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黄珠子草的化学成分研究



全 文 :落(庆大霉素 2药次 ,复达欣 1 药次 ,羟氨苄 1 药
次),应视为假敏感真耐药[ 4] ,但 ATB 法却误报为敏
感(4/509=0.78%);统计内药物中除羟氨苄青霉素
外其它如氧哌嗪 、复达欣 、丁胺 、庆大 、环丙等均显示
出C 的例数明显高于 D ,提示 ATB 法较 K-B法更容
易出现耐药结果 。
3 讨 论
我们用法国梅里埃公司 ATB 自动鉴定及药敏
系统和 K-B法同时检测了 91株细菌对 10种抗生素
的敏感度 ,两法的总符合率为 83.1%,低于文献报
道(98.4%, 90.93%)[ 4 ,5] 。ATB 法较 K-B 法似更容
易表现为耐药 ,但两种药敏方法结果在不同类细菌
间的符合率差异无显著意义。在所选 10种药物中 ,
两法对氧哌嗪青霉素测定结果差异有显著意义 ,符
合率为 67.6%,其药片含药浓度(100μg/片)最高 ,而
羟氨苄青霉素药片含药浓度为 10μg/片 ,其符合率
达91.8%,似提示药片含药浓度高低影响抑菌环直
径可能是导致两法对氧哌嗪青霉素结果有明显差异
的因素之一。
K-B法操作简便易行 ,能发现被检菌抑菌环内
的耐药菌落 ,可以避免假敏感真耐药 ,但该法也不能
避免某些药物由于扩散速度慢导致假耐药真敏感现
象的发生[ 4] 。ATB 法药敏试验出现结果时间快(有
快速药敏试条 , 4 ~ 6 小时出结果),自动化程度高 ,
可以排除一些主观因素影响 ,还可以避免假耐药真
敏感的发生 。一个 ATB药敏试剂条可同时做 10种
以上药物 ,医师可在种类更多的药物范围内选用有
效药物及时进行治疗 ,有助于缩短患者住院日期 ,降
低医疗费用 。
综上所述 ,ATB细菌自动鉴定及药敏分析法与
K-B法药敏结果基本相符合 ,在目前 VITEK System
ATB自动鉴定及药敏分析系统尚未普遍使用的情况
下 ,K-B法仍不失为一种较好的药敏方法 。
参考文献
1 马纪平.细菌药敏试验的质量控制述评.中华医学检验
杂志 , 1991 , 14(6):366~ 368.
2 叶应妩.全国临床检验操作规程.东南大学出版社 ,
1994.
3 王辉.简要介绍美国 NCCLS 药敏试验纸片扩散法法规
(1994 , 12 月版).中华医学检验杂志 , 1995 , 18(2):118 ~
124.
4 马纪平.VITEK AMS 药敏试验结果的初步评价.中华医
学检验杂志 , 1991 , 14(4):233~ 234.
5 卢月梅.革兰氏阴性杆菌两种药敏试验方法的比较.临
床检验杂志 , 1995 , 13(5):265.
黄珠子草的化学成分研究
  贵阳中医学院第二附属医院(550003) 谢 珊 贾宪生 杨基森
  黄珠子草(Phyllanthus Virgatus Forst.f.)在贵州
广泛分布于兴义 、兴仁 、织金 、贞丰等地 , 生长在
1 350米以下山坡 、草地 。贵州民间用叶下珠(Phyl-
lanthus Urianria L.又名山皂角)、黄珠子草治疗泌尿
系感染 、肠炎 、结膜炎 、黄疸型肝炎等 。黄珠子草
(Phyllanthus Virgatus Forst.f.)据报道在体外有较好
的抗 HBV 作用[ 1] ,但未曾见有对其化学成分的报
道。我们通过对黔产黄珠子草总黄酮(含量
24.0214mg/g)的测定 ,结果表明 ,黔产黄珠子草总黄
酮含量较高 ,因此黔产黄珠子草很具深入研究的价
值。向
从黔产黄珠子草的乙醇提取液经大孔吸附树脂
处理所得总甙中分得五个黄酮 ,两个酚类(根据理化
性质初步确定),我们只对所分离得到的两个含量较
高 、样品较纯的化合物进行了详细的分析 、鉴定 。得
到单体化合物为槲皮素-3-0-葡萄糖甙(quercetin-3
-0 -glucoside , Ⅱ), 槲皮素-3-0-鼠李葡萄糖甙
(quercetin-3-0-rhamnoglucoside , Ⅴ)。
1 仪器和试剂
熔点用 X-4数字显示显微熔点仪测定;UV光
谱用日立 UV-2000型紫外分光光度仪测定;EIMS用
美国HP 公司-5973-质谱仪测定 ,直接进样杠用美国
SIS公司的 Direct Insertim probe , NMR 谱用 INOVA-
400型核磁共振波谱仪测定。大孔吸附树脂为天津
南开大学高分子化学研究所化工厂生产。薄层及柱
层析用硅胶G 、硅胶 H为青岛海洋化工厂生产。溶
剂系统 氯仿-甲醇-水(30∶10∶1),所用溶剂均为分
·469·贵州医药 2001年 5 月第 25卷第 5 期
析纯 。
2 生 药
黄珠子草购于贵阳南明药市 ,由贵阳市中医学
院鉴定教研组杨锦刚副教授鉴定为大戟科 Eupho-
biceae 叶下珠属黄珠子草(Phy llanthus Virgatus Forst.
