全 文 ：·病毒学·
狼毒大戟对病毒性 T细胞白血病
的抑制作用
姚苹 崔 刘萍 王淑娥
【摘要】 目的 研究中药狼毒大戟抗病毒性肿瘤机理。方法 615近交系小鼠 50 只 ,随机分为
5 组 ,其中设肿瘤对照组(Ⅰ), 2种剂量的治疗组(Ⅱ 、Ⅲ),药物对照组(Ⅳ)和正常对照组(Ⅴ)。治疗
组和肿瘤对照组皮下接种 L615白血病肿瘤株 , 治疗组及药物对照组每天经胃分别给予狼毒水浸出液
1.8 g kg(36 mg)、3.0 g kg(60 mg),连续 1 周。检测外周血白细胞总数 , 观察肿瘤细胞凋亡形态特征及
DNA电泳图谱 , 并检测肿瘤细胞 c-myc和 ras基因的表达。结果 3.0 g kg 狼毒给药组外周血白细胞
[ (0.1164±0.0123)×109 L]明显低于肿瘤对照组[(0.2199±0.1099)×109 L] , P <0.01。 1.8 g kg 和
3.0g kg狼毒药物组的细胞凋亡率(23.60%±2.27%),(36.40%±4.99%)均明显高于肿瘤对照组
(4.60%±0.97%), P<0.01。在治疗组动物外周血中观察到大量的具有特征性的凋亡细胞和典型的
DNA凋亡梯形电泳带。与肿瘤对照组相比 ,狼毒治疗组肿瘤细胞 c-myc和 ras基因表达受到明显的抑
制(P<0.01), 表达强度也明显减弱。随着狼毒剂量增大 ,作用效果更为明显(P<0.01)。结论 狼毒
大戟能抑制T 淋巴细胞白血病的增殖 ,并可通过促进肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞 c-myc 和 ras 基因
表达发挥抗病毒性肿瘤的作用。
【关键词】 狼毒大戟;逆转录病毒;白血病;细胞凋亡;癌基因;小鼠
The effects of Euphorbia fisheriana stead to leukemia caused by retrovirus YAO Ping , CUI Xi , LIU Ping ,
WANG Shu-e.Department of Virology , Public Health College , Shandong University , Ji-nan 250012 , China
Corresponding author:YAO Ping , E-mail:yaoping@sdu.edu.cn
【Abstract】 Objective To investigate effects of Euphorbia fisheriana stead to cure T cell leukemia caused
by retrovirus.Methods To divide 50 mice of 615 strain into 5 groups , leukemia group(Ⅰ), two treated groups
(Ⅱ &Ⅲ), Euphorbia fisheriana stead control group without leukemia(Ⅳ), and normal group(Ⅴ).615 mice
from Ⅰ to Ⅲ groups were inoculated by leukemia cells with retrovirus.Then Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ group were given Eu-
phorbia fisheriana stead water lixivium , the dosage was 1.8 g kg , 3.0 g kg , and 3.0 g kg , respectively , orally
once time a day for 1 week.The total number ofWBC in peripheral blood was counted and apoptosis characteristics
of tumor cells , such as apoptosis body and DNA electrophoresis were observed.c-myc and ras gene expressions
were detected by histrochemical method.Results WBC number of treated group with 3.0 g kg [ (0.116 4±
0.012 3)×109 L] was much lower than tumor group [ (0.219 9±0.109 9)×109 L , (P<0.01)] .The apopto-
sis rates in tumor cells of two treated groups [ (23.60±2.27)%,(36.40±4.99)%] were higher than tumor
group [(4.60±0.97)%] and P<0.01.The typical apoptosis morphology and DNA trapeziform stead were ap-
peared in tumor cells of two treated groups.To comparewith tumor group , the expressions of c-myc and ras in Eu-
phorbia groups were less(P<0.01).As the dosage increased , the effect of therapy was more remarkable(P<
0.01).Conclusion Euphorbia fisheriana stead can inhibit T leukemia cell proliferation and so is potential by
promoting apoptosis and inhibiting c-myc ras expression.
