全 文 ：第 22卷第 9期
2 00 5年 9月
精 细 化 工
FINE CHEM ICALS
Vo.l 22, No. 9
Sep .t 2 0 0 5
中药现代化技术
狼毒大戟水提取物中化学成分的分离与鉴定*
简　丽 ,丁立军 ,庞丽纹 ,张前程
(内蒙古工业大学 化工学院 ,内蒙古 呼和浩特　010062)
摘要:为了研究狼毒大戟水提取物的化学成分 , 依次用乙醚 、丙酮等不同溶剂对狼毒大戟水提取物进行了萃取 ,
乙醚萃取物真空浓缩后用硅胶柱色谱分离 ,不同溶剂洗脱 , 分离得到了 5个化合物 ,经质谱 、红外和核磁测定 , 证
明 3个为萜类 , 2个为苯乙酮类。石油醚洗脱得到 β-香树脂醇乙酸酯(β-am yrin acetate);V(石油醚 )∶V(乙醚 )=
9∶1洗脱得到 Jo lk ino lide A;氯仿洗脱得到 3, 3′-二乙酰基-4, 4′-二甲氧基-2, 2′, 6, 6′-四羟基二苯甲烷;V(氯仿)∶V
(乙醚)=8∶1洗脱得到 2, 4-二羟基-6-甲氧基-3-甲基苯乙酮(狼毒乙素)和 Jo lk ino lide B。
关键词:狼毒大戟;水提取物;β-香树脂醇乙酸酯;Jo lkino lide
中图分类号:R284. 1　　文献标识码:A　　文章编号:1003 -5214(2005)09 - 0675 -03
Isolation and Identification of the Chem icalComponentsOb ta ined from
Aqueous Extract ofEuphorbia fischeriana
JIAN Li, DING Li-jun , PANG Li-wen, ZHANG Q ian-cheng
(School of Chem ica l Engineering, InnerMongolia Un iversity of Technology, Huhehot 010062, N eim enggu, China)
Abstrac t:Aqueous ex tract o fEuphorbia fischeriana was obtained by means of aqueous ex traction, and
the extractw as ex tracted by various solvents in turn, such as ethy l e ther and ace tone, e tc. The ethy l
e ther fraction w as concentrated in vacuo to g ive a residue, wh ich w as sub jected to silica ge l co lumn
ch roma tography, eluted w ith pe troleum ethe r, ethy l e ther and their m ix tures. F ive compounds w ere
isola ted, identified and e lucida ted by M S, IR and NMR analysis. They w ere β-amyrin aceta te,
Jo lkino lide A , 3, 3′-diace ty l-4, 4′-dime thoxy-2, 2′, 6, 6′-tetrahydroxydipheny lmethane, 2, 4-dihydroxy-6-
me thoxy-3-me thy lace tophenone and Jo lkino lide B.
Keywords:Euphorbia fischeriana;aqueous ex tract;β-amy rin ace tate;Jo lkino lide
Foundation item:G ranted by the natural science found of Inne r M ongo lia Autonomous Reg ion
(200208020205) and the found o f the Educa tion Department of InnerM ongo lia Autonomous Reg ion
(NJ03015)
　　狼毒大戟 (Euphorbia F ischeriana S teud. )又名猫眼草 , 为
大戟科大戟属植物 , 在我国主要生长于内蒙古 、东北及河北
等地区。其根为中药 , 有逐水祛痰 、散结杀虫之功效。狼毒
大戟还对肿瘤细胞有很强的抑制活性 , 且抗瘤谱广 、副作用
小 , 同时还有很强的抗病毒作用 [ 1] 。 据文献报道 , 狼毒大戟
水提取物对于多种移植性肿瘤均具有显著的抑制作用 , 能抑
制小鼠移植肿瘤 S - 180细胞的生长 、集落形成及小鼠白血
病 P308细胞的生长 [ 2] 。近年来人们致力于对狼毒的化学成
