４ 对急性心肌缺血大鼠血清ＳＯＤ活性及ＭＤＡ含量的影响（－ｘ ±ｓ，ｎ＝８）
组 别 ＳＯＤ ＭＤＡ
正常组 ２０４．１４±３１．９２ ２．５７±１．００
模型组 １６８．０１±１６．０３＊ ５．７８±３．５９＊
消心组 １９８．９３±１９．０８＃＃＃ ２．６５±１．３９＃＃＃
复方组 ２１２．２３±８．４４＃＃＃ １．７７±０．３６＃＃＃
Ａ组 １９２．３５±５．０３＃＃ ２．９９±０．８６＃＃＃
Ｂ组 １８９．６４±１４．９７＃ ２．６９±０．７９＃＃＃
Ｃ组 ２０３．６４±１５．９６＃＃＃ ３．１９±１．０８＃＃
Ｄ组 １９４．０８±１０．３９＃＃ ２．７４±１．１７＃＃＃
注：与正常对照组比较，＊Ｐ＜０．０１；与模型组比较，＃Ｐ＜０．０５，
＃＃Ｐ＜０．０１，＃＃＃Ｐ＜０．００１
４ 讨论
现代医学认为心肌缺血是指心脏的血液灌注减少，导致
心脏的供氧减少，心肌能量代谢不正常，不能支持心脏正常工
作的一种病理状态［３］。心肌缺血是多种心脏疾患的初始阶
段，临床上主要表现为冠心病心绞痛、心肌梗死等心肌缺血性
症状，属于中医“胸痹”、“心痛”范畴。其病性总属本虚标实，
心脉痹阻为发病主要病机，基本治法为活血化瘀、宣痹通阳、
扶正固表等［４～５］。
心电图测量作为无创性检查手段，对心肌缺血的评估、诊
断、预防等有很大帮助。血清心肌酶为多年来临床上作为心
肌坏死的检测标记物，心肌缺血坏死时，细胞膜的完整性受到
损害，膜的通透性增加，酶由细胞内因释放而减少，血清中酶
活性增加。因此，心肌酶 ＡＳＴ、ＣＫ、ＬＤＨ 的检测对心肌受损
程度具有一定参考价值，也可以作为心肌梗塞范围的定量指
标［６］ＳＯＤ是机体防御新陈代谢及其他生命活动中氧自由基损
１７２０１１年第３２卷第１１期 云 南 中 医 中 药 杂 志
伤和破坏的抗氧化酶。大量氧自由基生成及脂质过氧化反应
是心肌缺血损伤的主要机制之一［７］；ＭＤＡ是氧自由基攻击生
物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应的终产物，其值的高
低间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度［６］。心肌缺
血时氧自由基产生增多，氧自由基与不饱和脂肪酸反应形成
过氧化脂质，过氧化酯质进一步分解成 ＭＤＡ，ＭＤＡ可与蛋白
质的游离氨基及核酸等形成Ｓｃｈｉｆｆ碱，而使生物大分子发生
交联，心肌细胞膜的完整性受到破坏，造成对机体的损伤［７］。
本实验采用ｐｉｔ复制心肌缺血模型，观察小红参醇提物不
同极性段对其保护作用。阳性组（消心痛和复方丹参滴丸）和
小红参醇提物各段物质与模型组比较，心电图Ｊ点位移、ＳＯＤ
活性、心肌酶及 ＭＤＡ含量变化均有显著差异。其中小红参
醇提物Ｂ、Ｃ段物质能抑制Ｊ点抬高作用趋势明显，Ｂ段物质
在减少心肌损伤降低心肌酶 ＡＳＴ、ＣＫ、ＬＤＨ活性及 ＭＤＡ含
量作用趋势显著，Ｃ段物质能明显增加ＳＯＤ活性。小红参提
取物Ｂ、Ｃ段物质在抗心肌缺血方面具有协同作用，推测两极
性段物质为抗心肌缺血的活性部位，这一作用可能与抗氧化
有关，其具体有效成分及对于心肌保护作用的其他作用机制
还有待进一步研究。
参考文献：
［１］徐叔云，卞如濂，陈修 ．药理实验方法学［Ｍ］．第三版 ．北京：人民
卫生出版社，２００２：１２０３．
［２］陈清华，莫莉，袁肇凯，等 ．养心通脉方有效成分部位抗心肌缺血
的实验研究［Ｊ］．中华中医药学刊，２００８，９（９）：１９１０～１９１２．
［３］明磊，卢丹，刘金平，等 ．抗心肌缺血中药有效成分研究进展［Ｊ］．
人参研究，２０１０，３：３８．
［４］张玲，中药防治心肌缺血损伤作用机制研究进展［Ｊ］．辽宁中医
杂志，２０１０，３７（１０）：２０７０．
［５］蔡光先，赵玉庸 ．中西医结合内科学［Ｍ］．北京：中国中医药出版
社，２００５：１９８．
