全 文 ：　［收稿日期］　２０１２－０９－１６；２０１２－１０－１４修回
　［基金项目］　贵州省中药现代化产业专项子项目“苗药头花蓼病虫害无害化防治技术研究”，“贵州省地道中药材病虫害调查及重要病虫防
治技术研究”［黔科合中药专字（２００３）５２］；贵州省农业科技攻关项目“黔北撑绿竹根茎腐烂病成因及防控技术研究”［黔科合字
ＮＹ（２０１１）３０５０］
　［作者简介］　苏　凯（１９８６－），男，在读硕士，研究方向：植物病害综合防治。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｗｙｕａｎｆｅｎｔｉａｎｋｏｎｇ＠１６３．ｃｏｍ
　＊通讯作者：桑维钧（１９６３－），男，教授，从事植物病理学及植物病害综合防治技术研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｊｓａｎｇ＠１６３．ｃｏｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１２）１２－０７３６－００９５－０３
头花蓼枯萎病的病原鉴定及室内毒力测定
苏 凯１，桑维钧１＊，王 慧１，杨尚华２，潘滴滴３
（１．贵州大学 农学院，贵州山地农业病虫害重点实验室，贵州 贵阳５５００００；２．贵州威门药业股份有限公司，贵州
贵阳５５００２５；３．贵州省镇远县农业局，贵州 镇远５５７７００）
　　［摘　要］近年来贵州施秉县头花蓼发生一种枯萎病，该病害分布广、危害严重，已经成为影响当地头花
蓼生产的潜在威胁。为了控制该病害的发生与危害，对头花蓼典型发病组织进行了病原菌分离鉴定和回接
试验。结果表明，分离到的３种病原菌分别是弯孢属菌（Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ　ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ）、立枯丝核菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ
ｓｏｌａｎｉ）和厚垣镰孢霉菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｃｈ　ｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｕｍ）。经过接种试验，仅厚垣镰孢霉菌能引致与田间病害
一致的症状，结合形态鉴定和ＩＴＳ序列分析，初步确定该菌是头花蓼枯萎病的致病菌。室内抑菌试验表明，
杀菌剂咪鲜胺、多菌灵、百菌清和恶霉灵对其有较好的抑制作用。
［关键词］头花蓼；厚垣镰孢霉；病原鉴定；毒力
［中图分类号］Ｓ４３１．１８ ［文献标识码］Ａ
Ｐａｔｈｏｇｅｎ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｆｕｓａｒｉｕｍ　Ｗｉｌｔ　ａｎｄ　Ｉｎｄｏｏｒ　Ｔｏｘｉｃｉｔｙ
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｃａｐｉｔａｔｕｍ
ＳＵ　Ｋａｉ，ＳＡＮＧ　Ｗｅｉｊｕｎ１＊，ＷＡＮＧ　Ｈｕｉ　１，ＹＡＮＧ　Ｓｈａｎｇｈｕａ２，ＰＡＮ　Ｄｉｄｉ　３
（１．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｍｏｕｎｔａｉｎｏｕｓ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｐｅｓｔｓ　ａｎｄ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ，Ｇｕｉｚｈｏｕ５５００００；２．Ｗｅｉｍｅｎ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ＣＯ．Ｌ　ＴＤ．，Ｇｕｉｚｈｏｕ５５００２５；３．Ｚｈｅｎｙｕａｎ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｂｕｒｅａｕ，Ｚｈｅｎｙｕａｎ，Ｇｕｉｚｈｏｕ５５７７００，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｒｅｃｅｎｔ　ｙｅａｒｓ　Ｆｕｓａｒｉｕｍｗｉｌｔ　ｈａｄ　ａ　ｗｉｄｅ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｅｖｅｒｅ　ｄａｍａｇｅ　ｔｏ　Ｐ．ｃａｐｉｔａｔｕｍｉｎ
