全 文 ：165． 4 (C － 7) ，160． 8 (C － 9) ，159． 8 (C － 5) ，156． 6 (C － 4) ，
147． 7 (C － 2) ，136． 5 (C － 3) ，130． 0 (C － 2，6) ，122． 1 (C －
1) ，115． 9 (C － 3，5) ，104． 5(C － 10) ，97． 9 (C － 6) ，92． 5 (C
－ 8) ，56． 5 (－ OCH3)。以上波谱数据与文献［4］一致，确定化合
物为鼠李柠檬素。
2． 2． 5 化合物 5 白色针晶(M eOH ) ，mp 245 ～ 246 ℃。UV
(MeOH)λmax:300，248 nm ，显示异黄酮特征吸收，加入醋酸
钠后带Ⅱ红移 6 nm，示有 7 －羟基。1H NMR (DMSO － d6) :δ
10． 79 (1H，s，7 － OH ) ，8． 34 (1H，s，H －2) ，7． 97 (1H，d，J
= 8． 7 Hz，H － 5) ，7． 50 (2H，d，J = 8． 7 Hz，H － 2，6) ，
6． 98 (2H，d，J = 8． 7 Hz，H －3，5) ，6． 93 (1H，dd，J = 8． 7，
2． 1 Hz，H －6) ，6． 86(1H，d，J = 2． 1 Hz，H － 8) ，3． 79(3H，
s，－ OCH3)。以上波谱数据与文献
［5］一致，确定化合物为芒柄花
素。
2． 2． 6 化合物 6 黄色针晶(甲醇) ，mp 278 ～ 280 ℃． 1H NMR
(DMSO － d6) :δ 8． 15 (2H，d，J = 8． 9 Hz，H － 2，6) ，7． 16
(2H，d，J = 8． 9 Hz，H －3，5) ，6． 78 (1H，d，J = 2． 2 Hz，H －
8) ，6． 39(1H，d，J = 2． 2 Hz，H －6) ，5． 49 (1H，d，J = 7． 5 Hz，
H －1″)． 4． 94 (1H，d，J = 5． 1 Hz，H －1″) ;13C NMR (DMSO －
d6) :156． 8(C －2) ，134． 4(C －3) ，178． 2(C －4) ，161． 4(C － 5) ，98．
5(C －6) ，165． 7(C － 7) ，92． 8(C － 8) ，156． 4(C － 9) ，105． 6(C －
10) ，124． 1(C －1) ，131． 1(C － 2，6) ，116． 2(C － 3，5) ，159． 6(C
－4) ，101． 2(C － 1″) ，74． 6(C － 2″) ，77． 1(C － 3″) ，70． 5(C － 4″) ，
77． 5(C －5″) ，61． 3(C －6″) ，100． 5(C －1″) ，73． 6(C －2″) ，76． 9(C
－3″) ，70． 2(C －4″) ，78． 1(C － 5″) ，61． 4(C － 6″)． 以上波谱数
据与文献［6］一致，确定化合物为沙苑子苷。
2． 3 样品对羟自由基的清除实验 采用水杨酸法［7］测定化合物
6 清除自由基的能力。在 5ml的容量瓶中依次加入 9 mmol /L Fe-
SO4 溶液 1 ml，9 mmol /L的水杨酸乙醇溶液 1 ml，不同浓度的待
测溶液 1 ml，最后加入 9 mmol /L 的 H2O21 ml 启动反应，最后用
乙醇定容至 5ml。将反应体系置于 37℃反应 30 min后，以乙醇做
参比，在 510 nm测定吸光度。由于待测样品本身有吸光度，以 9
mmol /L FeSO4 溶液 1 ml，9 mmol /L的水杨酸乙醇溶液 1 ml，待测
溶液 1 ml，用乙醇定容后作为待测溶液的本底吸收值。清除率计
算公式如下:
清除率(%)=［1 －(A1 － A2)/A0］× 100%式中:A0为未加待
测溶液时的吸光度;A1为加入待测溶液后的吸光度;A2为待测溶
液的本底吸收值。
2． 4 样品对羟自由基的清除能力 结果见表 1。
表 1 化合物 6 对羟自由基的清除能力
编号 浓度 C /mg． ml － 1 清除率(%)
1 1． 5 10． 99
2 0． 75 12． 96
3 0． 375 6． 57
由表 1 可知，化合物 6 对羟自由基有一定的清除能力。
3 讨论
从沙苑子 95%的乙醇提取物中分离得到 6 个化合物，其中 1
个首次从该属中分离得到，化合物 6 有一定清除羟基自由基的能
力。通过以上研究发现，沙苑子中含有较多黄酮和甾醇类化合
物，有可能是其药理作用的物质基础。本研究为进一步开发利用
沙苑子提供了一定依据。
参考文献:
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活性的研究［J］． 时珍国医国药，2008，19(2) :326．
收稿日期:2010-04-30; 修订日期:2010-10-15