分进行研究 [ 3 ～ 6] ,其中有生物活性的物质主要为二萜类 、黄
酮类和香豆素类 ,但这些工作都集中在有机溶剂提取的研究
上。
本文的工作出于两个考虑 , 其一 ,较有机溶剂提取 , 以水
作为提取剂具有廉价和低毒的特点;其二 , 狼毒大戟水提取
物的抗肿瘤活性高 、毒性低 (水提取物的 LD50为 275.9 g /
kg[ 7] , 远大于乙醇提取物的 171. 96 g /kg[ 7 , 8] )。 一般认为低
毒性物系中的组分也应该是低毒性的 , 所以狼毒大戟水提取
* 收稿日期:2005 - 02 - 06;定用日期:2005 - 04 -26
基金项目:内蒙古自然科学基金项目(200208020205);内蒙古自治区高等学校科学研究项目(N J03015)
作者简介:简　丽(1958 -),女 ,福建永定人 ,内蒙古工业大学教授 ,硕士 ,主要从事化学工程和天然产物利用等方面的研究 , 电话:0471
- 6575931, E -m ail:jzhang@ im u.t edu. cn。
DOI牶牨牥牣牨牫牭牭牥牤j牣jxhg牣牪牥牥牭牣牥牴牣牥牨牥
物中应该有低毒性的抗肿瘤活性组分 ,这是这些组分作为药
物的使用优势。但水提取物中到底有什么化学成分和抗肿
瘤的活性组分 , 几乎没有文献报道。主要见到裴月湖等从狼
毒大戟水提取物中分离鉴定了两个物质 , 分别为 2, 4-二羟
基-6-甲氧基-3-甲基苯乙酮和没食子酸 [ 9] 。
为了研究狼毒大戟水提取物中有哪些化学成分和弄清
哪些已知的抗肿瘤活性组分是低毒性的 , 作者依次用乙醚 、
丙酮等不同溶剂萃取狼毒大戟的水提取物 ,从乙醚的萃取物
中分离得到了 5个已知化合物 , 其中有 2个二萜和 1个三
萜 , 另外 2 个为苯乙酮类。 经鉴定分别为 Jo lk ino lide A、
Jo lkino lide B、 β-香树脂醇乙酸酯 (β-amy rin acetate)、 2, 4-二
羟基-6-甲氧基-3-甲基苯乙酮和 3, 3′-二乙酰基-4, 4′-二甲氧
基-2, 2′, 6, 6′-四羟基二苯甲烷。 其中 Jo lk inolide A 和
Jo lkino lide B为已知的二萜类抗肿瘤活性组分。
1　实验
1. 1　仪器与材料
XT - 4型显微熔点测定仪 (温度未校正), NEXUS 670
型红外光谱仪 , Poia risM s型质谱仪 (EI -MS), INOVA - 500
型核磁共振仪。
柱色谱硅胶(200 ～ 300目)、薄层色谱硅胶 GF254(40
μm)均为青岛海洋化工厂生产 , 所用试剂均为 AR。
狼毒生药来自内蒙古通辽市扎鲁特旗 ,经鉴定为狼毒大
戟的干燥根。
1. 2　提取与分离
将干燥的狼毒大戟根拣出杂质后粉碎 , 取 1.5 kg用
10.5 kg的蒸馏水分两次浸泡 ,每次 20 h。然后入提取器加
热回流提取 , 约 5 h后停止加热 , 冷却后用尼龙丝网粗滤。
所得滤液静置沉降 , 分出的上清液再离心沉降。合并经离心
沉降的上清液 , 减压浓缩成棕褐色浸膏 , 得到狼毒大戟的水
提取物约 260 g。为研究这个水提取物中的化学成分 ,将其
与硅胶拌匀后上索氏提取器 ,依次用乙醚 、丙酮和乙醇萃取。
萃取结束后减压回收溶剂 , 分别得乙醚提取物 29 g, 丙酮提
取物 26 g, 乙醇提取物 45 g。
取乙醚提取物经硅胶柱色谱进行分离 , 依次用石油醚 、
氯仿 、V(石油醚)∶V(乙醚)=9∶1和 V(氯仿)∶V(乙醚 )=8∶1
梯度洗脱。每 10 mL接收 1份 , TLC检测 , 相同部分合并。
第 5 ～ 17份合并 ,经浓缩和重结晶等得化合物 Ⅰ (见图 1)8
m g(石油醚洗脱 , 石油醚重结晶 );第 20 ～ 28份得化合物 Ⅱ
(见图 1)5 mg(氯仿洗脱 ,氯仿重结晶);第 32 ～ 42份得化合
物Ⅲ (见图 1)4 mg〔V(石油醚)∶V(乙醚)=9∶1洗脱 ,石油醚
重结晶〕;第 47 ～ 55份得化合物Ⅳ(见图 1)6 mg〔V(氯仿 )
∶V(乙醚)=8∶1洗脱 , 甲醇重结晶〕;第 58 ～ 77份得化合物
Ⅴ(见图 1)5 mg〔V(氯仿 )∶V(乙醚) =8∶1洗脱 , 丙酮重结
晶〕。
所得化合物分别进行熔点测定 ,质谱 、红外及核磁测定 ,
以确定其化学结构。
2　结构鉴定
化合物Ⅰ :无色针状晶体(石油醚), 熔点 236 ～ 238 ℃。
TLC检测 , 展开剂为 V(石油醚)∶V(丙酮 )=7∶3, 呈单一斑
点 ,紫外灯下显黄色荧光 ,用 w(H2 SO 4)=5%的稀硫酸处理
呈紫红色。 EI -M S, m /Z:468[ M ] +;IR (KB r压片 ), ν/
cm - 1: 2 940, 2 853, 1 731 ( C O ), 1 455, 1 363,
1 245;1HNMR(500MH z, CDC l
3
), δ:0.85(3H , s, 28 - CH
