全 文 ：第３３卷第４期
２０１４年８月
中 国 海 洋 药 物
ＣＨＩＮＥＳＥ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＭＡＲＩＮＥ　ＤＲＵＧＳ
Ｖｏｌ．３３　Ｎｏ．４
Ａｕｇｕｓｔ，２０１４
红树植物角果木内生真菌Ｊ６２
生物活性成分研究△
＊
古海刚１，２，３，戴好富１，白红进３，王辉１，郭志凯１，梅文莉１＊
（１．中国热带农业科学院热带生物技术研究所 农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室，
海南 海口５７１１０１；２．新和县疾病预防控制中心，新疆 新和８４２１００；
３．塔里木大学 生命科学学院，新疆 阿拉尔８４３３００）
摘　要：目的 研究红树植物角果木内生真菌Ｊ６２的活性次生代谢产物。方法 采用多种柱色谱技术进行分离
纯化，根据理化常数和波谱数据与文献对照鉴定化合物的结构，采用滤纸片琼脂扩散法测定化合物抗金黄色
葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）和白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ）活性，利用 ＭＴＴ法测定各化合物的体外
细胞毒活性。结果 从角果木内生真菌Ｊ６２发酵液中分离鉴定了１０个化合物，分别为：反式桂皮酸（１），３，４－二
甲氧基苯甲醇（２），２－［（３，４－ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈｙｌ］－４，５－ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ－ｂｅｎｚｅｎｅｍｅｔｈａｎｏｌ（３），尿嘧啶核苷（４），
ｓｉｍｉｌｉｎ　Ｂ（５），ｃｏｉｂａｎｏｌ　Ｃ（６），ｈｙｍａｔｏｘｉｎ　Ｃ（７），５，８－ｅｐｉｄｉｏｘｙ－５α，８α－ｅｒｇｏｓｔａ－６，２２Ｅ－ｄｉｅｎ－３β－ｏｌ（８），豆甾－７，２２－二
烯－３β，５α，６α－三醇（９）和ｃｒｉｓｐｉｎ　Ａ（１０）。化合物１，２和７具有抗金黄色葡萄球菌活性，化合物１和２具有抗
白色念珠菌的活性；化合物２和５对肿瘤细胞株Ｋ－５６２显示有生长抑制活性。结论 化合物１～１０均为首次
从内生真菌Ｊ６２中分离得到。其中化合物７的抗金黄色葡萄球菌活性和化合物５对慢性髓原白血病Ｋ５６２细
胞株的细胞毒活性均为首次报道。
关键词：角果木；内生真菌；化学成分；结构鉴定；抗菌活性；细胞毒活性
中图分类号：Ｒ９３１　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００２－３４６１（２０１４）０４－０２１－０７
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ｆｕｎｇｕｓ
Ｊ６２ｏｆ　ｍａｎｇｒｏｖｅ　ｐｌａｎｔ　Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ
ＧＵ　Ｈａｉ－ｇａｎｇ１，２，３，ＤＡＩ　Ｈａｏ－ｆｕ１，ＢＡＩ　Ｈｏｎｇ－ｊｉｎ３，ＷＡＮＧ　Ｈｕｉ　１，ＧＵＯ　Ｚｈｉ－ｋａｉ　１，ＭＥＩ　Ｗｅｎ－ｌｉ　１＊
（１．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ｏｆ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｃｒｏｐｓ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，
Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ａｇｒｉｃａｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，
Ｈａｉｋｏｕ５７１１０１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｅｎｔｅｒ　ｆｏｒ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎｄ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｘｉｎｈｅ　Ｃｏｕｎｔｙ８４２１００，Ｃｈｉｎａ；
３．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｔａｒｉｍ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ａｌａｒ　８４３３００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　ｏｆ　ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ｆｕｎｇｕｓ　ｓｔｒａｉｎ　Ｊ６２ｏｆ
ｍａｎｇｒｏｖｅ　ｐｌａｎｔ　Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ
ｂｙ　ｃｏｌｕｍｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｔｈｅｉｒ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｔｈｅｉｒ　ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｓ　ａｎｄ　ｓｐｅｃｔｒａｌ　ｄａｔａ　ｗｉｔｈ　ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅｓ，ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｎｄ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕ－
ａｔｅｄ　ｂｙ　ｐａｐｅｒ　ｄｉｓｃ　ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ　ａｎｄ　ＭＴＴ　ｍｅｔｈｏｄｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｂｒｏｔｈ　ｏｆ
ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ｆｕｎｇｕｓ　ｓｔｒａｉｎ　Ｊ６２ｏｆ　ｍａｎｇｒｏｖｅ　ｐｌａｎｔ　Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ，ｔｅｎ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉ－
＊ △基金项目：海南省国际科技合作专项（ＧＪＨＺ２０１３－１７）；海南省自然科学基金（３１３０７９）资助
　作者简介：古海刚（１９８６－），男，硕士研究生，天然药物化学研究。
＊通讯作者：梅文莉（１９７４－），女，研究员。Ｔｅｌ：（０８９８）６６９８７５２９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｍｅｉｗｅｎｌｉ＠ｉｔｂｂ．ｏｒｇ．ｃｎ
　　收稿日期：２０１３－１０－３０
DOI:10.13400/j.cnki.cjmd.2014.04.004
