全 文 ：第 1 5卷第 1期
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1 5
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i
济 宁 医 学 院 学 报
JO U R N A L O F J IN IN G M E D I C A L C O L L E G E
1 9 92年 3 月
M a r
,
1 9 9 2
山东肿足蔗化学成分研究 ( 孤 )
- -一肿足旅贰的含量测定
陈雁 君 王 宁 芦英 华 陈亚 民
( 化学教研室
提 要
先扫描定 鼠。
关健词
水文少月荧光薄层光写度法测定山东肿足旅中肿足威试含量 。 生药经乙醚提取 , 薄层层 析 , 芡
测得山东肿足截中肿足藏试含量为 。 · 86 3 % , 平均加标回收率 为1 0 . 9 % , 变异系数 为。 . 昭叽 。
山东种足献; 种足蔽贰
本室已从山东肿足蔽生药中提取分离出
多种化合物 1 ` , “ , “ ’ , 并做了多种成分 的 含
量测定 { ` , 后 , 6 ) 。 提取出的一种新灿酮 贰一
肿足旅贰 ( C 12 o n g z u j u e s i d c ) , 其粗晶经 家
兔妊娠在位子宫药理实验 , 表现明显的兴奋
作用 L “ ’ 。 所以建立一种简便 、 快速 、 准确 、
灵敏测定山东肿足威中肿足藏戒含 量 的 方
法 , 对此药的开发利用是很有必要的 。 有关
鉴于肿足蔽贰在紫外光激发下发射出较强的
姜黄色荧光 , 其强度在一定范围内与含量呈
线关系 , 我们建立了荧光薄层扫描测定肿足
威贰含量的方法 。 山东肿足蔗全草粉末经性
乙醇提取薄 层 层析 、 荧光扫描定量 , 方法简
便 、 快速 、 准确 、 灵敏度高 、 重现性好 。
实验部分
(一 )仪器 、 药品及试剂 C S一 91 。双 波
长薄层扫描仪 , 日本岛津 ; R F一 54 。荧光分
光光度 计 , 日本岛津 ; 紫外荧光灯 , 上海顾
村光电仪器厂 ; 1 归毛细管微量点样 器 , 日
本岛津 。
肿足蔽贰纯品 , 本 室 提 供 , m p 2 1 6一
26 2 ℃ , 经薄层检识为单点 , 薄层荧光 扫 描
为单峰 ; 山东肿足蔽 , 本室提供 , 经中国医
科院药物所宋万志教授鉴定 。
试剂均为分析纯 。
(二 )薄层层析条 件 薄 层 板 为 硅 胶
G 一。 . 2肠 C M C一 N a , 1 0 x Z o c m , 板 厚
o
二
s m ln , 1呈O oC 活化 3 o m i n , 展开 剂 : 乙酸
乙醋一甲酸一水 ( 9 : 2 : 3 ) , 展距 1 c4 nl ,
层析温度 20 ℃左右 , 紫外荧光灯定位 , 肿足
贰斑点 R ; “ 0 . 7 。
(三 )扫描条件的选择 荧光法 , 氛灯 ,
单波 长 , 反射法线性扫描 , 狭缝 1 0 K 10 m nt ,
灵敏度中等 , 扫描速度 20 m m / m in , 记 录
仪纸速 10 m m / m in , 记录仪灵 敏 度 、 1 0 。
用岛津 R F一 5 40 荧光分 光光度计对 肿足藏贰
标准溶液 ( 1 8 4 n g / m l) 扫描 , 得最 大 入E X 为
3 1 O n ; n , 最大 入E M为 4 1 0 n m , 故选 3 1 0 , , m为
激发波长 , 用接近最大荧光波长的 4 。 。 n : n 滤
光片 。
(四 )样品的扫描测定 1 . 标准曲线的
绘制 : 精密称取干躁 至恒重的肿足威贰纯 品
2
.
