全 文 :表 4 雷公藤双层片对大鼠巴豆油气囊肿的影响
( x ±s , n=12)
组别 剂量 渗出液量 mL 囊壁重 (mg·g -1)
模型组 生理盐水 5.7±0.9 32.1±5.8
雷公藤双层片组 0.020 4.8±0.5**## 27.2±4.1**##
雷公藤双层片组 0.028 3.7±0.8**## 21.0±2.3**##
雷公藤双层片组 0.040 2.8±0.6** 17.4±2.9**
泼尼松组 40 2.6±0.6** 15.1±2.0**
与模型组比较:* p<0.05 **p<0.01;
与泼尼松组比较:# p<0.05 ##p<0.01
3 讨论
本研究证实雷公藤双层片对常规炎症模型均有
明显的抑制作用 ,它能显著抑制炎性渗出 、组织水肿 、
肉芽组织增生 ,以及降低血浆皮质醇水平 ,且随剂量
增加其作用增强 ,说明雷公藤双层片对炎症各期均有
显著抑制作用 ,其抗炎作用显著 。本研究发现 ,雷公
藤双层片对大鼠佐剂性关节炎亦有显著的抑制作用 ,
该模型是治疗类风湿关节炎的药效学主要模型 ,因此
本结果有一定的药效学参考意义 ,为本品在临床治疗
类风湿性关节炎及其他自身免疫性疾病提供了依据。
本实验表明雷公藤双层片能使佐剂性关节炎大鼠肾
上腺重量增加 ,血浆皮质醇水平升高;泼尼松组却使
佐剂性关节炎大鼠肾上腺重量减轻 ,血浆皮质醇水平
降低 ,这提示雷公藤双层片可调节肾上腺的功能 ,说
明雷公藤双层片的抗炎作用可能与垂体-肾上腺皮
质系统有关 。大鼠佐剂性关节炎是一种 T 细胞介导
的自身免疫性炎症模型 , Ts细胞功能缺陷在大鼠佐
剂性关节炎发病中占重要地位〔4〕 。有研究发现 ,佐剂
性关节炎大鼠非致炎侧踝关节及足爪组织中的前列
环素(PGE2)含量明显增加 , PGE2在免疫调节中起
重要作用 ,能选择性地抑制 Ts细胞 ,使细胞免疫失
调 ,引起组织和器官的损伤 ,这也是类风湿关节炎形
成的重要机制〔5〕 。本实验结果证明 ,雷公藤双层片多
次灌胃给药能明显抑制佐剂性关节炎的继发性病变
(由迟发型超敏反应所致),并能缓解由它引起的全身
病变 ,此外 ,该药使佐剂性关节炎大鼠免疫器官脾脏
重量减轻 , T 淋巴细胞百分率明显降低 ,表明其对免
疫性炎症的作用可能与抑制免疫器官的功能 , 降低
高度活化的巨噬细胞功能(如 PGE2 的水平异常升
高),纠正体内细胞免疫失调有关。
参考文献:
〔1〕 徐叔云 ,卞如濂 ,陈修.药理实验方法学[ M] .北京:人民
卫生出版社 , 1994.906-922.
〔2〕 李仪奎.中药药理实验方法学[ M] .上海:上海科学技术
出版社 , 1991.161-164.
〔3〕 陈奇 ,邓文龙 , 孙瑞元.中药药理实验方法学[ M] .北京:
人民卫生出版社 , 1993.356-360.
〔4〕 Robinson DR , Levinel.Prostaylandin concentrations in sy-
novial fluid in rheuma tic disease In[ M ] .Robinson HJ ,
Vane JR eds.Prostaglandin synthetase inhibitiors.NY ;
Raven , 1989.223-225.
〔5〕 马东来.卡芬尼对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的免疫机
制[ J] .中国免疫学杂志 , 1992 , 8(2):114-116.