２２　 中　国　海　洋　药　物 ３３卷
ｆｉｅｄ　ａｓ　ｔｒａｎｓ－ｃｉｎｎａｍｉｃａｃｉｄ（１），３，４－ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌ（２），２－［（３，４－ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈｙｌ］－４，
５－ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ－ｂｅｎｚｅｎｅｍｅｔｈａｎｏｌ（３），ｕｒｉｄｉｎｅ（４），ｓｉｍｉｌｉｎ　Ｂ（５），ｃｏｉｂａｎｏｌ　Ｃ（６），ｈｙｍａｔｏｘｉｎ　Ｃ（７），５，８－
ｅｐｉｄｉｏｘｙ－５α，８α－ｅｒｇｏｓｔａ－６，２２Ｅ－ｄｉｅｎ－３β－ｏｌ（８），ｓｔｉｇｍａｓｔａ－７，２２－ｄｉｅｎｅ－３β，５α，６α－ｔｒｉｏｌ（９），ａｎｄ　ｃｒｉｓｐｉｎ　Ａ
（１０）．Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１，２，ａｎｄ７　ｓｈｏｗｅｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ，ａｎｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１　ａｎｄ
２　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ．Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　２　ａｎｄ　５　ｓｈｏｗｅｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｃｅｌ　ｌｉｎｅ　Ｋ－５６２ｂｙ　ＭＴＴ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１～１０　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ｆｕｎ－
ｇｕｓ　ｓｔｒａｉｎ　Ｊ６２ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｔｉｍｅ．Ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　７　ａｎｄ　ｔｈｅ
ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅ　Ｋ－５６２ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　５　ｗｅｒｅ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｔｉｍｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ；ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ｆｕｎｇｕｓ；ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔ；ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ａｎｔｉｍｉ－
ｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
　　红树植物角果木（Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ）为红树科
（Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａｃｅａｅ）角果木属（Ｃｅｒｉｏｐｓ）的常绿植
物，别名剪子树、海枷仔、海淀子（海南）［１］。在中
国民间，该属植物用以止痛［２］，角果木的树皮捣碎
可以止血、收敛、通便和治疗恶疮；种子榨油可以
止痒和治疥癣，也可以治冻疮；叶煎汁曾作奎宁替
代品治疟疾［３］。近年来，角果木的药用价值得到
国内外学者的重视，Ａｎｊａｎｅｙｕｌｕ等［４－６］从同属植物
Ｃ．ｄｅｃａｎｄｒａ中分离到ｋａｕｒｅｎｅ和ｇｉｂｂｅｒｅｌｉｎ类
型８个新的二萜类化合物，张炎等［７］从角果木（Ｃ．
ｔａｇａｌ）石油醚部分分离出２种Ｄｏｌａｂｒａｎｅ型二萜，
其中 １ 种 为 Ｔａｇａｌｓｉｎ　Ａ，相 关 研 究 已 证 实
Ｔａｇａｌｓｉｎｓ系列化合物具有膜通透性和广谱的抗
肿瘤活性，对多种人类肿瘤细胞具有细胞毒活性，
具备潜在的新药开发价值［８］。近年来，中国药用
植物内生真菌生物活性成分的研究成了药物开发
的热点［９－１０］。为有效利用红树植物角果木资源，本
研究组对红树植物角果木内生真菌Ｊ６２的次生代
谢产物进行了研究，从Ｊ６２的发酵液中分离得到
１０个化合物，经波谱分析分别鉴定为：反式桂皮酸
（１），３，４－二甲氧基苯甲醇（２），２－［（３，４－ｄｉｍｅ－
ｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈｙｌ］－４，５－ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ－ｂｅｎｚｅｎｅ－
ｍｅｔｈａｎｏｌ（３），尿嘧啶核苷（４），ｓｉｍｉｌｉｎ　Ｂ（５），ｃｏｉ－
ｂａｎｏｌ　Ｃ（６），ｈｙｍａｔｏｘｉｎ　Ｃ（７），５，８－ｅｐｉｄｉｏｘｙ－５α，
８α－ｅｒｇｏｓｔａ－６，２２Ｅ－ｄｉｅｎ－３β－ｏｌ（８），豆甾－７，２２－二烯－
３β，５α，６α－三醇（９）和ｃｒｉｓｐｉｎ　Ａ（１０）。生物活性测
试结果表明，化合物１，２和７具有抗金黄色葡萄
球菌活性，化合物１和２具有抗白色念珠菌的活
性；化合物２和５对肿瘤细胞株 Ｋ－５６２显示有生
长抑制活性。
１　材料和方法
１．１　材料
１．１．１　内生真菌
红树植物角果木（Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ）于２０１１年７
月采自海南东寨港红树林自然保护区，由中国热
带农业科学院热带生物技术所代正福副研究员鉴
定。内生真菌Ｊ６２是本文第一作者从角果木新鲜
枝条中分离得到的，通过克隆真菌核糖体ｒＤＮＡ
基因转录间隔序列（ＩＴＳ１－５．８Ｓ－ＩＴＳ２全长序列）、
测序并与ＧｅｎＢａｎｋ中已知真菌菌株相应序列比对
结果鉴定为组丝核菌属（Ｐｈａｃｏｄｉｕｍｓｐ．），菌种保
存于中国热带农业科学院热带生物技术研究所。
１．１．２　指示菌与肿瘤细胞株
金黄色葡萄球菌 （Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）
ＡＴＣＣ　５１６５０和白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ）
ＡＴＣＣ　１０２３１购于海南省药品检验所；人慢性髓原
白血病细胞株 Ｋ－５６２购自中国科学院细胞库，在
含有１０％小牛血清的 ＲＰＭＩ１６４０培养基中，于
５％ＣＯ２、湿度９０％以上、３７℃温箱中培养，贴壁细
胞用０．２５％胰酶消化。
１．１．３　培养基
马铃薯葡萄糖琼脂培养基（ＰＤＡ）：马铃薯
２００．０ｇ，葡萄糖２０．０ｇ，琼脂１８．０ｇ，定容至１Ｌ，
ｐＨ自然；真菌发酵培养基：２％葡萄糖，１％蛋白
胨，０．５％酵母膏，５０％人工海水，ｐＨ　６．５定容至
