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华钩藤钩茎对NO供体诱导的小脑颗粒细胞神经元死亡的抑制作用



全 文 :国外医药 · 植物药分册 23 0 0年第 1 8卷第 l期
20%和 0 5% )天开始 , 动物 出现脱毛 、 厌 食 、
腹 泻 、 呼 吸 困 难等 症 状 ; 而 G l 和 G 3 组 约
2 0 %动物在感染 N D V 第 3 天仅 出现呼吸困
难 。 在病毒感染的急性期 (实验一 ) , G Z组死
亡 率达 7 8 . 9% , G 3 组 为 5 7 . 3% , G l 组 为
4 7
.
3%
,
G 4 和 G S 组 为 O 。 在实验二 , G Z 和
G 3 组 在 第 5 天 的 死 亡 率 分 别 为 “ %和
3 %
,第 6 天则分别为 25 %和 40 % , 2 个实验
组未死亡率相同 。 在实验一中 ,在感染 N D V
后 的前 4 天 , G Z 和 G 3组动物体重明显减轻 ,
G 4 和 G S组明显增加 。 在实验二 , G Z组体重
减轻 明显 , G 3 组不 明显 , 而 G 4 组体重 明显
增加 。 病理检查表 明 , 在实验二 中 , G Z 组有
7 。%动物气 管粘膜 、 胃及 肠腔 严重 损害 ; 而
G 3 组仅有 40 %动物出现上述症状 。 该提取
物对动物抗体水平无 明显影响 。
(于仁妾摘 黄正明校 )
( 2 0 0 n g /m L )
,而在较高浓度 ( > 4 60 雌 /血L )
时 , 差别不显著 , 在 8 0 n g /m L 时 , P H 的该
活性高于 H 。 P H 和 H 的抗增殖作用与诱导
细胞凋亡作用有较好的相关性 。 以上结果提
示光激活的 P H 与 H 的体外抗增殖和诱导细
胞凋亡的活性类似 。 在贯 叶金丝桃叶中 , P H
的含量为 H 的 2 倍以上 , 因而用贯叶金丝桃
提取物进行全身治疗时 ,应该重视 P H 潜在
的细胞毒性 。
(郑 晓亮摘 郑高利校 )
0 2 0 伪金丝桃素的光毒性和诱导细胞凋亡
的 作 用 〔英 〕/ S e h e m p p C M … / P l a n t a
M e d一 2 0 0 2 , 6 8 ( 2 )一 1 7 1 ~ 1 7 2
伪金丝桃素 (P H )和金丝桃素 ( H )是贯叶
金丝 桃 Z无沪 er icu m P e rj bar ut m 中的光敏 性
植物色素 。 H 对肿瘤细胞株有细胞毒活性及
诱导其凋亡的作用 。 P H 在该植物 中的含量高
于 H ,但其诱导细胞凋亡的作用未曾研究 。 作
者 比较 了 P H 与 H 对体外培养的人 T 一淋巴
细胞性 白血病细胞 株 J盯k at 的光毒性及诱
导其凋亡的能力 。
J
u r k at 细胞 株 培 养后 冲洗 , 再 悬 浮 于
P B S 中 , 分别 加 人 P H 和 H ( 5 0 ~ 8 0 0 n g /
m L )
, 先于暗处培养 Z h , 然后置冰浴中用可
见光 照射 , 冲冼后再培养 24 h ,用仁3H } 胸昔
掺人法测定细胞增殖 ;采用寡核小体光度定
量法评价细胞凋亡情况 。 结果显示 , 经光激活
的 P H 和 H 可剂 量相关地抑 制细 胞增 殖 ,
I C
S。分别为 2 0 0 和 1 0 0 n g /m L ;而未经光激活
的 P H 和 H 无此作用 。 经光激活的 P H 和 H
可剂量相关地增加 D N A 断裂 。 H 在低浓度
( 1 0
n g / m L ) 时诱导的细胞 凋亡率高于 P H
0 2 1 华钩藤钩茎对 N O 供体诱导 的小脑顺
粒细胞神经元死亡的抑制作用 〔英〕 / Y at a k a
S … / 和漠 医葵学雏赫一 20 02 , 1 9 ( 1) 一 15 ~
2 0
作者先前 的研究证明 , 华 钩藤 U n ca iar
s i n e n s i : ( O l i v
.