(收稿日期:2004-12-26)
习见蓼的利胆 、保肝及抗炎作用
黄勇其1 ,邓炜1 ,叶世芸2 ,莫艳珠1 ,陈秀芬1(1.贵阳中
医学院药理教研室 ,贵州 贵阳 550002;2.贵阳中医学院中药
系 , 贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 观察黔产习见蓼水提物(AE-P)的利胆 、
保肝和抗炎作用 。方法 测定大鼠的胆汁排出量及
胆汁中胆固醇 、胆汁酸 、Ca2+的含量;CCl4 肝损伤小
鼠的血清谷丙转氨酶活性;小鼠二甲苯致耳廓肿胀
度 、腹腔毛细血管通透性 、棉球肉芽肿增生和免疫器
官指数 。结果 AE-P 能明显增加胆汁量 ,并能明显
增加胆汁中总胆汁酸含量及降低胆汁中胆固醇和
Ca
2+含量;能明显降低血清谷丙转氨酶;能明显抑制
耳廓肿胀及毛细血管通透性 ,而不影响免疫器官指
数 ,但对肉芽肿增生无明显影响。结论 AE-P 具有
利胆 、急性肝损伤保护及抗急性炎症反应的作用。
关键词:习见蓼;利胆;保肝;抗炎
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
文章编号:1004-2407(2005)03-0115-03
蓼科植物习见蓼 Polygonum plebeium R.Br.又
称小艹扁蓄 、腋花蓼 ,主产于我国西南 、中南等地区 ,以
全草入药 ,味苦 、性凉 ,归膀胱 、大肠 、肝经 ,具有利尿
通淋 ,清热解毒等功效〔1 , 2〕 。贵州苗族等民间常用其
水煎服治疗胆石症等 ,但其现代药理研究未见报道 。
我们对习见蓼全草水提物(AE-P)的利胆 、抗急性肝
损伤及抗炎作用进行了实验研究。
1 实验材料
1.1 动物 Wistar大鼠和 KM 小鼠 ,均由贵阳医学
院实验动物中心提供 , 合格证号均为:SCXK(黔)
2002-0001。
1.2 药材及其提取物 药材于 6月份(原植物的花
期)在贵阳市清镇采集 ,经贵阳中医学院中药系药用
植物教研室何顺志研究员鉴定 。AE-P 的制备:清洗
原植物 ,全草粉碎成粗粉 ,50℃干燥至恒重 ,取适量 ,
准确称定 ,水提取 ,提取液浓缩后 ,浓缩液加入乙醇 ,
使成含 60 %乙醇的水溶液 ,静置 24 h 后离心 , 离心
液挥干制成干浸膏(提取收率为 6.2 %),临用时配制
成水溶液供试。
1.3 药品 谷丙转氨酶测定试剂盒(改良赖氏法):
四川省迈克科技有限公司 ,批号 20021212;泼尼松
115西北药学杂志 2005 年 6 月 第 20 卷 第 3 期
(Prednisone , Pns)注射液:上海第九制药厂 , 批号
990510。
1.4 仪器 RF -540 荧光分光光度计 ,日本岛津;
721型分光光度计 ,四川分析仪器厂;JN-A 型精密
扭力天平 ,上海第二天平仪器厂。
2 方法与结果
2.1 对大鼠胆汁分泌量及胆汁中成分的影响 取大
鼠 ,雌雄各半 , 200±20 g ,随机分为 4组。各组按表 1
中剂量以 NS或 AE-P 分别依 20 mL·kg-1 ig , 每天 2
次 ,连续 2 d ,d 3 给药 1次(末次给药前大鼠禁食不禁
水12 h),末次给药后 30 min ,各大鼠以 NS 按 2.5
mL 只 ig ,然后用 3 %戊巴比妥钠 1.5 mL·kg-1 ip麻
醉 ,按文献方法〔3〕手术 ,以聚乙烯塑料管作胆总管插
管引流胆汁 ,收集末次给药后 1.5 ~ 4.5 h 的胆汁量。
并分别用分光光度法 、荧光光谱法及络合滴定法测定
胆汁中胆固醇 、总胆汁酸及 Ca2+的含量 。结果见表
1。AE-P 大剂量和中剂量能明显增加胆汁排出量及
胆汁中总胆汁酸含量 ,同时能明显降低胆汁中 Ca2+