3
),
0.89(12H , m , 23, 24, 29, 30 - CH3), 0. 98(6H , d, J=2. 5 H z,
25, 26 -CH3), 1.15(3H , s, 27 - CH3), 2. 07(3H, s, CH3CO),
4.52(1H, dd, J =8. 0 H z, 3 -H), 5. 20(1H , t, J =3. 5 H z, 12 -
H);13CNM R(500MH z, CDC l3), δ:15. 55(C - 25), 16. 68 (C
-24), 16.79(C - 26), 18.25(C - 6), 21. 30(C - 31), 23.52
(C -11), 23.56(C - 2), 23.68(C - 30), 25.94(C - 27),
26. 12(C -16), 26.91(C - 28), 28.02(C - 15), 28. 39(C -
23), 31.07(C - 20), 32.48(C - 17), 32.58(C - 7), 33. 32(C
-29), 34.72(C - 10), 36.83(C - 22), 37.13(C - 4), 37.71
(C - 1), 38. 25(C - 21), 39. 80(C - 8), 41. 70(C - 14),
46. 78(C - 19), 47.22(C - 18), 47.55(C - 9), 55.24(C -
5), 80. 94(C -3), 121. 63(C - 12), 145.20(C - 13), 171.01
(C -32)。以上光谱数据与文献 [ 10]报道的 β-香树脂醇乙
酸酯(β-am y rin aceta te)数据相符 ,故确定该化合物为三萜类
化合物 β-香树脂醇乙酸酯。
化合物Ⅱ:浅黄色晶体 (氯仿 ), 熔点 254 ℃(分解 )。
TLC检测 , 展开剂为 V(石油醚)∶V(丙酮 )=7∶3, 呈单一斑
点。 IR (KBr 压片 ), ν/cm - 1:3 423, 2 922, 1 631, 1 597,
1 428, 1 203, 1 151, 953, 651;1HNMR(500 MH z, CDC l3), δ:
2.62(6H, s, 3, 3′-CO -CH3), 3.765(2H, s, A rCH2Ar), 3.84
(6H , s, 4, 4′-OCH3), 6.03(2H , s, 5, 5′-H), 9. 36(2H, s, 6,
6′-OH), 16.127(2H, s, 2, 2′-OH)。 以上光谱数据与文献
[ 11]数据相符 , 故确定该化合物为 3, 3′-二乙酰基-4, 4′-二甲
氧基-2, 2′, 6, 6′-四羟基二苯甲烷。
化合物Ⅲ:无色雪花状晶体 (石油醚), 熔点 218 ℃(分
解), TLC检测 , 展开剂为 V(石油醚)∶V(丙酮)=7∶3, 呈单一
斑点。 EI - MS, m /Z:314 [ M ] +;IR(KB r压片 ), ν/cm -1:
1 761, 1 652, 1 217, 1 069, 1 012, 744;1HNMR (500 MH z,
CDC l3), δ:0.73(3H , s, 20 - CH3), 0.86(3H , s, 19 - CH3),
0.95(3H, s, 18 -CH3), 2.06(3H , s, 17 -CH3), 2. 63(1H, d, J
=5.5 H z, 9 -H), 3. 49(1H , s, 14 -H), 5.46(1H , d, J=5 H z,
11 -H);13CNMR(500MH z, CDC l3), δ:8. 65(C - 17), 15.00
(C - 20), 18. 43(C - 2), 20. 87(C - 6), 21. 91(C - 19),
33. 48(C -18), 33. 52(C - 4), 34.16(C - 7), 39.89(C - 3),
41. 43(C -10), 41. 52(C - 1), 51.85(C - 9), 53.52(C - 5),
54. 49(C -14), 61. 18(C -8), 104. 07(C - 11), 125.21(C -
15), 145.02(C - 13), 147.49(C - 12), 170.61(C - 16)。以
上光谱数据与文献 [ 12, 13]中 Jo lk ino lide A的数据相符 , 故
确定该化合物为二萜类化合物 Jo lkino lide A。
化合物Ⅳ:无色针晶 (丙酮), 熔点 191 ～ 193 ℃。 TLC检
测 ,展开剂为 V(石油醚)∶V(丙酮)=7∶3, 呈单一斑点。 E I-
MS, m /Z:196[M ] +, 181(100), 178, 166, 138, 83, 69, 55;IR