【Key words】 Euphorbia fisheriana stead ;Retrovirus;Leukemia;Apoptosis;Oncogene;Mouse
基金项目:山东省中医药局资助项目(课题编号 98年第 17号)
作者单位:济南 250012,山东大学公共卫生学院病毒学研究室和
卫生检验研究室
通讯作者:姚苹(E-mail:yaoping@sdu.edu.cn)
狼毒大戟(Euphorbia fisheriana stead)以根入药 ,
始载于《神农本草》 ,有宣肺 、化淤 、消炎和治疗组织
溃烂及瘴气的作用 ,民间用其水煎液治疗胃癌 、肠
癌 、肺癌及骨结核等疾病〔1-3〕 。近年来已证实狼毒具
有广泛的抗癌活性〔4 , 5〕 。曾有研究用狼毒煎剂 1.5 ～
30g kg 试用于临床治疗晚期恶性肿瘤〔6〕 ,均有显著
效果 ,未发现任何不良反应 ,说明狼毒大戟在 30g kg
以下使用对人体是安全的 。我们通过小鼠逆转录病
毒诱发的 T细胞白血病动物模型 L615小鼠 ,从肿瘤
细胞增殖 、肿瘤细胞凋亡和癌基因表达方面探讨狼
毒大戟抗病毒性肿瘤的作用。
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材料和方法
实验动物:615近交系小鼠 50只 ,体重 19 ～ 20g ,
2 ～ 3月龄 ,雌雄各半 ,由中国医学科学院药物动物中
心提供。615近交系小鼠编号SCXK 11-00-0006。615
小鼠感染 L615瘤株后则为 L615 T 细胞白血病模型
小鼠 。
瘤株:L615白血病瘤株由中国医学科学院血液
病研究所引入。
药品:狼毒生药由济南市药品公司提供 ,经本校
药学院中草药生药教研室鉴定为狼毒大戟 。分别取
生药 12 ～ 20g 文火煎后 ,加蒸馏水 ,制成 LS-1(120g
L)、LS-2(200g L)狼毒煎液。
接种与给药:50只 615小鼠平衡饲养 1周后 ,随
机分为 5 组:肿瘤对照组(Ⅰ)、LS-1 组(Ⅱ)、LS-2
(Ⅲ)、药物对照组(Ⅳ)、正常对照组(Ⅴ),每组各 10
只。 Ⅳ、Ⅴ组每只鼠左腋下注射生理盐水 0.1ml ,其
余3组在相同部位接种 105 ml L615细胞 0.1ml , 24 h
后Ⅰ 、Ⅴ组每只小鼠每日胃饲生理盐水 0.3ml , Ⅱ组
LS-1 0.3ml(36mg), Ⅲ、Ⅳ组 LS-2 0.3ml(60mg),共7 d。
外周血白细胞计数:接种瘤株后第 8 天取 20μl
尾静脉血与白细胞稀释液 0.4ml摇匀 ,滴入细胞计
数室 ,静置 3min ,低倍镜下计白细胞总数 。
淋巴细胞的分离:取小鼠眶内血 0.5 ～ 1ml ,用淋
巴细胞分离液分离淋巴细胞 , RPIM 1640培养液调细
胞浓度为 107 ml。取 0.2ml细胞涂片 ,自然晾干后无
水乙醇固定15min 。
淋巴细胞形态学观察:取 L615小鼠外周淋巴细
胞涂片 ,分别进行瑞氏 、苏木素-伊红染色 ,镜下观察
细胞形态 ,计数 200个淋巴细胞 ,计算各组肿瘤细胞
的凋亡率 。
淋巴细胞 DNA 电泳:分离外周血淋巴细胞 ,提
取DNA并进行 DNA电泳 ,条件与方法见文献〔7 ,8〕。
pGEM DNA 为 Promaga 产品 。紫外透射成象仪记录
电泳结果 。
原癌基因表达产物的测定:取外周血淋巴细胞
涂片 ,采用 SP 免疫组织化学染色法对 L615 小鼠 T
肿瘤细胞中的 c-myc和 ras蛋白进行检测。识别 H-、