含量;另外 , AE-P 大剂量还能明显降低胆汁中胆固
醇的含量 。
表 1 AE-P 对大鼠胆汁排出量及胆汁中成分的影响
( x±s , n=10)
组别 剂量 (g·kg-1)
胆汁量
(mL·h-1·kg-1)
胆固醇
(μmol·mL -1)
胆汁酸
(×103 g·mL-1)
Ca
2+
(×103 g·mL-1)
NS - 2.45±0.48 10.48±1.93 5.50±1.21 5.78±1.70
AE-P 1.24 3.36±0.55** 7.43±2.35* 7.86±1.51** 3.73±1.45*
0.62 3.31±0.54** 8.51±2.32 7.58±1.60* 3.87±1.46*
0.31 2.68±0.45 9.94±2.49 6.82±2.06 4.51±1.52
注:与NS 组比较:* P<0.05; ** P<0.01。
2.2 对 CCl4 急性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶
(ALT)的影响 取小白鼠 , 雌雄各半 , 18 ~ 22 g ,随
机分为 5组 ,各组按表 2中的剂量以 NS 或 AE-P 分
别依 10 mL·kg-1 ig ,每天 1次 ,连续 7 d ,末次给药后
禁食 ,正常组小鼠 ip 大豆油 10 mL·kg-1 ,模型组及
AE- P 组小鼠均 ip 0 .1 %CCl4 大豆 油溶液 1 0
mL·kg-1 ,16 h后取血 ,离心分离血清 ,按文献〔3 , 4〕方
法和改良赖氏法操作 ,用分光光度计于 505 nm 处测
定小鼠ALT 活性 。结果见表 2。AE-P 大剂量和中
剂量能明显降低 ALT 活性的升高 。
表 2 AE-P 对 CCl4 急性肝损伤小鼠 ALT的影响
( x±s , n=10)
组别 剂量 (g·kg-1) ALT (U·L-1)
正常组 - 199±46**
模型组 - 2 478±497
AE-P 1.24 1 778±531*
0.62 1 902±577*
0.31 2 298±949
注:与模型组比较:* P<0.05; ** P<0.01。
2.3 对小鼠炎症反应的影响
2.3.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀及免疫器官指数的
影响 取雄性小白鼠 ,16 ~ 20g ,随机分为 5组 ,各组按
表 3中的剂量以 NS或相应试药分别依10 mL·kg-1 ig ,
每天 2次(泼尼松每天 1次),连续 4 d(泼尼松 2 d),
d 5给药 1次后 1 h ,于各鼠右耳两面涂二甲苯 0.05
mL 只 ,45 min后处死 ,按文献方法〔3〕操作 ,以 8 mm
打孔器冲下的左 、右耳片重量差值为耳肿胀值 ,并以
小鼠脾脏 、胸腺重量分别与其体重的比值为免疫器官
指数。结果见表 3 。AE-P 大剂量和中剂量能明显抑
制耳肿胀 ,AE-P 给药 5d 对免疫器官指数无明显影
响 。
表 3 AE-P 对小鼠二甲苯致耳廓肿胀及免疫
器官指数的影响( x ±s , n=10)
组别 剂量 (g·kg-1)
耳肿胀值
mg
耳肿胀抑制率
%
免疫器官指数 (g·kg-1)
脾脏 胸腺
NS - 12.4 7±2.69 8.19±1.31 2.10±0.90
泼尼松 25×10-3 7.25±2.77* 41.86 4.68±1.55** 0.45±0.31**
AE-P 1.24 7.83±2.61* 37.21 7.28±2.44 1.93±1.10
0.62 8.23±2.74* 34.00 7.40±2.39 1.97±1.20
0.31 10.1 4±2.43 18.68 8.06±1.28 2.17±1.20