１．０Ｌ；牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（ＮＡ）：蛋白胨
５．０ｇ，牛肉浸膏３．０ｇ，葡萄糖２．５ｇ，琼脂１８．０ｇ，
定容至１Ｌ，ｐＨ　７．０～７．２；Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ采用
ＹＰＤ培养基（酵母粉胨葡萄糖琼脂）；肿瘤细胞株
采用ＲＰ－ＭＩ１６４０完全培养基。
４期 古海刚，等：红树植物角果木内生真菌Ｊ６２生物活性成分研究 ２３　
图１　化合物１～１０的化学结构
Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１～１０
１．１．４　仪器与试剂
Ｘ－５型显微熔点仪（北京泰克仪器有限公司），
ＰＯＬＡＲ－Ｌ型旋光仪（ＣＡＴＡＣｒＯ　ＣＯ．ＬＴＤ），ＭＳ谱
在Ａｕｔｏｓｐｅｃ－３００质谱仪上测定，旋转蒸发仪（Ｈｅｉ－
ｄｏｌｐｈ　Ｌａｂｏｒｏｔａ），核磁共振波谱仪为Ｂｒｕｋｅｒ　ＡＶ－５００
ＭＨｚ（ＴＭＳ内标），薄层色谱硅胶和柱色谱硅胶（青
岛海洋化工厂产品），Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０柱（Ｍｅｒｃｋ公
司），ＢＳＡ－１００Ａ自动部份收集器（上海青浦沪西仪
器厂），ＣＡ－１１１１冷却水循环装置（上海爱朗仪器有
限公司），高压湿热灭菌锅（Ｓａｎｙｏ），试剂（工业纯重
蒸），硫酸卡那霉素（上海生工有限公司），ＣＯ２培养
箱（ＲＳ　Ｂｉｏｔｅｃｈ　Ｌｔｄ．），酶标仪（ＢｉｏＴｅｋ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，
Ｉｎｃ．），四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）、ＭＥＭ和平衡盐溶
液ＰＢＳ（北京欣经科公司），丝裂霉素 Ｃ（ｋｙｏｗａ
Ｈａｋｋｏ　ｋｏｇｙｏ　Ｃｏ．Ｌｔｄ．）。
１．２　方法
１．２．１　红树植物角果木内生真菌的培养
内生真菌Ｊ６２经ＰＤＡ培养基平板活化，切取
黄豆粒大小的菌丝块，接种于容量为１　０００ｍＬ的
装有３５０ｍＬ真菌发酵培养基的三角瓶中，室温，
１２０ｒ／ｍｉｎ振荡培养７ｄ后，静置培养４５ｄ，共发酵
４００瓶，得发酵液１４０Ｌ。
１．２．２　化合物提取与分离
将菌株发酵液１４０．０Ｌ，经滤布过滤得到菌丝
体和发酵上清液。将发酵上清液于５５℃减压浓
缩至４．０Ｌ，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃
取，减压浓缩，分别得到石油醚浸膏（２．８ｇ）、乙酸
乙酯浸膏（１５．２ｇ）和正丁醇浸膏（４１．４ｇ）。基于
乙酸乙酯部分测得的活性最好，所以本实验选择
乙酸乙酯部分，经过减压硅胶柱色谱，以氯仿－甲醇
梯度洗脱得到１０个流份（Ｆｒ．１～ Ｆｒ．１０）。Ｆｒ．３
经硅胶柱色谱，以氯仿－甲醇梯度洗脱得到９个流
份（Ｆｒ．３－１～Ｆｒ．３－９），Ｆｒ．３－２经Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０
柱色谱，以纯氯仿洗脱得到化合物５（１４．７ｍｇ）。
Ｆｒ．４经硅胶柱色谱，以石油醚－乙酸乙酯梯度洗脱
得到６个流份（Ｆｒ．４－１～Ｆｒ．４－６），Ｆｒ．４－２经多次
硅胶柱色谱，以氯仿－甲醇梯度洗脱得到化合物１
（２２．４ｍｇ）、２（３５．１ｍｇ）和３（６．５ｍｇ）；Ｆｒ．５经硅
胶柱色谱，以氯仿－甲醇梯度洗脱得到５个流份
（Ｆｒ．５－１～ Ｆｒ．５－５），Ｆｒ．５－２经Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０
柱色谱，以氯仿－甲醇体积分数１∶１洗脱得到化合
物４（６．５ｍｇ）和６（５．１ｍｇ）；Ｆｒ．５－４再以石油醚－
２４　 中　国　海　洋　药　物 ３３卷
丙酮（体积比２∶１）为洗脱剂进行硅胶柱色谱分离
后经Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０纯化得化合物８（４．３ｍｇ）
和９（２．１ｍｇ）；Ｆｒ．５－５经Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０柱色
谱，以纯乙醇洗脱后，再经氯仿－甲醇（体积比１５∶
１）梯度洗脱得到化合物７（２．２ｍｇ），其中１个流份
经反相柱色谱得到化合物１０（３．６ｍｇ）。
１．２．３　抗菌活性测定
采用滤纸片琼脂扩散法［１１］测定化合物的抗菌
活性。将样品配成质量浓度为２０ｍｇ／ｍＬ的氯仿甲
醇溶液，取样品溶液２５μＬ滴加于直径为６ｍｍ的
灭菌滤纸片上，待溶剂挥干后，将已点样的滤纸片
贴于已涂供试菌悬液１００μＬ （菌液浓度１０
５～
１０７　ｃｆｕ／ｍＬ）的平板上，放置３０ｍｉｎ后，放入培养箱
中３５～３７℃无光照培养，１８～２４ｈ后观察并测量抑
菌圈直径。每个样品重复３次，同时以氯仿甲醇试
剂为阴性对照，以硫酸卡那霉素为阳性对照。
１．２．４　体外肿瘤细胞生长抑制实验（ＭＴＴ法）［１２］
实验设阴性对照组（ＤＭＳＯ溶剂对照组）、阳
性对照组（丝裂霉素Ｃ）和５个不同浓度的待测样
品，每个浓度设２个平行。
收集对数生长期细胞，血球计数板计数，按每
孔４　５００个癌细胞量接种于９６孔平底细胞培养板
中，置于５％ＣＯ２、湿度９０％以上、３７℃温箱中培
养。２４ｈ后取出加入一定量的待测样品，继续培
养３ｄ后取出置于显微镜下观察每孔细胞形态，记
录细胞形态变化情况，接着每孔加入５ｍｇ／ｍＬ的
ＭＴＴ溶液（溶于平衡盐溶液ＰＢＳ）５０μＬ，３７℃反
应４ｈ后，将细胞培养液吸出，每孔加入１００μＬ
ＤＭＳＯ使Ｆｏｒｍａｚａｎｅ充分溶解后，将细胞培养板
置于ＥＬＸ－８００酶标仪上，用４９０ｎｍ波长测各孔
的吸光度 （Ａ），按下列公式求生长抑制率。而后
以样品浓度为横坐标，以抑制率为纵坐标，作图并
求出抑制率为５０％时样品的浓度（ＩＣ５０），样品活
性结果即以半数抑制浓度（ＩＣ５０）表示。
生长抑制率＝１－
用药组平均Ａ值
对照组平均Ａ值×１００％
２　结构鉴定
化合物１：无色针晶（氯仿－甲醇），［α］３１Ｄ －３３．９°
（ｃ　０．４１，ＣＨＣｌ３）；ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：１４８．１［Ｍ］＋。结
合１３Ｃ－ＮＭＲ（ＤＥＰＴ）谱数据推断其分子式为Ｃ９
Ｈ８Ｏ２。１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）；δ７．７９（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１４．７Ｈｚ，Ｈ－７），７．５６（２Ｈ，ｍ，Ｈ－２，Ｈ－
６），７．４１（３Ｈ，ｍ，Ｈ－３，Ｈ－４，Ｈ－５），６．４６（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１５ Ｈｚ，Ｈ－８）；１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１２５
ＭＨｚ）；δ１７１．４（Ｃ－９），１４７．１（Ｃ－８），１３４．２（Ｃ－１），
１３０．９（Ｃ－４），１２９．１（Ｃ－２，Ｃ－６），１２８．５（Ｃ－３，Ｃ－
５），１１７．３（Ｃ－７）。上述波谱数据与文献［１３］报道
基本一致，因此鉴定化合物 １ 为反式桂皮酸
（ｔｒａｎｓ－ｃｉｎｎａｍｉｃａｃｉｄ）。
