全 文 ：ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
湿生扁蕾的利胆有效成分研究
李　玥（天津市滨海新区塘沽中医医院，天津 ３００４５１）
摘要：目的　研究了湿生扁蕾Ｇｅｎｔｉａｎｏｐｓｉｓ　ｐａｌｕｄｏｓａ　Ｍａ的利胆活性部位及化学成分。方法　通过提取纯化出不同的极性部位，
采用胆管引流法筛选湿生扁蕾利胆作用的有效部位；再利用硅胶柱层析、ＯＤＳ、Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０等对有效部位进行分离，通过
１　Ｈ－ＮＭＲ、１３　Ｃ－ＮＭＲ等波谱技术对化合物进行结构鉴定。结果　从活性部位分离得到了１０个化合物，分别为２，３，５－ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙ－
１－Ｏ－ｐｒｉｍｅｖｅｒｏｓｙｌｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ（１），２，３，４，５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｏｘｙ－１－Ｏ－ｐｒｉｍｅｖｅｒｏｓｙｌｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ（２），１，８－二羟基－３，５二甲氧基口山酮（３），
２，３，４，７－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｏｘｙ－１－Ｏ－ｐｒｉｍｅｖｅｒｏｓｙｌｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ（４），１－羟基－３，７，８三甲氧基口山酮（５），１，７－二羟基－３，８二甲氧基口山酮
（６），齐墩果酸（７），熊果酸（８），芹菜素（９），１－羟基－２，３，５三甲氧基口山酮 （１０）。结论　其中化合物１，２，３，４为首次从湿生扁蕾
中分离得到。
关键词：湿生扁蕾；化学成分；利胆；活性部位
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１３．０４．００７
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１３）０４－０３４６－０４
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｇａｌｂｌａｄｄｅｒ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｆｒｏｍ
Ｇｅｎｔｉａｎｏｐｓｉｓ　ｐａｌｕｄｏｓａ　Ｍａ
ＬＩ　Ｙｕｅ（Ｔａｎｇｇｕ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｂｉｎｈａｉ　Ｎｅｗ　Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｔｉａｎｊｉｎ　３００４５１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｃｒｅｅｎ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｇａｌｂｌａｄｄｅｒ　ｅｆｆｅｃｔ　ｆｒｏｍＧｅｎｔｉａｎｏｐｓｉｓ　ｐａｌｕｄｏｓａ　Ｍａ，ａｎｄ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ
ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｏｌａｒ　ｆｒａｃｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｉｒ　ｇａｌｂｌａｄｄｅｒ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｗｅｒｅ
ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｂｙ　ａ　Ｔ－ｔｙｐｅ　ｄｒａｉｎａｇｅ　ｔｕｂｅ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｍｅｔｈｏｄｓ（ｓｉｌｉｃａｇｅｌｓ，
ＯＤＳ，ａｎｄ　Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０）ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ｓｐｅｃｔｒａｌ　ｄａｔａ（１　Ｈ－ＮＭＲ　ａｎｄ　１３　Ｃ－ＮＭＲ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｅｎ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ
ｔｈｅｉｒ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ａｓ　２，３，５－ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙ－１－Ｏ－ｐｒｉｍｅｖｅｒｏｓｙｌｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ（１），２，３，４，５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｏｘｙ－１－Ｏ－ｐｒｉｍｅｖｅｒｏｓｙ－
ｌｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ（２），ｌ，８－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｔｒｉｍｅｔｈｏｘａｎｔｈｏｎｅ（３），２，３，４，７－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｏｘｙ－１－Ｏ－ｐｒｉｍｅｖｅｒｏｓｙｌｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ（４），１－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，
７，８－ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ（５），１，７－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ－３，８－ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ（６），ｏｌｅａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ（７），ｕｒｓｏｌｉｃ　ａｃｉｄ（８），ａｐｉｇｅｎｉｎ（９），ａｎｄ　１－
ｈｙｄｒｏｘｙ－２，３，５－ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ（１０）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ（１），（２），（３），（４）ａｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｐｌａｎｔｓ　ｏｆ　Ｇｅｎｔｉａｎｏｐｓｉｓ
ｐａｌｕｄｏｓａ　Ｍａ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｔｉｍｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｇｅｎｔｉａｎｏｐｓｉｓ　ｐａｌｕｄｏｓａ　Ｍａ；ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ；ｇａｌｂｌａｄｄｅｒ；ａｃｔｉｖｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ
　　湿生扁蕾分布于华北、西北及四川、云南、西藏等
地［１］。湿生扁蕾具有清瘟热、利胆、止泻等功效；用于
治疗黄疸型肝炎及肝胆病引起的发烧、感冒、小儿腹
泻［２］。国内外对扁蕾属植物研究较少，研究过的植物
主要有扁蕾Ｇｅｎｔｉａｎｏｐｓｉｓ　ｂａｒｂａｔａ［３－４］，细萼扁蕾Ｇｅｎ－
ｔｉａｎｏｐｓｉｓ　ｂａｒｂａｔａ　ｖａｒ　ｓｔｅｎｎｏｃａｌｙｘ［５］，湿生扁蕾Ｇｅｎ－
ｔｉａｎｏｐｓｉｓ　ｐａｌｕｄｏｓａ　Ｍａ［６］，卵叶扁蕾 Ｇｅｎｔｉａｎｏｐｓｉｓ
ｐａｌｕｄｏｓａ　ｖａｒ　ｏｖａｔｏ－ｄｅｌｔｏｉｄｅａ［７］，从中分离出的化学
成分主要为口山酮类、三萜类和黄酮类。本实验首次
对湿生扁蕾的利胆活性部位进行了化学成分的研究，
为其进一步开发利用提供了科学依据。
１　仪器与材料
１．１　仪器　Ｂｒｕｋｅｒ　ＡＶ－４００核磁共振仪（德国）；
Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０凝胶柱色谱；氘代试剂（ＡＬＤＲＩＣＨ
公司）；Ａｇｉｌｅｎｔ　１２９０ＵＨＰＬＣ　ｗｉｔｈ　ＥＩ　ＭＳ　Ｓｙｓｔｅｍ；柱
色谱和薄层色谱用硅胶，均系青岛海洋化工厂生产；
所用试剂均系分析纯。
１．２　材料　实验动物为实验用 Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠（天
津药物研究院动物室提供），体质量２５０±２０ｇ，雌雄
各半，合格证号为津实动质准字第００１号。
２　方法与结果
２．１　供试样品的制备　药材１０ｋｇ，粉碎，乙醇加热
回流提取３次，每次２ｈ，溶剂体积为１００Ｌ。合并提取
液，６５℃减压回收溶剂得醇浸膏（Ａ，３ｋｇ），取１．５ｋｇ
浸膏加３Ｌ水进行水沉，并调ｐＨ 值为８．０，充分搅
拌，离心，得上清液。上清液通过Ｄ１０１大孔吸附树
脂吸附，经水（３ＢＶ）除杂、体积分数２０％乙醇（７
