全 文 ：样品溶液分别在 0 d, 1 d, 2 d, 3 d, 4 d进样 , 测定峰面积 ,
RSD为 0. 34 。 C.重复性试验 , 精密称取 3 号样品 5. 0 g 4
份 , 测定苍术内酯Ⅲ的含量 , RSD为 1. 38 。 D. 加样回收率
试验 , 精密称取 5份已测含量的党参药材粉末 5. 0 g, 加入苍
术内酯Ⅲ 0. 40 mg, 按 2. 4. 2项处理样品后 , 测定含量 , 结果
平均回收率为 103. 65 。
A
B
图 3　党参样品 (A)和苍术内酯 Ⅲ (B)的 HPLC 图
(ELSD), 峰 1为苍术内酯Ⅲ
F ig. 3　 Sam ple ofRadix Codonopsis (A) and a trac tyleno lide
Ⅲ (B) ofHPLC(ELSD), peak 1:atractylenolideⅢ
3　讨　论
3. 1　由表 3可知 , 甘肃华亭县和陇西县产党参 Codonopisis
P ilosulu (F ranch) Nannf中苍术内酯Ⅲ的含量均较高。苍术
内酯Ⅲ在植物界分布较局限 ,过去只发现存在于菊科植物和
金粟兰科植物中 ,在桔梗科植物党参中 , 苍术内酯Ⅲ是重要
的特征性成分 ,对于党参类生药的品质评价以及从化学系统
学的观点探讨桔梗科与菊科的亲缘关系均具有一定的意义。
苍术内酯Ⅲ的存在 ,可作为党参的一个重要鉴别和质量评价
手段 [ 2] 。 ELSD与 PAD所检测的结果基本一致 , 苍术内酯Ⅲ
在 220 nm 处有最大吸收 , 因此这两种方法均可作为党参中
苍术内酯Ⅲ的含量测定方法 ,而且这两种方法均简单 、可靠 、
准确 , 具有一定的实用性。
3. 2　我们研究的 10个不同产地 、不同采集时间党参样品与
党参对照药材指纹图谱之间的相似度都在 90 以上 ,说明研
究的指纹图谱具有比较好的稳定性和重复性。 用指纹图谱
峰面积进行相似度计算 , 既考虑了各个峰所代表组分的含
量 , 又考虑了各个峰的保留时间 , 这样的指纹图谱有定性和
定量双重意义 ,特征性好。通过测定 , 我们将党参的指纹图
谱评价标准定为有 25个特征峰 , 这 25个特征峰的紫外光谱
图应同本文的紫外光谱图 , 其中 11号峰为苍术内酯Ⅲ , 其含
量为 5 ～ 100 μg g - 1。 本文研究的白条党参样品指纹图谱
可作为白条党参药材极性部分的特征图谱。
参考文献:
[ 1] 　中华人民共和国药典一部 [ S] . 北京:化学工业出版社 , 2000.
233
[ 2] 　王峥涛 ,徐国均 ,难波恒雄 ,等.党参中苍术内酯Ⅲ的 HPLC的
分析 [ J] .中国药科大学学报 , 1991, 23(1):48-50.
水团花的指纹图谱质量控制研究
朱华旭 1 , 　闵知大 2
(1.南京中医药大学植物药研究与新药开发中心 ,江苏 南京 210029;2.中国药科大学天然药化教研室 ,江苏
南京 210009)
收稿日期:2004-07-30
基金项目:“九五 ”国家科技攻关重中之重项目—淫羊藿等 10种中药标准品研究。
作者简介:朱华旭(1972～ ),女 ,博士 ,助理研究员,从事天然药物化学和中药质量标准的研究。电话:025-86798393。
关键词:水团花;指纹图谱;反相高效液相色谱法
摘要:目的:建立中药水团花的指纹图谱质量分析方法 ,以确保该药材的质量稳定性。方法:运用反相高效液相色谱法 ,
对所收集的主产地 6批药材进行了指纹图谱测定。以 Agilen tZORBAX Ex tend C18柱(4. 6 mm ×250 mm)为分析柱 ,甲醇-
水(23∶77)为流动相 , 258 nm下检测。结果:RP-HPLC法的精密度 、稳定性和重现性良好 ,图谱中主要色谱峰均达到了基
线分离。结论:方法简单 ,准确可靠 , 可控性强 ,可以作为中药水团花指纹图谱质量控制的一种有效 、可行的方法。
中图分类号:R284. 1　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2005)07-0748-03
F ingerpr int for the quality control ofAdina pilulifera (Lam. )Franch. ex Drake
ZHU Hua-xu1 , 　M IN Zh i-da2
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中 成 药
Chine se T raditiona l PatentM ed icine
Ju ly 2005
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(1. The Cen ter for Botan ica l S tud ies, Nan jingU niversi ty of TCM , Nan jiang, J iangsu, 210029 , Ch ina;2. D epartm en t ofNa tura lM ed icina l Chem istry,
Ch ina Pha rmaceu tica lUn iversity , Nan jing 210009 , Ch ina)
KEYWORDS:Adina pilu lifera (Lam. )Franch. ex D rake;finge rprin t;RP-HPLC
ABSTRACT:AIM:To study an ana ly tica lme thod of finge rprin t forAdina pilulifera (Lam. )Franch. ex Drake in
order to ensure the quality o f thismed icina lm ateria.l METHODS:RP-HPLC was used to de tect 6 batches of th is
medicina lmaterial co llected inma in production areas. The experimen tw as carried ou t by using A gilen t ZORBAX
Ex tend C18 co lumn (4. 6 mm ×250 mm), me thanol:water (23∶77) and 258 nm. RESULTS:This RP-HPLC
me thod w as accurate, stable and reproducib le, and the main peaks in the spectrum were all separated pe rfectly.
