全 文 ：摘　要：目的 观察半边旗提取物5F对荷S 肉瘤小鼠的抗肿瘤作用及炎症因子影响。方法 建立荷S 肉瘤腹水瘤180 180
及实体瘤小鼠模型，随机分为生理盐水组、5-Fu组及低、中、高剂量5F组；采用腹腔注射给药，末次给药后处死小鼠，
记录腹水瘤小鼠的生存时间，检测实体瘤小鼠的抑瘤率、白细胞数、胸腺指数、脾指数及血清IL-1、IL-6、TNF-α和瘤
内TNF-α水平。结果 低、中、高剂量5F组小鼠的中位生存时间分别为(15.4±0.5)、(21.4±1.3)和(28.2±0.7) d，明显高
于生理盐水组(P<0.05)。5F组瘤重明显低于生理盐水组(P<0.05)；中、高剂量5F对胸腺指数、脾指数、IL-1、IL-6及
TNF-α水平有明显抑制作用(P<0.05)，但对白细胞数无明显影响。结论 5F可有效抑制小鼠荷S 肉瘤的生长，可能与下180
调炎症因子表达有关。
关键词：半边旗；炎症因子；肿瘤
中图分类号：R 965 文献标识码：A 文章编号：1005-4057(2011)04-0355-04
DOI: 10.3969/j.issn.1005-4057.2011.04.001
355
第 29 卷第 4 期
2011 年 8 月
广 东 医 学 院 学 报
JOURNAL OF GUANGDONG MEDICAL COLLEGE
Vol. 29 No. 4
Aug. 2011
Abstract： Objective To observe the role of 5F from Pteris semipinnata L. in antitumor activity and inflammatory
cytokines S sarcoma-bearing mice. Methods Mouse models with S ascites and solid sarcoma were divided into normal 180 180
saline (NS), 5-Fu, and low, middle and high dose 5F groups. The mice were sacrificed after the last peritoneal administration. The
survival time was recorded in ascites sarcoma mice, while the inhibitory rate, WBC, thymus index (TI), spleen index (SI), serum
levels of IL-1, IL-6 and TNF-α, and intratumoral content of TNF-α were detected in solid sarcoma mice. Results The median
survival time of low, middle and high dose 5F groups were (15.4±0.48), (21.4±1.28), and (28.2±0.73) days, respectively, and
they were superior to those in NS group (P<0.05). Tumor weight in 5F groups was significantly lower than that in NS group
(P<0.05). Compared with NS group, TI, SI, and levels of IL-1, IL-6 and TNF-α decreased (P<0.05), but WBC showed no
change in middle and high dose 5F groups. Conclusion 5F can inhibit the growth of S transplanted-tumor in mice, which 180
might be related to down-regulation of inflammatory cytokines.
Key words: Pteris semipinnata L.; inflammatory cytokine; tumor