ＢＶ）洗脱后，５ＢＶ 体积分数７０％乙醇洗脱，体积分
数７０％乙醇洗脱部分共１７０ｇ，沉淀部分经石油醚脱
脂后得到２００ｇ。将体积分数７０％乙醇洗脱部分和
脱脂后的沉淀部位合并为Ｂ部位，其他部位合并为Ｃ
部位，浸膏Ａ、Ｂ、Ｃ均溶于生理盐水，作为供试样品。
２．２　利胆活性部位筛选　采用胆管引流法实验。取
健康大鼠，体质量（２５０±２０）ｇ，５０只，随机分为５组，每
组１０只，雌雄各半。实验前禁食饮水１２ｈ。药物以生
理盐水配制，灌胃１次·ｄ－１，分别为空白对照组（生理
盐水）、阳性对照组（熊去氧胆酸）、浸膏Ａ、Ｂ、Ｃ的生理
盐水溶液（２．７ｇ生药／ｋｇ）。连续给药７ｄ。末次给药
前用１００ｍＬ·Ｌ－１水合氯醛（４００ｍｇ·ｋｇ－１），腹腔注
射麻醉大鼠，背位固定于手术台，在手术区剪毛。于
上腹正中切开约２ｃｍ，打开腹腔，找到胃幽门部，翻
转十二指肠，在十二指肠降部肠系膜中找到白色有韧
６４３ 西北药学杂志　２０１３年７月　第２８卷　第４期
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性的胆管，在其下穿２条线，结扎乳头部，肝脏方向作
Ⅴ字形切口，插入塑料管，并于距离肝门０．５ｃｍ处用
细线妥善结扎固定。确定胆汁排出通畅后，即可见有
淡黄绿色胆汁流出，用小烧杯收集胆汁。待胆汁流量
稳定后，经十二指肠进行末次给药。给药后每隔１ｈ
收集胆汁１次，在１，２，３，４和５ｈ收集各组大鼠胆汁
流量，以给药前后胆汁流量为统计指标。采用ＳＰＳＳ
１６．０软件进行单因素方差检验。结果表明，以各时
间点的胆汁增量和５ｈ内收集的胆汁总量为指标统
计，可以看出醇浸膏Ａ和浸膏Ｂ均能明显增加大鼠
胆汁流量，尤其是在前２ｈ内具有非常显著的差异。
对比空白和阳性数据，确定Ｂ为有效部位。
２．３　利胆活性部位化学成分研究
２．３．１　提取、纯化、分离方法　如药理实验所述，得
到的利胆活性部分是７０％乙醇洗脱部分和脱脂后的
沉淀部位。均反复使用硅胶柱色谱、开放 ＯＤＳ柱、
ＴＬＣ检测、凝胶柱色谱等方法分离纯化。共得到化
合物１（２３ｍｇ）、２（１６ｍｇ）、３（１３ｍｇ）、４（１０ｍｇ）、５
（６８ｍｇ）、６（７９ｍｇ）、７（２５ｍｇ）、８（５４ｍｇ）、９（６７ｍｇ）、
１０（１７ｍｇ）、１１（２２ｍｇ）。
２．３．２　结构鉴定
　　化合物１　黄色针晶（ＥｔＯＨ）。ＦｅＣｌ３反应显绿
色。ＥＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）＝５９７（Ｍ＋Ｈ）。１　Ｈ－ＮＭＲ（４００
ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ：７．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．６Ｈｚ，
Ｈ－８），７．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．６Ｈｚ，Ｈ－４），７．３４
（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，Ｈ－７），７．０９（１Ｈ，ｓ，Ｈ－４），３．９８～
３．７８（３Ｈ，３ｓ，２，３，５－ＯＣＨ３），４．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７
Ｈｚ，Ｈ－１＇）；１３　Ｃ－ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１４８．５
（Ｃ－１），１３９．１（Ｃ－２），１５９．２（Ｃ－３），９７．３（Ｃ－４），１５３．８
（Ｃ－４ａ），１４４．７（Ｃ－４ｂ），１４７．９（Ｃ－５），１１５．７（Ｃ－６），１２３．７
（Ｃ－７），１１６．５（Ｃ－８），１１２．３（Ｃ－８ａ），１７５．１（Ｃ－９），１０９．０
（Ｃ－９ａ），１０４．２（Ｃ－１＇），７３．２（Ｃ－２＇），７６．４（Ｃ－３＇），６９．４
（Ｃ－４＇），７６．５（Ｃ－５＇），６７．９（Ｃ－６），１０３．４（Ｃ－１），７４．０
（Ｃ－２），７６．４（Ｃ－３），６９．８（Ｃ－４），６５．４（Ｃ－５），３个
甲基信号δ：６０．９，５６．８，５６．２。该化合物波谱数据与
文献数据［８］对照基本一致，故鉴定化合物１为２，３，５－
ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙ－１－Ｏ－ｐｒｉｍｅｖｅｒｏｓｙｌｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ。
　　化合物２　黄色针晶（ＥｔＯＨ）。ＦｅＣｌ３反应显绿
色。ＥＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）＝６２７（Ｍ＋Ｈ）。１　Ｈ－ＮＭＲ（４００
ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：７．６２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．５Ｈｚ，