化合物２：黄色油状物，ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：１６８．４
［Ｍ］＋。结合１　Ｈ－ＮＭＲ和１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＤＥＰＴ）谱数
据推断其分子式为 Ｃ９Ｈ１２Ｏ３。１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，
５００ＭＨｚ）；δ６．８７ （３Ｈ，ｍ，Ｈ－２，Ｈ－５，Ｈ－６），
４．５７（２Ｈ，ｓ，Ｈ－７），３．８４（６Ｈ，ｓ，Ｈ－８，Ｈ－９）；
１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１２５ＭＨｚ）；δ１３３．７（Ｃ－１），１１０．５
（Ｃ－２），１４９．１（Ｃ－３），１４８．６（Ｃ－４），１１１．１（Ｃ－５），１１９．
４（Ｃ－６），６５．２（Ｃ－７），５６．０（Ｃ－８），５５．９（Ｃ－９）。上
述波谱数据与文献［１４］报道基本一致，因此鉴定
化合物２为３，４－二甲氧基苯甲醇。
化合物 ３：白色粉末（氯仿），ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：
３１８．２ ［Ｍ］＋。 结 合１　Ｈ－ＮＭＲ 和１３　Ｃ－ＮＭＲ
（ＤＥＰＴ）谱数据推断其分子式为 Ｃ１８Ｈ２２Ｏ５。１　Ｈ－
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）；δ６．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１
Ｈｚ，Ｈ－８），６．６９（１Ｈ，ｓ，Ｈ－９），６．９６（１Ｈ，ｓ，Ｈ－
１０），６．６８（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１１），６．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１
Ｈｚ，Ｈ－１２），４．６０（２Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），３．８４（３Ｈ，ｓ，
Ｈ－１４），３．８５（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５），３．８１（３Ｈ，ｓ，Ｈ－
１６），３．９０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１７），３．９８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１８）；
１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１２５ＭＨｚ）；δ１４９．３（Ｃ－１），１４８．
７（Ｃ－２），１４７．８（Ｃ－３），１４７．７（Ｃ－４），１３３．７（Ｃ－５），
１３１．３（Ｃ－６），１３１．３（Ｃ－７），１２０．５（Ｃ－８），１１４．１
（Ｃ－９），１１２．５（Ｃ－１０），１１２．１（Ｃ－１１），１１１．６（Ｃ－
１２），６３．２（Ｃ－１３），５６．２（Ｃ－１４），５６．２（Ｃ－１５），５６．１
（Ｃ－１６），５６．０（Ｃ－１７），３７．８（Ｃ－１８）。上述波谱数
据与文献［１５］报道基本一致，因此鉴定化合物３
为２－［（３，４－ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈｙｌ］－４，５－ｄｉｍｅ－
ｔｈｏｘｙ－ｂｅｎｚｅｎｅｍｅｔｈａｎｏｌ。
化合物４：无色结晶（甲醇），ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：２４４．２
［Ｍ］＋。结合１　Ｈ－ＮＭＲ和１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＤＥＰＴ）谱数据
推断其分子式为Ｃ９Ｈ１２Ｎ２Ｏ６。１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，
５００ＭＨｚ）；δ５．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，Ｈ－５），８．００
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｈ－６），５．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．５
Ｈｚ，Ｈ－１＇），４．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．５，５．０Ｈｚ，Ｈ－２＇），
４期 古海刚，等：红树植物角果木内生真菌Ｊ６２生物活性成分研究 ２５　
４．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．０，５．０Ｈｚ，Ｈ－３＇），４．０１（１Ｈ，
ｍ，Ｈ－４＇），３．７９（２Ｈ，ｍ，Ｈ－５＇）；１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，
１２５ＭＨｚ）；δ１５２．５（Ｃ－２），１６６．２（Ｃ－４），１０２．７（Ｃ－５），
１４２．７（Ｃ－６），９０．７（Ｃ－１＇），７１．３（Ｃ－２＇），７５．７（Ｃ－３＇），
８６．４（Ｃ－４＇），６２．３（Ｃ－５＇）。上述波谱数据与文献［１６］
报道基本一致，因此鉴定化合物４为尿嘧啶核苷
（ｕｒｉｄｉｎｅ）。
化合物５：黄色针晶（氯仿），［α］３１Ｄ －９９．２°（ｃ
０．２５，ＣＨＣｌ３）；ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：２６５．４［Ｍ］＋。结合１
Ｈ－ＮＭＲ和１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＤＥＰＴ）谱数据推断其分子
式为Ｃ１５Ｈ２３ＮＯ３。１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）；
δ７．５６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．０，８．５Ｈｚ，Ｈ－７），１．８６
（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｈ－８），０．７６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５
Ｈｚ，Ｈ－９），１．２８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１０），１．６７（１Ｈ，ｍ，
Ｈ－１１），１．７２（２Ｈ，ｍ，Ｈ－１２），０．９１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝
７．５Ｈｚ，Ｈ－１３），１．２９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，Ｈ－
１４），３．６７（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５）；１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１２５