K-、N-ras共同抗原决定簇的小鼠单克隆抗体及特异
性识别小鼠 c-myc的兔 IgG 抗体 ,工作浓度分别为
1∶50;生物素标记的羊抗鼠 IgG和羊抗兔 IgG 抗体 ,
工作浓度均为 1∶200;辣根过氧化物酶标记的链酶卵
白素 ,工作浓度为 1∶100。以上抗体与试剂均为丹麦
DAKO公司产品。实验按说明书进行操作 ,同时设阴
性对照。
结果判断和统计学处理:显微镜下观察不同给
药组中 L615小鼠外周血肿瘤细胞中 c-myc 和 ras原
癌基因蛋白的表达 ,以棕黄色为阳性。每一标本随
机选择5个视野 ,用图象扫描仪记录结果 ,图象分析
软件对阳性染色区域及强度和非染色区域进行定量
测定 ,计算 IOD(Integrated optical Density)比值 。两组
结果之间的比较用 t 检验 ,多组结果之间的比较采
用 q检验或秩和检验(Nemenyi 法)。 IOD 比值=阳
性 IOD值÷(阳性 IOD值+阴性 IOD值)
结 果
1.狼毒大戟对 L615小鼠白血病外周血白细胞
增殖的抑制作用:狼毒高剂量组外周血白细胞总数
(0.116 4±0.012 3)×109 L , 明显低于肿瘤对照组
[(0.219 9±0.109 9)×109 L] , P <0.01;狼毒低剂量
组动物外周血白细胞总数(0.152 0±0.004 0)×109
L ,虽低于肿瘤对照组 ,但未见明显的统计学意义 , P
>0.05。
2.狼毒大戟对外周血淋巴细胞凋亡的诱导作用
(1)外周血淋巴细胞 DNA电泳:给药的 2组动
物及肿瘤组动物外周血淋巴细胞 DNA均显示典型
的凋亡梯形电泳带 ,各个电泳带的特征相同(图 1)。
正常对照组DNA未出现凋亡梯形电泳带 。
图 1 外周血淋巴细胞 DNA 电泳结果
Fig 1.DNA electrophoresis of T cells
M:pGEM DNA;Ⅰ :leukemia group;Ⅱ:t reated group with 36 mg
Euphorbia fisheriana stead;Ⅲ:treated group with 60mg Euphorbia fisheri-
ana stead;Ⅴ:normal group
(2)L615小鼠外周血淋巴细胞形态学观察:瑞
氏染色显示 ,肿瘤对照组 L615小鼠外周血淋巴细胞
均为成熟的淋巴细胞 。HE染色细胞核呈深蓝色 ,核
染色质致密 ,胞浆少 ,呈淡红色 ,可见少数凋亡细胞
(图 2)。
在狼毒药物组动物的外周血中 ,可见许多凋亡
细胞 ,细胞中核质浓缩 、数个圆形凋亡小体位于胞
浆 ,或呈半月形 、块状靠近胞膜边缘(图 3)。另外还
可观察到细胞膜不完整的退化淋巴细胞 ,形态不规
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则 ,核质松散呈网状 ,核染色呈天蓝色 ,胞浆呈红色 ,
在狼毒高剂量组中 ,这种退化的终末细胞比低剂量
组的数量多 ,肿瘤对照组和药物对照组动物的外周
血中极少见到这种细胞。
图 2 肿瘤对照组(Ⅰ)L615 小鼠外周血淋巴细胞 , 可见
少量 T细胞中出现凋亡小体(箭头所示 ,HE染色 , ×1 000)
Fig 2.T cells of perepherial blood in L615 mice with leuke-
mia group(Ⅰ)
A few T cells with apoptosis bodies(arrow showing)(HE, ×1000)