Ｓｈｉｂｉｎｇ　Ｃｏｕｎｔｙ　ｉｎ　Ｇｕｉｚｈｏｕ，ｗｈｉｃｈ　ｈａｄ　ａｌｒｅａｄｙ　ｂｅｅｎ　ｔｈｅ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｔｈｒｅａｔｅｎ　ｔｏ　ｌｏｃａｌ　Ｐ．ｃａｐｉｔａｔｕｍ
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｉｎ　ｔｙｐｉｃａｌ　ｄｉｓｅａｓｅｄ　ｔｉｓｓｕｅ　ｏｆ　Ｐ．ｃａｐｉｔａｔｕｍ　ｗａｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ
ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ａｎｄ　ａ　ｔｉｅ－ｂａｃｋ　ｔｅｓｔ　ｗａｓ　ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｔｈｅ　ｏｃｃｕｒａｎｃｅ　ａｎｄ　ｄａｍａｇｅ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ
ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｐａｔｈｏｇｅｎｓ　ｗｅｒｅ　Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ　ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ，Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ　ｓｏｌａｎｉ　ａｎｄ　Ｆｕｓａｒｉｕｍｃｈ
ｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｕｍ．Ｔｈｅ　ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ　ｔｅｓｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｏｎｌｙ　Ｆ．ｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｕｍ　ｃｏｕｌｄ　ｃａｕｓｅ　ｓｙｍｐｔｏｍ　ｉｎ
ａｃｃｏｒｄａｎｃｅ　ｗｉｔｈ　ｆｉｅｌｄ　ｄｉｓｅａｓｅ．Ａｆｔｅｒ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ＩＴＳ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ，ｉｔ　ｗａｓ
ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙ　ｃｏｎｃｌｕｄｅｄ　ｔｈａｔ　Ｆ．ｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｕｍ ｗａｓ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ　ｂａｃｔｅｒｉｕｍ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｓｉｓ　ｔｅｓｔ　ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔ　ｐｒｏｃｈｌｏｒａｚ，ｃａｒｂｅｎｄａｚｉｍ，ｃｈｌｏｒｏｔｈａｌｏｎｉｌ　ａｎｄ　ｈｙｍｅｘａｚｏｌ　ｈａｄ　ｐｒｅｆｅｒａｂｌｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ａｃｔｉｏｎ　ｏｎ　Ｆ．
ｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｕｍ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｃａｐｉｔａｔｕｍ；Ｆｕｓａｒｉｕｍｃｈ　ｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｕｍ；ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｔｏｘｉｃｉｔｙ
　　头花蓼是石竹目、蓼科、蓼属植物，喜阴湿生境，
野生种类丰富。全草入药，对泌尿系统疾病有独特
疗效，也可作饲料使用，广泛分布于中国江西、贵州、
湖南、湖北、四川、广东、广西、西藏。贵州苗药头花
蓼ＧＡＰ规范化种植与试验示范基地，于２００１年在
贵州省施秉县牛大场镇开始建设，位于清水江水系
潕阳河中游北岸，海拔９８０ｍ，属亚热带季风性气
候，阳光充足，年降水量１　０００～１　２００ｍｍ，年均温
１４．６℃，７月平均气温２４．２℃，１月平均气温３．９℃；
年平均日照１　２００～１　５００ｈ，年平均年总积温高于
３　０００℃，无霜期在２７０ｄ以上；土壤类型为黄壤，微
酸性，土层深厚，肥沃疏松，比较适合头花蓼的栽培
和繁殖。基地建设以来，发展迅速，取得了良好的经
济和生态效益。但自２０１０年以来，该基地发生了一
种新病害，症状表现为枯萎，茎部出现黄褐色病斑，
后变为黑色，叶片变黄枯，植株萎蔫，病害分布范围
广﹑危害严重，已成为当地头花蓼生产上的一个威
胁［１］。由于国内外至今还未有此类中药材病害的报
道，为了控制该病害的发生与危害，笔者对该病进行
了研究，并结合ｒＤＮＡ－ＩＴＳ序列进行鉴定，以期为
防止该病害提供充分的理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 材料
供试病害标本采于施秉县牛大场头花蓼栽培基
地。取基地生长正常的植株在贵州大学农学院植物
病理实验室进行栽培待用。
供试试剂：ＤＮＡ提取试剂盒（上海生物工程技术
　贵州农业科学　２０１２，４０（１２）：９５～９７
　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
服务有限公司），ｒＤＮＡ－ＩＴＳ通用引物（上海生物工程
技术服务有限公司），ＩＴＳ１（５′－ＴＣＣＧＴＡＧＧＴＧＡＡＣ－
ＣＴＧＣＧ－３′）﹑ ＩＴＳ４（５′－ＴＣＣＴＣＣＧＣＴＴＡＧＡＴＡＴＧ
Ｃ－３′）和２×Ｔａｑ　ＰＣＲ　ＭａｓｔｅｒＭｉｘ（上海生物工程技术
服务有限公司）。
供试药剂：２５％的咪酰胺乳油，绩溪农化生物技
术有限公司，９９％的恶霉灵可湿性粉剂，吉林省延边
西爱斯开化学农药厂，８０％的福美双可湿性粉剂，天
津市汉邦植物保护剂有限责任公司，５０％的多菌灵
可湿性粉剂，安徽广信农化集团有限公司，７５％的百
菌灵可湿性粉剂，利民化工股份有限公司［２］。
１．２ 方法
１．２．１ 病原物的分离﹑培养﹑形态观察和致病性
测定 用组织分离法切取４～５ｍｍ的小块病组织，经
过７０％的酒精和０．１％升汞消毒、灭菌水漂洗３次以
后，移在琼胶培养基平板上培养，观察菌落形态。
在实验室和苗圃生长正常的头花蓼上，用根部
创伤接种，室内培养于２５℃人工气候箱中，光照黑
暗交替１２ｈ培养，湿度控制在９０％左右。接种３ｄ
后每间隔４ｄ观察发病情况。观察并显微摄影，记
录孢子和菌丝的形状，测微尺测量孢子的大小。
１．２．２ 病原菌的ｒＤＮＡ－ＩＴＳ序列分析　挑取足量
病原菌丝体，于液氮冷却状态下研磨成粉末，用真菌
基因组ＤＮＡ提取试剂盒提取ＤＮＡ，ＤＮＡ提取液
直接用于ＰＣＲ扩增，引物由上海生物工程技术服务
公司合成。ＰＣＲ反应体系为２４μＬ，包括：ＩＴＳ１和
ＩＴＳ４各１μＬ，模版１μＬ，灭过菌的双氧水９．５μＬ，
ＴａｑＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ　１２．５μＬ。ＲＣＲ扩增在型扩增
仪上完成，扩增反映程序为：９４℃预变性５ｍｉｎ；
９４℃变性３０ｓ，５１℃退火３０ｓ，７２℃延伸４５ｓ，循环
３３次；最后７２℃延伸１０ｍｉｎ。
ＰＣＲ扩增产物用１．２％琼脂糖凝胶电泳检测，
在凝胶成像系统下观察﹑照相。扩增产物经１．２％
琼脂糖凝胶电泳分离，在紫外灯照射下从凝胶中切
取目的条带，经ＤＮＡ片段回收试剂盒纯化后，由上
海生工生物工程技术服务有限公司测序。测得序列
经Ｂｌａｓｔ在ＧｅｎＢａｎｋ数据库中已知序列进行同源性