CONCLUSION:The deve lopedme thod is simple, accurate and operable, and can be used to con tro l the qua lity
of Ad ina pilulifera (Lam. )F ranch. ex D rake e fficiently and feasib ly.
　　水团花(Adina pilulifera (Lam. )F ranch. ex D rake)为茜草
科水团花属 (Ad ina Salisb. )植物 , 异名水黄凿 (《陆川本
草》),溪棉条(《福建中草药》), 水杨梅 , 水蓼花 (广东), 假
马烟树(海南)。水团花属有 3种 , 国外分布于日本和越南;
我国有 2种 , 分布于广东 、海南 、广西 、福建 、江西 、浙江和贵
州 , 分别为水团花和细叶水团花 (Adina rubella H ance)[ 1] 。
水团花产于长江以南各省区;生于海拔 200 ～ 350 m山谷疏
林下或旷野路旁 、溪边水畔 [ 1] 。全株可治家畜瘢痧热症 , 木
材供雕刻用。根系发达 , 是很好的固堤植物 [ 2] 。水团花具有
清利湿热 , 消瘀定痛 ,止血生肌的功效 , 主治痢疾 , 肠炎 , 湿热
浮肿 , 痈肿疮毒 ,湿疹 , 烂脚 ,溃疡不敛 , 创伤出血 [ 2] 。
水团花的根含乌檀苷 (Naucleoside)、β-谷甾醇 、去甲丁
子香宁(Noreugenin)及棕榈酸。此外还含生物碱 、黄酮苷 、
挥发油 、鞣质 、氨基酸 、还原糖。 叶含皂苷 、β-谷甾醇 、豆甾
醇。茎含奎诺酸(Quinov ic ac id)、莫洛酸 (M orolic ac id)、桦
皮酸(Be tu lin ic acid)、辛可利酸(C incho licacid)[ 3] 。
根据课题要求 , 本文运用高效液相色谱法对所收集的主
产地 6批药材进行了指纹图谱研究 [ 4 , 5] , 初步制定了该药材
的指纹图谱质量控制的方法。
1　药材 、仪器和试剂
药材:本题收集了 6批药材 ,批次与产地见表 1。
仪器:W ate rs 515泵 , W ate rs 2487检测器;W ate rs 600泵 ,
W aters 996 检测器。 Rheodyne进样器 , W ate rs工作站及
WDL-95工作站 ,色谱柱:ZORBAX Ex tend C18柱(Ag ilent)。
表 1　 药材批次与产地
批次 产地 采集时间
1 浙江 2001年 05月
2 浙江 2001年 10月
3 广西 2000年 04月
4 广西 2000年 11月
5 广西 2001年 05月
6 广东 2001年 10月
　　甲醇为色谱纯 (江苏淮阴塑料制品厂精细化工研究
所),水为重蒸馏水 , 其余试剂均为分析纯。
2　对照品来源及纯度检查
对照品 Noreugen in为自制 , 经 IR、MS、1H-NMR、13C-NMR
谱鉴定为 Noreugen in。经对照品纯度检查 , 表明其纯度 >
98 。
3　色谱条件的选择
色谱柱:Ag ilent ZORBAX Ex tend C
18
柱(5 μm , 4. 6 mm ×
250 mm);柱温:25°C。
流动相:以甲醇-水系统为流动相进行色谱分析 , 经试验
研究表明 ,甲醇-水比例为 23:77时 , 采集时间为 70 m in, 样
品中各峰分离较好;样品中 Noreugenin达基线分离。故选用
甲醇-水(23∶77)。流速为 1. 0 mL m in- 1。
测定波长:根据紫外吸收光谱 , 药材甲醇液的最大吸收
波长为 325 nm和 258 nm , 258 nm检测到的色谱峰较 325 nm
明显增多 , 灵敏度较高 ,且对照品 Noreugenin在此条件下检
测到的色谱峰灵敏度亦较高 , 故选用 258 nm。
4　提取条件的选择
4. 1　提取方法的选择
取批 3药材 , 打成细粉 (过 40目筛),分别取 5份 , 精密
称定 ,比较两种提取方法 (超声和回流), 不同提取时间对色
谱图的影响。筛选百分含量大于 3 的色谱峰作为特征峰 ,
将其与含量最高的色谱峰进行比较 , 计算相对保留时间和相
对峰面积 ,分析结果可知 ,样品超声与回流提取差别不大 ,超
声 30 m in提取已较完全 , 故以超声 30 m in提取。
4. 2　提取溶剂的选择
取批 3药材 , 打成细粉 (过 40目筛),分别取 4份 , 精密
称定 ,分别以不同比例的甲醇-水作为提取溶剂 , 比较 4种提
取溶剂对色谱峰的影响。 样品同等条件下以超声 (功率