图 3 狼毒给药组(Ⅱ)L615 小鼠外周血凋亡的淋巴细
胞 ,可见较多 T细胞中出现凋亡小体(箭头所示 ,HE染色 , ×
1 000)
Fig 3.Apoptosis in T cells in L615 mice treated with 60mg
Euphorbia fisheriana stead
Many T cells with apoptosis bodies(arrow showing)(HE , ×1 000)
(3)肿瘤细胞凋亡率:计数结果经秩和检验表
明 ,5组实验动物的细胞凋亡率存在显著的差异 , χ2
=45.629 1 , P=0.000 0。用 q 检验对实验组进行两
两比较 ,结果显示狼毒给药组肿瘤细胞凋亡率均明
显高于肿瘤对照组 ,两组不同剂量药物对细胞凋亡
的作用也有明显的差异 ,高剂量组效果比低剂量组
更为显著 。在肿瘤对照组的肿瘤细胞中也存在细胞
凋亡现象 ,与正常对照组及药物对照组比较存在明
显的差异 ,而正常对照组和药物对照组之间无差别 ,
见表 1。
表 1 实验动物组之间细胞凋亡率的比较
Table 1.Comparison of apoptosis in different groups
Groups
Margin of
rank sum
Standard error
of margin
q value
Ⅰ&Ⅱ 100.50 18.71 5.372 0＊＊
Ⅰ&Ⅲ 199.50 27.84 7.166 3＊＊
Ⅰ&Ⅳ 145.00 18.71 7.750 6＊＊
Ⅰ&Ⅴ 155.00 27.84 5.567 8＊＊
Ⅱ&Ⅲ 99.00 18.71 5.291 8＊＊
Ⅱ&Ⅳ 245.50 27.84 8.818 6＊＊
Ⅱ&Ⅴ 255.50 36.97 6.911 3＊＊
Ⅲ&Ⅳ 344.50 36.97 9.318 8＊＊
Ⅲ&Ⅴ 354.50 46.10 7.690 2＊＊
Ⅵ &Ⅴ 10.00 18.71 0.534 5＊
q test:＊P>0.05 , ＊＊P<0.01
3.狼毒大戟对肿瘤细胞癌基因表达的影响
(1)狼毒对 ras基因表达的影响:在肿瘤对照组
L615小鼠外周淋巴细胞中 ,可见明显的 ras蛋白棕黄
染色区 ,主要位于细胞膜的内侧 ,呈均匀分布 ,狼毒
药物组 ras基因表达在细胞中的表达强度和范围均
受到明显的抑制(图略)。定量测定见表 2 ,肿瘤对照
组外周淋巴细胞中 ras表达最高 , 随着狼毒剂量增
大 , ras基因表达明显降低 。统计分析表明 ,狼毒给
药组与患病组的肿瘤细胞 ras基因表达差异有显著
性(P<0.001 ,表 3)。药物对照组和正常对照组之
间差异无显著性(P>0.05)。
表2 L615小鼠外周血淋巴细胞 ras和 c-myc基因的表达
Table 2.Expressions of ras and c-myc in T lymphocytes of
L615 mice
Groups n
Ratio of IOD(mean)
ras myc
Standard deviat ion
ras myc
Ⅰ 10 0.8243 0.749 3 0.016 7 0.037 4
Ⅱ 10 0.5490 0.564 0 0.011 7 0.009 6
Ⅲ 10 0.4305 0.424 2 0.012 9 0.016 1
Ⅳ 10 0.0110 0.011 5 0.000 7 0.019 0
Ⅴ 10 0.0107 0.011 4 0.000 7 0.008 0
表 3 实验动物组之间 ras基因表达的比较