基金项目:国家自然科学基金(No． 39870900) ;香港科技创新署粤港合作计划项目(No． GHP / 022 /06)
作者简介:吴科锋(1980-) ，男(汉族) ，广东湛江人，现任广东医学院助理研究员，硕士学位，主要从事抗肿瘤药物生化药理教研工作．
半边旗提取物 5F － Na盐注射液制备
及其对小鼠 S180型肉瘤抑制作用研究
吴科锋1，吕应年1，刘 义1，李立1，George ． G． Chen2，梁念慈3
(1．广东天然药物研究与开发实验室，广东 湛江 524023; 2． 香港中文大学，香港 沙田;
3． 广东医学院生物化学和分子生物学研究所，广东 湛江 524023 )
摘要:目的 制备5F － Na盐注射液，并考察其对荷 S180型肉瘤小鼠肿瘤的抑制作用。方法 用0． 5 mol·L
－1 NaOH使半边旗
提取物 5F完全溶解，稀 HCl调节 pH值为 7． 4，加入磷酸盐缓冲液(PBS)稳定 pH值并定容，灭菌，分装。高效液相色谱法测
定 5F － Na盐注射液中 5F的含量，其标示量为 10 mg·ml －1。将所制备的 5F － Na盐注射液分为高、中、低 3 个剂量组(25，
50，100 mg·kg －1)，以小鼠 S180型肉瘤实体瘤和腹水瘤为模型检测其体内抗癌活性。结果 所制备 5F － Na盐注射液为微黄
色澄清透明液体。5F － Na 盐注射液 25，50，100 mg·kg －1 3 个剂量组对 S180型肉瘤实体瘤的抑制率分别为(16． 53 ± 4．
90)%，(48． 13% ± 11． 09)%，(63． 04 ± 6． 76)%，对腹水瘤的生命延长率分别为(42． 24 ± 25． 66)%，(74． 55 ± 23． 31)%，
(141． 86 ±13． 91)%。结论 该研究用的 5F － Na盐注射液制备方法简单可靠，对小鼠 S180型肉瘤的生长有明显抑制作用。
关键词:5F － Na盐注射液; 制备; S180肉瘤; 抗肿瘤
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 03． 011
中图分类号:R283;R285． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2011)03-0546-03
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 3 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 3
Preparation of 5F －Na Injection and Its Antitumor Effect on S180 Sarcoma in vivo
WU Ke-feng1，LV Ying-nian1，LIU Yi1，LI Li1，G． G． Chen2，LIANG Nian-ci3 ．
(1． Guangdong Key Lab for Research and Development of Natural Drugs，Zhanjiang，524023，China;2． De-
partment of Surgury，The Chinese University of Hong Kong，Shatin，NT，Hong Kong，3． Institute of Biochemistry
and Molecular Biology，Guangdong Medical College，Zhanjiang 524023，China)
Abstract:Objective To prepare 5F － Na injection and observe the antitumor effect on S180 sarcoma in mice treated with 5F －
Na injection in vivo．Methods 5F was dissolved in 0． 5mol·L －1 NaOH，PH value was adjusted to 7． 4 by diluted HCl，phosphate
buffer solution was added to keep the stability of pH value and metered volume，sterilized，subpackaged． The 5F － Na injection
were divided into three groups:25 mg·kg －1(low) ，50 mg·kg －1(median) ，100 mg·kg －1(high)． The antitumor activity in