3 m g , 置 5 m l容量瓶中 , 用 甲醇稀 释 至
刻度 , 在薄层板上精 确 点 样 1 、 2 、 3 ,
4
、
5
、
6 冲 1, 上行展开 、 挥干 后 于 C S一 9 1 0
双波长薄层扫描仪上进行荧光扫描 , 得 肿足
蘑贰在 。 . 4 6 ~ 2 . 7 6尽 g范围内的回归方程飞一
2
.
2 7 3 3 + 4
.穿8 9 X , r 之 0 . 9 9 7 9 , n 二 6 。
2
. 加标回收实验 : 每板点 标 、 、 样 、
样 + 标 、 标 : 4个点 , 标 , ( o . 4 e件 1)点样 i 林 l ,
标 : ( 0 . 4 6拼g八 1)点样 3 林卜 样品为 山 东 肿
足玻提取液 ( o . i m g / 林 1)点样 2 林 1, 样 + 标 :
山东肿足碳提取液 ( o . l m g /卜1 ) 和 标 准 掖
( 0
.
4 6件g八 l )各点 1 件 l , 上行展开 , 荧 光扫
描测定 , 加标回收率见表 1 。 ’
齐 1 山东肿足威的加标回收率
组别 回收率 平均回收率 C D %
( % ) (% )
1 1 0 2
。
0
吕 1 0 3 。 9
3 97
. 任 1此 , , 2杖a
5 1 03 , 2
4 ,了. 72
C
.
1 0 1
。
2一 . . . . . 口 . 山 . . . . . . .
3
. 精密度实验 : 在同一薄层板上点标
准液 ( 0 . 4 6拼 g /协 1) , 每点 2 终 1, 展开 , 荧 光
扫描测定 , 得 S = 0 . 0 5 5 0 3 , C V 二 0 . 9 3 9肠 ,
n 二 8 。
4
. 稳定性实验 : 将标准溶液 ( 0 . 46 件g
/卜 l) 点样 , 展开 , 测定不同时间各斑点的荧
光强度积分值 , 20 h 内测定结果基本不 变 ,
C V = 2
.
1 1%
, n 二 1 2 。
5
. 山东肿足破贰的含量测定 : 精确称
取于躁至恒重的山东肿足藏全草粉末 1 9 ,加
S Om l乙 醇 , 浸泡过夜后回流提取 1 五, 重复
提取 3 次 , 残渣用 乙醇洗涤 , 合并提取液 ,
挥干乙醇 , 用 甲醉溶解提取物 , 移 入 1 0 m l
容量瓶并稀释至刻度 。 每块薄层板 点 两 标
( 3 件 1、 4 件 l ) , 四样 ( 2 协 l ) , 展开 , 荧光扫
描 , 外标两点法定量 , 结果见表 2 。
表 2 山东肿足苏中肿足蔽贰的含量
纽样 ( 。 g ) 含量 ( % ) 平均含量 ( % )
.
8 4
。
8 4
1
。
7 2 4
1
。
7 3 8
石 1 。 3匕 1 。 8 4 1 。 7 2 4
4 1
.
3 8 1
.
8选 1 . 7 1 5
一一一~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ .
一
O
。
86 2
0
.
8 6 9 0
.
8 6 3
0
。
8 6 2
0
。
8 5 8
~一一 . 口 . . . . . . 口. 曰 . . . 一一一` - .~一讨 论
(一 )本实验采用随行标准 , 在线性范围
内外标两点法定量 , 消除了板间 、 时间 、 仪
器灵敏度稍有变化等误差 , 使测定 误 差 很
小 。
(二 )山东肿足费中的对苯二甲 酸 二 甲
醋 【今 」 , 与 肿 足 蔗 贰 同 在 2 4 o n m 处对 U V
有最大吸收 , 且对苯二甲酸二甲醋在薄板上
很难分离 , 但它无荧光 , 用荧光扫描法可消
除它的干扰 。
(三 )实验结果表明 , 山东肿足孩中肿足
该戒含量很高 , 且为有效成分 , 此生药又产
于山东山区 , 药源丰富 , 故可作为肿足蔗贰
来 源的资源开发利用 。
参考文欲
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