Table 3.Comparison of ras expressions in different groups
Groups
Margin of
rank sum
Standard error
of margin
q value P
Ⅰ &Ⅱ 100.000 18.708 3 5.345 2 <0.01
Ⅰ &Ⅲ 200.000 27.838 8 7.184 2 <0.01
Ⅰ &Ⅳ 338.500 36.968 5 9.156 5 <0.01
Ⅰ &Ⅴ 361.500 46.097 7 7.842 0 <0.01
Ⅱ &Ⅲ 100.000 18.708 3 5.345 2 <0.01
Ⅱ &Ⅳ 238.500 27.838 8 8.567 2 <0.01
Ⅱ &Ⅴ 261.500 36.968 5 7.073 6 <0.01
Ⅲ &Ⅳ 138.500 18.708 3 7.403 1 <0.01
Ⅲ &Ⅴ 161.500 27.838 8 5.801 3 <0.01
Ⅳ &Ⅴ 23.000 18.708 3 1.229 4 >0.05
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(2)狼毒对 c-myc基因表达的影响:肿瘤组细胞
内见明显的 c-myc基因蛋白的表达 ,被标记的 c-myc
蛋白在细胞内呈现不均匀棕黄色染色区。肿瘤组外
周血淋巴细胞中 c-myc表达量较给药组高;给药组中
随着狼毒剂量增大 , c-myc 基因表达明显受到抑制
(图略),定量测定见表 2。统计分析表明 ,狼毒给药
组与肿瘤组外周血淋巴细胞 c-myc 基因表达差异具
有显著性(P <0.001 ,表 4)。药物对照组和正常对
照组之间差异无显著性(P >0.05)。
表 4 实验动物组之间 myc基因表达的比较
Table 4.Comparison of myc expressions in different groups
Groups
Margin of
rank sum
Standard error
of margin
q P
Ⅰ &Ⅱ 100.000 18.7083 5.3452 <0.01
Ⅰ &Ⅲ 200.000 27.838 8 7.184 2 <0.01
Ⅰ &Ⅳ 348.000 36.968 5 9.413 4 <0.01
Ⅰ &Ⅴ 352.000 46.097 7 7.636 0 <0.01
Ⅱ &Ⅲ 100.000 18.708 3 5.345 2 <0.01
Ⅱ &Ⅳ 248.000 27.838 8 8.908 4 <0.01
Ⅱ &Ⅴ 252.000 36.968 5 6.816 6 <0.01
Ⅲ &Ⅳ 148.000 18.708 3 7.910 9 <0.01
Ⅲ &Ⅴ 152.000 27.838 8 5.460 0 <0.01
Ⅳ &Ⅴ 4.000 18.7083 0.2138 >0.05
(3)不同剂量狼毒大戟对 ras 、c-myc 表达抑制
作用的比较:高剂量狼毒大戟对 ras 、c-myc 表达的抑
制作用均大于低剂量组 , t 值分别为 21.454 9 、
23.615 4 ,P <0.001 ,差异具有显著性 。
讨 论
L615小鼠是我国自己建立的T 细胞白血病动物
模型〔9〕 ,是由小鼠逆转录肿瘤病毒诱发产生。小鼠
逆转录肿瘤病毒感染 615系小鼠后 ,使受感染小鼠
外周血 T 细胞大量增殖 ,死亡率为 100%。逆转录肿
瘤病毒可通过对细胞的转导作用 、对细胞癌基因的