比较。根据同源性分析、病原菌形态学特征及致病
性测定结果，鉴定头花蓼枯萎病病原菌归属。
１．２．３ 室内毒力测定　采用生长速率法测定菌丝
生长情况。取在ＰＤＡ培养基平板上２８℃培养５ｄ
的菌种，用直径５ｍｍ的打孔器统一打菌块。培养
皿直径为９ｃｍ。每皿９ｍＬ培养基，将供试药剂稀
释成不同浓度制成ＰＤＡ含药培养基，病菌培养５ｄ
后检查各处理菌的生长情况，十字交叉法量菌落直
径，每处理３次重复，结果取平均值，最后计算相对
抑菌率。
生长抑制率＝［（１－药剂处理菌落直径－５）／
（对照菌落直径－５）］×１００％
计算抑制率几率值和浓度对数值并建立毒力方
程，计算烯酰吗啉对疫霉菌各菌株的抑制中浓度
ＥＣ５０及相关系数ｒ。数据统计用农药室内生物测定
数据处理系统（武汉市蔬菜科学研究所﹑农业部农
药检定所）。
２ 结果与分析
２．１ 病原物的致病性
经过分离培养得到３种病菌，分别通过根部创
伤接种，在温度２５℃左右时，只有一种菌可以在室
内气候培养箱和田间（苗圃）引起发病。在接种前，
头花蓼植株生长旺盛，叶部正面表现为绿色，背面为
红褐色，茎部为浅红褐色；接种后，从头花蓼的叶梢
开始向下逐渐变黄，叶片萎蔫并失去水分，接种３～
５ｄ后，茎部变为黄褐色，并有明显的失水现象，接
种一星期之后，在茎部出现黄褐色病斑，后变为黑
色，叶片变黄枯，植株萎蔫。通过对病部的病菌重新
分离﹑培养，得到相同特征的病菌（图１）。
图１ 头花蓼枯萎病病原菌的田间发病症状和致病性
Ｆｉｇ．１　Ｆｉｅｌｄ　ｓｙｍｐｔｏｍ　ａｎｄ　ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ　ｏｆ　Ｆ．ｗｉｌｔ
２．２ 病菌的培养性状及形态观察
试验结果表明，能导致头花蓼枯萎病的病菌在
ＰＤＡ培养基上菌丝体初为白色，高而茂密（图２－
Ａ），以后变为黄褐色［３］，小型分生孢子很多，矩圆
形，具有０～１个分隔，大型分生孢子纺锤形，顶端细
胞逐渐狭细，基部有脚胞，椭圆状弯曲，有３～４个隔
膜，（１．８～３．８）μｍ×（１８．５～３５．９）μｍ（图２－Ｃ），分
生孢子梗长梗形（图２－Ｂ），厚垣孢子间生，成串（图
２－Ｄ）［４］。初步确定为厚垣镰孢霉菌（Ｆ．ｌａｍｙｄｏｓ－
ｐｏｒｕｍ）。
·６９·
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵 州 农 业 科 学
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
注：Ａ为ＰＤＡ上菌落形态，Ｂ为分生孢子梗形态，Ｃ为分生孢子，Ｄ为厚垣孢子。
Ｎｏｔｅ：Ａ，ｃｏｌｏｎｉａｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｏｎ　ＰＤＡ；Ｂ，ｃｏｎｉｄｉｏｐｈｏｒｅｓ；Ｃ，ｃｏｎｉｄｉｕｍ；Ｄ，ａｋｉｎｅｔｅ．
图２ 头花蓼枯萎病病原菌的显微形态特征
Ｆｉｇ．２　Ｍｉｃｒｏｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｏｆ　Ｆ．ｗｉｌｔ
２．３ 病原菌ｒＤＮＡ－ＩＴＳ序列分析
将病原菌基因组ＤＮＡ经通用引物ＩＴＳ１－ＩＴＳ４
进行扩增，测序后得到４７２个碱基，结果如下：
ＡＴＡＣＣＴＡＴＡＣＧＴＴＧＣＣＴＣＧＧＣＧＧＡＴＣＡＧ
ＣＣＣＧＣＧＣＣＣＣＧＴＡＡＡＡＡＧＧＧＡＣＧＧＣＣＣＧＣＣＣ
ＧＡＧＧＡＣＣＣＣＴＡＡＡＣＴＣＴＧＴＴＴＴＴＡＧＴＧＧＡＡ
ＣＴＴＣＴＧＡＧＴＡＡＡＡＣＡＡＡＣＡＡＡＴＡＡＡＴＣＡＡＡ
ＡＣＴＴＴＣＡＡＣＡＡＣＧＧＡＴＣＴＣＴＴＧＧＴＴＣＴＧＧＣ
ＡＴＣＧＡＴＧＡＡＧＡＡＣＧＣＡＧＣＡＡＡＡＴＧＣＧＡＴＡＡ
ＧＴＡＡＴＧＴＧＡＡＴＴＧＣＡＧＡＡＴＴＣＡＧＴＧＡＡＴＣ
ＡＴＣＧＡＡＴＣＴＴＴＧＡＡＣＧＣＡＣＡＴＴＧＣＧＣＣＣＧＣ
ＣＡＧＴＡＴＴＣＴＧＧＣＧＧＧＣＡＴＧＣＣＴＧＴＴＣＧＡＧＣ
ＧＴＣＡＴＴＴＣＡＡＣＣＣＴＣＡＡＧＣＴＣＡＧＣＴＴＧＧＴＧ
ＴＴＧＧＧＡＣＴＣＧＣＧＧＴＡＡＣＣＣＧＣＧＴＴＣＣＣＣＡＡＡ
ＴＣＧＡＴＴＧＧＣＧＧＴＣＡＣＧＴＣＧＡＧＣＴＴＣＣＡＴＡＧ
ＣＧＴＡＧＴＡＡＴＣＡＴＡＣＡＣＣＴＣＧＴＴＡＣＴＧＧＴＡ
ＡＴＣＧＴＣＧＣＧＧＣＣＡＣＧＣＣＧＴＡＡＡＡＣＣＣＣＡＡＣ