mouse model with transplanted S180 solid tumor or ascites tumor was detected． Results The 5F － Na injection was yellowish，
transparent and fransparent liquid． The labeled amount was 10 mg·ml －1 ． After treated with 5F － Na injection ip，the tumor inhi-
bition rates of low ，middle，high dose groups were (16． 53 ± 4． 90)%，(48． 13 ± 11． 09)%，(63． 04 ± 6． 76)%，respectively，
and the prolonging life rates of low，median，high dose groups were (42． 2 ± 25． 7)%，(74． 55 ± 23． 31)%，(141． 86 ±
13． 91)%，respectively． Conclusion The preparation method of 5F － Na injection is simple and reliable． The 5F － Na injection
can inhibit the growth of subcutaneous transplanted S180 sarcoma in mice．
Key words:5F － Na injection;Preparation;S180;Antitumor
半边旗(Pteris semipinnata L．，PSL)属凤尾蕨科植物，广泛分
布于我国南方各省，民间常用于治疗蛇伤、外伤出血、菌痢、肠炎、
肝炎等。本课题组在筛选抗肿瘤植物药时发现，半边旗的乙醇及
水提取物显示良好的体内外抗肿瘤活性［1］，通过进一步分离纯
化出二萜类化合物 5F(化学结构名为 Ent － 11α － hydroxy － 15 －
oxo － kaur 16 － en － 19 － oic acid，结构式如图 1 所示) ，发现其对
多种癌细胞均有不同程度杀伤作用［2 ～ 5］。但该化合物难溶于水，
不利于进一步开展体内实验研究，因此如何增加该化合物水溶性
是我们所必须解决的问题。通常增加化合物水溶性有通过加入
表面活性剂进行助溶、使化合物成盐或做成包合物等方法［6］。
从 5F的结构上看其存在一个羧基，因此将其做成盐溶液的方法
简单易行。
图 1 5F结构式
1 仪器与材料
1． 1 仪器 高效液相色谱(Angilent LC － 1200) ，磁力搅拌器(上
海医械专机厂) ，pH 计(METTLER 320 － S) ，酶标仪(BIO － TEK
ELX 800)。
1． 2 药物与试剂 小鼠 S180型肉瘤细胞由本实验室保存，二萜类
化合物 5F及 5F对照品均由本实验室提供，RPMI － 1640 培养基
(美国 Gibco 公司产品) ;小牛血清(杭州四季青工程有限公司) ;
除甲醇为色谱纯外，其余试剂均为分析纯。
1． 3 动物 KM 小鼠，雌雄各半，体质量 18 ～ 22g，由广东医学院
实验动物中心提供。
2 方法
2． 1 5F － Na注射液制备方法
2． 1． 1 处方 5F 10． 0 g，滴加 0． 5 mol·L －1 NaOH 溶解，稀 HCl
调 pH值 7． 2 ～ 7． 4，以 pH 值范围为 7． 2 ～ 7． 4 的磷酸盐缓冲液
(PBS)定容至 1 000 ml。
2． 1． 2 5F － Na 注射液制备 取 5F，用少量蒸馏水混悬，滴加适
量 0． 5 mol·L －1 NaOH 使 5F 完全溶解，适量稀 HCl 中和过量的
碱，边搅拌边滴加，至 pH 值 7． 4 左右，加入 pH 值范围为 7． 2 ～
7． 4的 PBS缓冲液，定容。0． 45 μm 微孔滤膜过滤，在 100 级洁净
条件下，分装，100℃流通蒸气灭菌 30min，即得。
2． 1． 3 测定 5F － Na注射液的含量 对照品储备液:精密称取 5F
对照品 25 mg，加适量甲醇溶解，转入 25 ml 量瓶中，加甲醇定容
至刻度，即为 5F 对照品储备液 1 mg·ml －1。供试品溶液:精密
量取半边旗注射液 2． 5 ml，放入 25 ml 量瓶中，加甲醇定容至刻
度，即得到含量 100 mg·L －1的供试品溶液。色谱条件及系统适
应性:流动相为甲醇 －水 －冰醋酸(55∶ 45∶ 0． 045) ;流速 1． 0 ml
·min －1，紫外检测波长 254 nm;室温。在上述色谱条件下，取 5F
对照品和供试品溶液各 10μl 进样。长期稳定性考察:取分装好
的 3 批 5F － Na溶液样品，在室温条件下放置，进行 12 个月的留
样考察。
2． 1． 4 S180小鼠实体瘤抑瘤率实验 取腹腔接种 S180细胞株 9 d