顺式激活作用和反式激活作用使宿主细胞产生恶
变。
狼毒大戟(Euphorbia fisheriana stead)为大戟科植
物 ,取其干燥的根茎入药。曾有文献报道用狼毒大
戟灌胃测得小鼠急性毒性(LD50)水提物剂量为 803
±224 g kg ,醇提物为 172±7 g kg 。我们也曾对狼毒
大戟在小鼠体内的毒性进行了观察 ,将狼毒大戟水
提物浓缩到最大粘稠度 9 kg L ,小鼠的最大灌胃剂量
为360 g kg ,给药 1周无一死亡〔10〕。
我们在狼毒大戟药物毒性实验的基础上 ,选择
1.8 g kg和 3.0 g kg 剂量观察药物对 L615小鼠血液
中肿瘤细胞的增殖 、凋亡和细胞癌基因表达的作用。
结果显示狼毒大戟可明显抑制血液中肿瘤细胞的增
殖。当L615小鼠胃饲60mg 狼毒 7 d后 ,外周血白细
胞总数明显降低 , P <0.01。在给予 36mg 后 ,动物
外周血白细胞总数较肿瘤对照组有不同程度减少 ,
但未见明显的统计学意义 ,这可能与用药剂量有关 。
myc和 ras基因表达异常能够影响细胞增殖的
速率 、分化过程 、酶活性及细胞代谢相关信息的传
递 ,并在肿瘤形成过程中起重要作用。 c-myc 与其它
细胞因子构成信息传导的下游路径直接诱导细胞的
增殖 ,上游路径的生长因子受体 、ras和细胞浆激酶
等在细胞凋亡中则起抑制作用〔11 , 12〕 。myc基因编码
的蛋白具有一个基本的螺旋-环状-螺旋的亮氨酸拉
链区域 ,这一区域可以使 myc 与 max 形成二聚体 ,
Myc-Max杂合二聚体可以与 DNA中 CA(C T)GTG序
列结合 ,激活转录 ,其过程为 c-myc 基因转录产生的
mRNA ,从细胞核转入细胞浆 ,翻译成 c-myc蛋白 ,通
过核定位信号再进入核内 ,与Max形成二聚体 ,再与
特异性 DNA结合位点结合 ,激活靶基因 ,参与细胞
生长的调控和转录。 ras可分为H-ras 、N-ras和K-ras ,
很多恶性肿瘤中都有 ras基因的突变和 ras蛋白的过
量表达〔13-15〕 ,如 30%的人类肿瘤中存在 ras突变 ,在
人类白血病中也检测到 ras基因的异常表达。现在
已经证实 ras可以导致许多动物体内不同类型的肿
瘤〔16〕。
狼毒促进肿瘤细胞凋亡 ,可能直接参与细胞凋
亡信号的激活过程 ,也可能是通过与逆转录病毒蛋
白相互作用而对细胞凋亡产生影响 。在实验结果中
我们还注意到在肿瘤对照组也出现不同程度的细胞
凋亡现象 ,这是由于宿主对肿瘤细胞增生的反馈作
用 ,启动机体细胞的凋亡机制 ,还是肿瘤逆转录病毒
的反式激活作用对细胞凋亡路径的影响 ,尚待进一
步探讨 。由于有多种路径可对 myc 和 ras基因表达
产生影响 ,并有多种细胞因子和原癌基因参与这两
种基因表达的调控 ,狼毒在抑制 myc和 ras基因表达
的确切位点还有待深入研究。
参 考 文 献
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(收稿日期:2002-08-12)
·病毒学·
丙型肝炎病毒核心区蛋白对 HepG2细胞凋亡的影响
全俊 胡国龄 范学工 李宁 谭德明
已有越来越多的证据表明肝细胞
和外周血淋巴细胞凋亡在丙型肝炎的发
生和慢性化过程中起着重要作用。HCV
核心区(HCV-C)具有较强的免疫调节功
能 ,但 HCV-C 蛋白究竟是促进细胞凋亡
还是抑制细胞凋亡目前还有争论。目前
尚未见有关 TRAIL(TNF related apoptosis