Ｈ－８），７．４３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．５Ｈｚ，Ｈ－６），７．３２
（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，Ｈ－７），４．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，
Ｈ－ｌ＇），４．００，３．９６，３．９４，３．７８（４×３Ｈ，ｓ，２，３，４，
５－ＯＭｅ），２．９０～５．１０（１０Ｈ，ｍ，ｓｕｇａｒ　ｐｒｏｔｏｎｓ）；
１３Ｃ－ＮＭＲ（１００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１４７．１（Ｃ－１），１３７．５
（Ｃ－２），１５２．３（Ｃ－３），１４２．６（Ｃ－４），１４４．２（Ｃ－４ａ），１４４．７
（Ｃ－４ｂ），１４８．２（Ｃ－５），１１６．５（Ｃ－６），１２３．９（Ｃ－７），１１６．１
（Ｃ－８），１２２．２（Ｃ－８ａ），１７５．４（Ｃ－９），１１１．２（Ｃ－９ａ），１０４．２（Ｃ－１
＇），７４．０（Ｃ－２＇），７６．４（Ｃ－３＇），６９．８（Ｃ－４＇），７６．３（Ｃ－５＇），
６８．１（Ｃ－６＇），１０３．４（Ｃ－１），７３．２（Ｃ－２），７６．３（Ｃ－３），
６９．４（Ｃ－４），６５．４（Ｃ－５），４个甲基信号δ：６１．５，
６１．４，６１．３，５６．８。该化合物波谱数据与文献数据［９］
对照基本一致，故鉴定化合物２为２，３，４，５－ｔｅｔｒａｍｅ－
ｔｈｏｘｙ－１－Ｏ－ｐｒｉｍｅｖｅｒｏｓｙｌｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ。
　　化合物３　黄色针晶（ＥｔＯＨ）。ＦｅＣｌ３反应显绿
色。ＥＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２８８（Ｍ＋Ｈ）。１　Ｈ－ＮＭＲ（４００
ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１１．９７（１Ｈ，ｓ，１－ＯＨ），１１．３７（１Ｈ，
ｓ，８－ＯＨ），７．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ－６），６．６９（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ－７），６．５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，Ｈ－４），
６．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，Ｈ－２），３．９４（３Ｈ，ｓ，５－ＯＭｅ），
３．８８（３Ｈ，ｓ，３－ＯＭｅ）；１３　Ｃ－ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－
ｄ６）δ：１６２．８（Ｃ－１），９７．９（Ｃ－２），１６７．４（Ｃ－３），９３．１（Ｃ－
４），１５４．１（Ｃ－４ａ），１３９．８（Ｃ－４ｂ），１４５．４（Ｃ－５），１０９．３
（Ｃ－６），１０２．８（Ｃ－７），１５７．７（Ｃ－８），１２０．２（Ｃ－８ａ），１８４．５
（Ｃ－９），１０８．１（Ｃ－９ａ），２个甲氧基信号δ：５７．３，５６．０，
该化合物波谱数据与文献数据［１０］对照基本一致，故
鉴定化合物３为１，８－二羟基－３，５二甲氧基口山酮。
　　化合物４　黄色针晶（ＥｔＯＨ）。ＦｅＣｌ３反应显绿
色。ＥＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）＝６４９（Ｍ＋Ｎａ）。１　Ｈ－ＮＭＲ （ＤＭ－
ＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ）δ：７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，Ｈ－５），
７．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，Ｈ－８），７．４２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
９．２，３．２Ｈｚ，Ｈ－６），４．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ－１＇），
３．８３，３．８６，３．９５，４．０４（ｅａｃｈ　３Ｈ，ｓ，４×ＯＣＨ３），２．８
～５．１（１２Ｈ，ｍ，ｓｕｇａｒ　ｐｒｏｔｏｎｓ）；１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－
ｄ６，１００ＭＨｚ）δ：１４７．３（Ｃ－１），１３７．３（Ｃ－２），１５２．４（Ｃ－
