全 文 ：　　　　 天然产物研究与开发　 　　　　　
　　　　　　　　　　 NATU RAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT　 2002　Vo1.14　No.5
　
　
　
　
收稿日期:2002-01-25　　修回日期:2002-04-04
中型滇丁香抑菌及抗耐药菌株作用的研究
康文艺1 　杨小生2 　赵洪芳1 　郝小江1＊
(1.中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室 , 昆明　650204;
2.贵州省 、中国科学院天然产物化学重点实验室 ,贵阳　550002)
摘　要　采用平板法 ,对中型滇丁香乙醇浸膏抑菌和抗耐药菌株的活性进行研究 ,发现其对金黄葡萄球
菌 、乙型溶血性链球菌 、枯草芽孢杆菌 、大肠埃希菌 、白色念珠菌敏感菌株具有抑制或杀菌作用;对金黄
葡萄球菌 、大肠埃希菌的耐药菌株没有抑菌或杀菌的作用;以青霉素为对照 , 发现其对大肠埃希菌和白
色念珠菌的抑菌作用比青霉素明显。
关键词　中型滇丁香;抑菌作用;抗耐药菌株作用
　　中型滇丁香(Lucul ia intermedia Hutch.)为茜
草科滇丁香属植物 。本属植物只有滇丁香(L .
gratissima sweet)、中型滇丁香 (L .intermedia
Hutch.)和鸡冠滇丁香(L .yunnanensis Hu.)等 3
种 ,分布于喜马拉雅至我国云南和广西[ 1] 。中型滇
丁香又名隔山香 、桂丁香 、栀子花 、酒瓶花 、野丁香 、
小黄树 、丁香花 ,始载于《植物名实图考》 ,分布于广
西 、云南。其根具有活血调经 、消炎止痛 、降压功能 ,
用于治疗月经不调 、风湿疼痛 、跌打损伤 、偏头痛 、心
慌 、毒蛇咬伤;花果有止咳化痰功能 ,用于百日咳 、慢
性支气管炎 、肺结核;叶有消肿功能 , 敷外伤肿
痛[ 2] 。我们在对中型滇丁香化学成分研究同时 ,对
其抑菌和抗耐药菌株活性进行了研究 ,为进一步研
究和开发中型滇丁香的药用资源提供依据。
1　材料
1.1　中型滇丁香枝干干品用乙醇(90%)提取 ,浓
缩 ,得棕褐色浸膏;
敏感菌株:黄色葡萄菌 、大肠埃希菌 、枯草芽孢
杆菌 、乙型溶血性链球菌;
耐药菌株:金黄葡萄球菌(耐青霉素 G 、苯唑青
霉素 、头孢啉 、氟呱酸 、庆大霉素)、大肠埃希菌(耐青
霉素 G 、苯唑青霉素 、头孢唑啉 、氟呱酸 、庆大霉素);
白色念球菌(耐两性霉素 ,制霉菌素)由贵阳医学院
微生物教研室王和研究组提供 。
培养基:营养琼脂培养基由杭州微生物试剂厂
提供 ,血琼脂培养基 ,沙保罗琼脂培养基由王和研究
组提供。
2　方法
2.1　抑菌试验:取培养基 10毫升分别倾注平板 ,凝
固后成为营养琼脂平板 、血琼脂平板和沙罗琼脂平
板 ,将金黄葡萄球菌敏感菌株与耐药菌株 、大肠埃希
菌敏感菌株与耐药菌株 、枯草芽孢杆菌分别接种与
营养琼脂平板 、乙型溶血链球菌接种于血琼脂平板 ,
白色念球菌接种于沙保罗琼脂平板 ,在平板上打孔 ,
孔径 5毫米 。用 1%的吐温 80 溶液稀释中型滇丁
香浸膏成 20%(g/ml)浓度 ,并将其加满各平板的孔
内;同样的方法以1%的吐温 80溶液和2 u/ml青霉
素做对照 。各培养基平板在普通培养箱内 37 ℃培
养 24小时后观察结果 。以各孔周围的抑菌圈直径 ,
判断试药对该菌种的抑菌作用 ,结果见表 1。
表 1　中型滇丁香抑菌实验结果
Table 1 　The result of the inhibition of Luculia intermedia
Hutch.
菌种 Strain 抑菌圈(mm)＊　Inhibi tion effect
试药
Sample
吐温溶液对照
Tween cont rast
青霉素对照
Penicillium contrast
金黄葡萄球菌敏感菌株
Staphy lococcus aureus
8.8 0 26
金黄葡萄球菌耐药菌株
Resistance to S taphyloc-
occus aureus
0 0 0
大肠埃希菌敏感菌株
Eschericbia coli
9.5 0 0
大肠埃希菌耐药菌株
Resistance to Eschericbia coli
0 0 0
枯草芽孢杆菌
Baci llus subtilis
8 0 44
乙型溶血性链球菌
Streptococcus hemolyt icus
11.5 0 25
白色念球菌
Micrococcus albus
7.5 0 0
注1:＊2次试验结果的均值
40
2.2　最低抑菌浓度(M IC)试验:2%的吐温溶液稀
释中型滇丁香乙醇浸膏并加入营养琼脂 、血琼脂及
沙保罗琼脂培养基内 ,使其浓度(g/ml)分别为 0.01
0.005 0.0025 0.00125 0.001 ,倾注平板内。用无菌
生理盐水稀释金黄葡萄球菌敏感菌株与耐药菌株 、
大肠埃希菌敏感菌株与耐药菌株 、枯草芽孢杆菌 、乙
型溶血性链球菌 、白色念球菌成 1 亿个/ml的菌液 ,
用接种环分别取一环菌液接种于不同浓度培养基上
以及不含中型滇丁香浸膏的培养基上 ,在普通培养
箱内 37 ℃培养 24小时后观察结果 ,以完全无菌生
长的试药最高稀释度作为该试药的最低抑菌浓度 ,
结果见表 2。
表 2　中型滇丁香最低抑菌浓度(MIC)结果
Table 2　The result of the minimum inhibitory concentration of
Luculia intermedia Hutch.