［６］Ｗａｎｇ Ｑ Ｄ，Ｐｅｒｎｏｗ Ｊ，Ｓｊｏｑｕｉｓｔ Ｐ Ｏ，ｅｔ ａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｐｏｓｓｉｂｉｌｉ－
ｔｉｅｓ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ａｇａｉｎｓｔ ｍｙｏｃａｒｄｉｃａｌ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］．Ｃａｒｄ－
ｉｏｖａｓｃ Ｒｅｓ，２００２，５５（１）：２５～３７．
［７］王智文，洪铁，杨振 ．安心对垂体后叶素所致实验性心肌缺血的保
护作用［Ｊ］．时珍国医国药，２００７，１８（１）：８２．
（收稿日期：２０１１－０５－１１）
作者简介：袁文娟（１９７９～），女，主管药师，主要从事中药分析工作。
ＨＰＬＣ法测定千紫红颗粒中杨梅苷的含量
袁文娟，高文分，孟 芹，李婷婷，蒋 序
（云南省食品药品检验所，云南 昆明 ６５００１１）
摘 要：目的：建立用液相色谱法测定千紫红颗粒中杨
梅苷的 含 量。方 法：采 用 Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸ ＸＤＢ Ｃ１８ 柱
（Φ４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流动相为０．４％乙酸铵溶液—甲
醇（６５∶３５），流速１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长２６０ｎｍ。结果：
线性范围６．６３２～２５６．２８ｕｇ·ｍＬ－１，（ｒ＝０．９９９ ９９）；平均回
收率为１００．６％，ＲＳＤ＝０．８６％（ｎ＝６）。结论：该法快速、准
确、可靠，可作为千紫红颗粒的质量控制。
关键词：液相色谱法；千紫红颗粒；杨梅苷；含量
中图分类号：Ｒ２８４ 文献标识码：Ａ
文章编号：１００７－２３４９（２０１１）１１－００７２－０３
千紫红颗粒收载于《卫生部药品标准》第十一册，由杨梅
根、大红袍、紫地榆、千里光及钻地风５味中药组成，具有清热
凉血、收敛止泻之功效。用于急性肠炎、慢性肠炎急性发作以
及小儿腹泻属湿热症者［１］。千紫红颗粒主治湿热下注泄泻，
症见肠鸣、腹痛腹泻、泻下急迫不爽、肛门灼热、烦热口渴等
症。通过中药药理试验研究证明，千紫红颗粒具有较强的广
谱抗菌活性，其煎剂对痢疾杆菌、伤寒杆菌及副伤寒甲／乙杆
菌、绿脓杆菌及大肠杆菌等均有较强的抑制作用，在一定程度
上阐明了千紫红颗粒治疗湿热泄泻的机理［２］。千紫红颗粒质
量标准中缺少含量测定项，其质量研究未见报道，其药品内在
质量难以评定，本文建立了液相色谱法测定药品中杨梅苷的
含量，为千紫红颗粒的质量控制提供了科学依据。
１ 仪器和试药
ＷＡＴＥＲＳ２６９５／２９９６高效液相色谱仪，带四元泵；ＰＤＡ检
测器；自动进样器；在线真空脱气机；智能化柱温箱及Ｅｍｐｏｗ－
ｅｒ化学工作站；甲醇为ＨＰＬＣ级，水为超纯水。杨梅苷对照品
购自上海同田生物技术有限公司。七批千紫红颗粒样品由云
南白药集团有限公司及云南白药云健制药有限公司提供。
２ 色谱条件
色谱 柱：Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸ ＸＤＢ Ｃ１８ 柱 （Φ４．６ ｍｍ×
２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相：０．４％乙酸铵溶液—甲醇（６５∶３５）；
流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温：３０℃；检测波长：２６０ｎｍ；进样
量：１０μＬ。
３ 溶液的配制
３．１ 对照品溶液的配制 精密称取杨梅苷对照品适量，加甲
２７ 云 南 中 医 中 药 杂 志 ２０１１年第３２卷第１１期