生长良好的腹水瘤源小鼠，抽取腹水，生理盐水悬浮，计数并调节
细胞浓度为 1． 0 × 107 个 /ml。KM清洁级小鼠 50 只，每鼠 0． 2 ml
细胞悬液接种于右腋皮下。接种 24 h后随机分 4 组，每组 10 只，
并给药:荷瘤空白组(给生理盐水)、5Fu 组(50 mg·kg －1)、5F －
Na 25 mg·kg －1组、5F － Na 50 mg·kg －1组、5F － Na 100 mg·
kg －1组，腹腔注射给药，1 次 /d，连续 10 d。停药次日取材并处死
小鼠。剥离并摘取右腋下生长的肿瘤组织，称重。
肿瘤抑制率(%)= 对照组平均瘤重 －给药组平均瘤重
对照组平均瘤重
×
100%
2． 2 S180小鼠腹水瘤生命延长率实验 取腹腔接种 S180细胞株 9
d生长良好的腹水瘤源小鼠，抽取腹水，生理盐水悬浮，计数并调
节细胞浓度为 1． 0 × 107 个 /ml。KM 清洁级小鼠 50 只，每鼠 0． 2
ml细胞悬液，接种于小鼠腹腔。接种 24h后随机分 4 组，每组 10
只，并给药:荷瘤空白组(给生理盐水)、5Fu组(50mg·kg －1)、5F
－ Na组(25 mg·kg －1)、5F － Na 组(50 mg·kg －1)、5F － Na 组
(100mg·kg －1) ，腹腔注射给药，1 次 /d，连续 10 d。观察 60 d
后，处死小鼠。
生命延长率(%)=
给药组平均生存时间 －对照组平均生存时间
对照组平均生存时间
× 100%
2． 3 统计学分析 实验数据以 珋x ± s 表示，采用 SPSS 13． 0 统计软
件包 One Way Anova进行统计学处理，P ＜ 0． 05 表示差异有统计
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL ． 22 NO． 3 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 3 期
学意义。
3 结果
制备所得 5F － Na盐注射液为微黄色澄清透明的液体，分装
后，每支 5F － Na盐注射液的标示量为 10 mg·ml －1。
3． 1 高效液相色谱图分析 比较 5F 对照品与 5F － Na盐注射液
的液相色谱图，如图 2 所示。5F － Na 盐注射液液相色谱图中的
物质峰保留时间，与对照品 5F 完全相同，且在同一浓度下，进样
相同体积，峰面积基本相当，证明 5F － Na 盐注射液中主要成分
仍为 5F。
3． 2 标准曲线的制备 精密称取 5F 参照品用甲醇溶解，配成 1
mg·ml －1的储备液，吸取储备液用甲醇稀释成 5 ，10 ，20 ，40 ，
80 ，160 μg·ml －1系列浓度的对照品溶液，按色谱条件进行测
定。以峰高为纵坐标(Y) ，对应的浓度为横坐标(X)作工作曲
线，线性方程为 Y = 578． 241 91X + 2． 500 22 ，r = 0． 999 7 。该
方法在 5 ～ 160 μg·ml －1范围内呈良好线性关系。
图 2 5F(a)和 5F － Na(b)盐注射液的液相色谱图
3． 3 5F － Na盐注射液中的 5F含量测定 按 5F － Na盐注射液制
备方法制备 5F － Na盐注射液 6 批。并按上述色谱条件测定，测
得的峰高代入线性方程计算含量。结果见表 1。6 批样品的相对
标示量均在 90% ～110%之间，符合相关规定。
表 1 5F － Na 注射液含量测定结果
样品
标示量
C /mg·ml － 1
测得 5F含量
C /mg·ml － 1
相对标示量
(%)
均值
(%)
RSD
(%)
1 10． 00 9． 882 98． 82
2 10． 00 10． 054 100． 54
3 10． 00 10． 122 101． 22 100． 51 2． 18
4 10． 00 10． 450 104． 50
5 10． 00 9． 934 99． 34
6 10． 00 9． 862 98． 62
n =6
3． 4 长期稳定性考察 分别于第 0 个月，第 3 个月，第 6 个月，第
9 个月和第 12 个月取样，考察其性状、pH 值及含量，结果发现其
澄明度及 pH值无变化。结果见表 2。
3． 5 5F － Na盐注射液对 S180小鼠实体瘤的抑瘤率 5F － Na 25，
50，100 mg·kg －1剂量组与空白对照组相比，均能有效减轻肿瘤
的重量，使肿瘤的生长受到抑制(P ＜ 0． 05) ，抑瘤率分别为:
(16． 53% ± 4． 90)%，(48． 13% ± 11． 09)%，(63． 04% ±
6． 76)%，100 mg·kg －1与 50 mg·kg －1剂量组的抑瘤率要远高
于 25 mg·kg －1剂量组的抑瘤率，且差异有显著性(P ＜ 0． 05)。
结果见图 3。
表 2 5F － Na注射液长期稳定性实验结果