ＴＴＣＴＧＡＡＴＧＴＴＧＡＣＣＴＣＧＧＡＴＣＡＧＧＴＡＧＧＡ
ＡＴＡＣＣＣＧＣＴＧＡＡＣＴＴＡＡＧＣＡＴＡＴＣ
将以上序列用ＧｅｎＢａｎｋ数据库中的Ｂｌａｓｔ功能
进行比对分析，结果显示，与厚垣镰孢霉菌（Ｇｅｎ－
Ｂａｎｋ　ａｃｃｅｓｓｉｏｎ：ＦＪ４２６３９）的ＩＴＳ序列的同源性最
高，达到１００％，最终确认头花蓼枯萎病的病原菌为
厚垣镰孢霉菌。
２．４ 室内毒力测定
研究结果（表）表明，５种供试杀菌剂对厚垣镰
孢霉菌的菌丝生长抑制程度与药剂浓度均呈正相
表 ５种杀菌剂对病菌的抑制效果
　　　　Ｔａｂｌｅ　Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ
ｏｎ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ
药剂
Ｆｕｎｇｉｃｉｄｅ
毒力回归方程
Ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ
ｅｑｕａｔｉｏｎ
ｒ　 ＥＣ５０／
（μｇ／ｍＬ）
咪鲜胺 ｙ＝０．７０３　７ｘ＋５．５２８　５　 ０．９３０　１　 ０．１７７　４
恶霉灵 ｙ＝１．０９８　８ｘ＋４．５１２　０　 ０．９３１　９　 ２．７２７　１
福美双 ｙ＝０．７３９　１ｘ＋４．１３７　１　 ０．９４４　０　 １４．７０３　７
百菌清 ｙ＝０．５３９　６ｘ＋４．８６７　３　 ０．９５６　３　 １．７６１　４
多菌灵 ｙ＝１．３９３　２ｘ＋４．４１６　９　 ０．９６０　７　 ２．６２１　４
关。其中，咪鲜胺、多菌灵、百菌灵、恶霉灵对病菌有
明显的抑制作用，其ＥＣ５０分别为０．１７７　４μｇ／ｍＬ、
１．７６１　４μｇ／ｍＬ、２．６２１　４μｇ／ｍＬ、２．７２７　１μｇ／ｍＬ。
３ 小结与讨论
镰刀属是一种常见植物病原真菌，广泛分布于
自然界中，兼寄生或腐生生活。是人类发现的最重
要的植物病原菌之一。可侵染多种植物（粮食作物、
油料作物、经济作物，药用植物及观赏植物），它们是
植物维管束系统的寄生菌，在适宜的环境条件下，不
但破坏作物的输导组织维管束，且在菌体生长发育
代谢过程中产生毒素危害作物，造成作物萎蔫死亡，
影响产量和品质，严重时可导致产量显著下降。近
２００年来许多科学家不断地对镰刀菌的形态、生理、
致病性等方面进行研究。
通过对施秉县头花蓼病害标本的采集、病原物
分离、形态观察、致病性鉴定和ｒＤＮＡ－ＩＴＳ序列测
序鉴定的结果表明，施秉头花蓼上近年来严重发生
·７９·
　苏　凯 等　头花蓼枯萎病的病原鉴定及室内毒力测定
　ＳＵ　Ｋａｉ　ｅｔ　ａｌ　Ｐａｔｈｏｇｅｎ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｆｕｓａｒｉｕｍ　Ｗｉｌｔ　ａｎｄ　Ｉｎｄｏｏｒ　Ｔｏｘｉｃｉｔｙ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｃａｐｉｔａｔｕｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１２）１２－０７３７－００９８－０３
烤烟漂浮育苗中烟草普通花叶病毒病的传播规律
张 崑１，胡宁贵１，朱 峻１，刘学辉２，张 海１，范成平１，左 锐３＊
（１．安顺市烟草公司，贵州 安顺５６１０００；２．贵州省植物保护研究所，贵州 贵阳５５０００６；
３．贵州省生物技术研究所，贵州 贵阳５５０００６）
　　［摘　要］为弄清大棚漂浮育苗阶段烟草普通花叶病毒病（ＴＭＶ）的传播特点，采用不同接种方法，研究
普通花叶病毒病（ＴＭＶ）的传播特点。结果表明：病毒汁液通过摩擦接种和剪叶器接种均可有效传播
ＴＭＶ，传播率极高；病毒汁液蒸馏水稀释１６０～２　５６０倍均能接种至烟苗，且随着接种浓度的降低烟苗感染
症状逐渐减轻；同时随着剪叶次数的增加，所检测样品的ＯＤ值也逐渐增大，随着剪叶等农事操作的进行，烟
草普通花叶病毒ＴＭＶ快速传播。烟苗叶片带毒量比茎部带毒量高。
［关键词］烟草；漂浮育苗；ＴＭＶ；传播规律
［中图分类号］Ｓ５７２．０４３ ［文献标识码］Ａ