注:与 NS 组比较:* P<0.01; ** P<0.001。
2.3.2 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 取雄性
小白鼠 ,18 ~ 22 g ,按 2.3.1方法分组及给药 ,于末次
给药后 1 h ,各组小鼠 iv 0.5 %的 Evans蓝 NS溶液
10 mL·kg-1 ,并立即 ip 0.6 %冰醋酸水溶液0.2 mL
只 ,然后按文献方法〔3〕操作 ,将腹腔洗涤液的离心液
用分光光度计于 590 nm 处测定吸收度(A),以 A 值
表示 Evans蓝含量。结果见表 4。AE-P 大剂量和中
剂量能明显抑制腹腔毛细血管通透性。
表 4 AE-P 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响( x±s)
组别 剂量 (g·kg -1) n 腹腔洗出液吸收度(A)
NS - 10 0.358±0.098
泼尼松 25×10-3 9 0.190±0.092**
AE-P 1.24 9 0.199±0.139*
0.62 10 0.210±0.169*
0.31 10 0.311±0.187
注:与 NS 组比较:* P<0.05; ** P<0.01。
2.3.3 对小鼠棉球肉芽肿增生的影响 取雄性小白
鼠 ,23 ~ 28 g ,麻醉后 , 于左 、右侧腋窝皮下分别殖入
精密称定的 10 mg 消毒棉球。待小鼠苏醒后 ,选活动
正常的模型鼠按 2.3.1方法分组和给药 ,每天 1次 ,
连续 8 d(给药期间 ,伤口被抓破棉球脱出的样本弃
去),于 d9将小鼠处死 ,按文献方法〔3〕操作 ,剥离肉芽
肿 。以各鼠的左右干燥棉球肉芽肿重量均值表示对
肉芽肿增生的影响。结果表明 AE-P 对小鼠棉球肉
芽肿增生无明显影响(AE-P组与NS组比较 P >
0.05;泼尼松组与 NS组比较 P <0.01)。
116 西北药学杂志 2005年 6月 第 20 卷 第 3 期
3 结论与讨论
习见蓼为贵州民族民间常用中草药 ,本实验结果
与其传统应用基本相符 。AE-P 对急性炎症有明显
的对抗作用 ,而对免疫器官胸腺和脾脏无明显抑制作
用 ,其抗炎机理有待进一步研究 ,但 AE-P 对棉球肉
芽肿增生无明显影响 ,提示AE-P 对炎症后期病理变
化无明显抑制作用 。据文献〔5〕报道 ,胆结石的形成与
胆汁中胆固醇含量过高或胆汁酸含量过低 、胆管(囊)
炎症而炎性渗出增多和胆汁中 Ca2+含量增加等因素
有关 ,AE-P 具有增加胆汁中总胆汁酸含量 、降低胆汁
中胆固醇和 Ca2+含量 、并有对抗急性炎症减少炎性渗
出的作用 ,提示其可阻止结石的形成或增大 ,另外 AE-
P 增加胆汁分泌 ,有利于小结石排出 ,这初步揭示了习
见蓼传统用于防治胆石症的药理学基础。值得注意的
是本实验还观察到 AE-P 能明显降低 CCl4 致小鼠的
ALT 升高 ,提示 AE-P 具有保肝作用 ,可能对某些急性
肝损伤的防治具有一定的临床意义。
参考文献:
〔1〕 贵州省中药资源普查办公室 ,贵州省中药研究所.贵州
中药资源[ M] .北京:中国医药科技出版社 , 1992.656.
〔2〕 中华本草编委会 , 国家中医药管理局.中华本草[ M] .第
六卷(第二册).上海:上海科学技术出版社 , 1999.689.
〔3〕 陈奇.中药药理研究方法学[ M] .北京:人民卫生出版
社 , 1993.305 , 356 , 366 , 440 , 450 , 832.
〔4〕 徐叔云 , 卞如濂 ,陈修.药理实验方法学[ M] .北京:人
民卫生出版社 , 2002.1346.
〔5〕 罗德诚 , 陈文彬.临床药物治疗学[ M] .北京:人民卫生
出版社 , 2000.218.