ＭＨｚ）；δ２０２．８（Ｃ－１），６０．９（Ｃ－２），１９６．７（Ｃ－３），
１４３．４（Ｃ－４），１４８．６（Ｃ－５），１０３．１（Ｃ－６），１４９．９
（Ｃ－７），３３．１（Ｃ－８），９．５（Ｃ－９），２２．２（Ｃ－１０），３４．６
（Ｃ－１１），２８．３（Ｃ－１２），１３．２（Ｃ－１３），１９．３（Ｃ－１４），
５９．６（Ｃ－１５）。上述波谱数据与文献 ［１７］报道基
本一致，因此鉴定化合物５为ｓｉｍｉｌｉｎ　Ｂ。
化合物６：无色油状（氯仿），［α］３１Ｄ ＋１３８．６（ｃ
０．０２，ａｃｅｔｏｎｅ）；ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：２９０．１［Ｍ］＋。结
合１　Ｈ－ＮＭＲ和１３Ｃ－ＮＭＲ（ＤＥＰＴ）谱数据推断其分
子式为Ｃ１７Ｈ２２Ｏ４。１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）；
δ４．７３（１Ｈ，ｂｒｓ，Ｈ－１ａ），４．６１（１Ｈ，ｂｒｓ，Ｈ－１ｂ），
２．１９（１Ｈ，ｍ，Ｈ－３），１．９５（２Ｈ，ｍ，Ｈ－４），２．３４
（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．５，１．５Ｈｚ，Ｈ－８），４．５４（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝５．５Ｈｚ，Ｈ－１１），２．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，５．５
Ｈｚ，Ｈ－１２ａ），２．０２ （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．０ Ｈｚ，Ｈ－
１２ｂ），１．６５（３Ｈ，ｓ，Ｈ－２＇），１．３２（３Ｈ，ｓ，Ｈ－６＇），
３．８１ （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，Ｈ－ＯＣＨ２ａ），３．４８
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，Ｈ－ＯＣＨ２ｂ），４．２２（１Ｈ，ｓ，
Ｈ－ＯＨ）；１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１２５ ＭＨｚ）；δ１１１．６
（Ｃ－１），１４５．４（Ｃ－２），４８．８（Ｃ－３），２７．０（Ｃ－４），３７．５
（Ｃ－５），８９．４（Ｃ－６），４３．４（Ｃ－７），１５．７（Ｃ－８），１０３．０
（Ｃ－９），１７３．０（Ｃ－１０），７８．６（Ｃ－１１），４４．２（Ｃ－１２），
８１．９（Ｃ－１３），１９８．９（Ｃ－１４），１９．２（Ｃ－２＇），２３．４（Ｃ－
６＇），７０．８（Ｃ－ＯＣＨ２）。上述波谱数据与文献［１８］
报道基本一致，因此鉴定化合物６为ｃｏｉｂａｎｏｌ　Ｃ。
化合物７：无色无定形固体（甲醇），ＥＩ－ＭＳ
ｍ／ｚ：３９９．２［Ｍ］＋。结合１　Ｈ－ＮＭＲ 和１３　Ｃ－ＮＭＲ
（ＤＥＰＴ）谱数据推断其分子式为 Ｃ２０Ｈ３１Ｏ６Ｓ－。
１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）；δ１．０６（１Ｈ，ｄｄｄ，
Ｊ＝１２．２，１１．８，３．２ Ｈｚ，Ｈ－１），１．９３ （１Ｈ，
ｄｄｄｄｄ，Ｊ＝１１．４，１１．３，１０．６，２．８，２．８Ｈｚ，Ｈ－
２），１．４１（１Ｈ，ｄｄｄｄｄ，Ｊ＝１１．４，３．２，３．２，２．８，
２．８ Ｈｚ，Ｈ－２），１．０４ （１Ｈ，ｂｒｄｄｄ，Ｊ＝１１．３，
１０．８，３．２Ｈｚ，Ｈ－３），２．１２（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝１０．８
Ｈｚ，Ｈ－３），１．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．３，３．８Ｈｚ，Ｈ－
５），２．４７（１Ｈ，ｂｒｄｄｄ，Ｊ＝１３．２，１１．３，５．３Ｈｚ，
Ｈ－６），２．１２（１Ｈ，ｂｒｄｄ，Ｊ＝１３．２，３．８Ｈｚ，Ｈ－６），
５．３３（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，Ｈ－７），１．６５（１Ｈ，
ｂｒｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，Ｈ－９），１．３１（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１１），
１．５３（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１１），１．２６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１２），１．５２
（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１２），１．８８（１Ｈ，ｂｒｓ，Ｈ－１４），１．８４
（１Ｈ，ｂｒｓ，Ｈ－１４），１．５６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈ－
１５），４．０８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｈ－１６），０．７９（３Ｈ，
ｓ，Ｈ－１７），１．１４（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１８），０．７８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－
２０）；１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，１２５ＭＨｚ）；δ４１．３（Ｃ－１），
２１．０（Ｃ－２），３９．８（Ｃ－３），４８．４（Ｃ－４），５２．９（Ｃ－５），
２５．８（Ｃ－６），１２２．７（Ｃ－７），１３６．１（Ｃ－８），５２．９（Ｃ－
９），３６．９（Ｃ－１０），２２．１（Ｃ－１１），３８．３（Ｃ－１２），３４．１
（Ｃ－１３），４５．０（Ｃ－１４），４４．８（Ｃ－１５），６６．１（Ｃ－１６），
２２．１（Ｃ－１７），３０．１（Ｃ－１８），１８０．９（Ｃ－１９），１４．９
（Ｃ－２０）。上述波谱数据与文献［１９］报道基本一
致，因此鉴定化合物７为ｈｙｍａｔｏｘｉｎ　Ｃ。
化合物 ８：无色针晶（氯仿），ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：
４２８．２ ［Ｍ］＋。 结 合１　Ｈ－ＮＭＲ 和１３　Ｃ－ＮＭＲ
（ＤＥＰＴ）谱数据推断其分子式为 Ｃ２８ Ｈ４４Ｏ３。
１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）；δ３．９７（１Ｈ，ｍ，
Ｈ－３），６．２４ （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，Ｈ－６），６．５０
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｈ－７），０．８２（３Ｈ，ｓ，Ｈ－