) H a v il 水提取物 ( U SE ) 及其
酚类和生物碱对 谷氨酸诱导 的培养 W i s t a r
大鼠小脑 颗粒细胞 ( C G C S )神经元 死亡具抑
制作用 。 现作者研究了该植物对 N O 介导的
神经毒性的防护作用 。
将该植物钩茎切碎 ,用沸水提取 3 次 ,合
并提取液冻干得提取物 (U S E ) 。 U S E 经 iD -
a io n H P

2 0 柱层析 ,用水洗脱得 U S E 一W ; 用
1
: 1 的水一 甲醇洗脱 ,得酚类部位 U S E 一 P ;用
甲醇洗脱得生物碱部位 U S E 一 A 。 用无蛋 白质
人工血清 ( L )S 将各提取物稀释 1 0 倍 ,并各
取 20 拼L 加至大 鼠小脑颗粒细胞培养液中 ,
对照组加等体积的 L S 。 10 m in 后分别加人
1%浓 度 的 N O 供体硝普钠 ( S N P ) 和 m 。卜
p h o l i n o s y d n o n im i n e ( S I N

1 ) 的 L S 溶 液 2 0
拌L ,对照组只加人等体积该溶液 。 用 M T T 法
测细胞活力 。 结果显示 ,与对照组相比 , 1 0 、 30
和 1 0 0 拌g / m L 的 U S E 明显抑制 S N P ( 1 0 和
3 0 拌m o l / L )诱导的神经元死亡 , 1 0 和 3 0 拌g /
m L 时明显抑制 S IN 一 1 ( 3 0 0 拜m o l / L )诱导的
神经元死亡 ,使细胞存活率明显提高 。 试验还
显 示 , U S E 一W 无活性 , U S E 一P 1 0 和 3 0 拌g /
m L 与 u s E一 A 3 0 和 1 0 0 拜g /m L 明显 抑侧
sN P ( 30 拜m ol / L )持续作用 2 4 h 诱导的神经
国外医药 · 植物药分册 2 0 0 3年第 18 卷第 i期
元死亡 。 U S E一P 3和 功 拜 g /mL 和 U S E一 A 30
和 0 0 1拌 g /mL 亦抑制 N S I一 i( 30 0拌 m ol /L )作
用 2 4 h 诱导的神经元死亡 。 试药的作用呈浓
度相关 。 U S E及其各部位在低于 10陀 /mL
时未显示细胞毒性 。
该植物抑制 N O供体诱导的神经毒性的
作用部分地归因于其 自由基清除活性 ,它 可
能对与 N O 有关的神经损害 (如缺血性脑病 )
的防治有益 。
(唐 渊摘 李晓辉校 )
R g
: 具有非竞争性拮抗作用 。 A C h 诱导的峰
电流的减小与电压无关亦表明了 R g : 并不是
开放人 n A C h R S 被阻断的通道 。 以上结果提
示 , R g : 特别对人异侧 n A C h R s 脱敏作用 的
调节活性 , 可能是人参 多种治疗作用的一种
机理 。
(赵宝娟摘 )
02 2 人参皂昔 R g Z 对人神经元烟碱性乙 酞
胆碱受体 的影响 〔英 〕s/ 习a .F 二 / J P ha r m
E x P T h e r 一 20 0 2 , 3 0 1 ( 3) 一 1 0 5 2一 1 0 5 9
作者研究了人参皂昔 R g : 对在蟾赊卵母
细胞中表达的人神经元 同侧和异侧烟碱性乙
酞胆碱受体 (n A C h R s )的影响 。
将人参皂昔 R g Z 粉末溶于二甲亚矾制成
2 0 0 m m ol / L 的储备液 , A C h 溶 液须新鲜 配
制 。 蟾赊卵母细胞用改性林格 氏溶液灌流 , 保
持电压 一 80 m V , 电流以 50 H z 的频率通过
eB
s
se l 滤波器 , 用电压钳对 受体进行 电生 理