半边旗(Pteris semipinnata L., PsL)为凤尾属蕨类 定了几种有效成分，其化学结构皆为二萜类化合
植物，广泛分布于中国南方各省，民间常用于治疗 物，其中以5F(化学结构为11α-羟基-15-氧-16-烯-对
蛇伤、外伤出血、细菌性痢疾、肠炎、肝炎等。我 映贝壳杉烷-19-酸，简称Psl5F)含量最高。课题组发
课题组发现它具有明显的抗肿瘤作用，并分离和鉴 现Psl5F能抑制多种癌细胞的生长，初步探讨了其作
用机制，包括下调NF-κB的活性、下调Bcl-2及Bcl-
xL的表达、上调Bax的表达和刺激p38 MAPK的活性
[1-3]
等 。我们从体外实验发现Psl5F杀伤多种癌细胞
的效价要优于5-氟尿嘧啶(5Fu)，但体内的抗肿瘤活
性是否优于传统药物，是否与传统的抗肿瘤药物同
样存在抑制免疫功能的作用，是我们需要继续深入
半边旗提取物5F下调炎症因子表达对荷S 肉瘤小鼠的抗肿瘤活性的影响180
1 2 1 1 3 3 2
吴科锋 ，何太平 ，刘　义 ，吕应年 ，陈　功 ，赖宝山 ，梁念慈 （1.广东天然药物研究与开发
实验室，广东湛江 524023；2.广东医学院生物化学与分子生物学研究所研究所，广东湛江 524023；3.香
港中文大学外科学系，香港沙田）
Down-regulation of inflammatory cytokines induced by 5F from Pteris semipinnata L. in
antitumor activity in S sarcoma-bearing mice180
1 2 1 1 3 3 2
WU Ke-feng , HE Tai-ping , LIU Yi , LV Ying-nian , CHEN Gong , LAI Bao-shan , LIANG Nian-ci
(1. Guangdong Key Lab for Research and Development of Natural Drugs, Zhanjiang 524023, China)
基金项目：国家自然科学基金项目(No.39870900)；香港科
技创新署粤港合作计划项目(No.GHP/ 022 /06)；
东莞市科技计划项目(No.2008108101042)
收稿日期：2011-03-15；修订日期：2011-05-06
作者简介：吴科锋 ( 1980－)，男，硕士，助理研究员。
通讯作者：梁念慈 ( 1940－)，男，教授。
研究的内容。 法分别检测血清IL-1、IL-6、TNF-α和瘤内TNF-α
水平。分别向IL-1、IL-6和TNF-α单抗包被的96 孔
1　材料和方法
酶标板每孔加入标准品稀释液或待检样本10 μL，
并设空白对照和标准曲线孔。各试剂稀释浓度和步1.1　材料
骤按试剂盒操作说明进行，终止反应后即用酶标仪Psl5F注射液(标示量为98%)由本实验室制备；
于490 nm处测定相应的吸光度(A)，绘制标准曲线，超级无支原体新生牛血清购自杭州四季青生物材料
根据标准曲线方程求得样品中相关细胞因子浓度。有限公司；RPMI-1640、胰酶购自美国Gibco公司；
1.4　统计学处理ELISA 试剂盒为R&D公司产品，其余试剂均为国产
采用SPSS 13.0 统计软件进行统计学分析，数据 分析纯。荷S 肉瘤细胞由本实验传代保存；昆明种180
±s用表示，采用单因素方差分析及q检验，以P (KM)小鼠100只，雌雄各半，体质量为18～22 g，由
<0.05为差异有统计学意义。广东医学院实验动物中心提供(SCXK2008-0008)。
1.2　仪器
2　结果
实验主要仪器包括电子天平、二氧化碳培养箱
(Thermo Forma MODEL 3111)、 酶 标 仪 (BIO-TEK 2.1　Psl5F对荷S 肉瘤腹水瘤小鼠生存时间的影响 180
ELX 800)和电子显微镜(NIKON E400)。 Psl5F低、中、高 剂量组的中位生存时间分别为
1.3　方法 (15.4±0.5)、(21.4±1.3)、(28.2±0.7) d，均明显高于
1.3.1　Psl5F对荷S 肉瘤腹水瘤小鼠的治疗实验 取 生理盐水组的(9.5±0.5) d，差异有统计学意义(P< 180
腹腔接种S 细胞株9 d生长良好的腹水瘤源小鼠， 0.05)。而5Fu组的中位生存时间则达到 (28.7±0.5) 180