１８），０．８８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１９），０．９０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０
Ｈｚ，Ｈ－２１），５．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．５，８．５Ｈｚ，
Ｈ－２２），５．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．５，７．５Ｈｚ，Ｈ－２３），
０．８１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｈ－２６），０．８３（３Ｈ，ｄ，
Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｈ－２７），０．９９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，
Ｈ－２８）；１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，１２５ＭＨｚ）；δ３４．９（Ｃ－
１），３０．３（Ｃ－２），６６．６（Ｃ－３），３７．１（Ｃ－４），８２．３（Ｃ－
５），１３５．６（Ｃ－６），１３０．９（Ｃ－７），７９．６（Ｃ－８），５１．３
（Ｃ－９），３７．１（Ｃ－１０），２３．６（Ｃ－１１），３９．５（Ｃ－１２），
２６　 中　国　海　洋　药　物 ３３卷
４４．７（Ｃ－１３），５１．９（Ｃ－１４），２０．８（Ｃ－１５），２８．８（Ｃ－
１６），５６．４（Ｃ－１７），１３．０（Ｃ－１８），１８．３（Ｃ－１９），３９．９
（Ｃ－２０），２１．０（Ｃ－２１），１３５．４（Ｃ－２２），１３２．５（Ｃ－
２３），４２．９（Ｃ－２４），３３．２（Ｃ－２５），１９．８（Ｃ－２６），２０．１
（Ｃ－２７），１７．７（Ｃ－２８）。上述波谱数据文献［２０］报
道基本一致，因此鉴定化合物８为５，８－ｅｐｉｄｉｏｘｙ－
５α，８α－ｅｒｇｏｓｔａ－６，２２Ｅ－ｄｉｅｎ－３β－ｏｌ。
化合物９：无色针晶（乙酸乙酯），ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：
４３０．３［Ｍ］＋。结合１　Ｈ－ＮＭＲ和１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＤＥＰＴ）
谱数据推断其分子式为Ｃ２８Ｈ４６Ｏ３。１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３
ＯＤ，５００ＭＨｚ）；δ１．２１～１．０７（２Ｈ，ｍ，Ｈ－１），
１．８８～１．６９（１Ｈ，ｍ，Ｈ－２），１．２１～１．０７（１Ｈ，
ｍ，Ｈ－２），３．６７（１Ｈ，ｍ，Ｈ－３），１．２１～１．０７（２Ｈ，
ｍ，Ｈ－４），３．２６（１Ｈ，ｂｒｓ，Ｈ－６），４．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝２．５Ｈｚ，Ｈ－７），１．８８～１．６９（１Ｈ，ｍ，Ｈ－９），
１．２１～１．０７（２Ｈ，ｍ，Ｈ－１１），１．８８～１．６９（２Ｈ，
ｍ，Ｈ－１２），１．６９～１．６５（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１４），１．２１～
１．０７（２Ｈ，ｍ，Ｈ－１５），１．５５～１．５１（２Ｈ，ｍ，Ｈ－
１６），１．２１～１．０７（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１７），０．４１（３Ｈ，ｓ，
Ｈ－１８），０．７８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１９），１．８８～１．６９（１Ｈ，
ｍ，Ｈ－２０），０．８７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，Ｈ－２１），
５．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．０，７．０Ｈｚ，Ｈ－２２），５．０５
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．５，８．０Ｈｚ，Ｈ－２３），１．８８～１．６９
（１Ｈ，ｍ，Ｈ－２４），１．２１～１．０７（１Ｈ，ｍ，Ｈ－２５），
０．６６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，Ｈ－２６），０．７６（３Ｈ，ｄ，
Ｊ＝６．５Ｈｚ，Ｈ－２７），０．６９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，Ｈ－
２８）；１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，１２５ＭＨｚ）；δ２１．４（Ｃ－１），
４０．２（Ｃ－２），６６．１（Ｃ－３），３１．２（Ｃ－４），７４．６（Ｃ－５），
７２．２（Ｃ－６），１１９．５（Ｃ－７），１３９．９（Ｃ－８），４２．４（Ｃ－
９），３６．８（Ｃ－１０），３２．６（Ｃ－１１），３９．１（Ｃ－１２），４３．１
（Ｃ－１３），５４．３（Ｃ－１４），２２．７（Ｃ－１５），２７．８（Ｃ－１６），
５５．４（Ｃ－１７），１２．２（Ｃ－１８），１７．８（Ｃ－１９），４０．１（Ｃ－
２０），２１．１（Ｃ－２１），１３５．５（Ｃ－２２），１３１．５（Ｃ－２３），
４２．１（Ｃ－２４），３２．６（Ｃ－２５），１９．９（Ｃ－２６），１９．６（Ｃ－
２７），１７．４（Ｃ－２８）。上述波谱数据与文献［２１］报道
的豆甾－７，２２－二烯－３β，５α，６α－三醇基本一致，并通
过２Ｄ－ＮＭＲ实验数据解析确证了其结构和ＮＭＲ
数据归属。
化合物１０：无色无定形固体（甲醇），［α］３１Ｄ ＋
１．７１°（ｃ　０．２０，ＭｅＯＨ）；ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：７１３．３
［Ｍ］＋。结合１　Ｈ－ＮＭＲ和１３　Ｃ－ＮＭＲ（ＤＥＰＴ）谱数
据推断其分子式为 Ｃ４０Ｈ７５ＮＯ９。１　Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３
ＯＤ，５００ＭＨｚ）；δ４．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．８，４．０
Ｈｚ，Ｈ－１），３．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．８，７．０Ｈｚ，Ｈ－
１），５．２０～５．２４（１Ｈ，ｍ，Ｈ－２），４．２０（１Ｈ，ｔ，Ｊ
＝７．０Ｈｚ，Ｈ－３），５．５１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．２，７．２
Ｈｚ，Ｈ－４），５．７６（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１５．２，５．９Ｈｚ，Ｈ－
５），２．１８～２．２５（２Ｈ，ｍ，Ｈ－６），１．２８（２０Ｈ，ｂｒ．，
Ｈ－７－１６），１．２８～１．３１（２Ｈ，ｍ，Ｈ－１７），１．２８～
１．３１（２Ｈ，ｍ，Ｈ－１８），０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，