测量 。 结果 显 示 , 1 0 0 拜m o l / L 的 R g Z 对 l
m m ol / L 的 A C h 诱导的并 通过同侧 a 7 受体
的电流无影响 ,对通过异侧烟碱性 A C h 受体
a 3民、 。 3p: 、 a 4尽; 和 a 4俘: 峰电流产生很小影 响 ,
但提高了它们的脱敏作用并呈剂量相关 。 R gz
对 曳仇受体脱敏作用 的 IsC 。> 1 0 拼m ol / L ,
对其他受体脱敏作用 的 IC S。值均在 20 一 40
拌m ol / L 。 在试验条件下除 。 3日2 受体具有较快
的脱敏作用外 , 其他所有受体 的 H il 系数均
小于 1 。 在给以 A C h 前预先给以 1 、 10 和 1 0
拜m ol / L 的 R g Z 5 m in , 明显降低通过受体 的
峰 电流 且呈剂量相关 , 其中 1 0 拌m ol / L 的
R g
Z对 a 4月4 、 a 3母: 和 a 4p: 峰 电流 的减少 大 于
85 %
,对 气民受体则为 40 % 。 在所有受体中 ,
R g
Z 对峰电流的减弱和脱敏作用的增加均相
似 , 且呈浓度相关 。 以 电民 和 久 pZ 受体研究
R g
。 的作用机理 , 发现 A C h 量效曲线位移很
小 , 当 A C h 高浓度时 , R g Z 持 续 作 用 , 提 示
02 3 粉色西番莲 甲醇提取物 中苯并黄酮部
位 对 小 鼠大 麻 素 成 瘾 的治 疗 作 用 〔英 〕 /
D h a w a n K … / J P h a r m P h a r m a e o l一 2 0 0 2 ,
5 4 ( 6 )一 8 7 5 ~ 8 8 1
除极少数坑抑郁药外 , 对大麻素 ( c a n n a -
ib n of d) 的成瘾性和依赖性 目前 尚无特效治疗
方法 。 作者研究了粉色西番莲 尸as s ifl o ar 子n -
ca rn at a .L 的苯并黄酮提取部位对小 鼠大麻
素 (△ , 一 T H C )依赖性的作用 。
S w is s 小 鼠分为 4组 ,每组 10 只 。 第 1组
为对照组 , 给以赋形剂 ; 第 2 组给 以 10 m g /
k g 的大麻素 ;第 3 组中的 5 只小 鼠给以大麻
素 1 0 m g / k g 十 提取物 10 m g / k g , 另 5 只给
以大麻素 10 m g k/ g 十提取物 20 m g k/ g ;第 4
组只给以提取物 。 各组每天口 服药物 2 次 ,共
6 天 。 停药后 24 h 各组给以大麻素受体选择
性拮抗剂 S R 一 1 4 1 7 1 6 A 2 0 m g / k g 。 记录各组
在治疗期间及以后 的行为活动 。 第 7 天 ,第 2
组再分为 2 小组 , 其中 1 组单次量给以 提取
物 20 m g k/ g (急性给药 ) , 另 1 组未作 处理 ,
记录 2 个小组头足震颤情况 。 结果显示 ,在第
5 天 , 第 2 组小 鼠活动明显减弱 , 出现 昏睡 、
走动次数减少等症状 ; 而第 3 组小 鼠活动增
加 ,表明提取物延迟对大麻素耐受性 的发生 ,
20 m g k/ g 时效果更明显 。 与对照组和在第 5
天的情况相 比 ,给 以 S R 一 1 4 1 7 1 6 A 后 ,第 2 组
小鼠由于脑中大麻素水平急剧下降而产生戒
断症状 ,使活动增加 ,头足震颤 , 而平行 给以
提取物组与第 5 天小 鼠的行为无 明显 区别 。
急性 给药亦 明显减少头足震颤次数 ,表 明提
取物平行给药和即时给药均有明显作用 。
以上结果表明该提取物能明显延迟小鼠