菌种St rain 药物浓度 T he Concentration Sample
0.01 0.005 0.0025 0.00125 0.001 对照 MIC
金黄葡萄球菌敏感菌株
Staphylococcus aureus
- - + + + + 0.005
金黄葡萄球菌耐药菌株
Resistance to Staphy loc-
occus aureus
+ + + + + + >0.01
大肠埃希菌敏感菌株
Eschericbia coli
+ + + + + + >0.01
大肠埃希菌耐药菌株
Resistance to Escheri-
cbia coli
+ + + + + + >0.01
枯草芽孢杆菌
Bacillus subti lis
- + + + + + 0.01
乙型溶血性链球菌
Streptococcus hemoly ticus
- + + + + + 0.01
白色念球菌
Micrococcus albus
+ + + + + + >0.01
注2:+:有菌生长 , -:无菌生长。
2.3　最低杀菌浓度(MBC):取 M IC 试验中无菌生
长的接种细菌处琼脂 ,接种于含不同试药的琼脂培
养基上 ,在普通培养箱 37 ℃培养 24小时后观察结
果 ,以培养基上细菌的生长情况判断试药对该菌种
的杀菌作用 ,以完全无菌生长的试药最高稀释度作
为最低杀菌浓度 ,结果见表 3。
3　讨论
3.1　中型滇丁香乙醇浸膏对金黄葡萄球菌敏感菌
株 、枯草芽孢杆菌 、乙型溶血型链球菌 、白色念球菌
具有抑菌或杀菌的作用 ,对大肠埃希菌敏感菌株未
见明显抑菌和杀菌作用 。其中对金黄葡萄球菌敏感
菌株最低抑菌浓度为 0.005 g/ml最低杀菌浓度大
于 0.01 g/ml;对枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度为
0.01 g/ml ,最低杀菌浓度大于 0.01 g/ml;对乙型溶
血型链球菌的最低抑菌浓度为0.01 g/ml ,最低杀菌
浓度为 0.01 g/ml;对白色念球菌最低抑菌浓度为
0.01 g/ml ,最低杀菌浓度大于 0.01 g/ml。
表 3　中型滇丁香最低杀菌浓度(MBC)结果
Table 3　The result of the minimum beat concentration
菌种 St rain 药物浓度(g/ml)
The Concent rat ion Sample
M BC
0.01 0.05
金黄葡萄球菌敏感菌株
S taphylococcus aureus
+ + >0.01
枯草芽孢杆菌
Baci llus subt il is
+ >0.01
乙型溶血性链球菌
Micrococcus a lbus
+ >0.01
注3:+:有菌生长 , -:无菌生长。
3.2　中型滇丁香乙醇浸膏以青霉素为对照时 ,对大
肠埃希菌 、白色念球菌敏感菌株的抑菌效果明显;对
金黄葡萄球菌 、大肠埃希菌的耐药菌株没有抑制作
用 。
3.3　随着新型抗菌药物的不断问世 ,几乎所有的细
菌感染性疾病都能够容易的治愈 ,但是这种乐观的
局面由于耐药菌株的出现而发生了变化 ,由于长期
使用某一种抗生素的环境下选择性的出现了一些互
不相关的耐药菌株 ,对很多抗生素具有内在的耐药
性;同时在长期的使用抗生素的环境使耐药菌株得
以选择性的发展[ 3] 。
耐药问题已经成为全球关注的一个重点 ,对中
草药抗耐药菌株活性的筛选研究 ,可以充分利用我
国中草药资源 ,同时也有可能扩展对抗耐药菌株研
究的领域 ,是一个值得探索的方向。
参考文献
1　侯宽昭.中国种子植物科属词典.北京:科学出版社 , 1982
2　吴征镒.新华本草纲要.上海:上海科技出版社 , 1991 , 430
3　吴　铨 ,任美端.抗菌药物细菌耐药性监测报道(Ⅰ).中
国药事.1993 , 7(2):119～ 120
412002　Vo1.14　No.5 康文艺等:中型滇丁香抑菌及抗耐药菌株作用的研究 　　　　　　　　　
INHIBITATION AND ANTIBIOTIC RESISTANCE TO BACTERIA
OF LUCULIA INTERMEDIA HUTCH.
KANG Wen-y i1 , YANG Xiao-sheng2 ,ZHAO Hong-fang1 ,HAO Xiao-jiang 1＊
(1.Chinese Academy of sciences Kunming Institute of Botany State Key Laboratary of
Phytochemistry and Plant Resources in West China , Kunming　650204 , China;
2.The Key Laboratory of Chemistry for Natural Products of Guizhou Prov ince and
Chinese Acdemy of Sciecnes , Guiyang　50002 , China)
Abstract　The inhibitation and antibio tic resistance to bacteria of the extact f rom Lucul ia intermedia Hutch.)
were provided by the method of plate culture.There were S taphylococcus aureus , Eschericbia coli , Bacil lus sub-
ti lis , S treptococcus and hemoly ticus and Micrococcus albus that can be inhibi ted , especially the effect to inhibita-
tion of Eschericbia coli and Micrococcus albus were superior to the penicillium as the contrast.There w ere no ef-
fect to the antibio tic resistance of S taphylococcus aureus and Eschericbia coli.
Key words　Luculia intermedia Hutch.;Inhibi tation;Antibiotic Resistance
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