３），１４２．５（Ｃ－４），１４４．４（Ｃ－４ａ），１４９．１（Ｃ－４ｂ），１１９．３（Ｃ－
５），１２４．３（Ｃ－６），１５５．８（Ｃ－７），１０５．８（Ｃ－８），１２１．８（Ｃ－８ａ），
１１０．９（Ｃ－８ｂ），１０４．２（Ｃ－１＇），７４．０（Ｃ－２＇），７６．３（Ｃ－３＇），
６９．８（Ｃ－４＇），７６．３（Ｃ－５＇），６８．２（Ｃ－６＇），１０３．５（Ｃ－１），
７３．２（Ｃ－２），７６．４（Ｃ－３），６９．４（Ｃ－４），６５．４（Ｃ－５），
１７５．２（Ｃ＝Ｏ），５５．７，６１．３，６１．４，６１．７（４×ＯＣＨ３）。
该化合物波谱数据与文献数据［１１］对照基本一致，故
鉴定化合物 ４ 为 ２，３，４，７－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｏｘｙ－１－Ｏ－ｐｒｉ－
ｍｅｖｅｒｏｓｙｌｏｘｙｘａｎｔｈｏｎｅ。
化合物５　黄色针晶（ＥｔＯＨ），ＦｅＣｌ３反应显绿
色。ＵＶｎｍ：２３８，２６２，３１２，３７５．ＥＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）＝３０２
（Ｍ＋），１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：３．８７（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），
３．９３（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．０（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），６．３１（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，Ｈ－２），６．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，Ｈ－４），
７．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，Ｈ－５），７．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２
Ｈｚ，Ｈ－６），１３．２４（１Ｈ，ｓ，－ＯＨ）。１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：
５５．７，５７．３，６１．９（３×ＯＣＨ３），１８０．８（Ｃ＝Ｏ），１６３．９
７４３西北药学杂志　２０１３年７月　第２８卷　第４期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
（Ｃ１），９６．９（Ｃ２），１６６．３（Ｃ３），９２．０６ （Ｃ４），１５７．１
（Ｃ４ａ），１４９．４（Ｃ４ｂ），１１２．７（Ｃ５），１２０．７（Ｃ６），１４８．０
（Ｃ７），１５１．２（Ｃ８），１１４．８（Ｃ８ａ），１０３．０（Ｃ８ｂ）。以上
数据与文献数据［５］对照一致，故鉴定化合物５为１－羟
基－３，７，８三甲氧基口山酮。
　　化合物６　浅黄色针晶（ＥｔＯＨ），ＦｅＣｌ３反应显绿
色。ＵＶｎｍ：２３８，２５９，３１１，３７６．ＥＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）＝２８８
（Ｍ＋）１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：３．８８（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．０
（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：５５．８，６２．８（２×
ＯＣＨ３），１８０．６（Ｃ＝Ｏ），１６３．６（Ｃ１），９７．０（Ｃ２），
１６６．６（Ｃ３），９２．（Ｃ４），１１３．８（Ｃ５），１２２．５（Ｃ６），１４４．４
（Ｃ７），１５０．０（Ｃ８）。以上数据与文献数据［５］报道一
致，故鉴定化合物６为１，７－二羟基－３，８－二甲氧基口
山酮。
化合物７　白色针晶（ＥｔＯＨ）。ＥＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）＝
４７８（Ｍ ＋Ｎａ），４６７，４４９，４４１，４２５，４２３，２４８，２０３
（１００），１８９，１３３，１１９，６９，５５，４３。１　Ｈ－ＮＭＲ（４００
ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１２．０４（１Ｈ，ｓ，ＣＯＯＨ），５．１６
（１Ｈ，ｔ－ｌｉｋｅ，Ｊ＝３．７，３．３Ｈｚ，Ｈ－１２），２．９９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ
＝１０．６，５．１Ｈｚ，Ｈ－３），２．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．９，４．０
Ｈｚ，Ｈ－１８），１．９１（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１３．６，４．０Ｈｚ，Ｈ－１６－１），
１．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，３．３Ｈｚ，Ｈ－１１），１．５８～１．６７
（３Ｈ，ｍ，Ｈ－２－ｌ，Ｈ－１５－１，Ｈ－１９－１），１．３８～１．５２（８Ｈ，
ｍ，Ｈ－１－１，Ｈ－１－２，Ｈ－２－２，Ｈ－６－１，Ｈ－７－１，Ｈ－９，Ｈ－１６－２，
Ｈ－２１－１），１．０７（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３Ｈ，Ｈ－６），１．２８～１．３４
（２Ｈ，ｍ，Ｈ－１９－１，Ｈ－２１－２），１．２３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝９．９，３．３
Ｈｚ，Ｈ－５），１．１３（１Ｈ，ｍ，１９－２），１．０３～１．０７（１Ｈ，ｍ，
Ｈ－２１－２），０．９９（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１１．０，３．３Ｈｚ，Ｈ＝１５＝
２），１．０９，０．８９，０．８７，０．８７，０．８５，０．７２，０．６７（ｅａｃｈ
３Ｈ，ｓ，ＣＨ３×７）。１３　Ｃ－ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：
１４３．８（Ｃ－１３），１２４．５（Ｃ－１２），７６．８（Ｃ－３），３８．４（Ｃ－１），
２７．７（Ｃ－２），３８．６（Ｃ－４），５５．７（Ｃ－５），１８．９（Ｃ－６），３２．３
（Ｃ－７），３９．９（Ｃ－８），４７．９（Ｃ－９），３７．１（Ｃ－１０），２３．８（Ｃ－
１１），４１．４（Ｃ－１４），２７．５（Ｃ－１５），２３．７（Ｃ－１６），４８．１（Ｃ－
１７），４０．９（Ｃ－１８），４６．０（Ｃ－１９），３０．６（Ｃ－２０），３３．４（Ｃ－
２１），３２．６（Ｃ－２２），２８．６（Ｃ－２３），１５．５（Ｃ－２４），１５．１（Ｃ－
２５），１７．３（Ｃ－２６），２６．０（Ｃ－２７），３３．３（Ｃ－２９），２３．０（Ｃ－
３０）。该化合物波谱数据与文献数据［１３］对照基本一
致，故鉴定化合物７为齐墩果酸。
化合物８　白色针晶（ＥｔＯＨ）。ＥＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）＝
４７８（Ｍ ＋Ｎａ），４６７，４４９，４４１，４２５，４２３，２４８，２０３
（１００），１８９，１３３，１１９，６９，５５，４３。１　Ｈ－ＮＭＲ（４００
ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：５．１１（１Ｈ，ｂｒｓ，Ｈ－１２），３．０１（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，５．０Ｈｚ，Ｈ－３），２．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．０
Ｈｚ，Ｈ－１８），１．０５，０．８８，０．８７，０．７４，０．６９（ｅａｃｈ　３Ｈ，ｓ，
５×ＣＨ３）；１３　Ｃ－ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１７８．１
（Ｃ－２８），１３８．１（Ｃ－１３），１２４．５（Ｃ－１２），７６．８（Ｃ－３），３８．３
（Ｃ－１），２７．２（Ｃ－２），３８．４（Ｃ－４），５４．８（Ｃ－５），１８．２（Ｃ－
６），３２．９（Ｃ－７），３９．９（Ｃ－８），４７．３（Ｃ－９），３６．６（Ｃ－１０），
２３．０（Ｃ－１１），４１．７（Ｃ－１４），２７．５（Ｃ－１５），２４．０（Ｃ－１６），
４７．１（Ｃ－１７），５２．５（Ｃ－１８），３９．５（Ｃ－１９），３８．６（Ｃ－２０），
３０．２（Ｃ－２１），３６．５（Ｃ－２２），２８．４（Ｃ－２３），１６．１（Ｃ－２４），
１５．４（Ｃ－２５），１７．１（Ｃ－２６），２３．３（Ｃ－２７），１７．０（Ｃ－２９），
２１．１（Ｃ－３０）。该化合物波谱数据与文献数据［１３］对照
基本一致，故鉴定化合物８为熊果酸。
　　化合物９　黄色针晶（ＥｔＯＨ）。ＥＩ－ＭＳ（ｍ／
ｚ）＝２７０（Ｍ＋）。１　Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：
１２．９６（１Ｈ，ｓ，５－ＯＨ），１０．８３（１Ｈ，ｓ，７－ＯＨ），１０．３５
（１Ｈ，ｓ，４＇－ＯＨ），７．９１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｈ－２＇，Ｈ－６＇），
６．９２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６，Ｈ－３＇，Ｈ－５＇），６．７８（１Ｈ，ｓ，Ｈ－３），