抽取腹水，生理盐水悬浮，计数并调节细胞浓度为 d，与Psl5F高剂量组荷瘤小鼠的中位生存时间基本
7
1.0×10 个/mL，每鼠0.2 mL细胞悬液，接种于小鼠 相当。
腹腔。接种后24 h将小鼠随机分5组，每组10只，分 2.2　Psl5F对荷S 肉瘤实体瘤小鼠抑瘤率、WBC、180
成生理盐水组(阴性对照，9 g/kg)、5Fu组(阳性对 TI和SI的影响
给药结束后，Psl5F各剂量组瘤重与生理盐水照，25 mg/kg )、Psl5F低、中、高剂量组(25、50、
2组相比，均有不同程度的减轻(P<0.05)，其抑瘤率100 mg/kg)。腹腔注射给药，每日1次，连续10 d。
分 别 为 (16.53±15.34)%、 (48.13±18.14)%和 (63.04 自接种癌细胞开始，统计各组小鼠的生存时间，未
±20.37)%；Psl5F高剂量组的效价与5Fu 2组比较差死亡小鼠记录至30 d止。
异无统计学意义；与生理盐水2组相比，不同剂量的1.3.2　Psl5F对荷S 肉瘤实体瘤小鼠的抑瘤作用　180
Psl5F对TI和SI均有不同程度的抑制，但仅中、高剂荷S 肉瘤细胞于小鼠腹腔内培养7 d后，无菌条件180
量差异有统计学意义(P<0.05)；而对WBC则无明显下抽取腹腔内瘤细胞，无菌生理盐水洗涤3次，3 000
影响，组间比较差异亦无统计学意义 (P>0.05)，这r/min离心5 min，细胞沉淀用生理盐水调整瘤细胞密
7
与5Fu强烈抑制白细胞数量有明显区别，详见表1。度为1×10 个/mL，接种于小鼠右腋皮下，每只小鼠
2.3　 Psl5F对 荷 S 肉 瘤 实 体 瘤 小 鼠 IL-1、 IL-6和接种0.2 mL，于接种后24 h将小鼠随机分5组，每组 180
TNF-α的影响10只，分成生理盐水2组(阴性对照，9 g/kg)、5Fu
从各组荷S 肉瘤实体瘤小鼠中取血清及瘤组织2组(阳性对照，25 mg/kg )、Psl5F低、中、高剂量 180
进行ELISA检测发现，与生理盐水2组比较，Psl5F各2组(25、50、100 mg/kg )。各组小鼠每天腹腔注射
剂 量 组 与5Fu 2组 相 类 似 ， 对 血 清 中 IL-1、 IL-6和给药，连续10 d，末次给药后24 h，将小鼠称重，眼
TNF-α的水平均有明显抑制的作用，且能明显降低眶取血并处死小鼠，计数白细胞(white blood cell，
瘤内的TNF-α水平，差异有统计学意义 (P<0.05)，WBC)，解剖摘取胸腺、脾脏及瘤块，用滤纸吸干
详见表2。后称重，计算胸腺指数(thymus index，TI)，脾指数
(spleen index，SI)和抑瘤率。
3　讨论
1.3.3　ELISA法测定Psl5F对荷S 肉瘤实体瘤小鼠180
细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α的影响　分别取各组 尽管Psl5F在体外已证实能对多种癌细胞有强烈
荷S 肉瘤实体瘤小鼠血清，采用酶标仪以ELISA方 的抑制和杀伤作用，但体外抗癌实验所受的干扰因180
x
356 广 东 医 学 院 学 报 2011 年 第 29 卷
表2 Psl5F对荷S 肉瘤实体瘤小鼠IL-1、IL-6和TNF-α的影响 ( ，μg/L，n=10)180
组别
血清 瘤内
a b
与生理盐水2组比较： P<0.05；与5Fu2组比较： P<0.05。
表1 Psl5F对荷S 肉瘤实体瘤小鼠瘤重、WBC、TI和SI的影响 (n=10)180
a b
与生理盐水2组比较： P<0.05；与5Fu2组比较： P<0.05。
　
组别
生理盐水2组
5Fu2组
Psl5F低剂量2组
Psl5F中剂量2组
Psl5F高剂量2组
瘤重(g)
2.16±0.57
a
0.95±0.22
a
1.79±0.37
a
1.22±0.31
a
0.80±0.29
9
WBC(10 /L)
5.22±0.22
a
2.37±0.61
b
4.96±0.45
b
5.11±0.27
b
5.34±0.36
TI(mg/kg)
2.91±0.28
a
1.86±0.12
b
2.73±0.35
ab
2.27±0.49
a
1.96±0.28
SI(mg/kg)
6.07±0.32
a
3.73±0.24
b
5.78±0.41
ab
5.46±0.37