Ｔｏｂａｃｃｏ　Ｍｏｓａｉｃ　Ｖｉｒｕｓ　Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　Ｌａｗ　ｏｆ　Ｆｌｏａｔｉｎｇ　Ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ
ＺＨＡＮＧ　Ｋｕｎ１，ＨＵ　Ｎｉｎｇｇｕｉ　１，ＺＨＵ　Ｊｕｎ１，ＬＩＵ　Ｘｕｅｈｕｉ　２，ＺＨＡＮＧ　Ｈａｉ　１，ＦＡＮ　Ｃｈｅｎｇｐｉｎｇ１，ＺＵＯ　Ｒｕｉ　３＊
（１．Ａｎｓｈｕｎ　Ｔｏｂａｃｃｏ　Ｃｏｍｐａｎｙ，Ａｎｓｈｕｎ，Ｇｕｉｚｈｏｕ　５６１０００；２．Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｇｕｉｙａｎｇ，
Ｇｕｉｚｈｏｕ５５０００６；３．Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ，Ｇｕｉｚｈｏｕ５５０００６，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｆｉｇｕｒｅ　ｏｕｔ　ｔｈｅ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ＴＭＶ （ｔｏｂａｃｃｏ　ｍｏｓａｉｃ　ｖｉｒｕｓ）ｉｎ
ｔｏｂａｃｃｏ　ｆｌｏａｔｉｎｇ－ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｓｔａｇｅ，ＴＭＶ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｂｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ
ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｂｏｔｈ　ｆｒｉｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｕｔｔｉｎｇ　ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ａｂｌｅ　ｔｏ　ｓｐｒｅａｄ　ＴＭＶ
ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ　ｖｅｒｙ　ｈｉｇｈ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｗａｓ　ａｃｈｉｅｖｅｄ　ｗｈｅｎ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｃｕｔｔｉｎｇ．Ｗｉｔｈ　ｄｅｉｏｎｉｚｅｄ　ｗａｔｅｒ
ｄｉｌｕｔｉｏｎ，ＴＭＶ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｏｂａｃｃｏ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｄｉｌｕｔｅｄ　ｂｙ　１６０～２　５６０ｔｉｍｅｓ．Ｔｈｅ
ｄｉｓｅａｓｅ　ｓｙｍｐｔｏｍ　ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ　ｂｙ　ｔｏｂａｃｃｏ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｗａｓ　ｌｉｇｈｔｅｎｅｄ　ｇｒａｄｕａｌｙ，ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ　ｏｆ
ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ　ｄｅｎｓｉｔｙ．Ｈｏｗｅｖｅｒ　ｉｔ　ｂｅｃａｍｅ　ｂｉｇｇｅｒ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｃａｌ　ｄｅｎｓｉｔｙ　ｖａｌｕｅ　ｉｎ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ
ｃｕｔｔｉｎｇ　ｎｕｍｂｅｒｓ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ，ｗｈｉｃｈ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ＴＭＶ　ｗｏｕｌｄ　ｓｐｒｅａｄ　ｒａｐｉｄｌｙ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｃｔｉｏｎｓ
ｓｕｃｈ　ａｓ　ｃｕｔｔｉｎｇ．Ａｎｄ　ｔｈｅ　ｖｉｒｕｓ　ｑｕａｎｔｉｔｙ　ｗａｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｉｎ　ｌｅａｖｅｓ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｓｔｅｍｓ，ｗｈｉｃｈ　ｗａｓ　ｉｍｐｌｉｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ＴＭＶ　ｉｎ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｔｉｓｓｕｅｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｔｏｂａｃｃｏ；ｆｌｏａｔｉｎｇ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ；ＴＭＶ；ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｌａｗ
　　烟草病毒病早在公元１８５７年由Ｓｗｉｅｔｅｎ以烟
草反常现象为特征记载［１］；１８８６年，Ｍａｙｅｒ首次将
烟草上发生的这种反常病害命名为烟草花叶病
“Ｍｏｓａｉｃ”［１－３］；１８９８年，Ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋ首次使用了“传染
性活液（Ｃｏｎｔａｇｉｕｍ　ｖｉｖｕｍｆｌｕｉｄｕｍ）”即“病毒（Ｖｉ－
ｒｕｓ）”来称谓烟草花叶病病原［２－３］；１９３９年，德国科
学家 Ｋａｕｓｃｈｅ等第１次观察到烟草花叶病毒粒
子［２－３］。２０世纪５０年代以后，烟草病毒病先后在世
界各国发生危害并时常暴发流行，给烟草生产造成
了不同程度的损失。烟草普通花叶病（ＴＭＶ）素有
“植物癌症”之称，该病是世界各国烟草生产上重要
的病毒病，给烟叶生产带来了严重的损失，其发生与
危害已成为烤烟优质、适产和高效生产目标的主要
障碍［４－５］。
　［收稿日期］　２０１２－０９－１７；２０１２－１０－２４修回
　［基金项目］　贵州省烟草公司项目“安顺市烟草病毒病防治体系建立”（２００９１８）
　［作者简介］　张　崑（１９６５－），男，助理农艺师，从事烟叶生产及病虫害防治研究。
　＊通迅作者：左　锐（１９６４－），男，副研究员，从事烟草病毒病检测与防治研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｕｏｒｕｉ０９＠
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１２６．ｃｏｍ
的枯萎病害是由厚垣镰孢霉菌引起的。该病害有逐
年上升的趋势，与近年来的过度引种和频繁复种有
关。
试验表明，杀虫剂咪鲜胺、多菌灵、百菌灵和恶
霉灵对厚垣镰孢霉菌均有明显的抑菌效果，具体效
果还有待进行田间防治试验。
［参 考 文 献］
［１］ 李　诚，李俊杰．百合枯萎病病原菌鉴定［Ｊ］．植物病
理学报，１９９６，２６（２）：１９２．
［２］ 朱茂山，关天舒，吕震环，等．１３种杀菌剂对百合枯萎
病菌的室内毒力测定［Ｊ］．农药，２０１０，１５（１０）：７６０－
７６２．
［３］ 郭明霞，贺运春，洪坚平，等．山西省忻州地区土壤镰
刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）种类鉴定［Ｊ］．山西农业大学学报，
２００６，１８（１１）：１７１－１７３．
［４］ 贺 冰，杨莉榕，贺运春，等．山西省重要作物萎蔫病
病原镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）种类的鉴定［Ｊ］．山西农业大
学学报，２００６，２６（２０）：１６８－１７０．
（责任编辑：彭　艳）
　贵州农业科学　２０１２，４０（１２）：９８～１００
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