250kW , 频率 50kH z)30 m in处理。分析结果知 , 样品以甲醇
提取较好 ,且简便易行。故应选择甲醇提取。
4. 3　药材用量的选择
取批 3药材 , 打成细粉 (过 40目筛),分别取 3份 , 精密
称定 ,分别以甲醇提取 , 比较不同药材用量对色谱峰的影响。
样品同等条件下以超声(功率 250 kW ,频率 50 kH z)30 m in
处理。分析结果知 ,样品应选择 0. 5 g药材提取。
根据上述试验结果 , 具体提取方法确定为:取药材粉末
(过 40目筛)0. 5 g, 精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入甲
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醇 10 m L, 精密称定 , 超声提取 30 m in, 补重。 取上清液 2
mL,离心 , 即得。
5　稳定性试验
药材(批 3)取 1份 , 按药材提取方法制备成样品液 , 0,
1, 2, 4, 10, 12, 24, 48 h测 1次 , 共测 8次。结果表明 ,样品中
各特征色谱峰在 48 h内稳定。其保留时间均在平均保留时
间的 ±1 m in内 , 峰面积 RSD( )均≤5 ,符合规定。
6　精密度试验
药材(批 3)取 1份 , 按药材提取方法制备成样品液 , 连
续进样 5次。 结果表明 , 样品中各特征色谱峰峰面积 RSD
( )均≤5 , 保留时间均在平均保留时间的 ±1 m in内 , 符
合规定。
7　重现性试验
药材 6批(详见表 1), 各取 1份 , 按药材提取方法制备
成样品液 , 每批进样 2次。 结果表明 , 样品中各特征色谱峰
峰面积 RSD( )均≤5 , 保留时间均在平均保留时间的 ±
1 m in内 ,符合规定。
8　药材测定结果
药材 6批(详见表 1), 每批取 1份 ,按药材提取方法制
备成样品液 ,依法检测 , 检测结果见图 1,分析结果见表 2和
表 3。
结果分析以同一液相条件下检测到的共有峰为基础 ,筛
选百分含量大于 3 的色谱峰作为特征峰 ,作为质量控制的
考察对象。结果表明:百分含量大于 3 的共有色谱峰为六
个 ,其含量之和大于 80 ;各检测图谱以峰面积最大的色谱
峰(即 3号峰)为参照 , 将其峰面积和保留时间作为考查指
标 ,计算图谱中各特征峰的相对保留时间和相对峰面积 , 结
果见表 2。根据计算结果 ,初步确定样品中各特征色谱峰相
对峰面积和相对保留时间的比值范围 , 结果见表 3。
对照品 Noreugenin的保留时间为 64. 1 m in;通过多图谱
比较知 ,药材特征指纹图谱中 6号峰为 Noreugenin的色谱
峰;指纹图谱中 1 ～ 5号峰有待进一步测定。
表 2　 药材特征指纹图谱的检测结果
峰号 批 1 批 2 批 3 批 4 批 5 批 6
1 0. 52 /0. 145 0. 54 /0. 152 0. 54 /0. 151 0. 54 /0. 156 0. 54 /0. 154 0. 54 /0. 158
2 0. 86 /0. 078 0. 86 /0. 088 0. 86 /0. 080 0. 86 /0. 080 0. 86 /0. 080 0. 86 /0. 081
3 1 /1 1 /1 1 /1 1 /1 1 /1 1 /1
4 1. 12 /0. 112 1. 12 /0. 108 1. 12 /0. 114 1. 12 /0. 111 1. 12 /0. 113 1. 12 /0. 109
5 1. 40 /0. 060 1. 40 /0. 057 1. 40 /0. 061 1. 40 /0. 059 1. 40 /0. 060 1. 39 /0. 059
6 4. 78 /0. 114 4. 82 /0. 122 4. 82 /0. 142 4. 83 /0. 142 4. 81 /0. 127 4. 79 /0. 130
　　注:表中各项为相对保留时间 /相对峰面积。
图 1　药材指纹图谱的 HPLC图谱
表 3　 药材特征指纹图谱的比值范围
峰号 相对保留时间比值 相对峰面积比值
1 0. 43 - 0. 65 0. 122 -0. 184
2 0. 69 - 1. 03 0. 065 -0. 097
3 1 1
4 0. 90 - 1. 34 0. 089 -0. 133
5 1. 12 - 1. 68 0. 047 -0. 071
6 3. 85 - 5. 77 0. 104 -0. 156
参考文献:
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