Ｈ－１９），４．１０～４．１５（１Ｈ，ｍ，Ｈ－２＇），１．７０～１．７３
（１Ｈ，ｍ，Ｈ－３＇），１．７８～１．８０（１Ｈ，ｍ，Ｈ－３＇），１．５３
～１．５６（２Ｈ，ｍ，Ｈ－４＇），１．２８～１．３１（２Ｈ，ｍ，Ｈ－５＇），
２．１６～２．１８（２Ｈ，ｍ，Ｈ－６＇），５．３７～５．４１（１Ｈ，ｍ，
Ｈ－７＇），５．３７～５．４１（１Ｈ，ｍ，Ｈ－８＇），２．１６～２．１８
（２Ｈ，ｍ，Ｈ－９＇），１．２８（６Ｈ，ｂｒ．，Ｈ－１０＇－１２＇），１．２８
（２Ｈ，ｂｒ．，Ｈ－１３＇），１．２８（２Ｈ，ｂｒ．，Ｈ－１４＇），０．８９
（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，Ｈ－１５＇），８．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
８．９Ｈｚ，Ｈ－ＮＨ），４．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，Ｈ－
１＇），３．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．７，５．７Ｈｚ，Ｈ－２＇），
３．２７～３．３０（１Ｈ，ｍ，Ｈ－３＇），３．２９～３．３０（１Ｈ，ｍ，
Ｈ－４＇），３．３３－３．３９（１Ｈ，ｍ，Ｈ－５＇），３．８５（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝１１．８Ｈｚ，Ｈ－６＇），３．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．８，
５．５Ｈｚ，Ｈ－６＇）；１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，１２５ＭＨｚ）；
δ６９．７（Ｃ－１），５４．６（Ｃ－２），７２．９（Ｃ－３），１３１．１（Ｃ－
４），１３４．７（Ｃ－５），３３．８（Ｃ－６），３０．４～３０．８（Ｃ－７－
１６），３３．１（Ｃ－１７），２３．８（Ｃ－１８），１４．５（Ｃ－１９），１７７．２
（Ｃ－１＇），７４．１（Ｃ－２＇），３５．９（Ｃ－３＇），２６．２（Ｃ－４＇），３０．４～
３０．８（Ｃ－５＇），２８．７（Ｃ－６＇），１２９．０（Ｃ－７＇），１３１．０（Ｃ－８＇），
２８．７（Ｃ－９＇），３０．４～３０．８（Ｃ－１０＇－１２＇），３３．１（Ｃ－１３＇），
２３．８（Ｃ－１４＇），１４．５（Ｃ－１５＇），１０４．７（Ｃ－１＇），７５．０（Ｃ－
２＇），７７．９（Ｃ－３＇＇），７１．６（Ｃ－４＇），７８．０（Ｃ－５＇＇），
６２．７（Ｃ－６＇）。上述波谱数据与文献［２２］报道基本一
致，因此鉴定化合物１０为ｃｒｉｓｐｉｎ　Ａ。
３　化合物生物活性测试
３．１　抗菌活性测定结果
采用滤纸片琼脂扩散法测定化合物的抗菌活
性，本实验滤纸圆片直径为６ｍｍ，抑菌圈直径大
小为３次重复试验的平均值，阳性对照硫酸卡那
霉素的抑菌圈直径为１８．７ｍｍ。结果表明化合物
１，２和７对金黄色葡萄球菌有抑制作用，并且化合
物１和２对白色念珠菌也有抑制作用（见表１），其
他化合物未显示出活性。
４期 古海刚，等：红树植物角果木内生真菌Ｊ６２生物活性成分研究 ２７　
３．２　体外肿瘤细胞生长抑制实验结果
以 ＭＴＴ法对１０个化合物进行了体外肿瘤细
胞毒活性筛选，结果表明，化合物２和５对体外培
养的人慢性髓原性白血病细胞株Ｋ－５６２的增殖显
示出抑制作用，其ＩＣ５０值分别为１０．１和８．４μｇ·
ｍＬ－１。阳性对照为丝裂霉素 Ｃ，其ＩＣ５０ 值为
７．１μｇ·ｍＬ
－１。
表１ 化合物１，２和７的抗菌活性
Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１，２　ａｎｄ　７
／ｍｍ
指示菌ｉｎｄｉｃａｔｏｒ
化合物ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ
１　 ２　 ７
金黄色葡萄球菌
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ
１３．３　 ９．６　 ８．７
白色念珠菌
Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ
８．５　 １３．６ －
４　结果与讨论
本次研究从红树植物角果木内生真菌Ｊ６２的
发酵产物中共分离鉴定了１０个化合物，均为首次
从红树植物角果木内生真菌中分离得到。生物活
性测试结果发现化合物１，２和７具有抗金黄色葡
萄球菌活性，化合物１和２具有抗白色念珠菌的
活性；化合物２和５对肿瘤细胞株 Ｋ－５６２显示有
生长抑制活性。其中化合物７的抗金黄色葡萄球
菌活性和化合物５对慢性髓原白血病 Ｋ５６２细胞
株的细胞毒活性均为首次发现。另外，化合物５
和６为仅在植物内生真菌中发现的次生代谢产
物，两类化合物具有抗肿瘤、抗病毒和抗菌等生物
活性。近年来角果木的药用价值一直得到国内外
学者的重视，它具有抗菌、抗肿瘤等活性。本研究
组从红树植物角果木内生真菌Ｊ６２的次生代谢产
物中分离得到具有抗菌、抗肿瘤活性的化合物，这
为寻找新的药源开辟了新的方向，具有一定的应
用价值和开发前景。因此，红树植物角果木内生
真菌次生代谢产物的化学成分和药理活性值得进
一步的深入研究，为更充分合理地对其进行开发
利用提供科学依据。
参考文献
［１］　陈焕镛主编．海南植物志：第一卷 ［Ｍ］．北京：科学出版
社，１９６４：２２０－２２１．
［２］　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｅｃｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｅｃｏｎｏｍｉｃ　Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍａｎ－
ｇｒｏｖｅｓ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：Ｃｈｉｎａ　Ｈｉｇｈｅｒ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ
ａｎｄ　Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ　Ｐｒｅｓｓ，２０００：１－１５．
［３］　Ｌｉｎ　Ｐ．Ｔｈｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｍａｎｇｒｏｖｅ　ｐｌａｎｔｓ　ｆｒｏｍ　Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ｃｈｉ－
ｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍａｒｉｎｅ　Ｄｒｕｇｓ，１９８４，３（４）：４５－５１．
［４］　Ａｎｊａｎｅｙｕｌｕ　Ａ　Ｓ　Ｒ，Ｒａｏ　Ｖ　Ｌ．Ｃｅｒｉｏｐｓｉｎｓ　Ａ，Ｄ，ｄｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ
ｆｒｏｍＣｅｒｉｏｐｓ　ｄｅｃａｎｄｒａ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，６０（８）：
７７７－７８２．