f.)的干燥全草。
3 提取和分离
黄珠子草干燥全草 1 000g ,切碎 , 80%乙醇回流
提取三次 ,每次 2小时 ,提取液减压回收乙醇 ,浓缩
提取液至 1 000ml ,石油醚萃取脂溶性成分 ,水液通
过H-103大孔吸附树脂 ,水行至α-萘酚反应阴性 ,
乙醇洗脱得总甙 。总甙拌入硅胶行硅胶上行柱层
析 ,氯仿—甲醇 —水(30∶10∶1)洗脱 ,得 5个黄酮及 2
个多酚 ,其中晶 Ⅱ、晶Ⅴ 、晶 Ⅵ 为较纯化合物 ,且量
多 ,可作今后质量控制标准物 ,因此对其进行鉴定 。
4 鉴 定
晶Ⅱ黄色粉末 ,mp157℃~ 159℃,HC1-Mg 反应
呈红色 ,Molih反应阳性。UV(MeOH)nm(logε):258 ,
357;(NaOMe)272 , 328;(A1C13)276 , 427;(A1C13/
HC1)271 , 399;(NaOAc)274 , 390;(NaOAc -H3BO3)
262 ,376。EIMSm/ z(%):302(M -Rha -Glu), 274 ,
248 ,153 ,137。H-NMR(400M Hz ,DMSO-d6):12.61
(1H , br), 10.78(1H ,br), 9.36(2H , br).为酚羟基吸
收信号 , 7.57(1H , dd , J=6Hz , 1.6Hz , 6-H), 7.56
(1H ,d , J =6Hz , 1.6Hz , 2′-H), 6.83(1h , d , J=9.
2Hz ,5′-H), 6.39(1H , d , J =1.6Hz , 8-H), 6.19
(1H ,d , J=1.2Hz ,6-H),5.45(1H , d , J=7.2Hz ,G1u
-1-H)。晶 Ⅱ30mg 加 5%HC1水溶液加热水解 2
小时 ,产生絮状沉淀 ,过滤 ,沉淀物以甲醇-水重结
晶 ,得黄色结晶 ,与槲皮素对照品 ,TLC 共层析 Rf值
一致 。滤液按常法处理后 ,TLC检查糖 ,Rf值与 D-
葡萄糖对照品一致 。
通过以上数据分析 ,晶 Ⅱ鉴定为槲皮素-3-0-葡
萄糖甙(quercetin-3-0-glucoside , Ⅱ)即异槲皮甙 。
晶Ⅴ黄色粉末 , mp187℃-189℃, HC1-Mg 反
应呈红色 , Molih 反应阳性 。UV(MeOH)nm(logε:
257 ,356;(NaOMe)273 , 329;(AlCl3)274 , 425;(AlCl3/
HCl)268 , 399;(NaOAc)275 , 396;(NaOAc -H3BO3)
263 ,375。显示为黄酮甙类 ,有 3′, 4′-OH 存在 ,有
游离的 7 -OH 。EIMSm/ z(%):302(M +-Rha -
Glu), 273 , 153 , 129。H -NMR(400M Hz , DMSO -
d6):12.58(1H ,br), 10.83(1H , br),9.10 ~ 9.36(2H ,
br)。为酚羟基吸收信号 , 7.54(2H , m , 2′, 6′-H),
6.83(1H ,d , J=8.4Hz ,5′-H),6.38(1H , d , J=2Hz , 8
-H),6.18(1H ,d , J=1.6Hz , 6-H), 5.34(1H ,S , Rha
-1-H),4.36(1H ,d , J=8.8Hz ,Glu-1-H), 0.97(3
-H ,d , J=6.4Hz ,Rha-CH3)。
晶Ⅴ30mg 加 5%HC1水溶液加热水解 2小时 ,
产生絮状沉淀 ,过滤 ,沉淀物以甲醇-水重结晶 ,得
黄色结晶 ,与槲皮素对照品 ,TLC共层析 ,Rf值一致 。
滤液按常法处理后 ,TLC 检查糖 ,Rf值分别与 D-葡
萄糖和鼠李糖对照品一致。
通过以上数据分析 ,晶Ⅴ鉴定为槲皮素-3-0-鼠
李糖葡萄糖甙(quercetin -3-0-rhamnoglucoside ,
Ⅴ)即芦丁(rutin)。晶Ⅴ与芦丁对照品 TCL 共层析 ,
Rf值一致 。
参考文献
1 陈征途 , 朱宇同 ,方宏勋 , 等.三种叶下珠属植物在体外
细胞培养中抗 HBV 作用的初步研究.广州中医药大学
学报 , 1997 , 14(2):102.
贵州省医学会骨科学会第五届第十四次学术会议征文通知
经贵州省骨科学会常委会研究决定 ,第五届第十四次骨科学术会议拟于 2001 年 7月下旬在凯里市召开 , 征文事项如下。
一 、征文内容:(1)骨科各专业领域中的临床工作新经验 、新技术 、新知识 、新理论;(2)骨科基础研究及应用基础研究;(3)
骨科诊疗新技术的发展与应用;(4)基层医疗单位骨科疾病防治及临床工作经验。
二 、征文要求:(1)所报送的必须是 2001年 4 月 1 日前未曾公开发表的论文 , 要求有一定的科学性 , 数据可靠 , 重点突出 ,
文字精练。(2)请注明论文题目和作者姓名 、单位 、邮编 ,自留底稿。(3)要求 3000 字以内论文全文及 800 字以内摘要各一份 ,
稿件请用 16开(20×20字)稿纸撰写或打印 ,字迹清晰。(4)论文于 2001年 6 月 1日前寄贵州省人民医院骨科田晓滨主任收 ,
地址:贵州省贵阳市市东路 52 号(邮编 550002)。
·470· Guizhou Medical Journal , 2001 , Vol.25 , No.5