样品
含量(相对标示量%)
第 0 月 第 3 月 第 6 月 第 9 月 第 12 月
1 99． 34 99． 34 99． 32 99． 35 99． 31
2 101． 22 101． 21 101． 23 101． 26 101． 23
3 100． 54 100． 52 100． 56 100． 51 100． 52
3． 6 5F － Na盐注射液对 S180小鼠腹水瘤的生命时间的影响 5F
－ Na 25，50，100 mg·kg －1剂量组的平均生存时间分别为19． 8，
24． 3，33． 7 d，明显高于对照组的 13． 9 d，生命延长率分别为:
(42． 24% ± 25． 66)%，(74． 55% ± 23． 31)%，(141． 86% ±
13． 91)%，呈明显的剂量 －效应关系，且组间差异有显著性(P ＜
0． 05)。结果见图 4。
4 讨论
半边旗提取物 5F属于典型的四环二萜类化合物在水中的溶
解性差，溶解度仅为 1． 24 mg·L －1。我们过去研究在体外研究
5F的抗癌作用，主要用 1‰的二甲基亚砜(DMSO)溶解，但 DMSO
不适宜作为注射剂的溶媒在体内应用，不利于 5F 体内药效学研
究的开展。由于 5F结构上有羧基的存在，故采用加碱成盐的办
法，增大其在水中的溶解度。在制备盐溶液的过程中，考虑到化
合物在强碱溶液中结构易被破坏，因而在制备时，先将化合物用
少量蒸馏水混悬，然后再缓缓滴加氢氧化钠溶液，降低该化合物
结构被破坏的可能性。制备后，经液相检测表明 5F 在制备过程
中几无损失，说明该法能用于制备开展体内药效学研究的 5F －
Na注射剂，且方法简单易行。
与 25 mg·kg －1剂量组比较，* P ＜ 0． 05
图 3 5F － Na对小鼠 S180肉瘤实体瘤的抑制作用
与 25 mg·kg －1剂量组比较，* P ＜ 0． 05
图 4 5F － Na对荷 S180肉瘤腹水瘤小鼠生命延长率的影响
尽管半边旗提取物 5F在体外能有效杀伤多种癌细胞，且效
价要略优于 5 －氟尿嘧啶(5Fu)相当。但 5F 制成 Na 盐注射液
后，是否会因结构被破坏而丧失其抗肿瘤活性或能否在体内荷瘤
动物上有效。因此本实验通过考察 5F － Na盐注射液对荷 S180型
肉瘤小鼠的实体瘤抑瘤作用及腹水型瘤的生命延长作用。结果
发现低、中、高 3 个剂量组的 5F － Na盐注射液在体内均有明显的
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 3 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 3
抗肿瘤作用(P ＜ 0． 05) ，这说明 5F制成 5F － Na盐注射液后仍然
能保持其原有的抗肿瘤活性，且对体内荷瘤小鼠的肿瘤生长有明
显的抑制作用。
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收稿日期:2010-05-19; 修订日期:2010-10-25
基金项目:国家自然科学基金 (No． 30873364) ;
吉林省科技厅科研项目(No． 200905109) ;
吉林省教育厅“十一五”科研项目(No． 2008 － 167，2008 － 170)
作者简介:刘质净(1983-) ，女(汉族) ，黑龙江齐齐哈尔人，现为黑龙江中
医药大学在读硕士研究生，学士学位，主要从事天然产物化学研究工作．
* 通讯作者简介:刘春明(1964-) ，女(汉族) ，吉林通化人，现任长春师范
学院教授，博士学位，主要从事天然产物化学研究工作．
玄参中苯乙醇苷化合物的高效逆流色谱技术分离
刘质净2，李 丽1，桂语歌1，闫 静2，刘春明1*
(1．长春师范学院，吉林 长春 130032;2．黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)
摘要:目的 应用高效逆流色谱技术分离玄参中的苯乙醇苷化合物。方法 采用高效逆流色谱，以醋酸乙酯∶ 正丁醇∶ 乙
醇∶ 水(1∶ 1∶ 0． 1∶ 2)为溶剂体系，分离玄参中的苯乙醇苷类化合物，流速 3 ml /min，检测波长 320 nm。结果 分离得到
麦角甾苷和安格洛苷 C化合物纯度达 90%以上。结论 应用高效液相色谱技术和电喷雾质谱可快速鉴定化合物结构。
关键词:高效逆流色谱; 玄参; 苯乙醇苷化合物
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 03． 012
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2011)03-0549-03
Isolation and Purification of Phenylethanoid Glycosides from the Scrophularia ningpoensis