inducing ligand)所介导细胞凋亡在丙型
肝炎致病过程中所起作用的研究报道。
本实验主要研究 HCV-C 蛋白对 HepG2
细胞凋亡的影响。
通过基因重组技术构建包括 HCV-C
的重组真核表达质粒 , 将重组真核表达
质粒经脂质体介导稳定转染肝癌细胞
HepG2 ,经 RT-PCR和间接免疫荧光法证
实转染 HepG2 细胞中有 HCV-C 蛋白表
达。免疫组化 SABC 法检测 HepG2 细胞
中Fas、FasL表达情况;结果显示实验组
细胞中的Fas 和FasL表达与对照组比较
没有显著性差异。培养细胞中分别加入
anti-Fas 或 TRAIL(2μg ml或 4μg ml)诱导
作者单位:410008长沙 , 中南大学湘雅医
院传染科
通讯作者:全俊(E-mail:quan73jun@hot-
mai l.com)
细胞凋亡 ,以及细胞在加 TRAIL(2μg ml)
前先加入抗 TRAIL 抗体(2μg ml)阻断后
的细胞凋亡情况;经流式细胞术检测细
胞凋亡率。结果表明实验组细胞自发凋
亡率(5.17%)低于对照(8.63%);Fas抗
体能够引起细胞凋亡率显著增加(>
14%);Fas抗体所诱导细胞凋亡实验组
与对照组之间无显著性差异。 TRAIL能
够引起细胞凋亡增加;但 4μg ml 低于
2μg ml TRAIL 所诱导细胞凋亡率(实验
组细胞分别>8.47%和 11.93%);TRAIL
所诱导细胞凋亡实验组低于对照组(分
别为 11.93%和 17.53%)。 TRAIL 所诱
导细胞凋亡能被抗 TRAIL抗体所阻断。
已证实慢性丙型肝炎患者被激活的
外周血淋巴细胞表达高水平的 FasL, 肝
细胞中 Fas、 TNFR1 表达及肝细胞凋亡
率都增加 , 且与肝脏的炎症活动程度正
相关。免疫细胞可能通过诱导感染HCV
的肝细胞凋亡以清除病毒 , 从而减轻肝
脏的炎症反应 ,另一方面 HCV 亦可通过
诱导淋巴细胞凋亡致使 HCV 在体内扩
散而使病情加重和慢性化。 TRAIL的重
要生物学特点为选择性细胞毒作用 , 即
TRAIL仅诱导肿瘤细胞 , 转化细胞或病
毒感染细胞凋亡 , 而不诱导正常细胞凋
亡。本研究发现 HCV-C 蛋白不影响
HepG2 细胞中 Fas 和 FasL 表达。 Fas 抗
体和 TRAIL能够引起HepG2 细胞凋亡说
明 Fas 和 TRAIL所介导的细胞凋亡可能
在肝炎的发病过程中起着一定作用 。本
实验还发现 2μg ml比 4μg ml TRAIL诱导
凋亡的能力更大 , 目前还未见相似报道。
有可能高浓度与低浓度 TRAIL 分别激
活不同的凋亡信号传导途径。未经诱导
凋亡处理的实验组细胞自发凋亡率低于
对照组 , TRAIL 所诱导细胞凋亡实验组
亦低于对照组 , 说明 HCV-C 蛋白起抑制
细胞凋亡的作用 , 这与某些文献的结果
一致。HCV-C 蛋白究竟是促进细胞凋亡
还是抑制细胞凋亡还没有定论 , 导致这
种相互矛盾结论的原因目前还不很清
楚 ,可能与所用细胞 、实验方法各异有
关 ,也可能 HCV-C 蛋白本身既具有抑制
细胞凋亡又具有促进细胞凋亡双重功
能 ,在不同的情况下表现出不同的功能;
从本实验结果还可推测可能与所用诱导
凋亡试剂种类及用量多少有关。
(收稿日期:2002-10-15)
·187·中华微生物学和免疫学杂志 2003年 3月第 23卷第 3期 Chin J Microbiol Immunol , March 2003 , Vol 23 , No.3