(收稿日期:2004-12-08)
·科研简报·
青霉素类药品含量测定中缓冲液对
测定结果的影响
郑 虹 ,张玉臣(青海省药品检验所 , 青海 西宁 810000)
中图分类号:R927.2 文献标识码:A
文章编号:1004-2407(2005)03-0117-01
青霉素及半合成青霉素是临床应用极为广泛的
抗菌药物。中国药典(CP)2000 年版二部将青霉素
钠 、青霉素钾等品种的含量测定定为硝酸汞电位滴定
法。该法在滴定过程中 ,使用的是 pH4.6 醋酸盐缓
冲液 ,与 CP2000年版附录中 pH4.5醋酸盐缓冲液比
较 ,两种缓冲液 pH 值虽然相差 0.1 ,但其配制方法差
别甚大。为此 ,我们考察了 pH4.5和 pH4.6的醋酸
盐缓冲液对青霉素钠含量测定结果的影响。
1 仪器与试药
1.1 仪器 ZDJ-1D自动电位滴定仪(北京先驱威锋
技术公司);铂电极(上海电光器件厂);汞-硫酸亚汞
电极(上海电光器件厂)。
1.2 试药 注射用青霉素钠(华北制药股份有限公
司 ,批号:20020524;山东鲁抗医药股份有限公司 ,批号
20020811);硝酸汞 、醋酸钠及其它试剂均为分析纯。
缓冲液配制处方:Ⅰ:醋酸钠 18 g ,冰醋酸 9.8 mL
加水至 1 000 mL(pH4.5);Ⅱ:醋酸钠 54 g ,加水 500
mL ,用冰醋酸调节 pH ,加水至 1 000 mL(pH4.6)。
2 测定方法
取注射用青霉素钠约 50 mg ,精密称定 ,加水 5
mL 溶解 ,再加1 moL·L -1氢氧化钠 5 mL ,摇匀 ,放置
15 min ,加 1 moL·L-1硝酸溶液 5 mL ,醋酸盐缓冲液
20 mL 及水 20 mL ,摇匀 ,在 35 ~ 40℃以铂电极作指
示电极 ,汞-硫酸亚汞电极作参比电极 ,用硝酸汞滴定
液(0.02 moL·L-1)缓慢滴定 ,以第二个等当点确定
滴定终点。每 1 mL 硝酸汞液(0.02 moL·L-1)相当
于 7.128 mg 的总青霉素(按 C16H17N2NaO4S 计算)。
3 结果与讨论
①从表 1 、表 2可以看出缓冲液 Ⅰ和 Ⅱ对青霉素
钠中的总青霉素含量测定结果没有明显的差别 ,基本
无影响 。
表 1 两种缓冲液中总青霉素含量测定结果(%)
批号缓冲液
20020524Ⅰ Ⅱ 20020811Ⅰ Ⅱ
99.8 99.9 99.7 99.6
99.7 99.7 99.6 99.7
99.4 99.6 99.7 99.7
99.5 99.5 99.4 99.9
99.5 99.7 99.5 99.6
99.6 99.8 99.6 99.8平均 99.7 99.7 99.7 99.7
②在测定过程中发现缓冲液 Ⅰ和 Ⅱ在接近终点
时的电位变化不同 ,如表 2所示 ,终点突跃时■E 值
以 pH4.6缓冲液较大 ,表明终点反应较为敏锐 ,有利
于提高测定结果的精度。
③两缓冲液试剂用量不同 。建议在电位滴定法
测定青霉素类药品含量时使用 pH4.5和 pH4.6醋酸
盐缓冲液均可 ,但为避免试验误差 ,提高测定结果精
度 ,使用 pH4.6醋酸盐缓冲液更为合适 。
表 2 两种缓冲液对■E 的影响
(注射用青霉素钠 , 批号 200205024)
pH4.5 缓冲液(Ⅰ)
A B
pH4.6 缓冲液(Ⅱ)
A B
99.8 28 99.8 48
99.7 25 99.7 38
99.6 24 99.9 29
99.4 23 99.8 28
99.5 23 99.5 36
99.5 27 99.6 44平均 99.7 25 99.7 37
注:A:总青霉素%;B:■E 终点时电位突跃值(mV)
参考文献:
〔1〕 中国药典 2000 年版[ S] .二部.2000.356 , 附录 173.
(收稿日期:2004-11-03)
117西北药学杂志 2005 年 6 月 第 20 卷 第 3 期