［５］　Ａｍｍａｎａｍａｎｃｈｉ　Ｓ　Ｒ，Ａｎｊａｎｅｙｕｌｕ　Ａ　Ｓ　Ｒ，Ｖａｄａｌｉ　Ｌ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．
Ａ　ｎｅｗ　ｄｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ　ｃｅｒｉｏｐｓｉｎｓ　Ｅ　ｆｒｏｍＣｅｒｉｏｐｓ　ｄｅｃａｎｄｒａ ［Ｊ］．
Ｊ　Ｎａｔ　Ｐｒｏｄ，２００２，６５（４）：５９２－５９４．
［６］　Ａｎｊａｎｅｙｕｌｕ　Ａ　Ｓ　Ｒ，Ｒａｏ　Ｖ　Ｌ．Ｃｅｒｉｏｐｓｉｎｓ　Ｆ　ａｎｄ　Ｇ，Ｄｉｔｅｒｐｅ－
ｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍ　Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｄｅｃａｎｄｒａ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，６２
（８）：１２０７－１２１１．
［７］　张炎，邓志威，高天翔，等．中国红树植物角果木的化学成
分 ［Ｊ］．药学学报，２００５，４０（１０）：９３５－９３９．
［８］　林文翰，陈英玉，顾佳，等．Ｔａｇａｌｓｉｎ　Ｃ及其同系物在制备
抗肿瘤药物中的应用 ［Ｐ］．中国：２００６１００８１０５１．７，２００７－
１１－２８．
［９］　秦盛，邢珂，吴少华，等．３种仙人掌植物内生真菌抑菌活
性的研究 ［Ｊ］．中草药，２００６，３７（６）：９１７－９２１．
［１０］　曾松荣，徐倩雯，叶保童，等．虎杖内生真菌的分离及产抗
菌活性物质的筛选 ［Ｊ］．菌物研究，２００５，３（２）：２４－２６．
［１１］　徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学 ［Ｍ］．北京：人民
卫生出版社，２００３：６５１－６５６．
［１２］　Ｍｏｓｍａｎｎ　Ｔ．Ｒａｐｉｄ　ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ　ａｓｓａｙ　ｆｏｒ　ｃｅｌｕｌａｒ　ｇｒｏｗｔｈ
ａｎｄ　ｓｕｒｖｉｖａｌ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ
ａｓｓａｙｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｉｍｍｕｎｏｌ　Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９８３，６５（１）：５５－６３．
［１３］　黄雪峰，李凡，陈才良，等．土荆芥化学成分的研究 ［Ｊ］．
中国天然药物，２００３，１（１）：２４－２６．
［１４］　逯忠祥，郝小江，赵庆，等．红果樫木化学成分研究 ［Ｊ］．
云南中医学院学报，２０１０：３３（５）：１７－１９．
［１５］　Ｊａｃｑｕｅｌｉｎｅ　Ａ　Ｈ，Ｇｏｒｄｏｎ　Ｊ　Ｌ．Ｔｈｅ　ｓｅｌｆ－ｃｏｎｄｅｎｓａｔｉｏｎ　ｒｅａｃ－
ｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｌｉｇｎｉｎ　ｍｏｄｅｌ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，ｖａｎｉｌｙｌ　ａｎｄ　ｖｅｒａｔｒｙｌ
ａｌｃｏｈｏｌ［Ｊ］．Ａｕｓｔ　Ｊ　Ｃｈｅｍ，１９８０，３３：９１７－９２５．
［１６］　Ｈｕ　Ｘ　Ｙ，Ｄｏｕ　Ｄ　Ｑ，Ｐｅｉ　Ｙ　Ｐ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ
ｏｆ　ｒｏｏｔｓ　ｏｆ　ｒａｎｕｎｃｕｌｕｓ　ｔｅｒｎａｔｕｓ ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００６，１５（２）：１２７－１２９．
［１７］　Ｈｏｌｙ　Ａ　Ｗ，Ｄａｌｅ　Ｃ　Ｓ，ａｎｄ　Ｊａｍｅｓ　Ｂ　Ｇ．Ｓｉｍｉｌｉｎｓ　Ａ　ａｎｄ　Ｂ：
ｎｅｗ　ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｃｏｐｒｏｐｈｉｌｏｕｓ　ｆｕｎｇｕｓ
ｓｐｏｒｏｒｍｉｅｌｌａ　ｓｉｍｉｌｉｓ ［Ｊ］．Ｔｃｔｒａｈｃｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９２，３３
（９）：１１５７－１１６０．
［１８］　Ｙｕａｎ　Ｗ　Ｈ，Ｌｉｕ　Ｍ，Ｊｉａｎｇ　Ｎ，ｅｔ　ａｌ．Ｇｕｉｇｎａｒｄｏｎｅｓ　Ａ－Ｃ：
Ｔｈｒｅｅ　Ｍｅｒｏｔｅｒｐｅｎｅｓ　ｆｒｏｍＧｕｉｇｎａｒｄｉａ　ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ［Ｊ］Ｅｕｒ
Ｊ　Ｏｒｇ　Ｃｈｅｍ，２０１０，３３：６３４８－６３５３．
［１９］　Ｋａｔｒｉｎ　Ｂ，Ｓｙｌｖｉｅ　Ｒ，Ｗｏｌｆｒａｍ　Ｔ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｙｍａｔｏｘｉｎｓ　Ｂ－Ｅ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｐｈｙｔｏ－
ｔｏｘｉｎｓ　ｆｒｏｍ　Ｈｙｐｏｘｙｌｏｎ　ｍａｍｍａｔｕｍ ｆｕｎｇａｌ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｏｆ
ｌｅｕｃｅ　ｐｏｐｌａｒｓ［Ｊ］．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９１，４７ （３９）：８３５１－
８３６０．
［２０］　Ｓｉｍｏｎａ　Ｈ，Ｊａｎ　Ｓ，Ｍａｒｔｉｎ　Ｄ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ
ｏｆ　ｓｔｅｒｅｕｍ　ｓｕｂｔｏｍｅｎｔｏｓｕｍ ａｎｄ　ｔｗｏ　ｏｔｈｅｒ　ｂｉｒｃｈ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ
ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｅｔｅｓ：ａｎ　ｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｅｓ　ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｓｔｕｄｙ ［Ｊ］．
Ｃｈｅｍ　Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓ，２００８，５：７４３－７５０．
［２１］　吴秀丽，林生，朱承根，等．火木层孔菌液体培养物的化学
成分研究 ［Ｊ］．中国中药杂志，２０１１，３６（７）：８７４－８８０．
［２２］　Ｉｊａｚ　Ａ，Ｉｔｒａｔ　Ａ，Ｉｔｒａｔ　Ｆ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｗｏ　ｎｅｗ　ｐｒｏｔｅａｓｅ－ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ
ｇｌｙｃｏｓｐｈｉｎｇｏｌｉｐｉｄｓ　ｆｒｏｍ　ｂｕｄｄｌｅｊａ　ｃｒｉｓｐａ ［Ｊ］．Ｃｈｅｍ
Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓ，２００７，４：９１７－９２４．