(KB r压片 ), ν/cm - 1:3 430, 2 926, 1 620, 1 567, 1 348, 1 269,
944;1HNM R(500MH z, CDC l3), δ:1.96(3H , s, 6 - OCH3),
2.54(3H, s, CH3CO), 3. 84(3H , s, 3 -CH3), 6.09(1H , s, 5 -
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H), 9. 10(1H , s, 4 - OH), 14. 26(1H , s, 2 -OH)。 以上光谱
数据与文献 [ 10]数据相符 , 故确定该化合物为 2, 4-二羟基-
6-甲氧基-3-甲基苯乙酮(狼毒乙素)。
化合物Ⅴ:无色针晶(甲醇 ), 熔点 217 ℃(分解), TLC
检测 , 展开剂为 V(石油醚)∶V(丙酮)=7∶3,呈单一斑点。 EI
-MS, m /Z: 330 [ M ] +;IR (KBr压片 ), ν/cm - 1:1 790,
1 690;1HNMR(500 MH z, CDC l3), δ:0. 86(6H , s, 19, 20 -
CH3), 0. 93(3H , s, 18 - CH3), 2.06(3H , s, 17 - CH3), 2. 29
(1H , s, 9 -H), 3.96(1H, s, 14 -H), 4. 05(1H , s, 11 -H);13
CNMR(500MH z, CDC l3), δ:8.55(C - 17), 15. 63(C - 20),
19.18(C - 2), 21.51(C - 6), 22.18(C - 19), 33. 84(C -
18), 34. 02(C - 4), 36. 32(C - 7), 39. 53(C - 10), 39.90(C
- 3), 42. 14(C - 1), 48.64(C - 9), 53.92(C - 5), 55.72(C
- 14), 61. 60(C -11), 66. 42(C -8), 85. 99(C -12), 130. 67
(C - 15), 150. 14(C - 13), 170. 17(C - 16)。以上光谱数据
与文献 [ 12, 13]中 Jolkino lide B的数据相符 , 故确定该化合
物为二萜类化合物 Jo lk inolide B。
化合物Ⅰ ～Ⅴ的结构式见图 1。
图 1　狼毒大戟水提取物中 5种化合物的结构式
F ig. 1　The structura l fo rmu lae o f 5 com pounds iso la ted from
aqueous ex tract ofEuphorbia fischeriana
3　结论
研究了狼毒大戟水提取物的部分化学成分 ,证明其中存
在低毒性的二 萜类抗肿瘤活性物质 Jo lk inolide A 和
Jo lkino lide B。
　　寻找天然抗病毒药物是现代药物研究的一个重要途
径 [ 14] ,天然产物有效成分的水相提取较有机溶剂提取有低毒
性的特点。狼毒大戟水提取物的毒性比有机溶剂提取物的毒
性小得多 ,所以从水提取物中发现的抗肿瘤活性组分一般认
为就是低毒性的活性物质 ,这一点对天然药物的开发很重要 ,
因此, 有必要对水提取物化学成分的研究给予更多关注。
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金桥工程
　天津大学 1, 6-二羟基萘和 2, 6-二羟基萘制备技术寻求合作伙伴
①1, 6-二羟基萘是重要的染料 、医药有机中间体 ,还可作为耐高温 、高强度聚合物的制备单体 ,应用范围日益广泛。
本技术以萘为原料 ,经定向两步法二磺化 , 再高温碱熔 、纯化精制而制得 1, 6-二羟基萘 , 产品外观为灰白色 ,质量分数
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②2, 6-二羟基萘是重要的医药中间体 ,也是制备高性能聚合物 、液晶材料等的重要原料之一。由于高质量分数的 2, 6-
萘二磺酸 (钠)制备困难 , 使 2, 6-二羟基萘的制备受到限制。 以往技术多采用高沸点有机溶剂为载体碱熔 , 成本高 , 焦油
多 , 产品不易分离。本工艺可利用低质量分数的 2, 6-萘二磺酸(钠)为原料 ,在非有机溶剂存在下高温碱熔 , 再经溶剂重结
晶精制 , 可使 2, 6-二羟基萘质量分数高于 98%。操作容易 ,成本低。本技术已用于工业生产。
联系人:天津大学化工学院张天永同志 , 电话:022 - 27406610(办), 013920884558, E -m ail:tyzhang@ tju. edu. cn
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