６．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，Ｈ－８），６．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０
Ｈ－６）；１３　Ｃ－ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１８１．７（Ｃ－
４），１６４．１（Ｃ－２），１６３．７（Ｃ－７），１６１．４（Ｃ－９），１６１．１（Ｃ－４＇），
１５７．３（Ｃ－５），１２８．５（Ｃ－２＇，６＇），１２１．２（Ｃ－１＇），１１５．９（Ｃ－３＇，
Ｃ－５＇），１０３．７（Ｃ－１０），１０２．８（Ｃ－３），９８．８（Ｃ－６），９３．９（Ｃ－
８）．该化合物波谱数据与文献数据［１２］对照基本一致，
故鉴定化合物９为芹菜素。
化合物１０　黄色针晶（ＥｔＯＨ）。ＥＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）＝
３０２（Ｍ＋）。１　Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１２．７０
（１Ｈ，ｓ，１－ＯＨ），７．７７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．６Ｈｚ，Ｈ－８），
７．２７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，Ｈ－７），７．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
７．９，１．６Ｈｚ，Ｈ－６），６．５８（１Ｈ，ｓ，Ｈ－４），４．００，３．９４，
３．９０（３×３Ｈ，ｓ，２，３，５－ＯＭｅ）。１３　Ｃ－ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，
ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１５３．１（Ｃ－１），１３１．８（Ｃ－２），１６０．０（Ｃ－３），
９０．９（Ｃ－４），１５４．０（Ｃ－４ａ），１４６．２（Ｃ－４ｂ），１４８．２（Ｃ－５），
１１５．４（Ｃ－６），１２３．６（Ｃ－７），１１６．６（Ｃ－８），１２１．１（Ｃ－８ａ），
１８１．１（Ｃ－９），１０４．２（Ｃ－９ａ），３个甲氧基信号δ：６０．９，
５６．３，５６．３。该化合物波谱数据与文献数据［１４］对照
基本一致，故鉴定化合物１０为１－羟基－２，３，５三甲氧
基口山酮。
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（收稿日期：２０１３－０１－０５）
香椿树皮总黄酮的提取分离工艺研究
王晓博，何俊婷（陕西新药技术开发中心，西安 ７１００７５）
摘要：目的　提取分离香椿树皮中有降血糖活性作用的总黄酮。方法　将香椿树皮总黄酮粗提物（含生药材２ｇ·ｍＬ－１）上
Ｄ１０１大孔吸附树脂分离纯化，以树脂径高比、上样流速、洗脱流速、洗脱剂用量为主要影响因素，采用Ｌ９（３４）正交实验优化最佳
分离工艺。结果　最佳分离工艺参数为：树脂径高比为１∶１２，上样流速为１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，体积分数７０％乙醇的洗脱流速为
１．０Ｌ·ｈ－１，洗脱剂用量为２ＢＶ。结论　Ｄ１０１大孔吸附树脂对香椿树皮总黄酮的分离效果较好，适用于工业化生产。
关键词：香椿树皮；总黄酮；Ｄ１０１大孔吸附树脂
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１３．０４．００８
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１３）０４－０３４９－０３
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂａｒｋ　ｏｆ　Ｔｏｏｎａ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ．Ａ．Ｊｕｓｓ．
ＷＡＮＧ　Ｘｉａｏｂｏ，ＨＥ　Ｊｕｎｔｉｎｇ（Ｓｈａａｎｘｉ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　Ｃｅｎｔｅｒ，Ｘｉ′ａｎ　７１００７５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂａｒｋ　ｏｆ　Ｔｏｏｎａ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ．Ａ．Ｊｕｓｓ．，ｗｈｉｃｈ　ｈａｖｅ　ｔｈｅ
ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ　ｂｌｏｏｄ　ｇｌｕｃｏｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｂａｒｋ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔ（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ｒａｗ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｈｅｒｂｓ　２ｇ·ｍＬ－１）
ｗａｓ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ｂｙ　Ｄ１０１ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ｒｅｓｉｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｉｎ　ｃｏｌｕｍｎ，ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ，ｔｈｅ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｖｏｌｕｍｅ
ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｉｎ　Ｌ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ
ｏｐｔｉｍａｌ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ａｓ　ｆｏｌｏｗｓ：ｄｉａｍｅｔｅｒ　ａｎｄ　ｌｅｎｇｔｈ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｒｅｓｉｎ　ｃｏｌｕｍｎ　１∶１２，ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，
ｔｈｅ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　７０％ｅｔｈａｎｏｌ，ｔｈｅ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１．０Ｌ·ｈ－１，ａｎｄ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ａｍｍｏｕｎｔ　２ＢＶ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　Ｄ１０１
ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ｒｅｓｉｎ　ｉｓ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｂａｒｋ　ｏｆ　Ｔｏｏｎａ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ．Ａ．Ｊｕｓｓ．；ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；Ｄ１０１ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ｒｅｓｉｎ
　　楝科植物香椿Ｔｏｏｎａ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ．Ａ．Ｊｕｓｓ．又名山
椿、香椿芽。据文献记载，香椿中主要化学成分为黄
酮类化合物［１－４］。目前，对香椿树中总黄酮的研究主
要集中在叶［５］、果实及其嫩芽［６］方面，而对香椿树皮
总黄酮研究未见报道。香椿总黄酮具有较强的药理
活性，能明显地降低糖尿病餐后血糖值［７］。为此，笔
者重点研究了香椿树皮总黄酮类化合物的提取分离
技术，优化最佳工艺参数，为开发治疗糖尿病的新药
奠定基础。
１　试药与设备
１．１　试药　香椿树皮采自陕西蓝田；乙醇，ＡＲ，天津
市富宇精细化工有限公司；大孔吸附树脂，Ｄ１０１型，
西安蓝晓科技有限公司生产；去离子水。
１．２　设备　玻璃层析柱：直径２．５，４．５和６．５ｃｍ，长
均为１００ｃｍ；旋转蒸发仪，ＲＥ－５２ＡＡ型，上海亚荣仪
器厂。
１．３　树脂预处理　将Ｄ１０１大孔吸附树脂用无水乙
醇浸泡２４ｈ，充分溶胀，湿法装柱，用无水乙醇淋洗
至洗出液加适量水无白色浑浊为止，再用去离子水洗
涤树脂至无醇味；将Ｄ１０１大孔吸附树脂用３ＢＶ（ＢＶ
为树脂柱体积）体积分数３％ＨＣｌ洗脱，用去离子水
洗脱至洗脱液呈中性；再用３ＢＶ　４０ｇ·Ｌ－１　ＮａＯＨ
溶液洗脱至洗脱液呈中性，备用。
１．４　香椿树皮总黄酮粗提物的制备　将香椿树皮粉
碎成粗粉，称取５００ｇ置于５　０００ｍＬ烧瓶中，加入８倍
量体积分数７０％乙醇，回流提取２次，每次２ｈ。过滤，
将２次的提取液合并，减压回收滤液中乙醇至无醇味，
得香椿树皮总黄酮粗提液（含生药２ｇ·ｍＬ－１）。
９４３西北药学杂志　２０１３年７月　第２８卷　第４期