by High － performance Counter － current Chromatography
LIU Zhi-jing2，LI Li1，GUI Yu-ge1，YAN Jing2，LIU Chun-ming1*
(1． The Central Laboratory，Changchun Normal University，Changchun 130032，China;2． Heilongjiang Universi-
ty of Traditional Chinese Medicine，Harbin 150040，China)
Abstract:Objective To isolate and purify two phenylethanoid glycosides，acteoside and angroside C from the Scrophularia ning-
poensis by high － performance counter － current chromatography(HPCCC)．Methods The HPCCC solvent system was consisted of
ethyl acetate － n － butanol － ethanol － water (1:1:0． 1:2，v:v:v:v) ，the flow rate was at 3． 0 ml /min，and the effluent was detec-
ted at 320nm． Results Acteoside and angvoside were isolated with purity at over 90% ． Conclusion The structures can be identi-
fied by HPLC and ESI － MSn in the negative mode．
Key words:HPCCC; S． ningpoensis; Henylethanoid glycosides
玄参为玄参科植物玄参 Scrophularia ningpoensis Hemsl．的干
燥根，是常用的传统道地药材之一［1］。玄参又名元参、黑参、浙
玄参，始载于《神农本草经》，列为中品，性微寒，味甘、苦、咸，归
肺、脾、肾经，具有凉血滋阴、泄火解毒等功效，可用于热病烦渴，
发斑，骨蒸劳热，夜寐不宁，自汗盗汗，津伤便秘，吐血衄血，喉咙
肿痛，痈肿，瘰疬等症［2］。
高效逆流色谱技术(High － performance counter － current chro-
matography，HPCCC)是一种新型的液液色谱技术，可以在短时间
内实现目标化合物的高效分离和制备，并且可以达到几千个理论
塔板数［3，4］。由于其不同于高效液相色谱，不使用固相载体作为
固定相，从而克服了固相载体带来的样品吸附、损失、污染和峰形
脱尾等缺点［5］，具有回收率高，制备量大等优点，是一种理想的
制备分离手段［6］。目前尚未见应用高效逆流色谱技术分离玄参
中苯乙醇苷化合物的报道。本文采用高效逆流色谱技术分离了
玄参中的两种苯乙醇苷化合物，即麦角甾苷和安格洛苷 C，并根
据液相色谱的保留时间和电喷雾质谱碎裂规律鉴定了化合物的
结构。
1 试剂与仪器
玄参 Scrophularia ningpoensis 药材购于北京同仁堂药店(长
春分店) ;HPCCC所用试剂均为分析纯试剂，购于北京北化精细
化学品有限责任公司;HPLC 所用试剂为色谱纯试剂(Laborato-
riesL，加拿大) ;麦角甾苷(Acteoside)从车前子药材中分离制
备［7］;水为超纯水(18． 2ΩPa) ，0． 45μm滤膜(安捷伦公司)。
高效逆流色谱(Spectrum HPCCC，England，Dynamic extrac-
tion) ;逆流色谱泵(Smartline Pump 100，Germany，KNAUER ) ;检
测器 (Smartline UV Detector 2500，Germany，KNAUER )。高效液
相色谱实验采用 Agilent Technology 1100 Series HPLC 系统，二极
管阵列检测器(photodiode array detector，DAD) ;Phenomenex ODS
－ C18色谱柱 (150 mm ×4． 6 mm，5 μm)和 C18保护柱。质谱分
析采用 Finngan LCQ ion － trap 电喷雾离子阱质谱(MAT，San Jo-
se，CA，USA)。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL ． 22 NO． 3 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 3 期