ab
5.21±0.45
生理盐水2组
5Fu2组
5F低剂量2组
5F中剂量2组
5F高剂量2组
IL-1
98.72±17.65
a
76.32±16.17
ab
100.19±16.16
ab
85.27±14.85
a
75.34±11.35
IL-6
82.65±7.32
a
59.32±6.13
ab
77.10±10.16
ab
65.27±8.85
a
52.34±6.37
TNF-α
58.62±7.41
a
36.16±6.25
ab
50.19±6.16
ab
45.36±8.8
ab
31.62±3.62
TNF-α
102.41±17.36
a
71.11±9.23
ab
90.10±10.16
ab
83.27±7.13
a
72.34±6.02
x±s
素较为单一，与体内真实环境存在很大差异，因此 NF-κB是连接炎症与肿瘤之间的关键位点，在多种
选取较常用的荷S 肉瘤为实验瘤种、昆明种小鼠为 实体肿瘤中均发现NF-κB的活化，在结肠炎相关的180
造模对象，将含有一定数量的荷S 肉瘤细胞悬液接 结肠癌和DEM诱导的肝细胞癌动物模型中发现，IL-180
种于小鼠腋下及腹腔，制成移植性荷实体瘤和荷腹 6的生成依赖于NF-κB，且有证据显示下调IL-1、IL
[5-7]
水瘤模型。由于腹腔注射给药可能对体内腹水瘤实 -6 及TNF-α的表达，可抑制NF-κB的活化 。同
验结果造成干扰，但肌肉注射和尾静脉注射刺激性 时 亦 有 研 究 表 明 ， IL-1、 IL-6及 TNF-α 水 平 的 升
大，不利于持续性给药，有资料显示，腹水瘤模型 高，可能介导了肿瘤恶液质导致的机体代谢紊乱，
以腹腔注射给药的生命延长率超过50%，也可以视 进而诱发体重减轻和恶病质的形成，抑制NF-κB的
[4]
为体内有明显的抗肿瘤活性作用 。综合考虑，本 活化能防止肿瘤恶液质致的心脏收缩功能障碍和萎
[8-10]实验以腹腔注射给药进行生命延长实验，结果表 缩 。TNF-α亦可通过激活NF-κB，转录调节
-1 -1
明：当Psl5F剂量为50、100 mg·kg ·d 时，均能明 cyclin D1 表达，加快细胞周期从G0/G1 期向S 期转
显抑制荷S 肉瘤实体瘤小鼠的肿瘤生长及延长荷腹180 换，导致细胞周期调节紊乱，促进癌症的发生，抑
水瘤小鼠的生存时间，且生命延长率超过100%，这 制IL-6、TNF-α的水平能抑制肿瘤生长和降低其迁
[11-12]说明Psl5F在小鼠体内有明显抗肿瘤作用。与经典抗 移能力 。我们过去的实验结果显示，Psl5F能显
[13]肿瘤药物氟尿嘧啶(5Fu)相比，Psl5F的抗肿瘤效价有 著抑制NF-κB的活性，诱导癌细胞发生凋亡 ，说
所不如，这与我们体外抑癌实验发现Psl5F对多个瘤 明Psl5F的抗肿瘤作用可能与通过下调炎症因子IL-
株的抑制作用与5Fu效价相当，甚至在某些瘤株的效 1、IL-6及TNF-α水平介导的NF-κB信号通路途径
价要优于5Fu的结果有较大差异。 有关。
通过比较Psl5F与5Fu对免疫器官及白细胞数量
参考文献：
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造血功能障碍和骨髓抑制不是其主要的不良反应， ent-11alpha-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid in
anaplastic thyroid carcinoma cells is via a mitochondrial-但仍有可能对免疫系统有抑制作用。有文献指出，
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358 广 东 医 学 院 学 报 2011 年 第 29 卷
医学期刊的论文中，引用英文文献的比例很高，但有不少作者将英、美人的姓名搞错，以至用光盘核
对时出现错姓、错名或姓名全错。英、美人姓名的习惯写法是：名-名-姓，“名”可以有1个、2个或3个，
但“姓”只有1个。因此，从书籍或期刊中姓名转录到文献时，要将次序调整为姓-名-名。姓是不可以简写
的；“名”可以缩写，用第一个字母大写，不用缩写点。数据库在著录作者姓名时，已经调整为姓-名-名，
可照录。
本刊编辑部
参考文献中英文作者名的著录方法